Phylum Firmicutes

oClase Clostridia oClase Mollicutes oClase Bacilli

Phylum Firmicutes,Clase Clostridia

I. II. Caractersticas generales Clasificacin C. tetani C. botulinum C. perfringens C. difficile

Clase Clostridia
I.Caractersticas generales
Morfologa y estructura general
Bacilos gram positivos,que pueden presentarse como negativos tras la formaion de esporas Bajo contenido en G+C Pueden aparecer sueltos, en parejas o en cadenas Flagelos peritricos y algunas son inmviles Forman endosporas ovaladas y esfricas(resistencia) Productoras de toxinas(diseminacin del agente patgeno en el husped) -lecticinasa o fosfolipasa:destruye la fosfatidilcolina, componente de las membranas plasmticas -desoxirribonucleasa -hemolisinas

Aisladas, en parejas o en cadena

Metabolismo y crecimiento
Anaerobios estrictos Quimiorganotrofos Fermentacin: algunas especies son sacarolticas (fermentacin de la glucosa), otras proteolticas (hidrlisis de la gelatina) y otras pueden tener ambas caractersticas
Algunas especies producen lecitinasa o lipasa Catalasa negativas Reductoras de sulfitos a sulfuros

Endosporas

Pleomorfismo Flexibilidad

Hbitats y medios de cultivo

Flora gastrointestinal del hombre y de animales Suelo

Agar sangre Medio con yema de huevo para investigar la produccin de lecitinasa Medio lquido de enriquecimiento, como el tioglicolato Incubacin se har a 35-37C La lecitinasa (fosolipasa C) produce un halo opaco alrededor de la colonia por lisis de la lecitina y la lipasa transforma las grasas en glicerol y cidos grasos, dando una capa iridiscente que cubre la superficie de la colonia

Medios de cultivo

Clase Clostridia
II.Clasificacin
Clase Clostridia se encuentra incluida en el volumen 3 del Manual de Bergey Ms de 120 especies Dentro del Gnero Clostridium la especies estudiadas van a ser: -C.Botulinum -C.difficile -C.perfringens -C.tetani

Clase clostridia
Orden clostridiales
Familia clostridiaceae
Genero clostridium
C.botulinum C.difficile C.perfringens C.tetani

CLOSTRIDIUM TETANI

Introduccin histrica:
En 1884, la toxina del ttanos fue aislada por Arthur Nicolaire Antonio Carle y Giorgio Rattone demostraron la transmisin del ttano por primera vez En 1890 se desarroll el toxoide ttani, base de la vacuna actual En 1889, C. tetani fue aislada por primera vez En 1924 la vacuna toxoide fue desarrollada por P. Descombey, utilizada en la segunda guerra mundial.

Patogenia:
Bacilo gram-positivo no encapsulado de forma abastonada. Mvil y forma esporas que se sitan en un extremo Anaerobio estricto Habita suelos de todo el mundo, en heces de animales y humanas las esporas son muy resistentes pero las clulas vegetativas son muy fcil de inactivar

 Lo ms frecuente es la contaminacin de heridas por esporas La germinacin y la produccion de la toxina solo tiene lugar en heridas con bajo potencial de xido reduccin Por si misma no produce inflamacin La toxina tetanospasmina se forma en la clula vegetativa bajo el control de un plamido. La secuencia de esta toxina es parcialmente homloga con la botulnica Slo existe un tipo de antgeno de esta toxina, toxoide eficaz para la inmunizacin La toxina producida en las heridas entra por los axones y es transportada a la mdula espinal y al cerebro Ejerce su accion sobre todo a nivel de la mdula espinal

Cuadro clnico
Ttanos generalizado: Aumento del tono y espasmos generalizados Los primeros sintomas son inquietud, dolor y rigidez de la espalda, cuello, muslos y abdomen. Dificultad en la deglucin y masticacin (trismo). Rictus o sonrisa sardnica, opisttonos o concavidad del dorso del paciente Estimulos como la luz y el ruido pueden desencadenar una crisis Puede ir acompaado de fiebre En casos graves: hipertensin lbil, taquicardia, disritmia, sudoracin profusa, vasoconstriccin y aumento de los niveles plasmticos y urinarios de catecolaminas Ttanos neonatal: Tiene lugar como forma generalizada y suele ser fatal. En nios con madres no inmunizadas Suele producirse en las dos primeras semanas Rigidez espasmos y dificultad en la deglucin Ttanos local y ttanos ceflico

Complicaciones:
Asfixia secundaria al espasmo laringeo Neumona por ventilacin mecnica Trombosis por la inmovilizacin del paciente Alteracin del ritmo cardiaco Hipertensin e hipotensin Fracturas vertebrales etc

Epidemiologa:
Esporas en suelos y pueden colonizar el tracto digestivo de humanos y animales Riesgo mayor por inmunidad inducida inadecuada, la enfermedad no induce inmunidad El microorganismo es transmitido por una herida punzante o por inoculacin directa del material infectado

 Enfermedad de distribucin mundial Provoca al ao un milln de muertos, sobre todo en pases en vias de desarrollo 500.000 recin nacidos mueren al ao por esta causa En los paises desarrollados la incidencia ha bajado notablemente desde que se introdujo la obligatoriedad de la vacunacin.

Diagnstico
Basado en hallazgos clnicos. Muy poco frecuente en pacientes que han sido vacunados y han recibido las dosis de refuerzo. Se puede aislar C. ttani en pacientes sin ttanos Leucocitos elevados, electrocardiograma muestra descargas continuas de las unidades motoras Niveles sricos de antitoxina de >_ 0.01U/ml son considerados como protectores y es muy poco probable que se desarrolle la enfermedad

Tratamiento
Eliminacin de la fuente de la toxina, neutralizar la toxina libre y prevenir los espasmos musculares Tratamiento antibitico: Para eliminar la infeccin vegetativa penicilina, actualmente se prefiere metronidazol. La eritromicina y la clindamicina en pacientes sensibles a la penicilina Tratamiento antiespasmdico: Se han utilizado muchos agentes, solos o en combinacion como el diazepan y otras benzodiazepinas como son lorazepan y midazolam. Barbitricos y la clorpromazina. En casos de una respuesta no satisfactoria puede ser necesaria una parlisis teraputica y ventilacin asistida

La antitoxina
Se utiliza la gammaglobulina humana antitetnica en dosis de 3000 a 6000 unidades intramusculares. Debe ser administrada cuanto antes Si no se dispone de la antitoxina humana se puede utilizar la equina en dosis de 10000 unidades i.v. o i.m.

Prevencin
Todos los sujetos inmunizados parcialmente o no inmunizados deben ser vacunados La primera serie de vacunaciones consiste en tres dosis, cada 10 aos es conveniente una dosis de recuerdo a partir de los 35 A partir de los 2 meses de edad se debe de recibir 3 inyecciones de 0.5 ml de vacuna trivalente (difteria, ttanos y tosferina) A los 18 meses y entre los 4 y 5 aos deben administrarse inyecciones de recuerdo, y luego cada 10 aos.

Clostridium botulinum

Clostridium botulinum

-Gram positiva anaerobia -Forma de varilla -Forma esporas subterminales con flagelos peritricos -No produce cpsula -Fue descubierta por Emile van Ermengem (1896)

Alimentos que producen la intoxicacin:

-De origen animal o vegetal. -pH mayor a 4,6.
Maz enlatado, pimienta, frejoles verdes, sopas, remolacha, esprragos, hongos, olivas maduras, espinacas, atn, pollo, jamones, salchichas, berenjenas rellenas, hgados de pollo as como los pats de hgado, langosta

Conservas (caseras).

TOXINA BOTULINICA
-Neurotoxina elaborada por C. botulinum -Produce el BOTULISMO por intoxicacin -Es uno de los 10 venenos ms poderosos -Mayor amenaza biolgica del mundo (junto con el Antrax) -Provoca la muerte del paciente por parlisis del msculo respiratorio.

Modo de accin

Patogenia
-7 tipos de toxina botulnicas (A hasta G) -Tipos A, B, E, F: botulismo en humanos. -Clostridium sporogenes no produce toxina botulnica.

Historia de C. botulinum
-1820 Justinus Kerner investiga sobre los envenenamientos producidos por salsa de carne. -1793-1827, 234 casos; 400 hasta 1853 con 150 muertes. -Van den Corput postul que el agente causal era un hongo (Sarcina botulina). -Ptomanas (sustancias encontradas en cadveres exhaumados), c. prsicos, pcricos y grasos. -1895-1897 Van Ermengem, de Ghent, y Kempner demostraron que el botulismo era causado por la toxina de un bacilo anaerobio. -34 personas enfermaron y 3 muertes. -Van Ermengem aisl esporas de un bacilo anaerobio (Bacillus botulinus). --C. botulinum produce 7 toxinas antignicamente distintas. Hiptesis de que esporula. --.1968 Allan Scott y Edward Schantz estudiaron su uso curativo.

-Durante la Segunda Guerra Mundial (1943) los britnicos informaron que los alemanes estaban estudiando bombardear toxinas sobre Gran Bretaa . -La Academia Nacional de Ciencias de EE.UU mont un laboratorio en Fort Detrick para investigar el problema de la guerra txica y proponer soluciones defensivas. -Carl Lamanna obtener la toxina botulnica tipo A en su forma ms pura y cristalina, con una fraccin txica de 150.000 dalton, unida a otra fraccin notxica de 750.000 dalton que la protega de la digestin enzimtica en el intestino. -Los alemanes nunca llegaron a bombardear esporas o toxinas sobre Londres. -En 1972 Estados Unidos fue una de las naciones firmantes de la Convencin de Armas Biolgicas y Toxinas. -Allan Scott inocul a voluntarios humanos que sufran de estrabismo, previo ensayos en monos rhesus. -Uso a personas que sufran de blefarospasmo, una reduccin de las arrugas, y as empez a usarse en el campo cosmtico.

Cuadro clnico
Botulismo alimentario
- Causado por intoxicacin alimentaria

Botulismo infantil o del lactante

- La miel es la principal reserva de las esporas de C. botulinum

Botulismo causado a travs de las heridas

- No implica ningn alimento

Otra categora todava sin determinar

- Ciertos casos en los cuales no puede identificarse al alimento especfico o a la herida causante de la enfermedad

Sntomas del botulismo alimentario:

1. Periodo de incremento febril, o primera semana de la enfermedad: -Fiebre continua a lo largo de todo el da -Aumento del tamao del bazo -Tos seca -Dolor abdominal
2. Segunda semana de la enfermedad: -Fiebre entre 39 y 40 C -Roseola: manchas rosa-rojo en el abdomen de 2-4 mm de dimetro -Somnolencia -Meteorismo (gases acompaados de gran movimiento de las asas intestinales a consecuencia del acmulo de los mismos) 3. Tercera semana de la enfermedad: -Fiebre -Desaparece la somnolencia -Desaparece la suciedad lingual 4. Cuarta semana de la enfermedad: -La enfermedad cede -Disminuye la fiebre poco a poco

Epidemiologa
La dosis letal para el ser humano depende de la toxina y vara entre 0,1 y 1,0 millonsimas de gramo La mayora de los casos estn asociados con el consumo de alimentos procesados inadecuadamente o enlatados de forma casera Es comn tanto en suelos de cultivo como en suelos con gran vegetacin, en sedimentos de las cadas de agua, en lagos y aguas costeras, y en el tracto intestinal de peces y mamferos, as como en las branquias y en las vsceras de los crustceos y otros mariscos La toxina se inactiva a temperaturas de 80C mantenidas durante 10 min Cepas proteolticas se asocian con vegetales, carne y productos lcteos Cepas no proteolticas, con pescado y productos del mar Es improbable que sobrevivan en los alimentos cocidos

Diagnstico Directo
Botulismo alimentario - Deteccin toxina en alimento - Deteccin toxina en suero Botulismo del lactante - Aislamiento a partir de heces - Deteccin de toxina en heces y/o suero Botulismo de las heridas - Aislamiento a partir del exudado - Deteccin de toxina en exudado o suero

Tratamiento
Si la toxina an no ha llegado al flujo sanguneo: - Lavado gstrico En caso contrario: - Se aplica una antitoxina polivalente (de origen equino) A, B, E, un vial intravenoso y un vial intramuscular
En resumen, el paciente requiere asistencia respiratoria, eliminacin del germen del tracto gastrointestinal por lavados gstricos, tratamiento con penicilina y antitoxina botulnica.

Prevencin
Conservas caseras: utilizar alimentos correctamente lavados, recipientes estriles y sobre todo sistemas trmicos a presin adecuados para su esterilizacin Conservar los alimentos precocinados a una temperatura de 4C o menos A nivel industrial: controles rigurosos de los procesos de preparacin de las conservas y platos precocinados En el caso de los lactantes: no administrar miel a los menores de 1 ao Existe una vacuna a base de toxoides botulnicos (A, B, C, D y E) para su utilizacin en personal de laboratorio que trabaja con el germen o sus toxinas.

Aplicaciones actuales de la toxina botulnica

Aplicaciones clnicas: - En enfermedades caracterizadas por movimientos involuntarios, especialmente en el caso de las distonas Aplicaciones cosmticas: - Botox es una forma diluida de la toxina botulnica, y uno de los tratamientos que ofrece mejores resultados para eliminar las arrugas Bioarmamento: - Unos 450 gramos seran suficientes para matar a toda la poblacin humana

ESTRABISMO

TIC FACIAL

Clostridium perfringens

Clostridium perfringens
FAMILIA : Bacillaceae GENERO : Clostridium Bacteria anaerobia Gram positiva

Formadora de esporas en los intestinos humanos y de varios animales homeotermos Difundidos por el suelo, aguas naturales, contenido intestinal y carnes crudas Tercer indicador de contaminacin fecal de las aguas Se destruyen con T superiores a 121 C.

Hay varios tipos:

- Clostridium perfringens A - Clostridium perfringens B - Clostridium perfringens C - Clostridium perfringens D

Producen potentes exotoxinas : 11 histotoxinas y 1 enterotoxina Tipos toxignicos de C. perfringens. Toxina lota alfa + + + + + + beta epsilon + +

C. perfringens tipo A C. perfringens tipo B

-

C. perfringens tipo C C. perfringens tipo D

Patologa
Debido a las toxinas que producen puede causar enfermedades como:
GANGRENA GASEOSA

INTOXICACIN ALIMENTARIA Tipo A

GANGRENA GASEOSA
El clostridio provoca destruccin en los tejidos infectados si persiste. Liberacin de exoenzimas especficos (fosfolipasas, hemolisinas, colagenasas, proteasas..) Putrefaccin del tejido acompaada de una produccin de gas

La solucin, llegado este nivel, es la amputacin de la zona afectada; de no ser as la infeccin suele acabar con la muerte del animal (cerdos, pollos, caballos, humanos...).

Gangrena gaseosa :

Diagnstico:
Clostridium perfringens es el responsable del 80% de los casos de gangrena gaseosa postraumtica El diagnstico temprano de la gangrena gaseosa es crtico Hallazgos clnicos, quirrgicos y microbiolgicos.

Examen e informe urgente de la tincin de Gram de las muestras:

- numerosos bacilos gram positivos y escasos o ausentes neutrfilos

Tratamiento:
Medidas quirrgicas con desbridamiento, extirpacin de todos los tejidos afectados y la administracin de antibiticos activos a altas dosis.

INTOXICACIN ALIMENTARIA
La mayoria producido por ingestin de mens a base de carne sometidos a un tratamiento trmico defectuoso. Cuando se trata de un brote de intoxicacin alimentaria por este microorganismo, la secuencia tpica incluye los siguientes eventos:
1. El plato de carne que contiene las esporas es un plato previamente cocido.

2. Las esporas resisten la coccin para hallarse en un medio ideal.

3. El producto se somete a un tratamiento incorrecto en cuanto a la relacin tiempo/temperatura; las esporas germinen y se multipliquen 4. El alimento se sirve fro o se vuelve a calentar insuficientemente para destruir las clulas vegetativas.

Intoxicacin alimentaria
PATOGENIA Y CUADRO CLNICO Autolimitante no febril con naseas, dolor abdominal, diarrea y poco o nada normal los vmitos. Sntomas comienzo entre 8-24 horas pero debe de haber una gran cantidad de este microorganismo vegetativo para que haya una fuerte intoxicacin. En individuos sanos, no suele ser necesario tratamiento mdico y la curacin total es da en 1 2 das 70% estn relacionados con productos crnicos tales como estofados, jugos de carne y empanadas.

Las carnes curadas rara vez estn implicadas en la intoxicacin alimentaria ya que contienen altos contenidos de sal, concentraciones de nitrito y un tratamiento trmico.

MEDIDAS DE CONTROL a.- Siempre que sea posible el alimento debe cocinarse y consumirse inmediatamente. b.- Cuando el alimento haya de guardarse despus de cocinado debe enfriarse tan rpidamente como sea posible (a menos de 18 C en una hora c.- A ser posible se evitar el cocinado parcial o total de los alimentos de un da para otro, esta prctica es peligrosa ya que este recalentamiento final slo sirve para estimular an ms su crecimiento y no para destruirlo. d.-Debe impedirse la contaminacin cruzada de los alimentos cocinados por los crudos y por las superficies sucias de trabajo, por el equipo y por los utensilios de cocina.

Clostridium difficile

CLOSTRIDIUM DIFFICILE
Puede vivir prcticamente en cualquier medio. Presente en el intestino del 3% de los adultos y el 66% de los nios. Por tanto, crecimiento ptimo en agar sangre a temperaturas corporales. Se reproduce profusamente en hospitales.

 Colonias de C.difficile en agar sangre.

microscopio electrnico.

C.difficile al

Sintomatologa
Diarrea grave o aguda Heces sanguinolentas Fiebre Calambres estomacales Dolor abdominal Infeccin de las paredes del abdomen (peritonitis) Envenenamiento de la sangre (septicemia) Desgarros en el intestino grueso (perforacin del colon)
Poco frecuente

COLITIS PSEUDOMEMBRANOSA

Cuadro clnico
Colitis pseudomembranosa
Pacientes que han recibido tratamiento antibitico o que han sido sometidos a una operacin gastrointestinal. Toxina que daa la mucosa del colon. Inflamacin aguda de la mucosa intestinal. Caracterizada por la presencia de pseudomembranas o placas en el colon. Grave y a menudo mortal.

Tratamiento y prevencin
Metronidazol y vancomicina: enfermedad grave. Recidiva frecuente (esporas resistentes) ltima mutacin C.difficile resistente a metronidazol. Vacuna eficaz a base de formaldehdo.
(grupos de riesgo, >65 aos y enfermos graves)