UNIVERSIDAD DE IXTLAHUACA C.U.I. INCORPORADO A LA UAEM.

LICENCIATURA EN QUMICO FARMACUTICO BILOGO

REPORTE PRACTICA 5.4 EFECTO DE CARBACOL Y ATROPINA SOBRE ILEON AISLADO DE COBAYO: CONSTRUCCION DE CURVA DOSIS-RESPUESTA EMPLEANDO SIMULADORES

LABORATORIO INTEGRAL DE FARMACOLOGIA

CATEDRTICO: M. en SHO. Juan Jaime Guerrero Daz del Castillo

ALUMNO: REYES RIOS GENARO

GRUPO: 702

FECHA DE REALIZACION DE LA PRACTICA: 13-SEPTIEMBRE-2013

FECHA DE ENTREGA DEL REPORTE: 20-SEPTIEMBRE-2013

OBJETIVO: Conocer el funcionamiento del simulador de rgano Aislado de Ileon de Cobayo y demostrar los efectos de agonistas y antagonistas sobre este rgano, construyendo las curvas dosis-respuesta correspondientes en ausencia y en presencia de un antagonista. MARCO TERICO El carbacol, tambin llamado carbamilcolina es un agonista colinrgico del tipo ster de colina que acta unindose y activando receptores de acetilcolina del sistema nervioso parasimptico. Es usado principalmente en oftalmologa para el tratamiento de la glaucoma o para uso durante operaciones quirrgicas. El carbacol es un ster de colina y un compuesto cuaternario de amonio cargado positivamente. No se absorbe bien en el tracto gastrointestinal ni puede cruzar la barrera hematoenceflica. Por lo general se administra por va tpica ocular o por medio de una inyeccin intraocular. El carbacol no es metabolizado por la enzima colinesterasa, sus efectos en el organismo duran entre 4 y 6 horas, administrado tpicamente y unas 24 horas si se administra por va intraocular. Debido a que el carbacol se absorbe mal por va tpica, por lo general se mezcla con cloruro de benzalconio (benzal) para promover su absorcin. En la mayora de los pases, el carbacol se obtiene solo con receta mdica. El carbacol es un parasimpaticomimtico que estimula tanto a los receptores muscarnicos como a los nicotnicos. En la administracin ocular tpica e intraocular, sus principales efectos son la miosis y un aumento en el flujo del humor acuoso. La atropina es una droga anticolinrgica extrada de la belladona (Atropa belladonna) y otras plantas de la familia Solanaceae. Es un metabolito secundario en estas plantas y se ocupa como droga con una amplia variedad de efectos. Es un antagonista competitivo del receptor muscarnico de acetilcolina. Se emplea en medicina para disminuir los efectos muscarnicos de los inhibidores de la acetilcolinesterasa, para pre medicacin pre anestsica y para el tratamiento de la bradicardia y la asistolia. Tambin se utiliza para disminuir la motilidad gastrointestinal y como midritico. Es tambin amplio su uso como antdoto en caso de intoxicaciones por organofosforados, ya que relaja la musculatura lisa y as evita la muerte por asfixia que producen estas sustancias, que poseen precisamente la sustancia antagnica de la atropina: excesivas dosis de acetilcolina.

MATERIAL PC con software organ bath simulation

METODO

Explicar el funcionamiento del software Organ Bath Simulation.

Elaborar curvas dosis-respuesta a diferentes concentraciones de carbacol con y sin lavados.

Elaborar grficas con el log de la concentracin del carbacol vs % de efecto.

Elaborar curvas dosisrespuesta a diferentes concentraciones de carbacol a diferentes concentraciones, as como tambin administrar atropina a bajas y altas concentraciones.

Elaborar conclusiones de los resultados obtenidos.

RESULTADOS Tabla No. 1 Registro de respuestas de contraccin del leon de cobayo a diferentes concentraciones de carbacol realizando lavados despus de cada administracin. Volumen (ml) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 [Carbacol] en el leon 5.0E-9 5.0E-8 5.0E-7 5.0E-6 5.0E-5 5.0E-4 5.0E-3 Contraccin (gramos) 0.0488 0.1172 0.127 2.785 14.48 14.53 15.62 % Efecto 0.31 0.75 0.81 17.82 92.70 93.02 100 Log[Carbacol] -8.3010 -7.3010 -6.3010 -5.3010 -4.3010 -3.3010 -2.3010 Ecuacin Probit 5.57 5.77 5.97 6.17 6.37 6.57

Grfica No. 1.Curva sigmoidea de la administracin de carbacol realizando lavados. Relacin log [carbacol] vs % Efecto
Administracin de Carbacol realizando lavados. Relacin log [carbacol] vs % Efecto Y= 20.5535 X + 152.5844 r = 0.9114
120
100

% Respuesta

80 60 40 20 0 -9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 -20 0

Log Concentracin

Y= mx + b Y= 20.5535 X + 152.5844 r = 0.9114

X= ED50 ED50= 1.02 X 10-5

Grfica No. 2.Recta con la relacin log [carbacol] vs Probits. Administracin de Carbacol realizando lavados.
Administracin de Carbacol realizando lavados. Relacin log [carbacol] vs probits Y= 20.5535 X + 152.5844 r = 0.9114
6.8 6.6

Probits

6.4 6.2 6 5.8 5.6 5.4 -9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0

Log Concentracin

Tabla No. 2 Registro de respuestas de contraccin del leon de cobayo a diferentes concentraciones de carbacol sin realizar lavados.

Volumen (ml) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5

[Carbacol] en el leon 5.0E-9M 5.50E-8M 5.55E-7M 5.55E-6M 5.56E-5M 5.56E-4M 5.56E-3M

Contraccin (gramos) 2.12 7.269 8.979 9.35 9.37 9.428 9.624

% Efecto 22.028 75.52 93.29 97.15 97.36 97.963 100

Log[Carbacol] -8.3010 -7.2596 -6.2557 -5.2557 -4.2549 -3.2549 -2.2549

Ecuacin Probit 5.23 5.43 5.63 5.83 6.03 6.23

Grfica No. 3.Curva sigmoidea de la administracin de carbacol sin realizar lavados. Relacin log [carbacol] vs % Efecto
Administracin de Carbacol sin lavados Y= 10.0964 X + 136.4613 r = 0.7753
120 100

% Respuesta

80 60 40 20 0 -9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0

Log Concentracin Y= mx + b Y= 10.0964 X + 136.4613 r = 0.7753 Grfica No. 4. Recta con la relacin log [carbacol] vs Probits. Administracin de Carbacol sin realizar lavados.
Administracin de Carbacol sin realizar lavados. Relacin log [carbacol] vs probits Y= 10.0964 X + 136.4613 r = 0.7753
6.4 6.2

X= ED50 ED50= 2.73 X 10-9

Probits

6 5.8 5.6

5.4
5.2 5 -9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0

Log Concentracin

Tabla No. 3 Registro de respuestas de contraccin del leon de cobayo mediante la administracin de 0.5 ml de atropina a una concentracin baja (10-6M) y la administracin de diferentes concentraciones de carbacol. Volumen (ml) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 [Carbacol] en el leon 5.0E-9M 5.50E-8M 5.55E-7M 5.55E-6M 5.56E-5M 5.56E-4M 5.56E-3M Contraccin (gramos) 0.02931 0.03908 0.05862 0.08793 4.426 14.7 14.94 % Efecto 0.13 0.26 0.33 0.53 29.62 98.39 100 Log[Carbacol] -8.3010 -7.2596 -6.2557 -5.2557 -4.2549 -3.2549 -2.2549 Ecuacin Probit 5.34 5.54 5.74 6.94 6.14 6.34

Grfica No. 5. Curva sigmoidea de la administracin de 0.5 ml de atropina a una concentracin baja (10-6M) y la administracin de diferentes concentraciones de carbacol. Relacin log [carbacol] vs % Efecto.

Administracin de atropina a dosis baja (10-6 M) ms carbacol a diferentes concentraciones. Y= 18.6180 X + 130.7269 r = 0.8669
120 100

% Respuesta

80 60 40 20 0 -9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1

Log Concentracin

-20

Y= mx + b Y= 18.6180 X + 130.7269 r = 0.8669

X= ED50 ED50= 4.61 X 10-5

Grfica No. 6. Recta con la relacin log [carbacol] vs Probits. Administracin de atropina a dosis baja (10-6 M) ms carbacol a diferentes concentraciones.

Administracin de atropina a dosis baja (10-6 M) ms carbacol a diferentes concentraciones. Relacin log [carbacol] vs probits Y= 18.6180 X + 130.7269 r = 0.8669

6.4 6.2

Probits

6 5.8 5.6 5.4 5.2

-9

-8

-7

-6

-5

-4

-3

-2

-1

Log Concentracin

Tabla No. 4 Registro de respuestas de contraccin del leon de cobayo mediante la administracin de 0.5 ml de atropina a una concentracin alta (10-2M) y la administracin de diferentes concentraciones de carbacol.

Volumen (ml) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5

[Carbacol] en el leon 5.0E-9M 5.50E-8M 5.55E-7M 5.55E-6M 5.56E-5M 5.56E-4M 5.56E-3M

Contraccin (gramos) 0.06839 0.07816 0.1075 0.1172 3.556 15 15.57

% Efecto 0.43 0.50 0.64 0.70 22.80 96.33 100

Log[Carbacol] -8.3010 -7.2596 -6.2557 -5.2557 -4.2549 -3.2549 -2.2549

Ecuacin Probit 5.42 5.62 5.82 6.02 6.22 6.42

Grfica No. 7 Curva sigmoidea de la administracin de 0.5 ml de atropina a una concentracin alta (10-2M) y la administracin de diferentes concentraciones de carbacol. Relacin log [carbacol] vs % Efecto.
Administracin de atropina a dosis alta (10-2 M) ms carbacol a diferentes concentraciones Y= 18.1691 X + 127.2415 r = 0.8543

120 100

% Respuesta

80 60 40 20 0

-9

-8

-7

-6

-5

-4

-3

-2

-1
-20

Log Concentracin Y= mx + b Y= 18.1691 X + 127.2415 r = 0.8543 X= ED50 ED50= 5.60 X 10-5

Grfica No. 8. Recta con la relacin log [carbacol] vs Probits. Administracin de atropina a dosis alta (10-2 M) ms carbacol a diferentes concentraciones.
Administracin de atropina a dosis alta (10-2M) ms carbacol a diferentes concentraciones. Relacin log [carbacol] vs probits Y= 18.1691 X + 127.2415 r = 0.8543

6.6 6.4

Probits

6.2 6 5.8 5.6 5.4 5.2 -9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0

Log Concentracin

DISCUSION DE RESULTADOS

Al realizar la comparacin de las curvas dosis-respuesta en la administracin de carbacol a diferentes concentraciones realizando lavados con la de carbacol a diferentes concentraciones sin lavados, se observ una gran diferencia en cuanto al efecto mximo alcanzado, ya que los valores de contraccin mxima alcanzados en la administracin de carbacol a diferentes concentraciones realizando lavados fueron menores que los obtenidos en la administracin de carbacol a diferentes concentraciones sin realizar lavados. De igual forma, al comparar la dosis efectiva 50 (DE-50), se muestra que las concentraciones del frmaco en ambas curvas, capaces de producir el 50 % del efecto son muy diferentes. Por otro lado, al observar las diferencias y similitudes de las curvas dosisrespuesta en presencia de atropina, se identific diferencia en los valores mximos de contraccin, debido a que para la administracin de atropina a dosis baja (10-6 M) se obtuvo una contraccin menor, mientras que en la administracin de atropina a dosis alta (10-2 M) se obtuvo una contraccin mayor.

CONCLUSIONES

El sitio del cobayo donde se llev a cabo la experimentacin fue en su capa muscular del leon, esto debido a que en la musculatura lisa del leon las clulas se contraen como respuesta a diversos estmulos. Los neurotransmisores con capacidad de producir contraccin muscular en el leon son acetilcolina, histamina y noradrenalina. En la simulacin se emple carbacol, que es un agonista colinrgico, que interacta con receptores muscarnicos, especficamente M3 y nicotnicos. Despus de la estimulacin se desencadenan una serie de procesos que implican el incremento de iones calcio a nivel intracelular, provocando la contraccin del msculo liso, considerando que el receptor M3 est asociado a la protena G.

Se cumpli con el objetivo establecido en la prctica ya que se conoci el funcionamiento del simulador de rgano aislado de cobayo demostrando los

efectos de agonistas y antagonistas sobre este rgano ,adems se construyeron las curvas dosis-respuesta correspondientes en ausencia y en presencia de un antagonista. Por otra parte, debido a que no se obtuvieron los resultados esperados, se sugiere practicar con el simulador de rgano aislado de leon de cobayo para obtener mejores resultados.

BIBLIOGRAFIA

Villarejo-Daz,

M.,

Murillo-Zaragoza,

J.R.,

Alvarado-Hernndez,

H.,

Farmacologa de los agonistas y antagonistas de los receptores opioides, educacin e investigacin clnica, vol. 1; Agosto, 2000, pgs. 106-137.

Flrez, J., Gonzlez, A. M., Frmacos antagonistas, CNS Drugs, 2005; 95, 233-235.

Gonzlez G. (1985). Mtodos estadsticos y principios de diseo experimental. 2da ed. Quito-Ecuador, Universidad Central del Ecuador. pp.181-198