Formatos y Registros Pronahebas

Formatos y Registros
NORMA TCNICA N 016 - MINSA / DGSP - V.01
LIMA PER 2004
Sistema de Gestin de la Calidad del PRONAHEBAS Formatos y Registros

NORMA TCNICA N 016 - MINSA / DGSP - V.01
Ministerio de Salud
DRA. PILAR MAZZETTI SOLER Ministra de Salud DR. HENRY ZORRILLA SAKODA Vice Ministro de Salud DR. LUIS PODEST GAVILANO Director General Direccin General de Salud de las Personas
Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre Av. Salaverry Cdra 8 - 3er Piso Ministerio de Salud Lima, Per Telfono: (51-1) 315-6600 Anexo: 2540 Fax: (51-1) 315-6600 Anexo: 2712 Per. Ministerio de Salud PRONAHEBAS Sistema de Gestin de la Calidad del Pronahebas FORMATOS Y REGISTROS: Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre, 2004. 73 Pag. ISBN Hecho en el Depsito legal N 1501132004-8702 Comisin Tcnica para la Elaboracin: Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco Dr. Luis Robles Guerrero Dr. Ivn Rojas Ruz Dra. Violeta Dvila Ildefonso Dra. Nancy Loayza Urcia Dra. Diana Bolvar Joo Dr. Jos Mlaga Centeno Dr. Rafael Rodrguez Bayona Dr. Ernesto Manrique Valencia Dr. Santos Hinostroza Orihuela Ing. Luis Docarmo Ruggiero Lic. Pilar Yvera Ancajima Lic. Alejandro Bustamante del Ro Lic. Yohanna Trinidad Salinas Lic. Carmen Valqui Chamochumbi Lic. Martn Magallanes Sebastin Edicin y Diagramacin: Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco Coordinadora Nacional Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre MINSA Equipo Tcnico Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre MINSA Coordinadora Nacional Pronahebas - MINSA Equipo Tcnico - Pronahebas - MINSA Director Administrativo - Hospital Daniel Alcides Carrin Coordinador Regional del PRONAHEBAS - DISA V Lima Ciudad. Jefa del Departamento de Patologa Clnica - Hospital Nacional de Emergencias Jos Casimiro Ulloa. Jefe del Banco de Sangre - Hospital Nacional Dos de Mayo. Jefe del Banco de Sangre - Hospital Alberto Sabogal Sologuren EsSalud. Jefe del Banco de Sangre - Hospital de la Fuerza Area del Per. Patlogo Clnico - Hospital Militar Central. Representante de la Asociacin de Clnicas Privadas. Representante de la Asociacin de Clnicas Privadas. Ingeniero Electrnico Especialista en Equipamiento de Bancos de Sangre. Tecnloga Mdica - Hospital Nacional de Cayetano Heredia. Tecnlogo Mdico - Hospital Guillermo Almenara Irigoyen EsSalud. Tecnloga Mdica - Instituto de Salud del Nio. Tecnloga Mdica - Hospital Guillermo Almenara Irigoyen EsSalud. Tecnlogo Mdico - Hospital Nacional San Bartolom.
Publicado con el apoyo financiero de USAID a travs del Proyecto Cobertura con Calidad.
Prohibida la reproduccin total o parcial. Ninguna parte de este libro puede ser reproducida, copiada o transmitida sin autorizacin escrita de los editores.
Impreso en el Per
AGRADECIMIENTOS
El Ministerio de Salud expresa su profundo agradecimiento a todos los profesionales que participaron en la validacin de estas Normas Tcnicas, y a aquellos que con sus conocimientos y experiencia brindaron importantes aportes a la versin final que hoy presentamos:
Dr. Dra. Dr. Dr. Dr. Dr. Dra. Dra. Dra. Dr. Dra. Dra. Dr. Dr. Dr. Lic.
Jos Ramiro Cruz Mara Dolores Prez-Rosales Rubn Figueroa Rubn Szyszkowsky Jorge Cordero Valera Enrique Argumanis Snchez Susana Del Carpio Ortman Mitzi Rodrguez Farfn Carmen Arica Chvez Juan Zubieta Cabanillas Keiko Nakamatsu Yonamine Myriam Lavalle Saavedra Alfredo Torres Tello Csar Ramrez Salinas Jos Caldern Sanguinez Flor Crdenas Palomino
EG03 EG03 EG05 EG05 EG05 EG05 EG05 EG05 EG05 EG05 EG05 EG05 EG05 EG05 EG05
- POEEQ1/01 - POEMP1/01 - POEH1/01 - POEH2/01 - POEH3/01 - POEH4/01 - POEH5/01 - POEH6/01 - POEH7/01 - POEH8/01 - POEH9/01 - POEH10/01 - POEH11/01 - POEH12/01 - POES1/01
EG05 - POES2/01 EG05 - POES3/01 EG05 - POES4/01 EG05 - POES5/01 EG05 - POES6/01 EG05 - POEC1/01 EG05 - POEC2/01 EG05 - POEC3/01 EG05 - POEC4/01 EG05 - POEC5/01 EG05 - POEC6/01 EG05 - POEC7/01 EG05 - POECC1/01 EG05 - POECC2/01 EG05 - POECC3/01 EG05 - POECC4/01 EG06 - POEDR1/01 FORMULARIOS Y ANEXOS REFERENCIAS
Instalacin de Equipo Nuevo Calibracin de Micropipetas Determinacin de Grupo Sanguneo ABO - Rh en Lmina. Determinacin de Grupo Sanguneo Globular ABO - Rh en Tubo Determinacin de Grupo Sanguneo Srico ABO en Tubo. Tipificacin del D Dbil del Sistema RH. Test de Coombs Directo Cualitativo Poliespecfico Test de Coombs Directo Cuantitativo Poliespecfico. Test de Coombs Directo Cualitativo Monoespecfico. Test de Coombs Directo Cuantitativo Monoespecfico . Test de Coombs Indirecto Pantalla. Test de Coombs Indirecto Panel. Determinacin de la Avidez. Determinacin de la Especificidad. Elucin por Calor. Enzimoinmunoensayo para determinacin de Anticuerpos y/o Antgenos. Deteccin de Anticuerpos de Treponema Pallidum - Mtodo Floculacin. TPHA - Sfilis. Hemaglutinacin Indirecta Chagas - HAI. Pruebas Rpidas - TESTPACK. Pruebas R pidas - LTEX. Tcnica de Preparacin de Zona de Venopuntura Tcnica de Flebotoma Preparacin de Componentes Sanguneos - Paquete Globular Preparacin de Componentes Sanguneos - Plasma Fresco Congelado Preparacin de Componentes Sanguneos - Concentrado Plaquetario. Preparacin de Componentes Sanguneos - Crioprecipitado Dosaje de Hemoglobina por el Mtodo de Sulfato de Cobre. Pruebas de Evaluacin Externa del Desempeo (Proficiencia) Suero Control Interno Control de Calidad del Crioprecipitado Control de Temperatura de Unidades Transportadas Procedimientos Operativos Estndar
13 15 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 45 47 49 51 53 55 57 59 61 63 65 67 69 71 73 75 77 79 81 97
INTRODUCCIN El concepto universal de la calidad, y el estudio de sus procesos, se ha extendido fuera de la industria de la manufactura a las ciencias mdicas. El servicio y la satisfaccin del cliente se han convertido en una de las metas ms importantes para los hospitales, laboratorios clnicos y bancos de sangre, quienes tratan de implementar un sistema de calidad que se adapte a las necesidades operativas y financieras de la organizacin, as como a los requerimientos prcticos y personales del paciente o donante. Es as que podemos definir al sistema de calidad, como el conjunto de polticas, recursos y documentos conducentes a asegurar la calidad, no slo del producto sino de la organizacin como un todo. Un documento es un testimonio importante por el que se prueba, se establece o se hace constar algo, y dentro de los documentos tenemos a los procedimientos, documentos que describen la secuencia de pasos necesaria para asegurar la correcta ejecucin de las actividades de tipo administrativo o tcnico. En general un procedimiento define "qu se debe hacer", "quien lo debe hacer", "cuando" y "en donde" se debe realizar. La presente Gua de Procedimientos Operativos Estndar" ha sido elaborada con la finalidad de brindar una herramienta para estandarizar el trabajo dentro de los Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre, por profesionales que realizan sus labores diariamente en instituciones de salud de alta complejidad y que pretende ser una gua para todo aquel que requiera desarrollar actividades relacionadas con la Medicina Transfusional. Consta de cinco secciones: Procedimientos de inmunohematologa, Procedimientos de Inmunoserologa, Procedimientos para la Preparacin de Componentes, Procedimientos para el Control de Calidad, una seccin de anexos y la seccin final de referencias, que contiene documentos de inters general y en algunos casos ampliatorios para los procedimientos que se describen. Esta Gua establece las bases para la elaboracin de los Manuales de Procedimientos de los diferentes Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre del pas, ya que contiene procedimientos generales relacionados con los procesos que comnmente se llevan a cabo en los mencionados establecimientos.
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO
TTULO: POE N EG03/POEEQ1/01 OBJETIVO INSTALACIN DE EQUIPO NUEVO Revisin N Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 01 De 01 01/01/04 La instalacin de un equipo nuevo debe seguir un proceso definido que incluya una adecuada instalacin, calibracin, validacin, documentacin y medidas correctivas para los problemas que se puedan presentar. Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre PROCEDIMIENTO Instalar el equipo de acuerdo a las indicaciones del fabricante Calibrar el equipo de acuerdo a lo sugerido por el fabricante Validar que el equipo trabaja como se espera y como especifica el fabricante Decidir si el equipo es crtico, de ser as incluirlo en la lista de equipos crticos Desarrollar procedimientos, horarios y registros para la calibracin, mantenimiento preventivo y control de calidad que forman parte de las regulaciones, requerimientos de acreditacin y manuales del operador Revisar el control de calidad semanalmente cuyo responsable ser el supervisor inmediato y el responsable del centro de hemoterapia lo har mensualmente, a fin de asegurar que la calibracin, mantenimiento preventivo y reparaciones se realicen adecuadamente. Preparar el registro para anotar el record de reparaciones del equipo Si se encuentra que el equipo esta defectuoso antes de ponerlo en funcionamiento colocarlo en situacin de inactividad, marcandolo con un signo visible Arreglar la devolucin del equipo ya sea para su reemplazo o reparacin. REDACCIN Lic. TM: Pilar Yovera Anacajima APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
ALCANCE
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rea Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre
Fecha 01/12/2003 01/12/2003
REVISIONES Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre
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TTULO: CALIBRACIN DE MICROPIPETAS POE N Revisin N Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 01 De 01 EG03/POE/MP1/01 OBJETIVO Para que los resultados de las pruebas sean precisos se requiere que las micropipetas dispensen los volumenes requeridos. ALCANCE Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre MUESTRA Micropipeta MATERIALES Tips o puntas descartables adecuados para la micropipeta. Agua destilada. Vial o contenedor limpio. Balanza analtica PROCEDIMIENTO Ajustar el volumen de la pipeta de acuerdo al modelo segun la tabla. Ver Anexo: ANX2/01 Colocar el contenedor limpio en la balanza analtica. Pesar el contenedor y calibrar a cero. Fijar el tip firmemente al cono de la pipeta. Pipetear agua destilada dentro del contenedor y anotar el peso. Repetir 5 veces cambiando de tip. Anotar los resultados. Verificar los resultados con la tabla de valores permitidos.VerAnexo: ANX2/01
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INTERPRETACIN Si los resultados estan dentro de los valores permitidos la pipeta esta calibrada y slo necesita continuar con el MANTENIMIENTO DIARIO de limpieza del cono con Etanol al 70% Si uno de los resultados esta fuera de los lmites aceptados la pipeta necesita ser RECALIBRADA y limpiada desmontando las piezas y siguiento las instrucciones del fabricante. REFERENCIAS Labsystems, Finnpipette Instruction for use. www.finnipipette.com REDACCIN Lic. TM Carmen Valqui Chamochumbi Lic. Martn Magallanes Sebastian APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
rea Coordinador Nacional Garanta de Calidad Director del Banco de Sangre
Fecha 01/12/2003 01/12/2003
REVISIONES Coordinador Nacional Garanta de Calidad Director del Banco de Sangre
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TTULO: CONTROL DE CALIDAD DE CENTRIFUGAS REFRIGERADAS POE N Revisin N Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 01 De 01 EG03/POEMP2/01 OBJETIVO Se debe estandarizar la velocidad y el tiempo de centrifugacin de cada equipo en uso. Todos los instrumentos deben ser mantenidos adecuadamente, limpiados y monitorizados. ALCANCE Centros de Hemoterapia MUESTRA Centrifugas refrigeradas EQUIPOS Tacmetro Cronmetro PROCEDIMIENTO Colocar cinta brillante en la parte superior dela gua del rotor Utilizar un tacometro para chequear la precisin del inidcador de velocidad en cada una de las ubicaciones del selector Colocar el selector a 24000 RPM por 5 a 10 minutos Colocar el tacometro en la parte central de la tapa de apertura y anotar la lectura Repetir los pasos 2, 3 y 4 llevando el selector a 4100 RPM Chequear el selector de tiempo con un cronmetro y marcar el cambio en la centrifuga de ser necesario
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OBSERVACIONES Las temperaturas deben ser chequeadas diariamente Las revoluciones por minuto (RPM) y los relojes deben chequearse trimestralmente REFERENCIAS
REDACCIN Lic. TM. Pilar Yovera Ancajima APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
Fecha 01/12/2003 01/12/2003
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: DETERMINACIN DE GRUPO SANGUINEO ABO- RH EN LMINA Fecha de aplicacin 01/01/2004 Pgina 01 De 02.
POE N Revisin N Fecha de Revisin EG05/POE/H1/01
OBJETIVO ALCANCE MUESTRA MATERIALES Y EQUIPOS
Determinar el Grupo Globular ABO-RH en donantes y pacientes, mediante el uso de antisueros especficos, que actuen aglutinando las celulas portadoras del Antigeno respectivo.Correlacin con el grupo srico con celulas de tipificacin conocida. Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre Sangre entera anticoagulada y suero o plasma Sueros comerciales Anti A, Anti B, Anti-AB (opcional) Anti D policlonal o monoclonal Todos los reactivos deben usarse de acuerdo con las instrucciones del fabricante Globulos rojos A1 y B al 40% Opcional A 2 Comerciales o preparados en el Laboratorio Placa de vidrio o Placa escavada , pipetas Pasteur, baguetas PROCEDIMIENTO EN LMINA: FASE CELULAR Rotular la placa o lmina escavada identificando la muestra Colocar una gota de Anti-A en un pozo . Colocar una gota de Anti-B en otro pozo . Colocar una gota de Anti-D en un tercer pozo. Agregar una gota de glbulos rojos en estudio Mezclar con la ayuda de una bagueta. Observar la presencia de aglutinacin a partir de los 10 seg hasta los 2 minutos. Leer, interpretar y registrar los resultados. PROCEDIMIENTO EN LAMINA: FASE SRICA Rotular la lmina Colocar una gota de Globulos Rojos "A" en uno de los pozos o en la placa Colocar una gota de Globulos Rojos "B" en uno de los pozos o en la placa Agregar 02 gotas de suero o plasma en cada pozo e los numerales 2 y 3 Agregar una gota de clulas A2 si correspondiera a un sub tipo de A.observ. Mezclar con la ayuda de una bagueta. Observar la presencia de aglutinacin a partir de los 10 seg hasta los 2 minutos. Leer, interpretar y registrar los resultados. Comparar los resultados de la prueba con los obtenidos en la fase celular INTERPRETACIN La aglutinacion de los glbulos rojos en estudio constituyen resultados positivos. La resuspension de las clulas constituye un resultado negativo.
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1 2 ADJUNTO
TABLA: TIPIFICACIN ABO Prueba Celular Prueba Srica Glbulos rojos desconocidos Suero Desconocido Anti-A Anti-B Anti-AB A1 B O 0 0 0 + + 0 + 0 + 0 + 0 0 + + + 0 0 + + + 0 0 0
Interpretacin O A B AB
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POE/H1/01 DETERMINACIN DE GRUPO SANGUINEO ABO- RH EN LAMINA Revisin N Fecha de Revisin Fecha de aplicacin 01/01/2004 Pgina 01 De 02.
OBSERVACIONES En los casos de anemia severa, realizar la correcin del Hemtaocrito al 50%, a fin de evitar problemas en la determinacin del factor Rh. REFERENCIAS Manual Tcnico Asociacin Americana de Bancos de Sangre 13ava Edicion REDACCIN LIC. TM Alejandro Bustamante Del Rio APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
Fecha 01/12/2003 01/12/2003
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POEH2/01 OBJETIVO ALCANCE MUESTRA MATERIALES Y EQUIPOS DETERMINACIN DE GRUPO SANGUINEO GLOBULAR ABO-RH EN TUBO DETERMINACIN DE GRUPO SANGUINEO SRICO ABO EN TUBO Revisin N Fecha de Revisin Fecha de aplicacin 01/01/04 Determinar el Grupo Globular ABO-RH , mediante el uso de antisueros especificos, que actuen aglutinando las celulas portadoras del Antigeno respectivo.Correlacincon el grupo srico con celulas de tipificacin conocida. Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre Sangre entera anticoagulada y suero o plasma Reactivos: Sueros comerciales Anti A, Anti B monoclonal y Anti D policlonal o monoclonal Todos los reactivos deben usarse de acuerdo con las instrucciones del fabricante Globulos rojos A1 y B al 5% Opcional A 2 Equipos: Centrfuga de inmunohematologa, aglutinoscopio, tubos 12 x 75 , pipetas pasteur.Sol. Salina PROCEDIMIENTO EN TUBO: FASE CELULAR Preparar una suspen.Glob. Roj. en estudio al 5% en solucin salina al 0.9% Colocar una gota de Anti A en un tubo limpio y rotulado. "A" Colocar una gota de Anti B en un tubo limpio y rotulado. "B" Colocar una gota de Anti-D en un tubo limpio y rotulado "D" Agregar una gota de la suspensin al 5% de glbulos rojos en estudio, a cada tubo. Mezcla con suavidady centrifugarde acuerdo con las instrucciones por 15 seg a 3,400 rpm por 1 min. a 1,000 rpm. Resuspender con suavidad las celulas y /Examinar macroscopicamente en busca de aglutinacin con la ayuda del aglutinoscopio Leer, interpretar y registrar los resultados. PROCEDIMIENTO EN TUBO: FASE SRICA Rotular 2 tubos como A1 y B. (nota: si se usan glbulos rojos A2 se rotula en tubo adicional) Agregar 2 gotas del suero en estudio a cada tubo. Agregar una gota de clulas A1 al tubo rotulado como A1. Agregar una gota de clulas B al tubo rotulado como B. Agregar una gota de clulas A2 al tubo rotulado como A2, si correspondiera. Mezcla con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones por 15 seg a 3,400 rpm por 1 min. a 1,000 rpm. Resuspender con suavidad las celulas y examine macroscopicamente en busca de aglutinacin y/o hemolisis con la ayuda del aglutinoscopio . Nota ( Hemolisis igual a 4+) Ver tabla adjunta. Leer, interpretar y registrar los resultados. Comparar los resultados de la prueba con los obtenidos en la fase celular INTERPRETACIN La aglutinacion de los glbulos rojos en estudio constituyen resultados positivos. La ausencia de aglutinacin de las clulas constituye un resultado negativo. La interpretacin de la tipificacin ABO del suero y los Glbulos rojos se ilustra en la tabla. Todas las discrepancias entre los resultados globular y srico deben resolver antes de registrar la interpretacin del tipo ABO del paciente o donante. En la fase Globular ABO y RH, las reacciones positivas suelen mostrar aglutinacin 3+ 4+; las reacciones en fase srica son ms dbiles. Los GR A2 se utilizaran si se encuentra un sub tipo "A" que pueda desarrollar anticuerpos anti A1 Pgina 01 de 02
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1 2 3 4 NOTA
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POEH2/01 DETERMINACIN DE GRUPO SANGUINEO GLOBULAR ABO-RH EN TUBO DETERMINACIN DE GRUPO SANGUINEO SRICO ABO EN TUBO Revisin N Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 02 de 02 01/01/04
ADJUNTO TABLA: TIPIFICACION ABO Prueba Celular Prueba Srica Glbulos rojos desconocidos Suero Desconocido Anti-A Anti-B Anti-AB A1 B 0 0 0 + + + 0 + 0 + 0 + + + 0 + + + 0 0 REFERENCIAS Manual Tcnico Asociacin Americana de Bancos de Sangre 13ava Edicin REDACCIN LIC. TM Alejandro Bustamante Del Rio APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga
O 0 0 0 0
Interpretacin O A B AB
Fecha 01/12/2003 01/12/2003
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N Revisin N EG05/POEH3/01 TIPIFICACIN DEL D dbil DEL SISTEMA RH Fecha de Revisin Fecha de aplicacin 01/01/2004 Pgina 01 de 02
La expresin del antgeno D en el grupo de los D dbiles est disminuido en nmero de copias de antgeno D, por lo que su presencia tiene que ser demostrado mediante la tcnica OBJETIVO de la antiglobulina. El objetivo de esta tcnica es demostrar la presencia del antgeno D. ALCANCE Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre MUESTRA Sangre entera anticoagulada Suero Comercial Anti D policlonal o monoclonal , Suero Control Rh Albumina 22% MATERIALES Y Suero de Coombs Poliespecifico IgG C3d , Celulas Control de Coombs EQUIPOS Todos los reactivos deben usarse de acuerdo con las instrucciones del fabricante Equipos: Centrfuga de inmunohematologa, aglutinoscopio, tubos 12 x 75 , pipetas pasteur. PROCEDIMIENTO Suspensin al 5% de glbulos rojos en estudio en solucin salina al 0.9% Colocar una gota de Anti D en un tubo limpio y rotulado. "D" Colocar una gota de Suero Control RH Alb 22%en un tubo limpio y rotulado. "Control" Agregar una gota de la suspensin al 5% de glbulos rojos en estudio, a cada tubo. Mezcla con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones casi siempre por 15 seg a 3,400 rpm por 1 min. a 1,000 rpm. Resuspender con suavidad las celulas y/ examine macroscopicamente en busca de aglutinacin con la ayuda del aglutinoscopio Leer, interpretar y registrar los resultados.Si reaccin es Negativa continuar procedimiento Incubar en Bao Mara durante 30 min ,luego repetir paso 5 y 6 si es Negativo continuar. Lavar los tubos con Sol. Salina por 4 veces decantando totalmente el ltimo lavado Agregar 2 gotas de Suero Coombs ( Antiglobulina Humana) repetir paso 5 y 6 Comprobar con Celulas Control de Coombs INTERPRETACIN La aglutinacin de los glbulos rojos en estudio constituyen resultados positivos. La resuspensin de las clulas constituye un resultado negativo. La validacin como Rh Negativo se dar si ambos tubos no aglutinan ADJUNTO TABLA RH NEGATIVO TPICO D Ctl RH Interpretacin 0 0 Continuar 0 0 Continuar 0 0 Continuar 1+ / 2+ 1+ / 2+ NEGATIVO TABLA RH POSITIVO DBIL D Ctl RH Interpretacin 0 0 Continuar 0 0 Continuar 1+ 0 POSITIVO 1+ / 2+ POSITIVO
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Lectura Inmediata Lectura Incubacion Lectura Suero de Coombs Control de Coombs
Lectura Inmediata Lectura Incubacion Lectura Suero de Coombs Control de Coombs
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N Revisin N EG05/POEH3/01 TIPIFICACIN DEL D dbil DEL SISTEMA RH Fecha de Revisin Fecha de aplicacin 01/01/2004 Pgina 02 de 02
Lectura Inmediata Lectura Incubacin Lectura Suero de Coombs Control de Coombs * REALIZAR ESTUDIO COMPLEMENTARIO TCD. VER POE N: EG05/POEH4/01
TABLA RH NO DETERMINADO D Ctl RH Interpretacin 0 0 Negativo? 0 0 Negativo? 1+ 1+ INVALIDO (+)
OBSERVACIONES Se debe analizar un control negativo de manera simultnea (autocontrol) REFERENCIAS Manual Tcnico Asociacin Americana de Bancos de Sangre 13ava Edicin REDACCIN LIC. TM Alejandro Bustamante Del Rio APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
Fecha 01/12/2003 01/12/2003
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POEH4/01 OBJETIVO ALCANCE MUESTRA MATERIALES Y EQUIPOS Revisin N TEST DE COOMBS DIRECTO CUALITATIVO ( POLIESPECFICO ) Fecha de Revisin Fecha de aplicacin 01/01/2004 Pgina 01 De 01
Determinar la presencia de Anticuerpos adheridos a la membrana del hematie. Induccin de la aglutinacin in vitro de hemates sensibilizados ante la precencia del reactivo de Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre Sangre entera anticoagulada Antiglobulina Humana IgG-C3d ( Suero de Coombs Poliespecifico) Todos los reactivos deben usarse de acuerdo con las instrucciones del fabricante Equipos: Centrfuga de inmunohematologa, aglutinoscopio, tubos de vidrio 12 x 75 , pipetas pasteur. PROCEDIMIENTO Suspensin al 5% de glbulos rojos en estudio en solucin salina al 0.9% lavados 4 veces Agregar una gota de Suero de Coombs Poliespecifico Mezcla con suavidady centrifugarde acuerdo con las instrucciones, por 15 seg a 3,400 rpm por 1 min. a 1,000 rpm. Leer, interpretar y registrar los resultados. De salir Positivo Realizar la misma operacin con los sueros Monoespecificos INTERPRETACIN La aglutinacion de los glbulos rojos en estudio constituyen resultados positivos. La resuspension de las clulas constituye un resultado negativo. Los resultados negativos deben ser comprobados con las clulas control de coombs. Si el resultado es negativo la prueba es "no vlida" y deber repetirse.
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REFERENCIAS Manual Tcnico Asociacin Americana de Bancos de Sangre 13ava Edicin REDACCIN LIC. TM Alejandro Bustamante Del Rio APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
Fecha 01/12/2003 01/12/2003
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EGO5/POEH5/01 OBJETIVO ALCANCE MUESTRA MATERIALES Y EQUIPOS TEST DE COOMBS DIRECTO CUANTITATIVO ( POLIESPECFICO ) Revisin N Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 01 de 01 01.01.04 Determinar el Ttulo de Anticuerpos adheridos a la membrana del hemate. Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre Sangre entera anticoagulada Antiglobulina Humana IgG-C3d ( Suero de Coombs Poliespecifico) Todos los reactivos deben usarse de acuerdo con las instrucciones del fabricante Equipos: Centrfuga de inmunohematologa, aglutinoscopio, tubos de vidrio 12 x 75 Pipetas Pasteur, Solucin Salina fisiologica PROCEDIMIENTO Preparar suspensin al 5% de glbulos rojos en estudio en solucin salina 0.9% lavados 4 veces en cada tubo rotulado Realizar la dilucin del suero de Coombs al 1/2 , 1/4 , 1/8 , 1/16 , 1/32 , 1/64 , 1/128 , 1/256 , 1/512 , 1/1024 Agregar una gota de Suero de Coombs Poliespecifico previamente diludo a cada tubo. Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones casi siempre por 15 seg a 3,400 rpm por 1 min. a 1,000 rpm. Leer, interpretar y registrar los resultados. De salir Positivo Realizar la misma operacin con los sueros Monoespecificos INTERPRETACIN La aglutinacion de los glbulos rojos en estudio constituyen resultados positivos. La resuspension de las clulas constituye un resultado negativo. Los resultados negativos deben ser comprobados con las clulas control de coombs. Si el resultado es negativo la prueba es "no vlida" y deber repetirse. La sumatoria del contaje de los puntos segn la aglutinacin ser el score asignado ADJUNTO 2+ 1+ 6 ptos 4 ptos
1 2 3 4 5
1 2 3 NOTA
Puntuacin
4+ 10 ptos
3+ 8 ptos
1/2 + 3 ptos
0 0
Fecha 01/12/2003 01/12/2003
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POEH6/01 OBJETIVO ALCANCE MUESTRA MATERIALES Y EQUIPOS TEST DE COOMBS DIRECTO CUALITATIVO ( MONOESPECIFICO ) ANTI IgG y/o C3d C3b Revisin N Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 01 De 01 01/01/2004 Determinar la presencia de Anticuerpos adheridos a la membrana del hemate. Centros de Hemoterapia y Banco de Sangre Sangre entera anticoagulada Antiglobulina Monoespecifica IgG , Antiglobulina Monoespecifica C3c,C3d Todos los reactivos deben usarse de acuerdo con las instrucciones del fabricante Equipos: Centrfuga de inmunohematologa, aglutinoscopio, tubos de vidrio 12 x 75. Pipeta Pasteur. PROCEDIMIENTO Suspensin al 5% de glbulos rojos en estudio en solucin salina al 0.9% lavados 4 veces en cada tubo rotulado Agregar una gota de Suero de Coombs Poliespecfico Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones casi siempre por 15 seg a 3,400 rpm por 1 min. a 1,000 rpm. Leer, interpretar y registrar los resultados. De salir Positivo Realizar la misma operacin con los sueros Poliespecificos INTERPRETACIN La aglutinacion de los glbulos rojos en estudio constituyen resultados positivos. La resuspension de las clulas constituye un resultado negativo. Los resultados negativos deben ser comprobados con las clulas control de coombs. Si el resultado es negativo la prueba es "no vlida" y deber repetirse.
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Fecha 01/12/2003 01/12/2003
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POEH7/01 OBJETIVO ALCANCE MUESTRA MATERIALES Y EQUIPOS TEST DE COOMBS DIRECTO CUANTITATIVO ( MONOESPECFICO ) ANTI IgG y/o C3d C3b Revisin N Fecha de Revisin Fecha de aplicacin 01/01/2004 Pgina 01 De 01
Determinar el Ttulo de Anticuerpos adheridos a la membrana del hematie. Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre Sangre entera anticoagulada Antiglobulina Monoespecifica IgG , Antiglobulina Monoespecifica C3c,C3d Todos los reactivos deben usarse de acuerdo con las instrucciones del fabricante Equipos: Centrfuga de inmunohematologa, aglutinoscopio, tubos de vidrio 12 x 75 . Pipetas Pasteur,Solucin Salina fisiologica PROCEDIMIENTO Preparar suspensin al 5% de glbulos rojos en estudio en solucin salina al 0.9% 4 veces en cada tubo rotulado Realizar la dilucin del suero de Coombs al 1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32, 1/64, 1/128, 1/256, 1/512, 1/1024 Agregar una gota de Suero de Coombs Monoespecfico previamente diludo a cada tubo. Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones casi siempre por 15 seg a 3,400 rpm por 1 min. a 1,000 rpm. Leer, interpretar y registrar los resultados. De salir Positivo, realizar la misma operacin con los sueros Poliespecificos INTERPRETACIN La aglutinacion de los glbulos rojos en estudio constituyen resultados positivos. La resuspension de las clulas constituye un resultado negativo. Los resultados negativos deben ser comprobados con las clulas control de coombs. Si el resultado es negativo la prueba es "no vlida" y deber repetirse. La sumatoria del contaje de los puntos segn la aglutinacin ser el score asignado ADJUNTO 4+ 10 ptos 3+ 8 ptos 2+ 6 ptos 1+ 4 ptos 1/2 + 3 ptos 0 0
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1 2 3 NOTA
Puntuacin
Fecha 01/12/2003 01/12/2003
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EGO5/POEH8/01 OBJETIVO ALCANCE MUESTRA TEST DE COOMBS INDIRECTO ( PANTALLA) Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 01 de 01 01/01/2004
Revisin N
Determinar la presencia de Anticuerpos circulantes dirigidos contra Antgenos Hemtcos. Bancos de Sangre y Servicios de Hemoterapia y Medicina Transfusional Sangre entera anticoagulada, suero. Antiglobulina Humana IgG-C3d ( Suero de Coombs Poliespecifico). Antiglobulina Monoespecifica IgG , Antiglobulina Monoespecifica C3c,C3d. Clulas detectoras de Anticuerpos de Fenotipos conocidos del 3% a 5%. Albmina Bovina al 22%. Equipos: Centrfuga de inmunohematologa, incubadora, aglutinoscopio, tubos 12 x 75, pipetas pasteur.
MATERIALES Y EQUIPOS
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PROCEDIMIENTO Enumerar los tubos como I. II. III segn sea el caso de 2 3 celulas Dispensar una gota de Glbulos Rojos en cada uno de los tubos debidamente rotulados. Agregar 02 gotas del suero problema a cada tubo. Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones casi siempre por 15 seg a 3,400 rpm por 1 min. a 1,000 rpm. Leer, aglutinacin y/o hemlisis , resuspender completamente el botn celular y anotar resultado. Agregar 02 gotas de Albmina Bovina al 22% Repetir paso 4 y 5 Incubar a 37 C por 15 min. Repetir pasos 4 y 5 Lavar los G.R. con solucin Salina 0.9% x cuatro veces decantando totalmente en el ltimo lavado Agregar 02 gotas de Suero de Coombs Poliespecfico Repetir pasos 4 y 5 Agregar 01 gota de celulas Contol de Coombs en aquelos tubos sin aglutinacin Repetir pasos 4 y 5 INTERPRETACIN La aglutinacin de los glbulos rojos en estudio constituyen resultados positivos. La resuspensin de las clulas constituye un resultado negativo. De ser positivo ver POE N: EG05/POEH9/01 Test de Coombs Indirecto-Panel Todos los reactivos deben usarse de acuerdo a las instrucciones del fabricante. Cent. Inmediat Albmina ADJUNTO 37C Coombs Cont. Coombs
Cel I Cel II Cel III REFERENCIAS Manual Tcnico Asociacin Americana de Bancos de Sangre 13ava Edicin REDACCION LIC. TM Alejandro Bustamante Del Rio APROBACION Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
rea Coordinador Nacional Garantia de Calidad Jefe del Banco de Sangre
Fecha 01/12/2003 01/12/2003
REVISIONES Area Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre 33
DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POEH9/01 OBJETIVO ALCANCE MUESTRA Revisin N TEST DE COOMBS INDIRECTO (PANEL) Fecha de Revisin Fecha de aplicacin 01/01/2004 Pgina 01 De 01
Determinar la especificidad del Anticuerpos circulantes contra Antgenos Hemticos. Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre. Sangre entera anticoagulada, suero. Antiglobulina Humana IgG-C3d ( Suero de Coombs Poliespecfico) Antiglobulina Monoespecifica IgG , Antiglobulina Monoespecifica C3c,C3d Celulas detectoras de Anticuerpos de Fenotipos conocidos del 3% a 5% Panel Celular Albmina Bovina al 22% Equipos: Centrfuga de inmunohematologa, incubadora, aglutinoscopio, tubos 12 x 75, pipetas pasteur. PROCEDIMIENTO Enumerar los tubos como 1, 2, 3,4 hasta 11 segn sea el caso de 11 mas celulas Dispensar una gota de Globulos rojos en cada uno de los tubos debidamente rotulados. Agregar 02 gotas del suero problema a cada tubo. Mezcla con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones casi siempre por 15 seg a 3,400 rpm por 1 min. a 1,000 rpm. Leer, aglutinacin y/o hemlisis , resuspender completamente el botn celular y anotar resultado. Agregar 02 gotas de Albmina Bovina al 22% Repetir paso 4 y 5 Incubar a 37 C por 15 min. Repetir paso 4 y 5 Lavar los G.R. con solucin Salina 0.9% x cuatro veces decantando totalmente en el ultimo lavado Agregar 02 gotas de Suero de Coombs Repetir paso 4 y 5 Agregar 01 gota de celulas Contol de Coombs Repetir paso 4 y 5 INTERPRETACIN La aglutinacin de los glbulos rojos en estudio constituyen resultados positivos. La resuspensin de las clulas constituye un resultado negativo. Todos los reactivos deben usarse de acuerdo a las instrucciones del fabricante. ADJUNTO 37C Coombs
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1 2 NOTA
Cent. Inmediat
Albumina
Cont. Coombs
REDACCIN LIC. TM Alejandro Bustamante Del Rio
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DIRECCION GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EGO5/POEH9/01 Revisin N TEST DE COOMBS INDIRECTO ( PANEL) Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 02 de 02 01/01/2004 APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
Fecha 01/12/2003 01/12/2003
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POEH10/01 OBJETIVO ALCANCE MATERIALES Determinacin de la Avidez Fecha de Revisin Fecha de aplicacin 01/01/2004
Revisin N
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Determinar la velocidad de fijacin de un antgeno con su anticuerpo. Centros de Hemoterapia Antisueros Anti A, Anti B, Anti AB y Lectina A1 Hemates O al 45% Hemates B al 45% Hemates A1 al 45% PROCEDIMIENTO Colocar en una lmina de vidrio una gota del reactivo a evaluar Colocar una gota de hemates especficos a aproximadamente 1 cm del reactivo a evaluar Mezclar determinando un crculo de no ms de 2 cm de dimetro, accionado en forma simultnea el cronmetro Continuar la mezcla por balanceo de la lmina hasta ver aglutinacin Anotar el tiempo de inicio de aglutinacin INTERPRETACIN Tiempo ptimo de reaccin: 9 a 12 segundos REDACCIN Lic. Alejandro Bustamante Del Rio APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
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Fecha 01/12/2003 01/12/2003
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N Revisin N EG05/POEH11/01 OBJETIVO ALCANCE MATERIALES Determinacin de la Especificidad Fecha de Revisin Fecha de aplicacin 01/01/2004
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Determinar la capacidad de reaccin de un anticuerpo frente a sus correspondientes determinantes antignicos. Centros de Hemoterapia Antisueros Anti A, Anti B, Anti AB y Anti D Glbulos rojos A1, B y D positivo Tubos 12 x75 mm Pipetas Pasteur, aglutinoscopio, Bao Mara, centrfuga PROCEDIMIENTO Rotular 3 series de tubos cada una como: A, B y D Aadir una gota de anti A a los tubos rotulados "A" y una gota de hemates A1 Aadir una gota de anti B a los tubos rotulados "B" y una gota de hemates B Aadir una gota de anti D a los tubos rotulados "D" y una gota de hemates D Centrifugar a 3500 rpm por 15 seg Leer INTERPRETACIN Aglutinacin: Reaccin del anticuerpo con su antgeno especfico REDACCIN Lic. Alejandro Bustamante Del Rio APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
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Fecha 01/12/2003 01/12/2003
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO POE N Revisin N EG05/POEH12/01 OBJETIVO ALCANCE MUESTRAS MATERIALES ELUCIN POR CALOR Fecha de Revisin Fecha de aplicacin 01/01/2004
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Investigacin de la enfermedad hemoltica del recin nacido por incompatibilidad ABO. Centros de Hemoterapia. Glbulos rojos PAD positivos lavados con solucin salina por 6 veces. Albmina bovina 6% (Albmina bovina 22% 30% diluda con cloruro de sodio). Sobrenadante salino del lavado final de los glbulos rojos en estudio. Tubos 13 x 100 mm. Pipetas Pasteur, aglutinoscopio, centrifuga. PROCEDIMIENTO Mezclar volmenes iguales de glbulos rojos concentrados y lavados con albmina bovina al 6% Incubar por 10 minutos a 56 oC. Agitar peridicamente. Centrifugar a 1000 g por 2 - 3 minutos, si es posible en centrfuga calentada. Transferir sobrenadante a un tubo limpio. Comparar con el sobrenadante salino del lavado final de los glbulos rojos concentrados. REDACCIN Lic. Alejandro Bustamante Del Rio APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
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Fecha 01/12/2003 01/12/2003
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO ANEXOS CUADRO PARA EL CONTROL DE CALIDAD DE REACTIVOS Fecha de Revisin Fecha de Aplicacin 01/01/2004 Pgina 01 de 01
TTULO
ANEXO N
Revisin N
ANX4/01 ANEXO No. 04
REACTIVOS Reactivos Eritrocitarios
1. 2.
Sueros Hemoclasificadores
LIMITE DE VARIACION ? ? Reaccin de 1+ con el control positivo ? ? Ausencia de hemlisis ? ? Reaccin de 1+ con el control positivo ? ? Ausencia de aglutinacin ? ? Reaccin de 1+ con el control positivo
OBSERVACIONES ? ? Debe registrarse la fecha en que se recibe el producto y cuando empieza a usarse. ? ? Debe registrarse la fecha en que se recibe el producto y cuando empieza a usarse.
Potenciadores ? ? Cada da que se utilice.
CONTROL DE CALIDAD INTERVALO Pruebas con controles positivos. ? ? Cada da que se utilice. Revisar el sobrenadante. ? ? Cuando se abre un frasco de lote distinto. Pruebas con controles p ositivos y ? ? Cada da que se utilice. negativos. ? ? Cuando se abre un frasco de lote distinto. Pruebas con control negativo. ? ? Cada da que se utilice.
Enzimas
Suero de Coombs
Pruebas con anticuerpos que no reaccionan en pruebas salinas, pero dan resultados positivos con hemates tratados con enzimas. Controles Positivos y Negativos. Pruebas con hemates sensibilizados con pequeas cantidades de IgG o de componentes de complemento.
? ? Cada da que se utilice. ? ? Aglutinacin de 1 2+ ? ? Cuando se abre un frasco de lote distinto.
Debe registrarse la fecha en que se recibe el producto y cuando empieza a usarse. Debe aadirse hemates sensibilizados con IgG a las pruebas de antiglobulina negativas
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: ENZIMOINMUNOENSAYO PARA DETERMINACIN DE ANTICUERPOS Y/O ANTGENOS ELISA Fecha de Revisin Fecha de aplicacin 01/01/2004 Pgina 01 de 02
POE N Revisin N EGO5/POES1/01
OBJETIVO
ALCANCE MUESTRA MATERIALES
EQUIPOS
Mtodo inmunoenzimtico directo o indirecto tipo "sandwich" para: Deteccin cualitativa de anticuerpos especficos en suero o plasma. Deteccin cualitativa de antgenos circulantes en suero o plasma. Usado para determinar la presencia de los siguientes agentes infecciosos : Virus de Inmunodeficiencia Humana (Anti-HIV), tipo 1 y 2, subtipo 0. Virus Linfotrpico Humano tipos I y II (Anti-HTLV 1 - Anti HTLV 2) Virus de Hepatitis B (Anti- HBcore) Hepatitis B Antgeno de superficie(HBsAg) Virus de la Hepatitis C (Anti - HCV). Enfermedad de Chagas (Anti-Trypanosoma cruzi), Sfilis (Anti-Treponema pallidum) Centros de Hemoterapia. Suero o plasma. Kit de reactivos . Agua Destilada o Deionizada. Hipoclorito de sodio (lejia). Papel absorbente. Guantes desechables. Reloj alarma o cronmetro. Lminas autoadhesivas para cubrir las policubetas. Pipetas o micropipetas, automticas o semiautomaticas, fijas o graduables. Puntas o tips para pipetas de 5ul a 250 ul. Probetas graduadas. Contenedor para residuos contaminados. Crioviales y criobox o cajas con soporte para crioviales. Lavador de placas de ELISA (automtico, semiautomtico o manual). Incubador de placas de ELISA ( de 37C a 40C). Lector de placas de ELISA equipado con filtros 450nm, 490nm, 620nm. Impresora . PROCEDIMIENTO Establecer cuidadosamente el plan de distribucin e identificacin de las muestras Dejar que los reactivos y soportes de reaccin se atemperen 15C a 30 C por un tiempo mnimo de 30 minutos. Determinar el numero total de pocillos que se necesitan para el ensayo incluyendo los controles. Preparar la solucin de lavado, el conjugado de trabajo, y el substrato como lo describe el inserto. Dispensar diluyente de muestras y controles, reservar un pocillo para blanco si as lo requiere el procedimiento. Ver inserto del Kit . Agregar las muestras y controles de acuerdo a lo estipulado en el inserto y cubrir. Incubar a la temperatura y el tiempo estipulado en el protocolo de ensayo Lavar de 4 a 6 veces de acuerdo a lo estipulado en el protocolo de ensayo. Adicionar el conjugado de acuerdo al volumen estipulado y cubrir.
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: ENZIMOINMUNOENSAYO PARA DETERMINACIN DE ANTICUERPOS Y/O ANTGENOS ELISA Fecha de Revisin Fecha de aplicacin 01/01/2004 Pgina 02 de 02
POE N Revisin N EGO5/POES1/01 10 11 12 13 14 15 16 17 18
Incubar a la temperatura y el tiempo estipulado en el protocolo de ensayo. Lavar de 4 a 6 veces de acuerdo a lo estipulado en el protocolo de ensayo. Adicionar el substrato/cromgeno de acuerdo al volumen estipulado y cubrir. Incubar a la temperatura y el tiempo estipulado en cmara oscura. Adicionar reactivo de parada (stop) de la reaccin enzimtica Obtener lecturas impresas de densidad ptica (O.D.) utilizando el lector de ELISA Calcular el valor de corte o cut off. Interpretar los resultados de acuerdo a la validacin de la prueba realizada por el fabricante. Guardar la muestras Positivas y dbil positivo de HIV, HTLV, HCV, CHAGAS y HBsAg en crioviales para su posterior confirmacion de acuerdo a las polticas de la institucin.
INTERPRETACIN NO REACTIVO : muestras con una lectura menor a la del valor umbral (cuttoff). Indica que la muestra utilizada no contiene el antigeno y/o anticuerpo investigado hasta los lmites de sensibilidad de la prueba. Se consideran NEGATIVAS. REACTIVO : muestras con una densidad optica igual o mayor a la del valor umbral. Deben volver a ensayarse por duplicado antes de proceder a su interpretacion definitiva y se consideran POSITIVAS. ZONA GRIS: muestras con una lectura comprendida entre el 10% por encima o debajo del cut-off. Deben de volverse a ensayar por duplicado antes de interpretarlo como DEBIL POSITIVO. OBSERVACIONES En los mtodos competitivos inversos los resultados NO REACTIVOS son mayores al cut-off. Y las lecturas menores que cut-off son REACTIVO. NOTAS Si los resultados de los controles Positivo (+) y Negativo (-) no cumplen los criterios de validacin, se invalida toda la corrida y se realiza un nuevo ensayo. Klein HG, StandardS for blood banks and transfusion services, 17th ed. Bethesda MD; American Association of Blood Banks. REDACCIN LIC. TM Carmen Valqui Chamochumbi Lic. Martn Magallanes Sebastian APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
REFERENCIAS
Fecha 01/12/2003 01/12/2003
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POES2/01 OBJETIVO FUNDAMENTO Revisin N DETECCIN ANTICUERPOS DE TREPONEMA PALLIDUM METODO FLOCULACION Fecha de Revisin Fecha de Aplicacin Pgina 01 de 02 01/01/2004 Diagnstico presuntivo de sfilis. Las personas con sfilis no tratada desarrollan anti cardiolipinas. La prueba de Reagina Plasmtica Rpida (RPR) usa partculas de carbn recubiertas. con cardiolipina, que aglutina cuando se agrega suero con anticuerpos especficos. El antgeno contiene micropartculas de carbn que permite incrementar la diferencia. visual entre los resultados reactivos y no reactivos. Centros de Hemoterapia . Suero o plasma, si no se usa en el momento debe refrigerarse a 4C O congelar de -20 a - 70 C. Kit de deteccin de anticuerpos anti-treponema por floculacin Tips o puntas plsticas descartables adecuados para la pipeta. Palilos o baguetas plsticas descartables. Rotador de placas 100 rpm. Cronmetro Pipeta automtica calibrada 50 ul. PROCEDIMIENTO 1 2 3 4 5 6 7 Dispensar 50 ul de la muestra dentro del crculo de la tarjeta. Incluir paralelamente un control negativo y uno positivo en los crculos respectivos Distribuir la muestra en toda el rea del crculo de la tarjeta con ayuda de la bagueta. Mezclar por inversin el reactivo de RPR. Dejar caer una gota del reactivo en forma perpendicular. Rotar las tarjetas a 100 rpm por 8 min en el rotador mecnico. Leer inmediatamente los resultados macroscpicamente con buena luz. INTERPRETACIN Muestra REACTIVA: Si forma grandes flculos en el centro o periferie. Muestra DBIL REACTIVA si forma pequeos flculos en el centro o periferie . Muestra NO REACTIVA: Si es homognea y no se visualizan flculos. REFERENCIAS Manual of Tests for Syphilis, Public Health Service Publication # 411, 1990. REDACCIN LIC. TM Carmen Valqui Chamochumbi Lic. Martn Magallanes Sebastian rea Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco Fecha 01/12/2003 01/12/2003
ALCANCE MUESTRA MATERIALES
EQUIPOS
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POES3/01 OBJETIVO FUNDAMENTO TPHA - Sifilis Fecha de Revisin Fecha de aplicacin 01/01/2004
Revisin N
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ALCANCE MUESTRA
MATERIALES
EQUIPOS
Es un test de hemaglutinacion pasiva para la deteccin de antisueros especificos anti- Treponema pallidum en suero o plasma humano. Los hematies de pollo estabilizados se sensibilizan con un extracto antignico de Treponema pallidum (cepa Nichols). Estos hematies aglutinarn con los anticuerpos especficos presentes en el suero o plasma de pacientes afectos de sfilis. Los anticuerpos del grupo Treponema no especficos de la sifilis se absorven con un extracto de Treponema Reiter incluido en la solucion diluyente. Centros de Hemoterapia Suero: Usar suero fresco. Los sueros pueden ser conservados durante 5 das entre 2 y 8 C. Si es por un perodo ms largo los sueron deben ser congelados a (-20 C). Plasma: Aunque el suero es la muestra de eleccin para todos los tests de sfilis, pueden utilizarse muestras de plasma EDTA , para screening en bancos de sangre. Otros anticoagulantes deben ser comprobados antes de utilizarse. Es conveniente realizar el test antes de transcurridas 48 horas de la extraccin. Reactivo antgeno : Suspensin de hemates de pollo sensibilizados. Listo para su uso Reactivo control: Suspensin de hemates de pollo no sensibilizados. Listo para su uso Solucin diluyente: Tampon fosfato salino que contiene componenetes solubles de T. Reiter y agentes estabilizadores. Control positivo: Suero de conejo inmune. Prediludo a 1:20, Ver el ttulo exacto en la etiqueta del vial. Se acepta una variacin de ttulo de */- un dilucin doble. Control negativo: Suero de conejo no inmune, Prediludo a 1:20 Visor de iluminacin indirecta (aglutinoscopio) Placas de microtitulacin con fondo en U (redondo) Pipetas automticas PROCEDIMIENTO Dejar que los reactivos alcancen la temperatura ambiente Distribuir 25 ul de la muestra en el pocillo 1, 100 ul en el pocillo 2 y 25 ul en cada uno de los pocillo 3 y 4 Aadir 25 ul de la muestra en el pocillo 1. Mezclar el contenido del pocillo 1 y transferir 25 ul al pocillo2. Mezclar y transferir 25 ul del pocillo 2 al pocillo3, mezclar y desechar 25 ul del pocillo3. Transferir otros 25 ul del pocillo 2 al pocillo 4, mezclar y desechar 25 ul del pocillo 4. Aadir 75 ul de reactivo control al pocillo 3 y 75 ul de reactivo antgeno al pocillo 4. Mezclar el contenido de los pocillos dando ligero golpes en los lados de la placa o utilizar un agitador de placas durante al menos 30 segundos. 49
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POES3/01 TPHA - Sfilis Fecha de Revisin Fecha de aplicacin 01/01/2004
Revisin N
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Cubrir la placa e incubar durante 45 - 60 minutos a temperatura ambiente. Evitar cualquier movimiento de la placa y mantener lejos de cualquier fuente de calor. Leer los resultados: 4+ Tapiz homogneo de clulas aglutinadas que cubre el fondo del pocillo, a veces con bordes irregulares. 3+ Tapiz homogneo de clulas aglutinadas que cubre parcialmente el fondo del pocillo. 2+ Tapiz homogneo de clulas aglutinadas rodeado por un anillo de hemates. 1+ Tapiz homogno de celulas aglutinadas rodeado por un patente anillo de hemates. 1/2 + Botn de hemates con una pequea abertura central. Botn de hemates con una muy pequea abertura central o botn totalmente compacto. Positivo : desde 4+ a 1+ Dudoso : + Negativo : INTERPRETACIN
La reaccin es considerada REACTIVA cuando forma una malla o red (aglutinacin) La reaccin es considerada NO REACTIVA, cuando los hemates se depositan en el fondo de la placa formando un botn. REFERENCIAS Specificity, Sensitivity and Reproducibility between FTA test and the Microhemagglutination assay for Treponema pallidum antibodies. Journal Clinical Microbiology. 1981. Larsen S.A., Hambie E.A., Pettit D.E., Perryman M.W. and Kraus S.J. REDACCIN LIC. TM Carmen Valqui Chamochumbi Lic. Martn Magallanes Sebastian APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
Fecha 01/12/2003 01/12/2003
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POES4/01 OBJETIVO HEMAGLUTINACION INDIRECTA CHAGAS - HAI Revisin N Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 1 de 2 01/01/2004
Inmunoserologa. Deteccin de anticuerpos totales contra antgenos de Trypanosoma cruzi (Enfermedad de Chagas) por Hemaglutinacin indirecta. FUNDAMENTO El reactivo consiste en una suspensin de glbulos rojos sensibilizados con antgenos citoplasmticos de Tripanosoma cruzi. Estos hemates reaccionan con los Anticuerpos especficos presentes en el suero del paciente, formando una malla homognea en la policubeta (muestra reactiva) o un botn ntido, en el fondo de la policubeta, lo que indica ausencia de Anticuerpos especficos (muestra no reactiva.) ALCANCE Centros de Hemoterapia MUESTRA Suero MATERIALES Reactivos de Hemaglutinacin indirecta. Placas de microtitulacin con fondo en "U". Tips para pipetas automticas. Lmina adhesiva transparente. EQUIPOS Visor de iluminacin indirecta (aglutinoscopio) Pipetas automticas. PROCEDIMIENTO Dejar que los reactivos alcancen la temperatura ambiente. Resuspender el reactivo antgeno y el reactivo control realizando movimientos giratorios suaves por lo menos 2 minutos. Distribuir 25 ul buffer diluyente en el pocillo 1, 25 ul en el pocillo 2 y 25 ul en los pocillos 3, 4 y 5. Aadir 25 ul de la muestra en el pocillo 1. Mezclar el contenido del pocillo 1y transferir 25 ul al pocillo 2. Mezclar y transferir 25 ul del pocillo 2 al pocillo 3. Del pocillo 3 transferir 25 ul al pocillo 4 y del pocillo 4 tranferir 25 ul al pocillo 5 Mezclar y desechar 25 ul del pocillo 5. Obteniendo diluciones sucesivas 1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32. Aadir 75 ul de reactivo control al pocillo 1 Aadir 75 ul de reactivo antgeno a los pocillos 2 al 5. Mezclar el contenido de los pocillos dando ligero golpes en los lados de la policubeta o utilizar un agitador de placas durante 30 segundos. Cubrir la placa con una lmina adhesiva. Dejar la policubeta en reposo a T ambiente por 1 hora al resguardo de vibraciones. Efectuar la lectura.
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INTERPRETACIN NO REACTIVO: formacin de un botn ntido en el fondo de los pocillos 2 al 5. REACTIVO: formacin de una malla homognea que cubre el fondo que puede ser de 1+ a 4+ hasta el pocillo 5. Slo se consideran POSITIVAS las muestras que reaccionan hasta 1/32. Las muestras que reaccionan slo hasta 1/4, 1/8 o 1/16 se consideran NEGATIVAS El pocillo 1 es para detectar anticuerpos Heterfilos, si es Positivo invalida la positividad de la muestra y tiene que ser analizada por otra metodologa.
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POES4/01 HEMAGLUTINACIN INDIRECTA CHAGAS - HAI Revisin N Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 1 de 2 01/01/2004
OBSERVACIONES Para cada test se necesitan 5 pocillos, 1 de los cuales se utilizarn para el control de anticuerpos heterfilos. REFERENCIAS Estudio de la Confiabilidad de las tcnicas para inmunodiagnostico de la enfermedad de Chagas. ABA - Crdova 1985 Fontenta S., Morettii E., Gonzales G. REDACCIN LIC. TM Carmen Valqui Chamochumbi Lic. Martn Magallanes Sebastian APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
Fecha 01/12/2003 01/12/2003
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N Revisin N EG05/POES5/01 OBJETIVO ALCANCE MUESTRA MATERIALES EQUIPOS PRUEBAS RPIDAS - TESTPACK Fecha de Revisin Fecha de aplicacin 01/01/2004
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Ensayo inmunocromatogrfico para la deteccin cualitativa de antigeno y/o anticuerpos de HIV 1-2, HBsAg. Bancos de Sangre Suero, plasma o sangre obtenido con EDTA. Tarjetas de ensayo o tiras inmunocromatograficas que trae el Kit. Frasco de tampon de arrastre que trae el Kit. Pipeta de precision para 50 ul. Tips o puntas descartables para la pipeta. PROCEDIMIENTO Retire adecuadamente la envoltura de proteccin de las tarjetas. Ver inserto. Rotule adecuadamente cada tarjeta de ensayo. Incluya 1 CN y 1 CP. Para muestras de suero o plasma: a. Aada 50ul de muestra (con una pipeta de precisin) en la superficie absorvente (sealada con una flecha). b. Espere entre un mnimo de 15 min. Y mximo de 60 min. Para leer el resultado. Para muestras de sangre (venipuntura): a. Aada 50ul de muestra (con una pipeta de precisin) en la superficie absorvente (sealada con una flecha). b. Espere un min. Y aada una gota de tampn de arrastre en la superficie absorvente c. Espere entre un mnimo de 15 min. y un mximo de 60 min. Leer el resultado. Ver Anexos.
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INTERPRETACION REACTIVO: Tanto en la ventana de control como en la ventana de resultados del paciente aparece 1 barra roja. Cualquier tipo de tonalidad roja que pueda aparecer en la ventana de resultados del paciente implica que el resultado es reactivo ( 2 barras). NO REACTIVO: En la ventana de control aparece 1 barra roja y en la ventana de resultados del paciente no aparece ninguna barra roja. ( 1 barra). INVALIDO: No aparece ninguna barra en la ventana de control del ensayo. ( 0 barra) El ensayo se debe de repetir. REDACCIN LIC. TM Carmen Valqui Chamochumbi Lic. Martn Magallanes Sebastian APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N Revisin N EG05/POES6/01 PROPSITO PRUEBAS CON METODOLOGA LTEX. Fecha de Revisin Fecha de Aplicacin Pgina 01 de 01 01/01/2004
ALCANCE MUESTRA MATERIALES Y EQUIPOS
EQUIPOS
Suspensin de partculas de Ltex sensibilizadas con antgenos o anticuerpos para la deteccin de Anti-Tripanozoma cruzi o Antgeno de superficie Hepatitis B, basado en una reaccin de aglutinacin. Bancos de Sangre Suero Goteros descartables o micropipetas de 50 ul. Palillos o baguetas descartables. Placas de vidrio fondo negro incudas en el kit. Reactivo Antgeno Ltex 1% includo en el Kit. Solucin de fluorescena de contraste includo en el Kit. Control Positivo y Control Negativo includo en el Kit. Rotador automtico Cronmetro o reloj. Lmpara o fuente de luz. PROCEDIMIENTO Llevar los reactivos a temperatura ambiente. Disear el protocolo de trabajo y rotular las lminas de vidrio. Dispensar una gota (50ul) de muestras y controles en los crculos correspondientes. Aadir una gota (25ul) de reactivo contraste. Rotar la lmina manualmente para que se mezclen. Agitar el reactivo ltex, sin formar espuma, por 30 segundos antes de usar. Dispensar una gota (25ul) del reactivo ltex a cada muestra y controles. Mezclar con el palillo o bagueta por 5 seg. Hasta obtener una suspensin uniforme. Colocar las placa en el rotador por 5 minutos. Leer los resultados macroscopicamentebajo una fuente de luz. INTERPRETACIN NO REACTIVO: Suspensin que se mantiene homognea. REACTIVO: Aglutinacin visible, dbil o intensa comparada con el control negativo. REFERENCIAS Singer J.M. y Plotz C.M The Latex Fixation Test Journal Clinical Pathology 1956 APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POEC1/01 OBJETIVO ALCANCE FUNDAMENTO MATERIALES Y EQUIPOS TCNICA DE PREPARACIN DE ZONA DE VENOPUNTURA Revisin N Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 01 de 01 01/01/2004 Asepsia de la zona de venopuntura Centros de Hemoterapia, Campaas de Donacin Los compuestos iodados son usados para desinfectar el sitio de puncin previo a la recoleccin de la sangre. Solucin antisptica acuosa al 0.7% del compuesto iodado Solucin de yodo povidona al 10% Gasa estril Ligadura para torniquete PROCEDIMIENTO Aplicar un torniquete en el brazo Identificar la zona de puncin Liberar el torniquete Limpiar con la solucin acuosa de yodo al 0.7% el rea tomando hasta 4cm alrededor de la misma durante por lo menos 30 seg. Retirar el exceso de espuma Aplicar la solucin de yodo al 10% y limpiar con movimientos concentricos hacia afuera por 30 seg. Cubrir el rea con gasa estril No tocar nuevamente el rea despues de terminado el procedimiento Encaso de hipersensibilidad al yodo se puede usar clorhexidina REFERENCIAS Manual del AABB. 13ava Edicin REDACCIN Lic. TM. Pilar Yovera Ancajima Lic. TM. Yohana Trinidad APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
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rea Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe de Banco de Sangre
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REVISIONES Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe de Banco de Sangre
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: TECNICA DE FLEBOTOMA POE N Revisin N Fecha de Revisin Fecha de aplicacin EG05/POEC2/01 01/01/2004 OBJETIVO ALCANCE MUESTRA MATERIALES Y EQUIPOS
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Extraer un volumen de sangre en condiciones de asepsia, que garantice componentes adecuados y no represente peligro para la salud del donante. Centros de Hemoterapia, Campaas de Donacin. Sangre venosa. Camillas o sillones reclinables . Tubos de vidrio para muestras para estudios inmunoserolgicos e inmunohematolgicos. Clips y selladores manuales. Tijeras. Pinzas hemostticas. Bolsas colectoras . Sistema de contrapeso para controlar el volumen de sangre extrada. PROCEDIMIENTO Ubicar al donante en posicin semisentada o en decbito dorsal. Codificar la bolsa principal, bolsas satlite y tubos para muestras. Ubicar la bolsa por debajo del nivel del brazo del donante. Hacer un nudo flojo en la tubuladura en caso de no usar clips y selladores manuales. Colocar la pinza hemosttica en la tubuladura antes de destapar la aguja para prevenir el ingreso de aire. Elegir una vena de fcil acceso y visible. Realizar la asepsia de piel segn POE: EG05/POEC1/01. Punzar la piel con la aguja en ngulo de 45, luego disminmuir 10 de inclinacin y atravezar la vena. Liberar la pinza de la tubuladura. Fijar la aguja y la parte inicial de la tubuladura . Mantener al donante abriendo y cerrando la mano lentamente. Observar al donante durante todo el proceso. Mezclar la sangre y anticoagulante suavemente cada minuto durante el proceso. Puede ser a mano o con mezclador mecnico contnuo. Controlar el volumen extrado, programando un volumen total no menor de 400cc ni mayor de 500 cc. Idealmente no extraer ms del 10% del volumen sanguneo total y en ningn caso mas del 13 %. El proceso de extraccin de sangre no ser mayor de 12 minutos. Mezclar por inversin la sangre de la tubuladura con el anticoagulante. Llenar nuevamente la tubuladura Sellar la tubuladura y dejar algunos segmentos adicionales para las pruebas de compatibilidad. Remitir la unidad a la sala de separacin de componentes sanguneos. Remitir las muestras al laboratorio de compatibilidad para el estudio de grupos sanguneos y otras pruebas que sean necesarias. Al concluir la extraccin, el donante reposar durante 20 minutos.
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N Revisin N EG05/POEC2/01 TECNICA DE FLEBOTOMIA Fecha de Revisin Fecha de aplicacin 01/01/2004
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REFERENCIAS 1. Red Interamericana de Programas de Sangre de Cruz Roja. Documento marco. Santillana S.A. Costa Rica. 1998. 2. Sally V.Rudmann. Textbook of blood banking and transfusion medicine. Saunders Company.USA.1995. 3. Quinley,Eva. Inmunohematology. Perinciples and practice. USA.1999. 4. Asociacin Argentina de Hemoterapia e Inmunologa. Manual Tcnico. Bs As 1997. 5. OPS. Estandares de trabajo para Bancos de Sangre.Serie 7.1999. REDACCIN Lic. TM. Pilar Yovera Ancajima Lic. TM. Yohana Trinidad APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POEC3/01 OBJETIVO Revisin N PREPARACIN DE COMPONENTES SANGUNEOS PAQUETE GLOBULAR Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 01 De 01 01/01/2004
Optimizar el uso de la sangre en beneficio de un mayor nmero de personas Asegurar la sobrevida con un mayor tiempo y un adecuado funcionamiento de los glbulos rojos. Centros de Hemoterapia Sangre entera extrada en bolsas mltiples o en sistema automatizado. Bolsas de extraccin Centrifuga refrigerada Balanza de platillos Extractor de plasma Pinzas ,tijeras Sellador elctrico de grapas o mecnico PROCEDIMIENTO Centrifugar la sangre usando centrifugacin pesada a 4 C. Ver anexo EG05/ANX01/01 Si el plasma se usara para preprar plaquetas, proceder segn POE N: EG05/POEC5/01 Colocar la bolsa de sangre centrifugada en el extractor de plasma o en el equipo de separacin automatizado. Liberar suavemente el mecanismo de presin del extractor. Cerrar con una pinza hemosttica la tubuladura que comunica ambas bolsas. Romper el sellado de la bolsa primaria, retirar la pinza y dejar fluir el plasma en la bolsa satlite (remover 225 a 250 ml de plasma), quedando un paquete de clulas con un hematocrito del 70% al 80%. Pinzar nuevamente el tubo de comunicacin, sellar en dos sitios mediante grapas de metal o con el sellador elctrico y separar las bolsas. Identificar la unidad de paquete globular y la del plasma con el sistema de codificacin establecido. Conservar el paquete globular entre 2 a 8C. De no contar con grapas, sellar aplicando nudos ajustados Manual del AABB. 13ava Edicin REDACCIN Lic. TM. Pilar Yovera Ancajima Lic. TM. Yohana Trinidad APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POEC4/01 OBJETIVO ALCANCE MUESTRA MATERIALES Y EQUIPOS Revisin N PREPARACIN DE COMPONENTES SANGUNEOS PLASMA FRESCO CONGELADO Fecha de Revisin Fecha de Aplicacin Pgina 01 De 01 01/01/2004
Obtener un producto que conserve la actividad de los factores lbiles de la coagulacin. Centros de Hemoterapia . Sangre entera recin extraida en bolsas mltiples de circuito cerrado. Congeladora a -20*C Centrfuga refrigerada Balanza Separador de plasma Pinzas, tijeras y clips Sellador manual o elctrico PROCEDIMIENTO Centrifugar la sangre colectada entre 1 y 6 C Transferir a la bolsa satlite 250 ml de plasma. Sellar el tubo de transferencia en tres segmentos dejando un espacio antes de llegar a la base de la bolsa. Identificar la unidad del plasma indicando: volumen, grupo y factor RH Fecha de extraccin y fecha de expiracin y sello nacional de calidad. Cortar el tubo de transferencia entre dos fragmentos de la tubuladura sellada. Enrollar la tubuladura segmentada y fijarla a la unidad del plasma.Esta tubuladura puede ser til para posteriores controles que se deseen practicar. Congelar inmediatamente a -20C asegurndose que la congelacin se produzca dentro de las seis horas de extrada la sangre. Mantenido a la temperatura indicada puede ser almacenado por 1 ao REFERENCIAS Manual del AABB. 13ava Edicin REDACCION Lic. TM. Pilar Yovera Ancajima Lic. TM. Yohana Trinidad APROBACION Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
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Area Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe de Banco de Sangre
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DIRECCION GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TITULO: POE N EG05/POEC5/01 OBJETIVO ALCANCE MUESTRA MATERIALES Y EQUIPOS Revision N PREPARACION DE COMPONENTES SANGUINEOS CONCENTRADO PLAQUETARIO Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 01 De 02 01/01/2004
Optimizar el uso de la sangre y.mantener un depsito suficiente de plaquetas para cubrir demandas Mantener la actividad hemosttica evaluada al tiempo mximo de almacenamiento. Centros de Hemoterapia . Unidades de Sangre Completa recolectada en bolsas mltiples ( Dobles, triples, cudruples) . Centrfuga refrigerada. Balanza. Separador o Extractor de Plasma. Sistema automtico de separacin (Opcional). Pinzas hemostticas, tijeras. Sellador manual de grapas o elctrico. Rotador de plaquetas. PROCEDIMIENTO Centrifugar la sangre a centrifugacin liviana a 20 C. Ver Anexo: EG05/ANX01/01 Colocar la bolsa en el extractor de plasma y separar el plasma rico en plaquetas en la bolsa satlite sellar la tubuladura y almacenar los glbulos rojos. Centrifugar el plasma rico en plaquetas por centrifugacin pesada a 20 C Colocar la bolsa centrifugada en el extractor de plasma y transferir el plasma sobrenadante a la segunda bolsa satlite, deje un volumen no menor de 50 ml Identificar el producto con su respectivo cdigo, grupo sanguneo, fecha de preparacin y vencimiento y sello nacional de calidad. Dejar el concentrado de plaquetas sobre la mesa de trabajo (20a 24 C.) por una hora para que desagregue espontneamente, no agitarlas porque puede ocurrir agregacin irreversible Colocar la unidad de plaquetas obtenida en un agitador con rotacin suave y constante para as evitar su agregacin y el acortamiento de su viabilidad. Realizar la separacin dentro de las 8 hrs de la flebotoma. No refrigerar la sangre ni antes ni durante la separacin de las plaquetas. Congelar el plasma sobrenadante rpidamente a -18C o menos. REFERENCIAS Manual del AABB. 13ava Edicin. Sally V. Rudmannn. Textbook of blood banking and transfusion medicine. Saunders 1995. REDACCIN Lic. TM. Pilar Yovera Ancajima Lic. TM. Yohana Trinidad APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
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Fecha 01/12/2003 01/12/2003
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POEC6/01 OBJETIVO Revisin N PREPARACIN DE COMPONENTES SANGUINEOS CRIOPRECIPITADO Fecha de Revisin Fecha de Aplicacin Pgina 01 De 01 01/01/2004
Mantener un stock para el tratamiento de pacientes con deficiencia de factor VIII (Von Willebrand) y fibringeno. Contar con factores de coagulacin suficiente para tratamientos sin riesgos de sobrecarga de volumen. Centros de Hemoterapia. Sangre entera recin extrada en bolsas mltiples . Equipos de congelacin. Hielo seco bao de etanol al 95% con hielo seco triturado ( Si no hay congelador). Centrfuga refrigerada. Balanza. Separador de plasma. Pinzas, tijeras y clips. Sellador manual, de grapas o elctrico. PROCEDIMIENTO Colectar la sangre en un sistema de bolsas mltiples. Centrifugar la sangre a alta velocidad a temperatura de 1 a 6 C Transferir el plasma pasndolo a una de las bolsas satlites en volumen no menor a 200 ml, sellar el tubo, separar los glbulos rojos y refrigerarlos entre 2 y 8C Congelar el plasma rpidamente, el proceso de congelado completo no debe ser mayor a 6 horas. Puede utilizarse un congelador (-65C) o una mezcla de etanol y hielo seco. Descongelar lentamente el plasma fresco entre 2 y 8 C en un perodo de 12 horas. Centrifugar el plasma descongelado entre 2 y 8 a alta velocidad. Ver anexo EG05/ANX01/01. Colgar la bolsa de plasma invertida y pasar el sobrenadante rpidamente a otra bolsa satlite o usar el extractor de plasma, dejando 15 a 20 ml de sobrenadante para resuspender el crioprecipitado. Identificar y guardar el plasma residual a - 20C y el crioprecipitado a -30C o menos. Duracin 12 meses a partir de la fecha de preparacin del plasma fresco congelado. En lugares donde la temperatura ambiental sea menor de los 15C se sugiere que el descongelamiento del plasma fresco de 2 a 8C se realice utilizando un recipiente que contenga agua destilada en cantidad suficiente que cubra la base de las bolsas de crioprecipitado. Manual del AABB. 13ava Edicin. REDACCIN Lic. TM. Pilar Yovera Ancajima Lic. TM. Yohana Trinidad APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
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REFERENCIAS
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POEC7/01 OBJETIVO ALCANCE MUESTRA MATERIALES DOSAJE DE HEMOGLOBINA POR EL METODO DEL SULFATO DE COBRE Revisin N Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 01 De 01 01/01/2004 Determinar el nivel de hemoglobina en donantes de sangre. Centros de Hemoterapia, Bancos de Sangre y Campaas de Donacin. Sangre Completa . Capilares con anticoagulante. Algodn. Lancetas descartables. Sulfato de cobre (peso especfico = 1.053). Solucin desinfectante o alcohol al 70%. Recipiente transparente de boca ancha y tapa hermtica. PROCEDIMIENTO Distribuir el sulfato de cobre en cantidad suficiente (30 ml) en el recipiente transparente. Realizar la asepsia del sitio de la puncin del dedo del donante. Hacer la puncin utilizando las lancetas. Recoger la sangre en un tubo capilar con anticoagulante y evitar que entre aire al tubo. Descartar la primera gota. Dejar que una gota de sangre caiga suavemente del tubo a una altura de 1 cm de la superficie a la solucin de sulfato de cobre. Observar por 15 segundos.
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Si la gota se hunde Si la gota no se hunde
INTERPRETACIN Nivel de Hemoglobina aceptable para la donacin. Nivel de Hemoglobina no aceptable para la donacin. REFERENCIAS
Manual del AABB. 13ava Edicin REDACCIN Lic. TM. Pilar Yovera Ancajima Lic. TM. Yohana Trinidad APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POE/CC1/01 OBJETIVO ALCANCE PRUEBAS DE EVALUACIN EXTERNA DEL DESEMPEO (PROFICIENCIA) Revisin N Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 1de 1 01.01.04 Participacin de los Centros de Hemoterapia en el Programa de Evaluacin Externa del Desempeo (PEVED). Centros de Hemoterapia. PROCEDIMIENTO Las muestras de los estudios de proficiencia deben ser manejadas de la misma manera que las muestras de rutina. El responsable del Centro de Hemoterapia asignar las muestras de tal manera que sean procesadas rotativamente entre todos los tecnlogos de ser posible. Si la evaluacin para el tipo de sangre se realiza en microplaca, manejarla como una muestra de donante, con la posterior tipificacin por parte de otro tecnlogo en la etapa de rechequeo. Si la evaluacin para el tipo de sangre se realiza en tubo, manejarla como una muestra de paciente, con todas las muestras nuevas que tendrn el rechequeo posterior por parte de otro tecnlogo. Si las pruebas directa e inversa muestran discrepancias, seguir el procedimiento pertinente. Para las pruebas de ELISA, todas las muestras inicialmente reactivas debern ser repetidas en duplicado. A las pruebas de RPR reactivas se les practicar la prueba cuantitativa. Se consultar con el responsable del Centro de Hemoterapia como cuando se realizan las pruebas en las muestras de donantes o pacientes Se anotarn los resultados en los registros convencionales del servicio, y de all se transferirn a los formatos del programa de evaluacin externa del desempeo. REFERENCIAS Manual Tcnico de la AABB 12ava Edicin 1996 www.panel.com.br ELABORACIN Dra. Mariela Delgado Burga APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N EG05/POECC2/01 PROPSITO ALCANCE MUESTRA SUERO CONTROL INTERNO Fecha de Revisin Fecha de aplicacin 01/01/2004
Revisin N
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Evaluar la reproductibilidad de un resultado positivo dbil con un mismo reactivo y analizar las variaciones que se presentan entre los diferentes lotes. Centros de Hemoterapia . Sueros fuertemente reactivos para HIV, HTLV, HBsAg, HBcore, HCV, Chagas y Sifilis. Pool de sueros completamente negativos a estos agentes infecciosos, que no estn lipmicos y que hallan sido extraidos en vacutainer. Tips o puntas descartables para pipeta. Pipetas 200 - 1000 ul. Viales de vidrio con tapa o crioviales de 10 ml. Conservante Bronidox-L. Refrigerador. PROCEDIMIENTO Diluir las muestras de HIV, HCV, y Chagas 1:2 y 1:4 con el pool de sueros negativos. Diluir las muestras HTLV, SIFILIS, HBsAg+Hbcore, 1:5 y 1:10 con el pool de sueros negativos. Colocar en los viales con tapa debidamente rotulados incluyendo nmero o cdigo, marcador y dilucin. Adicionar un conservante para una concentracin final de 0.05% Realizar los ensayos de ELISA para todos los marcadores a todas las diluciones. Escoger las diluciones que representen dos veces o tres veces el cut-off. Agregar suero negativo o suero positivo a los marcadores que no consiguieron la concentracin adecuada y volver a probar. Guardar los viales en refrigeracion, 2C a 6C evitando el congelamiento y descongelamiento sucesivo. Alicuotar en crioviales de 1ml para usarlos diariamente en la rutina. Colocar el control interno en todos los ensayos luego de los controles del Kit.
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REPORTES Anotar diariamente el indice de cut-off del control interno y vaciar los resultados en el grfico de Levey Jennings Estudiar los datos obtenidos cada 20 o 30 determinaciones y calcular la media y la desviacin estndar del indice de cut- off. REGISTROS Construir el grfico de Levey Jennings. El 90 % de los puntos debe de estar dentro de +/- 2 desviaciones estndar REDACCIN LIC. TM Carmen Valqui Chamochumbi Lic. Martn Magallanes Sebastian rea Coordinador Nacional Garanta de Calidad Director del Banco de Sangre APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco Fecha 01/12/2003 01/12/2003
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N Revisin N EG05/POECC3/01 PROPSITO CONTROL DE CALIDAD DEL CRIOPRECIPITADO Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 01 De 01 01/01/2004
ALCANCE MATERIALES
La unidad promedio de crioprecipitado debe contener 250 mg de fibringeno y un mnimo deI 80 UI de Factor VIII. En el Centro de Hemoterapia la comprobacin de la recuperacin del Factor VIII debe ser realizada en por lo menos 4 unidades de crioprecipitado al mes. Estos exmenes deben ser realizados en el laboratorio de coagulacin, mediante el mtodo establecido para las rutinas de evaluacin del concentrado del Factor VIII. Centros de Hemoterapia. Unidades de crioprecipitado. Insumos del Laboratorio de Coagulacin para determinacin de fibringeno y Factor VIII. PROCEDIMIENTO Seleccionar las unidades de crioprecipitado y retirarlas del congelador. Colocarlas en una bolsa plstica y llevarlas al Bao Mara por 10 - 15 minutos. Registrar los datos y numeracin de las unidades de crioprecipitado, incluyendo su peso, pruebas solicitadas al laboratorio de coagulacin y el nombre del solicitante. Preparar diluciones de cada unidad en el laboratorio de coagulacin, antes de realizar las pruebas y determinar la actividad del Factor VIII, convirtindolo luego a UI. Determinar tambien los niveles de fibringeno INTERPRETACIN Se debe obtener un mnimo de 80 UI de Factor VIII en cada unidad de crioprecipitado, en por lo menos el 75% de las unidades evaluadas. Los niveles de fibringeno deben ir de 100 - 350 mg por cada unidad de crioprecipitado. Esta evaluacin se recomienda cuando el crioprecipitado es usado para reemplazar deficiencias de fibringeno. Esta evaluacin sirve como un control de calidad de los mtodos de coleccin, procesamiento y almacenamiento del crioprecipitado. REDACCIN Lic. TM Pilar Yovera Ancajima APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N Revisin N EG05/POECC4/01 PROPSITO CONTROL DE CALIDAD DE UNIDADES TRANSPORTADAS Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 01 De 01 01/01/2004
ALCANCE MATERIALES
Contar con un mecanismo de monitorizar la temperatura durante el transporte de la sangre en distancias medias y largas, la misma que puede ser realizada al momento de la recepcin de los productos. Centros de Hemoterapia . Unidades de sangre total o paquetes globulares. Termmetros de mercurio o electrnicos. PROCEDIMIENTO Retirar de la caja transportadora 2 de las unidades de sangre. Colocar el extremo sensible de un termmetro de mercurio o electrnico entre las dos bolsas. Asegurar el "sandwich" con bandas elsticas. Leer la temperatura despus de 3 a 4 minutos. Registrar las lecturas.
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INTERPRETACIN Si la temperatura de la sangre o glbulos rojos excede los 10C, se deben colocar las unidades en cuarentena hasta su disposicin final. REDACCIN Lic. TM Yohanna Trinidad Salinas APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco
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DIRECCIN GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS Direccin Ejecutiva de Servicios de Salud Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre POE MAESTRO TTULO: POE N Revisin N EG06/POE/DR1/01 OBJETIVO PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTNDAR Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 1 de 2
ALCANCE
Proveer una forma estandarizada de desarrollar, revisar, autorizar, aprobar, implementar archivar todos los procedimientos usados en el Centro de Hemoterapia y/o Banco de Sangre. Debe ser un sistema que documente que todo el personal conoce todas las partes de los Procedimientos, relevantes en el mbito de sus actividades. Todos los procedimientos tcnicos, administrativos o de calidad, relacionados al Centro de Hemoterapia y/o Banco de Sangre. LINEAMIENTOS GENERALES Cada procedimiento debe ser escrito segn el formato que se describe y constar de las siguientes partes: Encabezado: Ttulo N de Procedimiento Operativo Estandar (POE) N de Revisin Fecha de Revisin Fecha de Aplicacin Cuerpo: Propsito u Objetivo Ambito Materiales/Equipos ( Si se requieren ) Procedimientos Records, formatos y reportes Adjuntos ( Si se requieren ) Referencias Aprobacin Pi de Pgina, Direccin Electrnica del Documento Secciones adicionales como: coleccin de la muestra, reactivos y equipos, control de calidad, Reportes e interpretacin de resultados, notas y autor o fuente, se usaran cuando sea necesario Fuente o Tipo de Letra: Universal. Estilo: Regular o Negrita. Tamao: 11 puntos ( Cuerpo ), 10 puntos ( Tablas ). Efectos: Usados cuando se necesite. Mrgenes: 1" alrededor de la pgina Encabezado: 1 Pi de Pagina: 0.5
FORMATO
FORMATO DE ESCRITURA
APROBACIN Cada procedimiento debe ser aprobado, firmado y fechado por el responsable del Centro de Hemoterapia y/o Banco de Sangre, el Responsable de Calidad y el Coordinador Nacional del PRONAHEBAS, antes de ser implementado en el servicio. La autorizacin tambin incluye la fecha de efectividad o inicio. REVISIONES Todos los Procedimientos Operativos Estandar (POE) debern ser revisados por lo menos una vez al ao. Durante el ao el responsable del Centro de Hemoterapia y/o Banco de Sangre, junto con todo el personal evaluarn la necesidad de procedimientos nuevos, adicionales o revisin de los existentes. PERSONAL Todo el personal deber leer todos los procedimientos nuevos o revisados que sean relevantes para el desarrollo de sus actividades. Esta revisin ser documentada firmando la hoja de recibo de informacin que asegura la lectura de los documentos.
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TTULO: POE N EG06/POE/DR1/01 Revisin N PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTNDAR Fecha de Revisin Fecha de aplicacin Pgina 2 de 2 01.01.04
ORIGINALES
LINEAMIENTOS GENERALES Los originales impresos y firmados de cada procedimiento operativo estndar, son considerados documentos legales, y debern ser guardados en las oficinas administrativas. Copias controladas de los procedimientos operativos estndar se encontrarn disponibles en las reas de trabajo.
DEFINICIONES Debe ser breve, omitiendo el uso de la palabra "procedimiento". Empezar el ttulo con las palabras claves que se usaran para encontrar el procedimiento. Nmero de POE Nmero de identificacin del procedimiento especfico. Nmero de Nmero de la versin del procedimiento. Este nmero cambia cada vez que el procedimiento Revisin es actualizado o modificado. Fecha aplicacin Fecha en la que el procedimiento es implementado con el suficiente personal entrenado. Propsito Razn por la cual se desarroll el procedimiento. mbito reas a las que el procedimiento involucra. Materiales Listado de cualquier material, reactivos, y/o equipos requeridos para llevar a cabo el procedimiento. Procedimiento Instrucciones de trabajo requeridas para completar las tareas listadas en el formato, que incluyen el "Paso" y la "Accin" a ser tomada. Deber ser breve pero incluir los detalles suficientes para la realizacin correcta del procedimiento. Utilizar "verbos de accin", tales como tipear, diluir, colocar, presionar, contar, etc. , al empezar cada instruccin o paso. Registros, For Formatos, hojas de trabajo y cualquier registro relacionado al POE. Cualquier documento matos y Reportes relacionado al procedimiento podr ser escaneado dentro del documento. Adjunto Flujogramas, diagramas, grficos y otras ilustraciones que puedan ser usadas como ayuda en el desarrollo del procedimiento. Referencias Documentacin relevante o de soporte que establece la necesidad o validez del procedimiento. Las referencias deben indicar la edicin actual y el ao de publicacin del documento. Aprobaciones La autorizacin oficial que documente la revisin del procedimiento. Las firmas validan el uso del POE nuevo o revisado. REGISTROS O FORMATOS Formato del Procedimiento Operativo Estandar ( POE ). REFERENCIAS Clinical Laboratory Technical Procedure. Documento NCCLS GP2-A4, 4ta Edicin, 2002. Standarts for Blood Banks and Transfusion Services. American Association of Blood Banks. 21st Edition, 2001. College of American Pathologists. Acreditation Inspection Checklist, 2001. rea Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre APROBACIN Firma Dra. Mariela Delgado Burga Dra. Cecilia Bedoya Velasco Fecha 01/12/2003 01/12/2003
TRMINOS Ttulo
80
ANEXO N ANX1/01
REVISIN N
Fecha de Revisin
Fecha de Aplicacin 01/01/2004
PAGINA 01 DE 01
ANEXO N 01 CENTRIFUGACIN PARA PREPARACIN DE COMPONENTES
Centrifugacin a Alta Velocidad PRODUCTOS Glbulos Rojos Concentrado Plaquetario Plasma Crioprecipitado VELOCIDAD 5000 g 5000 g TIEMPO 5 minutos 7 minutos
Centrifugacin a Baja Velocidad Plasma rico en Plaquetas
2000 g
3 minutos
81
ANEXO N ANX2/01
REVISIN N
Fecha de Revisin
Fecha de Aplicacin 01/01/2004
PAGINA 01 DE 01
ANEXO N 02 CALIBRACION DE MICROPIPETAS Modelo de Pipeta Rango De 2 a 20 ul De 5 a 50 ul De 10 a 100 ul De 20 a 200 ul De 100 a 1000 ul De 200 a 1000 ul De 1 a 5 ml De 2 a 10 ml Volumen a medir 4 ul 10 ul 20 ul 40 ul 200 ul 300 ul 2 ml 3.5 ml Valores Permitidos en ul 3.9 - 4.1 9.8 - 10.1 19.7 - 20.3 39.6 - 40.4 198.7-201.3 298.0 - 302.0 1990 - 2010 3485 - 3515
83
TTULO: ANEXO No. ANX3/01 Revisin N
ANEXOS MEDIOS DE REACCION O ADITIVOS Fecha de Revisin Fecha de aplicacin 01/01/2004 Pgina 01 De 01
ANEXO No. 03 ADITIVO Albmina PRINCIPIO Disminucin del potencial Zeta SUERO 23g INCUBACION 15 60 min.
LISS
Incremento en la captacin de anticuerpos
2g
10 30 min.
LISS/PEG
Incremento en la captacin de anticuerpos Incremento en la concentracin Ag-Ac
2g
10 30 min.
85
RBOL DE DECISIONES PARA LAS PRUEBAS DE TAMIZAJE DE DONANTES DE SANGRE
SUERO A EVALUAR
TAMIZAJE SEROLGICO HIV 1-2, HbsAg, HBc, HVC, CHAGAS, SIFILIS, HTLV 1-2
NO
REACTIVO
AUTORIZA USO
SI 2. ELISA POR DUPLICADO
NO
REACTIVO
AUTORIZA USO
SI: Realizar Uno o ambos ? DESCARTAR UNIDAD
87
MODELO DE POE
Nombre de la Institucin
No. de Procedimiento
TTULO DEL PROCEDIMIENTO

Departamento Pgina X de Y
1. OBJETIVOS 2. ALCANCE 3. RESPONSABILIDAD 4. DEFINICIONES 5. PROCEDIMIENTOS
Acciones a ejecutar. Qu y a quines afecta. Personales con capacidad, informacin y recursos para supervisar la ejecucin del procedimiento. Definicin de elementos del proceso. FUNDAMENTO MUESTRAS REQUERIDAS: Cantidad. Recoleccin. Conservacin. REACTIVOS: Enumeracin. Preparacin. Estndares. EQUIPOS UTILIZADOS: Calibraciones. INSTRUCCIONES DETALLADAS para realizar el procedimiento: - Indicar acciones en forma secuencial. - Utilizar verbos en imperativo. - Personal involucrado. - Controles en puntos crticos. - Clculos. - Interpretacin de resultados. - Limitaciones para el procedimiento: interferencias, precauciones. - Confirmacin de resultados.
6. FORMULARIOS Y REGISTROS 7. REFERENCIAS 8. ANEXO 9. LISTA DE DISTRIBUCION
Formularios para documentar la produccin y los resultados. Normas de referencia. Diagramas de flujo. Formularios. Copias a departamentos involucrados.
REDACTADO POR FECHA DE REDACCION VERSION ORIGINAL
REVISADO POR FECHA DE REVISION REVISION No.
APROBADO POR FECHA APROBACION REVISION DE VIGENCIA
FECHA VIGENCIA
89
REDACCIN DE PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS STANDAR - POE -
Si
Es un nuevo procedimiento?
No
Existen documentacin disponible: dibujos, diseos, folletos
Es un POE existente?
Si
Adaptar a las necesidades, requerimientos y medio ambiente del banco Etapas del procedimiento y tareas/ actividades Documento escrito Determinar el formato Esquemas/ dibujos Desarrollar el POE Seleccionar redactores
Si
Revisar y actualizar de acuerdo con requerimientos y necesidades
Entrenar redactores
Identificar variables y conciliar requerimientos
Aprobar POE
Verificar pasos del POE
Revisar anteproyecto con personal calificado y supervisores
Distribuir copias controladas de POE Identificar documento
Entrenar personal sobre el POE
Evaluar entrenamiento
Archivar copia original del POE
Implementar POE
91
CARTULA DE POE
Nombre de la Institucin No. de procedimiento
TTULO DEL PROCEDIMIENTO

Departamento
Pgina X de Y Fecha
Departamento No.
DISTRIBUCIN Nombre departamento
Copia No.
Redactado por: Aprobado por:
REVISIN HISTRICA Fecha revisin Descripcin Razn Aprobado por: Fecha
93
INDICE MAESTRO
NMERO POE Y VERSION DE POE
TTULO POE
UBICACIN
FECHA VIGENCIA
95
REFERENCIAS
PROTOCOLOS DE ENSAYOS
PRUEBA Tipo de ELISA Diluyente de muestra (ul) Muestras (ul) Controles Volumen (ul) Cubrir e Incubar a 37o CTpo min Lavados 0.370 ml x 30seg Conjugando (ul) Cubrir e Incubar a 37o C Tpo min Lavados 0.370ml x30 seg. Sustrato (ul) Cubrir e Incubar a To ambiente Tpo min Solucion STOP (ul) Leer a 450 nm/ 450nm con 630 655nm referencia CUT OFF
H I V 1-2 Sandwich Ag-Ac 4ta. Generacin Conjugado A 25 75 1N3CO 1P 75 60 3 CICLOS Conjugando B 100 To ambiente 30 5 CICLOS 80 30
HTLV I-II
H Bs Ag Sandwich de un paso. 100 3N 2P 100 50
HB CORE Sandwich Indirecto 200 20 2N 3P 20 30 4CICLOS 200 60 4 CICLOS 100 30
Sandwich Indirecto 80 20 1N3CO 1P 20 40oC 30
5CICLOS 100 40oC 30
60 5 CICLOS 100 30
5 CICLOS 100 30
100
50
100
100
si
si
si
si
CO X 0.200
CO X 0.200
CN + 0.040
CP X 0.200
99

Formatos y Registros Pronahebas

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NORMA TCNICA N 016 - MINSA / DGSP - V.01

LIMA PER 2004

Sistema de Gestin de la Calidad del PRONAHEBAS Formatos y Registros

rea Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre

Fecha 01/12/2003 01/12/2003

REVISIONES Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre

rea Coordinador Nacional Garanta de Calidad Director del Banco de Sangre

Fecha 01/12/2003 01/12/2003

REVISIONES Coordinador Nacional Garanta de Calidad Director del Banco de Sangre

rea Coordinador Nacional Garanta de Calidad Director del Banco de Sangre

Fecha 01/12/2003 01/12/2003

REVISIONES Coordinador Nacional Garanta de Calidad Director del Banco de Sangre

POE N Revisin N Fecha de Revisin EG05/POE/H1/01

OBJETIVO ALCANCE MUESTRA MATERIALES Y EQUIPOS

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Fecha 01/12/2003 01/12/2003

REVISIONES Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre

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Fecha 01/12/2003 01/12/2003

REVISIONES Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre

Lectura Inmediata Lectura Incubacion Lectura Suero de Coombs Control de Coombs

Lectura Inmediata Lectura Incubacion Lectura Suero de Coombs Control de Coombs

TABLA RH NO DETERMINADO D Ctl RH Interpretacin 0 0 Negativo? 0 0 Negativo? 1+ 1+ INVALIDO (+)

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Fecha 01/12/2003 01/12/2003

REVISIONES Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre

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Fecha 01/12/2003 01/12/2003

REVISIONES Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre

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Fecha 01/12/2003 01/12/2003

REVISIONES Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre

rea Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre

Fecha 01/12/2003 01/12/2003

REVISIONES Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre

rea Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre

Fecha 01/12/2003 01/12/2003

REVISIONES Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre

rea Coordinador Nacional Garantia de Calidad Jefe del Banco de Sangre

Fecha 01/12/2003 01/12/2003

REDACCIN LIC. TM Alejandro Bustamante Del Rio

rea Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre

Fecha 01/12/2003 01/12/2003

REVISIONES Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre

rea Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre

Fecha 01/12/2003 01/12/2003

REVISIONES Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre

rea Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre

Fecha 01/12/2003 01/12/2003

REVISIONES Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre

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Fecha 01/12/2003 01/12/2003

REVISIONES Coordinador Nacional Garanta de Calidad Jefe del Banco de Sangre

ANX4/01 ANEXO No. 04

REACTIVOS Reactivos Eritrocitarios

Potenciadores ? ? Cada da que se utilice.

? ? Cada da que se utilice. ? ? Aglutinacin de 1 2+ ? ? Cuando se abre un frasco de lote distinto.

POE N Revisin N EGO5/POES1/01

ALCANCE MUESTRA MATERIALES

POE N Revisin N EGO5/POES1/01 10 11 12 13 14 15 16 17 18

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Fecha 01/12/2003 01/12/2003