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Descripcin de los Comportamientos Celulares Universidad de Cartagena Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Bautista C, Hernndez H, Meja E, Morales C, Patio

L Docente Yaleivis Buelvas Montes

RESUMEN El propsito de esta prctica de laboratorio fue observarla velocidad de difusin de una solucin en presencia del agua destilada, identificar los fenmenos de osmosis/dilisis en las clulas y observar el comportamiento de la clula en presencia de distintas soluciones, todo esto con la ayuda del microscopio. Se tomaron pequeas cantidades de las muestras a observar, como: la Elodea (Apalanthe), ElLirio (Lirium) y laSangre, los cuales se sometieron a montaje hmedo para luego ser observados. A medida que se cambiaban los objetivos de uno de menor a mayor aumento se dejaba apreciar toda la muestra para solo enfocarse en una parte especfica de la misma. Pudindose observar y analizar el comportamiento de cada una de las muestras; se describieron y se dibujaron las muestras observadas desde los distintos objetivos (4x, 10x y 40x). Una breve descripcin de alguna de las muestras se dio al observar la muestra de elodea al adicionarle solucin hipotnica, las clulas se hinchaban, y al agregarle solucin hipertnica de cloruro de sodio las clulas se deshidrataban, encogindose y moviendo todos sus cloroplastos al centro de la clula, desprendindose de la pared celular. Palabras Claves: Microscopio, difusin, osmosis, dilisis, clula, cloroplastos.

OBJETIVOS Distinguir los procesos de difusin, osmosis y dilisis. Observar el comportamiento de la clula en presencia de diferentes soluciones hper, is e hipotnica.

otras, estos movimientos aleatorios producen un movimiento neto de las regiones de alta concentracin, a las regiones de baja concentracin, en un proceso llamado difusin3. MATERIALES Y MTODOS Los instrumentos bsicos y herramientas necesarias para que se llevara a cabo el desarrollo de esta actividad fueron: Microscopios Porta y cubre objetos Tubo de ensayo Gradilla para tubos de ensayos Papel milimetrado Hojas de Elodea Lancetas estriles Cuchillas Hojas de lirio Sangre Alcohol antisptico Algodn Vaso de precipitado de 250mL Papel celofn Solucin de almidn Solucin de lugol Soluciones hipo, iso e hipertnicas de cloruro de sodio Solucin de permanganato potasio Suero ringer al 0.9 % Goteros

INTRODUCCIN Todas las clulas, procariotas y eucariotas, estn delimitas por una membrana lipidica que acta como una barrera de permeabilidad selectiva. En las procariotas la estructura de la membrana est confinada solamente a la barrera externa que rodea las clulas, en cambio en las eucariotas esta estructura es tambin responsable de la compartimentalizacion interna1. La membrana celular separa el interior de la clula con el medio exterior y realiza el transporte selectivo de sustancias por distintos procedimientos, los cuales se encargan de conservar las diferencias entre el fluido extracelular y el fluido en el ambiente intracelular, al ser la membrana ms permeable a unas sustancias que a otras.Su composicin vara dependiendo de la funcin celular, pero siempre est formada por lpidos, protenas y en menor proporcin, glcidos2. El transporte celular en su gran mayora est regido por gradientes de concentracin que influyen en el movimiento de las molculas o iones dentro de un fluido. Estas sustancias se mueven en respuesta a un gradiente de concentracin, una diferencia en la concentracin de esas sustancias entre una regin y otra. Este movimiento se da a causa de que las molculas de un fluido estn en constante movimiento rebotando unas con

de

RESULTADOS Difusin Se agrego a tres tubos de ensayo 5 ml de agua destilada, a los cuales se les agrego 1

gota, 3 gotas, 5 gotas de permanganato de potasio respectivamente.

Figura 1: vista de una muestra de elodea desde el objetivo de (4x)

Se observ que en el primer tubo al cual se le agrego 1 gota de la solucin, tardo en disolverse 1min y 21seg. El tubo que se le agrego 3 gotas de la solucin, tardo 32seg en disolverse totalmente la solucin y el tubo que se le agrego 5 gotas de la solucin, tardo 15seg en disolverse totalmente; como lo mostrara la Grafica 1 en el anexo, al final del trabajo. Osmosis (Solucin hipotnica) Para observar el proceso de osmosis se tom una hojita de Elodea, se ubic en el portaobjeto, se le agrego solucin hipotnica y se ubic en el microscopio. A continuacin se mencionaran las observaciones vistas en cada una de las muestras, en los diferentes objetivos. Muestra de Elodea (4x) Se observ una estructura con forma similar a una malla de color verde, dividida en mltiples cavidades rectangulares de manera ordenada, separada por una sustancia viscosa.

Muestra de Elodea (10x) Se observ una estructura con forma similar a una malla de color verde, en donde se lograba ver en cada divisin pequeos grupos de puntos verdes denominados Cloroplastos, los cuales se mueven libremente en el citoplasma. Figura 2: vista de una muestra de elodea desde el objetivo de (10x)

Muestra de Elodea (40x) Se observ de manera ms clara la estructura de la hoja en forma de malla cubierta en su exterior por una sustancia viscosa, en el cual se observ el movimiento de los cloroplastos atreves del citoplasma a los lados perifricos de la membrana,

tambin se nota que las clulas estn hinchadas. Figura 3: vista de una muestra de elodea desde el objetivo de (40x)

Muestra de Elodea (10x) Se observ una estructura con forma similar a una malla de color verde, en donde se lograba ver en cada divisin pequeos grupos de puntos verdes denominados Cloroplastos, ligeramente unidos, los cuales presentaban muy poca actividad.

Muestra de Elodea (40x) Se observ de manera ms clara la estructura de la hoja en forma de malla cubierta en su exterior por una sustancia viscosa, en donde se nota como los cloroplastos estn recogidos en el centro y la membrana celular desprendida de la pared celular.

Se alcanz a observar, como los cloroplastos se movan alrededor de las paredes celulares; este fenmeno recibe el nombre de ciclosis. Segn el concepto de osmosis el agua se debe difundir hacia el interior de la clula, razn por la cual la clula se nota abultada/hinchada. Osmosis (Solucin hipertnica) Para observar el proceso de osmosis se tom una hojita de Elodea y se le agrego solucin hipertnica de cloruro de sodio y se ubic en el microscopio. A continuacin se mencionaran las observaciones vistas de cada una de las muestras, en los diferentes objetivos. Muestra de Elodea (4x) Se observ una estructura con forma similar a una malla de color verde, dividida en mltiples cavidades rectangulares de manera ordenada, separada por una sustancia viscosa.

Figura 6: vista de una muestra de elodea desde el objetivo de (40x) Fue notable como la clula se encontraba deshidrata y el citoplasma juntamente con los cloroplastos se reunan haca en el centro de la clula, desprendindose la membrana

de la pared celular. Este proceso recibe el nombre de plasmlisis.

claros rasgos distintivos que permiten afirmar que la clula se encontraba hinchada.

Plasmlisis (Solucin hipotnica) Se tom una pequea muestra de la epidermis de una hoja de lirio, evitando tomar clorofila. La muestra fue ubicada en un portaobjeto, se le adiciono una pequea cantidad de solucin hipotnica y se observaron los posibles cambios que presentara la clula en ese medio. A continuacin se mencionaran las observaciones vistas de cada una de las muestras, en los diferentes objetivos . Muestra de Lirio (4x) Se observ un conjunto de clulas agrupadas conformando la epidermis de la hoja de lirio, adems una serie de puntos negros, denominados Estomas. Las clulas tenan una apariencia ligeramente ovalada. Figura 7: vista de una muestra de lirio desde el objetivo de (4x)

Figura 8: vista de una muestra de lirio desde el objetivo de (10x) Muestra de Lirio (40x) Se observ claramente como la clula se hincho, mostrando mejor el fenmeno de turgencia. La membrana de la clula se encontraba extremadamente adherida a la pared celular, por la gran cantidad de agua contenida en su parte interna.

Muestra de Lirio (10x) Se observ un conjunto de clulas agrupadas conformando la epidermis de la hoja de lirio, adems se percibe mejor el estado de la clula, la cual tiene apariencia ovalada y

Figura 9: vista de una muestra de lirio desde el objetivo de (40x)

Plasmlisis (Solucin hipertnica) Se tom una nueva muestra de la epidermis de una hoja de lirio, evitando tomar clorofila. La muestra fue ubicada en un portaobjeto, se le adiciono una pequea cantidad de solucin hipertnica de cloruro de sodio y se observaron los posibles cambios que presentara la clula en ese medio. A continuacin se mencionaran las observaciones vistas de cada una de las muestras, en los diferentes objetivos

Dejando un pequeo espacio entre ambas, difcil de notar.

Muestra de Lirio (4x) Se observ un conjunto de clulas agrupadas conformando la epidermis de la hoja de lirio, adems una serie de puntos negros, denominados estomas. Las clulas tenan una apariencia ligeramente ovalada. Figura 11: vista de una muestra de lirio desde el objetivo de (10x)

Muestra de Lirio (40x) Se observ como lo que era un conjunto de clulas ahora parece un conjunto de paredes celulares cuyo centro es una clula arrugada, encogida y deforme.

Figura 10: vista de una muestra de lirio desde el objetivo de (4x)

Muestra de Lirio (10x) Se observ ligeramente como la membrana celular se separ de la de su pared celular.

Figura 12: vista de una muestra de lirio desde el objetivo de (40x)

El fenmeno de plasmlisis se observa mejor en la muestra de elodea, dado que en ella se muestra mucho ms claramente cmo se dan los procesos, y cul es el estado final del fenmeno de plasmlisis. Plasmlisis (Clulas Sanguneas Solucin isotnica) Se tom una muestra de sangre, y se coloc en un portaobjeto, al cual se le adiciono una pequea cantidad de Suero fisiolgico 0.9%.A continuacin se mencionaran las observaciones vistas de cada una de las muestras, en los diferentes objetivos

Muestra de Sangre (4x) Se observ un conjunto de puntos rojos que forman el tejido fluido, denominados eritrocitos.

Muestra de Sangre (10x) Desde este objetivo se observ un conjunto de puntos que forman el tejido fluido, el cual no presento ningn cambio significante. Muestra de Sangre (40x) Se observ mejor la imagen y se logra observar la forma de dichos puntos, los cuales son denominados eritrocitos y tienen una forma circular con una cavidad en el centro, adems estos se encuentran en constante movimiento (aleatorio). Plasmlisis (Clulas Sanguneas Solucin hipertnica) Se tom una muestra de sangre, y se coloc en un portaobjeto, al cual se le adiciono una pequea cantidad de solucin hipertnica de cloruro de sodio. A continuacin se mencionaran las observaciones vistas de cada una de las muestras, en los diferentes objetivos.

Figura 16: vista de una muestra de sangre desde el objetivo de (4x)

Muestra de Sangre (10x) Se observ un conjunto de puntos rojos que forman el tejido fluido, denominados eritrocitos, los cuales han perdido su forma circular.

Muestra de Sangre (40x) Se observ una deformacin presente en los eritrocitos, estos tenan apariencia arrugada y encogida, fue muy notable el estado de deshidratacin que presentaban las clulas.

Muestra de Sangre (10x) Se observ que la apariencia de los eritrocitos cambio un poco, debido a que estos se vean un poco ms esponjosos y su cavidad que normalmente se encuentra en el centro desapareci totalmente. Muestra de Sangre (40x) Se observ que los eritrocitos estaban muy grandes hasta el punto en que estallaban. Se observ cmo se rompa la membrana que los envuelve debido a la alta concentracin de agua. Figura 21: vista de una muestra de sangre desde el objetivo de (40x) Se nota claramente, que los eritrocitos presentan diferencias morfolgicas en cada una de las soluciones, ya que en la solucin hipertnica el eritrocito, se encoje (deshidrata), y se nota arrugado; en la solucin hipotnica, el eritrocito se llena de agua hasta explotar y en la solucin isotnica el eritrocito no presenta ningn cambio; todo esto debido a los diferentes concentraciones de solvente en el medio extracelular. DISCUSIN Fue notable, como las clulas mantenan diferentes comportamientos, frente a una solucin hper, iso hipotnica. Se not que los procesos de plasmlisis se observaron mejor en la hoja de elodea que en el lirio, ya que la elodea permita ver de manera ms clara como se daba este proceso. Por otra parte, fue muy importante observar como los eritrocitos de la muestra de sangre en presencia de solucin hipotnica, estallaban a causa del exceso de agua.

Figura 18: vista de una muestra de sangre desde el objetivo de (40x) Plasmlisis (Clulas Sanguneas Solucin hipotnica) Se tom una gota de sangre y se coloc un portaobjeto, al cual se le agrego una pequea cantidad de solucin hipotnica. A continuacin se mencionaran las observaciones vistas de cada una de las muestras, en los diferentes objetivos.

Muestra de Sangre (4x) Se observ un conjunto de puntos que conforman el tejido fluido, denominados eritrocitos.

Figura 19: vista de una muestra de sangre desde el objetivo de (4x)

CONCLUSION Del anterior laboratorio podemos concluir, que cada clula presenta diferentes comportamientos frente al medio exterior en donde se encuentre Se identific, el estado final en el cual queda una clula despus de entrar en contacto en el medio exterior con solucin hipertnica hipotnica. Se estableci cual era la mejor muestra (entre la elodea y el lirio) para observar los fenmenos de plasmlisis en las clulas vegetales, la cual fue la elodea, dado a la claridad en la cual se muestra el fenmeno. Y finalmente se estableci la relacin existente entre la concentracin de una sustancia con el tiempo de difusin en una solucin de agua destilada a temperatura constante.

BIBLIOGRAFA [1] Ramn Latorre. (1996). Biofsica y Fisiologa celular. Editorial Universidad de Sevilla. Serie: Ciencias, Numero 49. Pg. 5. [2] Pedro Gabriel Martn Villamor, Jos Mara Soto Esteban. (1993).Anatoma Fisiologa. (1993). Editorial Masson Salvat. Tomo I. Pg. 9-10. [3]Teresa Audesirk, Gerald Audersirk, Bruce E. Byers. (2003). Biologa: la vida en el Tierra. Editorial Pearson Educacin. 1era Edicin .Pg. 60.

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