UN ANLISIS DEL POTENCIAL DE LA PLACA TERMINAL REGISTRADO CON UN ELECTRODO INTRACELULAR.

Por: P. Fatt y B. Katz , J. Physiol. 1951 Es quema que describe el proceso de transmisin neuromuscular:
Impulso Acetilcolina Potencial placa terminal Impulso muscular Contraccin

La evidencia para esta cadena fue resuminda por Eccles (1948), Hunt & Kuffler (1950) y Rosenblueth (1950). Se sabe que la acetilcolina es liberada por el impulso nervioso y despolariza la placa terminal. Sin embargo an no se sabe cmo ocurren esos dos mecanismos. El objetivo de este artculo es investigar las propiedades del final del potencial de la placa terminal an ms estrechamente que en el pasado , usando el mtodo de registro intracelular que fue desarrollado por Graham & Gerard (1946), Ling & Gerard (1949) and Nastuk & Hodgkin (1950). Este mtodo ofrece varias ventajas: Permite registrar potenciales de reposo y de accin. La preocupacin de este trabajo es determinar la carga elctrica que pasa a travs de la membrana de la placa terminal durante la transmisin de un impulso. Mtodo La tcnica empelada fue similar a la de Graham & Gerard (1946), Ling & Gerard (1949) and Nastuk & Hodgkin (1950) excepto que en este trabajo la misma fibra muscular e incluso en el mismo punto de la fibra fueron sometidas a varias medicines lo que quiere decir que se introdujo y saco el microelectrodo en repetidas ocasiones. Esto introduce un riesgo, pues despus de cierto nmero de de inserciones el dao local resulta en una cada del potencial de accin y de reposo. Por lo que no siempre era posible completar las medicines y, en la preparacin no curarizado, el movimiento activo del msculo aumenta considerablemente los riesgos del experimento. Sin embargo a pesar de esta inherente dificultad este mtodo fue satisfactorio en muchos casos y dio consistentes resultados que no se hubieran obtenido de otra manera. El termino placa terminal es usado aqu para escribir el rea post-sinapsis de una fibra muscular que est en contacto con la terminal de una motoneurona (Experimentos en rana). Preparacin. Se us el msculo sartorio con su nervio de la rana temporaria y fue montado en una cmara como se muestra en la Fig. 1. La cmara fue moldeada en parafina. Se us un microscopio binocular para diseccin con aumento de x39.

Se us un micrmetro ocular para medir distancias cortas a lo largo de la fibra muscular. Para gruesas distancias de us un anexo vernier. La profundidad del lquido en el bao por encima del msculo era de unos 3 mm. Se us un micromanipulador para mover el microelectrodo. Microelectrodos y el amplificador. Se us microelectrodos con capilar con punta menos a 0.5micras y llenos con 3M de KCl. El amplificado fue calibrado para aplicar voltajes en escalera de 10 a 1mV. La constante de tiempo varia con la resistencia del microelectrodo. //no entend la manera en que medan la resistencia del electrodo. La constante de tiempo fue entre50 y 200 msc. En la figura dos se puede apreciar dos curvas, una con la distorsin y la otra con corregida (subtangent analysis). Procedimiento Experimenal. Los experimentos en los que el potencial de reposo cay por debajo de los 80mV fueron descontinuados. Localizacin de la placa terminal A medida que el microelectrodo se aproxima a la placa terminal el primer signo es siempre un pequeo y lento potencial de la placa terminal. Cambios en el potencial extracelular La magnitud del campo elctrico externo es proporcional a la densidad de corriente radial en la superficie de la fibra y de la resistencia especfica de la solucin externa y conduce a una ligera reduccin y distorsin de los cambios en el potencial de membrana observados. Estimulacin directa Constante de cable? Se acopl un segundo electrodo

Temperatura Solucin Se us solucin Ringer con una modificacin Sodio: 113mM Potasio: 20mM Calcio: 3.6mM (1.8mM) Fosfato: 1mM Cloro: 121mM El fostato sirve como buffer y mantiene el pH en 6.8 El cambio de la concentracin sirvi para aumentar el umbral de la fibra muscular, relativo al potencial de la placa terminal alrededor de un 25%. Resultados La curarina es un relajante muscular proveniente del curare. Esta droga reduce la amplitud de la e. p. p. por debajo del umbral de la fibra muscular, por lo que no surge impuso y permanece un cambio local de potencial subumbral. El e. p. p. consiste de una simple onda monofsica, que es rpidamente atenuada como se extiende a lo largo de la fibra. Efecto de la concentracin de curarina en el potencial de la placa terminal y el potencial de reposo. Con un incremento de la dosis de curarina el e. p. p. se reduce sin otro cambio. Inversamente, la remocin de curarina est asociada con el aumento del e. p. p., pero su amplitud de pico se oscurece por la intervencin de la espiga del msculo. Tabla 2. Un anlisis de la distribucin espacial y de la disminucin del potencial de la placa terminal. La distribucin de la carga en una fibra muscular en reposo se puede describir por la clsica teora del cable.