NOTA CIENTFICA

Anlise do leo Essencial dos Diferentes rgos de Acmella ciliata Kunth (Asteraceae)
Thaila Sarnaglia Vulpi1, Camila Pio Moret Morais1, Ana Paula Felix Trindade2, Maria Cristina de Holanda Pereira Lima3, Leosvaldo Salazar Marques Velozo4 e Maria Auxiliadora C. Kaplan5 Introduo
A famlia Asteraceae compreende cerca de 1.535 gneros com aproximadamente 25.000 espcies, sendo a segunda maior famlia da Angiospermae [1]. Aproximadamente 50% das espcies de Asteraceae ocorrem no continente Americano, com predominncia na Amrica Latina. No Brasil cerca de 4000 espcies encontram-se distribudas em regies ridas, semiridas e montanhosas [2]. Plantas dessa famlia possuem hbitos variados: ervas, subarbustos, trepadeiras ou, excepcionalmente, rvores. Dentre os gneros representantes dessa famlia est Acmella, que inclui a espcie em estudo Acmella ciliata, conhecida popularmente como jambu. Essa planta cultivada na regio norte do pas, onde utilizada como condimento na culinria amaznica, principalmente no preparo do famoso molho de tucupi. As folhas e inflorescncias so empregadas na medicina popular, para o tratamento de males da boca e garganta, alm de tuberculose, litase pulmonar e como estimulante do apetite [5]. Quando mastigadas as inflorescncias e folhas proporcionam uma sensao anestsica local, devido ao princpio ativo espilantol [3,4], sendo por isso usadas para dor de dente. O objetivo deste trabalho extrair e analisar os leos essenciais de caules, folhas e inflorescncias de A. ciliata. B. Extrao do leo essencial Caules, folhas e inflorescncias foram reduzidos a pequenos fragmentos e submetidos, separadamente, hidrodestilao em aparelho de Clevenger por duas horas, para a obteno dos leos essenciais. Os leos obtidos foram separados da fase aquosa por partio lquidolquido com diclorometano, sendo as fraes orgnicas submetidas secagem utilizando sulfato de sdio anidro. C. Anlise dos leos Cada leo essencial foi analisado por cromatografia com fase gasosa acoplada espectrometria de massas (CG-EM). Foi utilizado um cromatgrafo HP 5890 SII, equipado com coluna capilar DB-5 (30m x 0,20mm x 0,25m de filme) usando-se: hlio como gs de arraste (1,0ml/min); programao de temperatura 60C 240C (3C/min); e um detector de massas VG Autospect (IE, 70eV). Os ndices de reteno (IR) para cada componente dos leos, foram calculados com base nos seus tempos de reteno (TR), em comparao com os tempos de reteno (TR) dos constituintes de uma srie homloga de n-alcanos (C5 C26) analisada nas mesmas condies. A identificao das substncias contidas no leo essencial de A. ciliata foi realizada por comparao dos ndices de reteno (IR) e do padro de fragmentao dos espectros de massas com os registros da literatura cientfica especializada [6,7] e com o banco de dados do computador conectado ao espectrmetro de massas.

Material e mtodos
A. Material vegetal A coleta do material vegetal foi realizado no horto da Escola Superior So Francisco de Assis, (ESFA), Santa Teresa, ES. A identificao de Acmella ciliata Kunth foi realizada pelo Prof. Roberto L. Esteves da Universidade Estadual do Rio de Janeiro (UERJ). Uma exsicata desta espcie foi depositada no Museu de Biologia Melo Leito para realizao do seu registro, recebendo cdigo MBML: 22772. Aps a coleta, os rgos vegetais da planta foram separados para serem processados.

Resultados
As anlises dos leos essenciais de caules, folhas e inflorescncias de A. ciliata por CG mostraram uma especificidade de cada rgo na elaborao de sua frao voltil. Do leo essencial de caule foram identificados os constituintes responsveis por 95,72 % do leo (Tabela 1), englobando hidrocarbonetos, monoterpenos, sesquiterpenos e arilpropanides. Os componentes majoritrios so: 3-trideceno (45,89%), isoeugenol (14,85%) e germacreno D (11,69%). Para folhas foram identificados os constituintes

_______________ 1. Aluna de Graduao do Curso de Farmcia da Escola Superior So Francisco de Assis. Rua Bernadino Monteiro, 700, Dois Pinheiros, Santa Teresa, ES, CEP 29650-000. E-mail: thatavulpi@yahoo.com.br 2. Aluna de Mestrado do Ncleo de Pesquisas de Produtos Naturais, Universidade Federal do Rio de Janeiro. Bloco H, Centro de Cincias da Sade, Ilha do Fundo, Rio de Janeiro, RJ, CEP 21941-590. 3. Tcnica de Nvel Superior do Ncleo de Pesquisas de Produtos Naturais, Universidade Federal do Rio de Janeiro. Bloco H, Centro de Cincias da Sade, Ilha do Fundo, Rio de Janeiro, RJ, CEP 21941-590. 4. Professor de Graduao do Curso de Farmcia da Escola Superior So Francisco de Assis. Rua Bernadino Monteiro, 700, Dois Pinheiros, Santa Teresa, ES, CEP 29650-000. 5. Professora Titular do Ncleo de Pesquisas de Produtos Naturais, Universidade Federal do Rio de Janeiro. Bloco H, Centro de Cincias da Sade, Ilha do Fundo, Rio de Janeiro, RJ, CEP 21941-590. Apoio financeiro: PIC-ESFA e CNPq.

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1129 registrados no perfil cromatogrfico, responsveis por 91,20% do leo (Tabela 2). Os componentes majoritrios deste leo so: germacreno-D (37,51%), -farneseno (36,04%) e 3-trideceno (2,97%). Da frao voltil obtida das inflorescncias de A. ciliata foram identificados 100% dos constituintes separados por cromatografia em fase gasosa (Tabela 3). Os representantes majoritrios deste leo so: 3-7dimetil-1,3,6-octatrieno (15,38%), espilantol (15,16%) e -farneseno (15,02%). A comparao dos componentes identificados nos leos essenciais de caules, folhas e inflorescncia de A. ciliata, indica a importncia comercial da planta na produo de espilantol e do germacreno-D. A anlise do leo essencial de A. ciliata mostrou padres distintos em diversidade molecular. O espilantol, princpio ativo da planta, foi detectado nos trs rgos em estudo. (PIC-ESFA) e do Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico (CNPq). Os autores agradecem ao Prof. Roberto L. Esteves pela classificao da espcie.

Referncias
[1] [2] BREMER, K. 1994. Asteraceae: Cladistics and Classification. Portland, Timber Press. 752p. HIND, D.J.N. 1993. New compositae from the Serra do Gro-Mogol (Mun. Gro-Mogol, Minas Gerais, Brazil) and the surrounding area. Kew Bulletin, 49: 511-522. MARTIN, R. & BECKER, H. 1984. Spilanthol-related amides from Acmella ciliata. Phytochemistry, 23: 1781-1783. RAMSEWAK, R.S.; ERICKSON, A.J. & NAIR, M.G. 1999. Bioactive N-isobutylamides from the flower buds of Spilanthes acmella. Phytochemistry, 51: 729-732. LORENZI, H. & MATOS, F.J.A. 2002. Plantas Medicinais no Brasil Nativas e Exticas. So Paulo, Instituto Plantarum de Estudos da Flora. 544p. ADAMS, R.P. 2001. Identification of Essential Oil Components by Gas Chomatography/Quadrupole Mass Spectroscopy, 3rd ed. Carol Stream, Allured Publishing. 456p McLAFERT F. W &STANFFER, D.B. 1989. Registry of Mass Spectral Data. I, New York, Wiley-Intercience Publication, 1038p.

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Agradecimentos
Esse trabalho teve apoio do Programa de Iniciao Cientfica da Escola Superior So Francisco de Assis

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Tabela 1. Substncias identificadas [Tempo de reteno (TR); ndice de Reteno (IR) e % na mistura] no leo essencial de caule de Acmella ciliata.
Substncia 1. -pineno 2. 3-careno 3. N. I. 4. 2- undecanona 5. timol 6. isoeugenol 7. -farneseno 8. germacreno D 9. 3-trideceno 10. acetato de isoeugenol 11. N. I. 12. N-isubutil-2(E), 6(Z), 8(E) decatrienoamida (espilantol) TR 6,32 6,69 16,49 16,92 17,03 19,58 21,78 24,34 25,18 26,61 31,70 40,09 IR 937 1037 1190 1298 1301 1364 1415 1479 1398 1536 1571 1813 % Amostra 1,01 4,50 2,23 1,25 2,93 14,85 11,44 11,69 45,89 2,15 2,05 0,01 Mtodo de Identificao a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c

a = padro de fragmentao EM; b = ndice de reteno relativo a srie de n-alcanos na coluna DB-5, c = ndice de reteno comparados com a literatura [6]

Tabela 2. Substncias identificadas [Tempo de reteno (TR); ndice de Reteno (IR) e % na mistura] no leo essencial de folhas de Acmella ciliata.
Substncia 1. -pineno 2. -mirceno 3. 3-careno 4. 3,7-dimetil (E)- 1,3,6-octatrieno 5. -cariofileno 6. -farneseno 7. germacreno D 8. N.I. 9. 3-trideceno 10. nerolidol 11. xido de cariofileno 12. 4-(2,6,6-trimetil-1-ciclohexen-1-il)-3-buten-2-ona 13. N.I. 14. -cadinol 15. N.I. 16. N-isubutil-2(E), 6(Z), 8(E) decatrienoamida (espilantol) 17. N.I. TR 4,84 5,27 6,38 6,75 22,08 23,32 24,72 25,17 25,25 28,16 28,57 IR 988 991 1039 1049 1423 1454 1479 1398 1576 1586 1616 1646 1658 1696 1816 2034 % Amostra 1,46 0,76 0,87 1,95 36,04 2,69 37,51 3,05 2,97 1,02 1,87 1,17 1,62 0,71 1,99 1,46 2,14 Mtodo de Identificao a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c,d a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c -

29,69
30,79 31,48 32,69 40,21 47,09

a = padro de fragmentao EM; b = ndice de reteno relativo a srie de n-alcanos na coluna DB-5, c = ndice de reteno comparados com a literatura [6], d = padro cariofileno

Tabela 3. Substncias identificadas [Tempo de reteno (TR); ndice de Reteno (IR) e % na mistura] no leo essencial de inflorescncias de Acmella ciliata.
Substncia 1. sabineno 2. -pineno 3. -mirceno 4. 3- careno 5. 3,7- dimetil- 1, 3, 6- octatrieno 6. isoeugenol 7. -cariofileno 8. -farneseno 9. germacreno D 10. acetato de isoeugenol 11. xido de cariofileno 12. N-isobutil-2 (E), 6 (Z), 8 (E)decatrienoamida (espilantol) TR 4,76 4,83 5,27 6,39 6,77 19,65 21,91 23,28 24,49 26,80 28,55 40,20 IR 984 987 1004 1039 1049 1365 1419 1453 1479 1541 1586 1816 % Amostra 2,62 2,25 5,01 11,22 15,38 14,96 15,02 1,03 5,69 4,19 0,99 15,16 Mtodo de Identificao a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c,d a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c a,b,c

a = padro de fragmentao EM; b = ndice de reteno relativo a srie de n-alcanos na coluna DB-5, c = ndice de reteno comparados com a literatura [6], d = padro cariofileno

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