Practica Bioquimica 2013

Universidad Nacional FEDERICO VILLARREAL
LABORATORIO DE BIOQUIMICA I
Lima, 2013
CURSO DE BIOQUIMICA Ing.. Marleni Bautista Espinoza
CONTENIDO
ITEM 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18
LABORATORIOS Reconocimiento del Laboratorio de Bioqumica Preparacin de soluciones cidos y bases, medicin de Ph. Propiedades fsico qumicas del agua Preparacin de soluciones isotnicas, hipotnicas e hipertnicas. Reconocimiento de protenas Extraccin de la casena y determinacin del punto isoelctrico Reconocimiento de la protena en la clara de huevo Reconocimiento de carbohidratos Reconocimiento e hidrlisis del almidn Reconocimiento de lpidos Extraccin de ADN Reconocimiento del ARN en el huevo Verificacin de vitaminas en algunos alimentos. Rutas metablicas Fermentacin anaerbica Fermentacin aerbica Reaccin de mauller Oxidacin redox
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OBJETIVO GENERAL DEL CURSO

Al trmino de las prcticas de este manual, el alumno estar capacitado para identificar las diferentes actividades realizadas en la qumica general, as como algunos conceptos de la qumica orgnica, como requisito al estudio de la bioqumica. ADVERTENCIAS SOBRE EXPERIMENTOS AL ALUMNO
1. El laboratorio es un lugar donde se desarrollan prcticas elegidas por el profesor para

confirmar y reafirmar los conocimientos tericos impartidos en el saln de clase.
2. Al realizar cada prctica deben seguirse las instrucciones, observar y registrar lo que
sucede.
3. No deber cambiar los reactivos de mesa, ya que los equipos de soluciones que son
necesarios para cada uno de los anlisis sern puestos completos en la mesa de trabajo.
4. Se asesorar y resolvern las preguntas durante el anlisis de cada grupo. 5. Es importante sealar la necesidad de seguir todos los pasos indicados en cada
prctica para obtener los resultados correctos de cada experimento. En todas las prcticas debern anotarse las observaciones, los resultados y las conclusiones.
6. En el caso de que el experimento no resultara como est planeado, el alumno deber

investigar, consultar y agotar todas las posibilidades para lograr un desarrollo correcto. Si no se lograra el objetivo de la prctica, debe preguntar al docente, l le explicara en donde est la falla y la manera de corregirla. MEDIDAS DE SEGURIDAD EN UN LABORATORIO.
1. No deben efectuarse experimentos no autorizados, a menos que estn supervisados

por el docente.
2. Cualquier accidente debe ser notificado de inmediato al docente o al responsable del

laboratorio
3. Uso indispensable de bata como medida de proteccin. 4. No pipete los cidos, puede llegar a ingerirlos
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5. Lea cuidadosamente la etiqueta del frasco hasta estar seguro de que es el reactivo que
necesita, no utilice reactivos que estn en frascos sin etiqueta.
6. Despus de que utilice un reactivo tenga la precaucin de cerrar buen el frasco. 7. Los tubos y varillas de vidrio y objetos calientes deben colocarse sobre tela de asbesto
y en un lugar no muy accesible de la mesa de trabajo, para evitar quemaduras as mismo o a un compaero.
8. Los tubos de ensaye calientes, con lquido o no, deben colocarse en una gradilla de
alambre o dentro de un vaso de precipitados.
9. Cuando se calientan sustancias contenidas en un tubo de ensaye, no se debe apuntar

la boca del tubo al compaero o a s mismo, ya que pueden presentarse proyecciones del liquido caliente
10. La dilucin de cidos concentrados debe hacerse de la siguiente manera:

Utilizar recipientes de pared delgada. Aadir lentamente el cido al agua resbalndolo por las paredes del recipiente, al mismo tiempo que se agita suavemente . NUNCA AADIR AGUA AL CIDO, ya que puede formarse vapor con violencia explosiva. Si el recipiente en el que se hace la dilucin se calentara demasiado, interrumpir de inmediato y continuar la operacin en bao de agua o hielo.
11. No se debe probar ninguna sustancia. Si algn reactivo se ingiere por accidente, se
notificar de inmediato al docente.
12. No manejar cristalera u otros objetos con las manos desnudas, si no se tiene la certeza
de que estn fros.
13. No se debe oler directamente una sustancia, sino que sus vapores deben abanicarse
con la mano hacia la nariz. 14. No tirar o arrojar sustancias qumicas, sobre nadantes del experimento o no, al desage. En cada prctica deber preguntar al profesor sobre los productos que pueden arrojar al desage para evitar la contaminacin de ros y lagunas. 15. Cuando en una reaccin se desprendan gases txicos o se evaporen cido, la operacin deber hacerse bajo una campana de extraccin. 16. Los frascos que contengan los reactivos a emplear en la prctica deben mantenerse tapados mientras no se usen. 17. No trasladar varios objetos de vidrio al mismo tiempo. 18. No ingerir alimentos ni fumar dentro del laboratorio. 19. Se deber mantener una adecuada disciplina durante la estancia en el
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laboratorio. 20. Estar atento a las instrucciones del docente. SUSTANCIAS QUE DEBEN USARSE CON PRECAUCIN Todas las que se utilizan en las operaciones y reacciones en el laboratorio son potencialmente peligrosas por los que, para evitar accidentes, debern trabajarse con cautela y normar el comportamiento en el laboratorio por las exigencias de la seguridad personal y del grupo que se encuentre realizando una prctica. Nmerosas sustancias orgnicas e inorgnicas son corrosivas o se absorben fcilmente por la piel, produciendo intoxicaciones o dermatitis, por lo que se ha de evitar su contacto directo; si este ocurriera, deber lavarse inmediatamente con abundante agua la parte afectada.
RECOMENDACIONES PARA EL MANEJO DE ALGUNAS SUSTANCIAS ESPECFICAS. cido Fluorhdrico (HF): Causa quemaduras de accin retardada en la piel, en contacto con las uas causa fuertes dolores, y slo si se atiende a tiempo se puede evitar la destruccin de los tejidos incluso el seo. cido Ntrico (HNO3): Este cido daa permanentemente los ojos en unos cuantos segundos y es sumamente corrosivo en contacto con la piel, produciendo quemaduras, mancha las manos de amarillo por accin sobre las protenas. cidos Sulfrico (H2SO4), Fosfrico (H3PO4) y Clorhdrico (HCl) Las soluciones concentradas de estos cidos lesionan rpidamente la piel y los tejidos internos. Sus quemaduras tardan en sanar y pueden dejar cicatrices. Los accidentes ms frecuentes se producen por salpicaduras y quemaduras al pipetearlos directamente con la boca. QU HACER EN CASO DE ACCIDENTE?
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En caso de accidente en el laboratorio, hay que comunicarlo inmediatamente al docente. Salpicaduras por cidos y lcalis: Lavarse inmediatamente y con abundante agua la parte afectada. Si la quemadura fuera en lo ojos, despus de lavado, acudir al servicio medico. Si la salpicadura fuera extensa, llevar al lesionado al chorro de la regadera inmediatamente y acudir despus al servicio medico. Quemaduras por objetos, lquidos o vapores calientes: Aplicar pomada para quemaduras o pasta dental en la parte afectada. Es caso necesario, proteger la piel con gasa y acudir al servicio medico.
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LABORATORIO N 01 PREPARACION DE SOLUCIONES ACIDOS Y BASES, MEDICION DE Ph

1. OBJETIVO: Identificar e evaluar las condiciones de disociacin y asociacin de las diferentes soluciones utilizadas en los laboratorios. Conocer y expresar las diferentes escalas de medicin de cidos bases en las sustancias. Reconocer los diferentes mtodos de medicin, del potencial hidrogeno. 2. MARCO TEORICO EL pH se define como el logaritmo negativo de la concentracin de iones hidronio (H+) pH = -log [H+] El pH es exclusivo de soluciones acuosas, que contienen tantos iones hidronios H 3O como iones oxidrios OH-. El ph es una expresin de equilibrio que ha sido calculada a 25 C a base del valor de Ki= 1x10-14 (Ki constante o producto de ionizacin del agua pura). Por lo cual el valor de este vara por la temperatura. Ionizacion del agua: Es la disociacin inica de las molculas en un electrolito es una reaccin reversible. H2O + H2O H3O+ + H2O [H+] + [OH-] Ki= [H+] + [OH-] H2O La disociacin del agua pura cambia muy poco por ello es indiferente (55.5 gr. / litro). Ki= [H+] + [OH-] Pgina 7 OH +
[H+] = [H3O+] = [OH-] = 10-7 mol7lt. pH = -log [H+] = -log [H3O+] Potencial hidrogeno= Potencial Hidroxido = pH + pOH = 14 Relacin de concentraciones H+ , pH , pOH OHmoles / litro 10-14 10-13 10-11 10-9 10-7 10-9 10-11 10-13 10-14 -log [H+] -log [OH-]
H+ 100 10-1 10-3 10-5 10-7 10-9 10-11 10-13 10-14
Moles / litro 1 0.1 0.001 0.00001 0.0000001 0.000000001 0.00000000001 0.0000000000001 0.00000000000001
pH 0 1 3 5 7 9 11 13 14
pOH 14 12 11 9 7 5 3 1 0
Ejemplo calcular el pH de HCL HCL H+ + CL1 mol de HCL se disocia formando 1 mol de iones H+ = H3O+ [H+] = 1 mol / lt. pH = -log [H+] pH = -log [1] = 0 pOH = 14 Ejemplo calcular el pH de NaOH Pgina 8
NaOH Na+ + OH1 mol de NaOH se disocia formando 1 mol de iones OH[OH+] = 1 mol / lt. pOH = -log [H+] pOH = -log [1] = 0 pH = 14 De forma general AH A+ + HAcido1 + Base2 Acido2 + Base1 Base 1 que resulta del Acido 1 se dice que es la base conjugada del acido Acido2 que resulta de la base 2 es el acido conjugado a la base 2 Neutralizacin; se dice cuando se ha llegado a un punto neutral entre una acido y una base, donde carecen de propiedades salvo lo referido a la conductividad elctrica. Hay neutralizacin si el total de la base, reacciona estequiometricamente con un numero igual de molculas del acido. Las soluciones de acido y base que han reaccionado, son inica y la solucin resultante continua siendo inica De all que la reacciones tienen mas sentido y mayor proximidad a la realidad se les expresa en forma inica. La reaccin de neutralizacin es el encuentro entre ambos iones, entonces la neutralizacin acido-base la definimos como la reaccin de igual numero de moles de iones [H+] + [OH-] TITULACION (acidez): Anlisis volumtrico que consiste en determinar el volumen de una solucin de concentracin desconocido que es qumicamente equivalente a un volumen dado de Pgina 9
una solucin de concentracin conocida llamada Standard primario, se adiciona la disolucin Standard desde una bureta graduada hasta que se ha aadido la cantidad de reactivo equivalente (punto equivalente) a la sustancia que se determina. El punto de equivalente o punto final terico se observa con un reactivo indicador. Al completar la reaccin entre la solucin Standard y la sustancia valorada, el indicador cambia o vira de color o forma un precipitado. El punto en que esto ocurre se llama punto final de la titilacin y no necesariamente coincide con el punto final terico, aunque esta muy cercano. La acidez de un producto natural se considera como su contenido en sustancias cidas. Habitualmente se determina mediante tcnicas de valoracin o titulacin cido-base y se puede expresar como la cantidad equivalente de un cido caracterstico de ese producto natural. ndice de acidez: Expresa el nmero de miligramos de base necesarios para neutralizar 1 gramo de sustancia problema. % de acidez = Gx N x meq. De acido x 100 g. muestra G= gasto de la solucin de NaOH N = normalidad de la solucin NaOH Meq. Del acido= mili equivalente del acido en que se expresa predominante) g. muestra= peso de la muestra a analizar. INDICADORES Son cidos orgnicos o bases orgnicas dbiles que presentan distinto color segn se encuentren en su forma disociada o no disociada, lo cual depender del pH de la solucin en que se encuentren, dado que el grupo disociable de estos puede ser acido o base. INTERVALO DE pH 1.2 3.0 3.1 2.8 4.6 4.4 la acidez (acido
INDICADOR Azul de timol Azul de bromofenol Anaranjado de metilo
CAMBIO DE COLOR acido rojo amarillo rojo Pgina 10 Base Amarillo Azu Amarillo
INDICADOR Verde de bromocresol Rojo de metilo Tornasol Azul de bromotimol Rojo de fenol Fenoltaleina Amarillo de alizarina 1,3,5 trinitro benceno POTENCIOMETRIA
CAMBIO DE COLOR acido amarillo rojo rojo amarillo amarillo Incoloro Amarillo incoloro Base Azul Amarillo Azul Azul Rojo Rojo violeta anaranjado
INTERVALO DE pH 3.8 4.2 4.5 6.0 6.8 8.3 10.1 12.0 5.4 6.2 8.3 7.6 8.4 10.0 12.0 14.0
Es la tcnica as conveniente y confiable APRA medir el pH de las soluciones y fluidos biolgico, este mtodo utiliza el Potencimetro (pHmetro) como instrumento para medir el pH de las soluciones Estas tcnicas potencio mtricas son importante ya que nos pueden proporcionar medidas de actividad, concentracin y coeficientes de actividad de muchas soluciones. La potenciometria esta basada en la medida de la diferencia de potencial (voltaje) entre dos electrodos sumergidos en una solucin, bajo condiciones de equilibrio corriente cero. Se opera en un rango de concentraciones de 10-8 a 10-3 moles/lt. Y las medidas son hechas en volmenes muy pequeos de muestra. 3. MATERIALES Y EQUIPOS
Equipos materiales pHmetro Bureta Soporte universal Balanza analitica Vagetas Papel pHmetro Papel de tonasol Pipeta de 10 ml. Vasos precipitados 250 ml. Vasos precipitados de 100 ml. Matraz de 100 ml Fiolas 100 ml.
Reactivos NaOH 0.1 N HCL 0.1 N KOH 0.1 N Fenoltaleina Anaranjado de metilo Mezcla 1:1 de etanol y eter dietlico neutralizada exactamente con KOH 0,1N Agua destilada Aceite Leche vinagre
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4.
METODOLOGIA El alumno tendr que aplicar el mtodo experimental para el desarrollo de esta practica as como el mtodo analtico para obtener los resultados citados.
5.
DESCRIPCION DE LA PRACTICA Neutralizacin de un acido: Titular 10 ml. HCL a 0.1 N con NaOH a 0.1 N (tomar como indicador fenoltaleina), anotar las observaciones Neutralizacin de una base: Titular 10 ml. NaOH a 0.1 N con HCL a 0.1 N (tomar como indicador Anaranjado de metilo), anotar las observaciones Medir la acidez pH de 1.- Aceite: -Pesar con una aproximacin de 0,01 g entre 10 g de aceite en un erlenmeyer, previamente tarado. -Aadir 50 ml de la mezcla disolvente (alcohol-ter etlico) previamente neutralizada con KOH 0,01 y agitar. -Aadir 5 ml de indicador fenolftalena. -Cargar la bureta con la disolucin de KOH 0,5 N 0,1N, segn se indique. Enrasar y comenzar la valoracin, agitando continuamente, hasta viraje del indicador. Anotar los ml de KOH gastados. 2.- Leche: -Tomar 10 ml de leche exactamente medidos con una pipeta aforada y verterlos en un matraz erlenmeyer. -Aadir con una probeta unos 25 ml de agua destilada -Aadir unas gotas de la disolucin de fenolftalena. -Valorar NaOH 0.1N segn el mismo procedimiento usado en la valoracin del aceite hasta viraje del indicador (coloracin rosa persistente durante unos 20 segundos). 3.- Vinagre: Pgina 12
-Medir exactamente 2 ml de vinagre, con una pipeta aforada de 2 mL o con una graduada de 5 ml. y verterlos en un erlenmeyer. -Diluir con unos 25 ml de agua destilada medidos en una probeta. -Aadir 2 o 3 gotas de la disolucin de fenolftalena. -Valorar con NaOH 0,1N hasta el punto final indicado por el viraje del indicador. Medir el pH de aceite, leche, vinagre. 6. RESULTADOS Y DISCUSION Presentar lo reportes de las diferentes practicas de la siguiente manera.
TITULACION DE UN ACIDO Gasto de base pH de la solucin Productos Aceite Leche Vinagre pH
TITULACION DE UNA BASE Gasto de acido pH de la solucin Acidez
7.
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES El pH de todo sustancia es identificado en funcin a su estado acido o base de los mismos, de la practica se concluye que el estado de alcalinidad o acides de toda sustancia depender de su composicin y para su medicin exacta se requiere de un equipo exclusivo, as mismo la acidez en un indicativo indirecto para el calculo del pH.
8.
BIBLIOGRAFIA Qumica General: Frederick R, Longo Traductor; Orlando Guerrero; Libros McGraw-Hill
9.
CUESTIONARIO
1. 2.
Existe alguna correlacin entre el pH de los alimentos y la cantidad de Medir el pH del siguiente problema: Pgina 13
carbohidratos, lpidos, protenas en el mismo. Explicar?
3.
Se disolvieron 20 ml. De acido actico (CH3COOC) 0.5 N hasta 100 ml. Y la
solucin resultante se titulo con NaOH 0.2 N calcular el pH a.- Antes de aadir la base b.- Despus de aadir 8 ml. De NaOH c.- en el punto de equivalencia despus de aadir 20ml de NaOH d.- Cuando se aadi un total de 30 ml. De NAOH e.- Trazar la curva correspondiente (pH-titilacin)
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LABORATORIO N 02 PROPIEDADES FISICO QUIMICAS DEL AGUA

1. OBJETIVO Comprender la relacin existente entre las propiedades fsicas y qumicas del agua con las fuerzas de interaccin intermolecular. Observar el comportamiento de dos grasas distintas en diferentes medios acuosos para identificar las propiedades fisicoqumicas del agua. 2. MARCO TEORICO Cuando un compuesto soluble en agua es colocado en sta, desaparece rpidamente en el lquido. Por el contrario, si no es soluble, entonces permanece donde se le coloca. Si posee una solubilidad intermedia, entonces se puede dispersar sobre la superficie del agua hasta que se vuelve invisiblemente delgada. Lo que determina el comportamiento de un compuesto en una solucin son las complejas interacciones de tipo elctrico en las superficies de las molculas. Por ejemplo, la solubilidad de un compuesto qumico en agua depende de la magnitud de las interacciones de unin entre sus molculas y las del agua. El grado de solubilidad resulta de una competencia entre los enlaces que mantienen a cada molcula unida y las oportunidades alternas de unirse con la otra sustancia. Los compuestos orgnicos varan grandemente en su solubilidad en agua. La vida en la Tierra no existira sin esta variabilidad. Los compuestos orgnicos insolubles tienen grupos componentes de tomos que forman pocas uniones (ninguna en algunos casos) con molculas de agua. Se dice que tales grupos son hidrofbicos, al igual que la molcula que tenga tales grupos. Este trmino es confuso ya que implica una repulsin entre la molcula (o el grupo) y el agua. El efecto no surge de la repulsin sino del hecho de que la unin es tan dbil que la cohesin del agua mantiene afuera al compuesto hidrofbico.
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Sin embargo, muchas molculas orgnicas son parcialmente solubles en agua debido a que por lo menos algunos de sus grupos atmicos se unen al agua. Mientras ms de estos grupos tenga el compuesto, ser ms soluble. 3. MATERIALES Y EQUIPOS
Equipos materiales Balanza Piceta Placas petri Esptula Manguera de hule Matraces volumtricos Mechero Pipetas Micropipeta Vasos de precipitado de 50 ml Vaso de precipitado de 100 ml
Reactivos Acetona. cido clorhdrico concentrado. Aceite de oliva. (cido oleico). Agua destilada. Bicarbonato de sodio. Hidrxido de amonio. Hidrxido de sodio. Petrolato Sudn III. lquido. (Mezcla de
hidrocarburos del petrleo).
4. METODOLOGIA El alumno tendr que aplicar el mtodo experimental para el desarrollo de esta prctica as como el mtodo analtico para obtener los resultados citados. 5. DESCRIPCION DE LA PRACTICA Antes de la prctica se debe preparar las siguientes soluciones: Preparacin de soluciones: 1.- Prepare 100 ml de bicarbonato de sodio 20 % en agua. 2.- Prepare 25 ml de hidrxido de sodio 0.1 N en agua. 3.- Prepare 25 ml de cido clorhdrico 0.1 N en agua. 4.- Prepare 25 ml de hidroxido de amonio 0.1 N en agua.
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Comportamiento del aceite mineral. Vierta en una placa petri como se describe a continuacin: 1.- Vierta 10 ml de agua 2.- Vierta 10 ml de solucin de HCl . 3.- Vierta 10 ml de solucin de NaOH A cada placa agregue una gota de aceite mineral con una pipeta. Observe. Aada unas gotas ms y observe. Mantenga las muestras en observacin durante 30 minutos. Comportamiento del cido oleico (aceite de oliva). 1.- Vierta 10 ml de agua 2.- Vierta 10 ml de solucin de HCl . 3.- Vierta 10 ml de solucin de NaOH 4.- Vierta 10 ml de solucin de hidroxido de amonio A cada placa agregue una gota de aceite de oliva coloreado con SUDAN III con una pipeta Pasteur. Observe. Aada unas gotas ms y observe. Mantenga las muestras en observacin durante 30 minutos. Lave y caliente al rojo la punta de un clip o pinza, posteriormente colocarlo en una placa con agua adicionar una pequea gota de cido oleico. Observe. Coloque una segunda gota sobre la superficie. Observe. Nota: para la eliminacin de las sustancias, neutralizar los residuos cidos con bicarbonato de sodio, y los residuos alcalinos con bicarbonato de sodio. 6. RESULTADOS Y DISCUSION Revise las estructuras qumicas de los compuestos utilizados en el experimento. Identifique las propiedades fsicas y qumicas de los grupos funcionales de los compuestos utilizados. Explique las variaciones en trminos de las fuerzas que actan entre el aceite de oliva, el aceite mineral y las diferentes soluciones.
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7. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
8. BIBLIOGRAFIA Miller D.D. 2001. Qumica de Alimentos, Manual de Laboratorio. Limusa Wiley, Mxico
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LABORATORIO N 03 PREPARACIN DE SOLUCIONES ISOTNICAS, HIPOTNICAS E HIPERTNICAS.

1.
OBJETIVO Comparar los procesos fsicos de difusin, osmosis y dilisis con el proceso fisiolgico mediante el cual las molculas se transportan a travs de las membranas celulares. Visualizar y diferenciar los fenmenos de osmosis y dilisis en clulas y modelos celulares. Demostrar la importancia que tienen las concentraciones de distintas soluciones en el mantenimiento de la integridad de las clulas vegetales y animales.
2. MARCO TEORICO
La existencia de la membrana plasmtica que rodea las clulas, funciona como una especie de "muro comunicante" que separa dos compartimentos, el extracelular y el intracelular. Esta separacin trae como consecuencia que las diferentes molculas e iones se distribuyan de manera asimtrica estableciendo diferenciales de concentracin y cargas elctricas que promueven el intercambio entre ambos compartimentos. Estas molculas e iones, pueden atravesar las membranas biolgicas mediante diferentes mecanismos, dependiendo de la naturaleza polar, el tamao de ellas y la diferencia de concentracin. Dentro del grupo de molculas que pueden atravesar las membranas, el paso de agua es muy importante para las clulas, porque utiliza un mecanismo particular que puede contribuir a disminuir diferencias extremas en las concentraciones de las sustancias disueltas entre los compartimentos, permitir la adaptacin celular al medio ambiente o causar la destruccin de la misma. Este flujo de agua y/o de diferentes sustancias puede traer como consecuencia cambios en la morfologa de clula que pueden ser apreciables al microscopio. El agua se mueve fcilmente cruzando las membranas celulares, a travs de canales especiales revestidos de protena. Si el total de la concentracin de todos los solutos disueltos no es igual en ambos lados, habr un movimiento neto de molculas de agua Pgina 19
hacia dentro o fuera de la clula. Para donde es el movimiento del agua, depende si el medio donde se encuentra la clula es isotnico, hipotnico o hipertnico.
3. MATERIALES Y EQUIPOS
Equipos materiales Microscopios Porta y cubre objetos Tubo de ensayo Gradilla para tubos de ensayos Papel milimetrado Lancetas estriles Cuchillas Vaso de precipitado de 250mL Papel celofn Goteros Algodn Reactivos Solucin de almidn Solucin de lugol Soluciones hipo, iso e hipertnicas de cloruro de sodio Solucin de permanganato de potasio. Hojas de planta acuatica. Hojas de lirio
4. METODOLOGIA El alumno tendr que aplicar el mtodo experimental para el desarrollo de esta prctica as como el mtodo analtico para obtener los resultados citados. 5. DESCRIPCION DE LA PRACTICA Difusin: Coloque en tres tubos de ensayo 5 ml de agua destilada, a igual temperatura y numrelos. Agregue en cada tubo un nmero de gotas de permanganato de potasio en la siguiente forma: Tubo No. 1 = 1 gota Tubo No. 2 = 3 gotas Tubo No. 3 = 5 gotas
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Mida el tiempo de difusin en cada caso, para ello anote el tiempo inicial cuando se agreg el colorante y el tiempo final en que se difundi totalmente. La diferencia entre ambos es el tiempo de difusin. Haga una grfica en papel milimetrado de concentracin (# de gotas) vs. tiempo de difusin. Osmosis: 1.- Deposite una hojita de planta acutica en un porta objeto, adicinele tres gotas de solucin hipotnica, pngale el cubreobjeto y observe con menor y mayor aumento. Dibuje. Observa algn movimiento en los cloroplastos? Que nombre recibe este fenmeno? Segn el concepto de osmosis en qu sentido se debe difundir el agua? 2.- Deposite una hojita de planta acutica en un porta objeto y agrguele tres gotas de una solucin hipertnica de cloruro de sodio, pngale el cubre objeto y observe con menor y mayor aumento. Haga un esquema de lo observado. Que cambios se presentan en el citoplasma de las clulas que usted observa? Que nombre recibe este fenmeno? Plasmolisis: Extraiga con una cuchilla un pedacito de epidermis del envs de una hoja de lirio, trate que quede libre de clorofila. Cuidando que no se arrugue depostela en el porta objeto y adicinele tres gotas de solucin hipotnica. Ponga el cubre objeto y observe. Dibuje Haga un nuevo montaje de epidermis de hoja de lirio, pero con una solucin hipertnica. Observe y dibuje. En cual de las dos muestras, planta acutica y epidermis de hoja de lirio, se observa mejor el fenmeno de plasmlisis? Explique Por qu? Dilisis: Usando papel celofn, elabore una bolsa (tubo de dilisis) y coloque en ella una solucin de almidn. Amarre fuertemente el otro extremo de la bolsa y suspndala en un beaker o tubo de ensayo con agua destilada. Luego aada solucin de yodo (lugol) al agua de dicho beaker o tubo de ensayo. Tome nota de la coloracin caracterstica. Pgina 21
6. RESULTADOS Y DISCUSION 1S se vara la temperatura del agua en los tubos del numeral de la practica de difusin: a) Qu efecto tiene la temperatura sobre la velocidad de difusin? b) Cul es el efecto de la concentracin sobre la velocidad de difusin? c) Investigue la ley de difusin de Graham y la primera ley de Fick. 1 2Qu diferencia observ entre las clulas de plantas acuacticas y la epidermis de lirio? 3Como se llaman las estructuras respiratorias que hacen parte del tejido de epidermis de lirio? 4Defina que son soluciones iso, hipo, e hipertnicas? 5Como se podra desplasmolizar una clula? 6Por que no estalla una clula vegetal cuando se encuentra en un medio hipotnico? 7Qu es permeabilidad diferencial? 8Qu es presin osmtica? 9Qu es presin de turgencia? 10A que se le llama transporte pasivo? 11En que consiste el transporte activo y el facilitado? 12Cual es la diferencia entre smosis y dilisis?
7. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
8. BIBLIOGRAFIA
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Miller D.D. 2001. Qumica de Alimentos, Manual de Laboratorio. Limusa Wiley, Mxico
LABORATORIO N 04 RECONOCIMIENTO DE LAS PROTEINAS

1. OBJETIVO Identificar a travs de pruebas bioqumicas las protenas existentes en soluciones problemas 2. MARCO TEORICO Coagulacin de Protenas; Las protenas, debido al gran tamao de sus molculas, forman con el agua soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formacin de cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70 C o al ser tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc. La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin por los agentes indicados, que al actuar sobre la protena la desordenan por la destruccin de su estructura terciaria y cuaternaria
Reaccin Xantoproteica: Es debida a la formacin de un compuesto aromtico nitrado de color amarillo, cuando las protenas son tratadas con cido ntrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas protenas con aminocidos portadores de grupos bencnicos, especialmente en presencia de tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un lcali vira a un color anaranjado oscuro.
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Reaccin de Biuret: La producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos, ya que se debe a la presencia del enlace peptdico (- CO- NH -)que se destruye al liberarse los aminocidos. Cuando una protena se pone en contacto con un lcali concentrado, se forma una sustancia compleja denominada Biuret, de frmula:
que en contacto con una solucin de sulfato cprico diluida, da una coloracin violeta caracterstica. Reaccin de los aminocidos azufrados: Se pone de manifiesto por la formacin de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se basa esta reaccin en la separacin mediante un lcali, del azufre de los aminocidos, el cual al reaccionar con una solucin de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo. 3. MATERIALES Y EQUIPOS
Equipos materiales Tubos de ensayo Gradilla Varillas de vidrio Mechero Vasos de precipitados Pipetas Bageta
Reactivos Clara de huevo Acido nitrico concentrado Hidroxido de sodio a 40 % Hidroxido de sodio al 20 % Sulfato cuprico al 1 % Acetato de plomo al 5 %
4.
METODOLOGIA
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El alumno tendr que aplicar el mtodo experimental para el desarrollo de esta practica as como el mtodo analtico para obtener los resultados citados. 5. DESCRIPCION DE LA PRACTICA REACCIN XANTOPROTEICA: 1. Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de solucin problema (clara de huevo). 2. Aadir 1 cc. de HNO3 concentrado. 3. Calentar al bao mara a 100: C.. 4. Enfriar en agua fra 5. Aadir gota a gota una disolucin de sosa al 40%. REACCIN DE BIURET: 1. Tomar un tubo de ensayo y poner unos 3 cc. de albmina de huevo. 2. Aadir 2cc. de solucin de hidrxido sdico al 20%. 3. A continuacin 4 5 gotas de solucin de sulfato cprico diluida al 1%. Debe aparecer una coloracin violeta-roscea caracterstica. REACCIN DE LOS AMINOCIDOS AZUFRADOS 1. Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de albmina de huevo (clara de huevo). 2. Aadir 2 cc. de solucin de hidrxido sdico al 20%. 3. Aadir 10 gotas de solucin de acetato de plomo al 5%. 4. Calentar el tubo hasta ebullicin. 5. Si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que se ha formado sulfuro de plomo, utilizndose el azufre de los aminocidos, lo que nos sirve para identificar protenas que tienen en su composicin aminocidos con azufre. 6. RESULTADOS Y DISCUSION Describir lo encontrado en la experiencia realizada.
7.
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES El reconocimiento de las protenas es importante para tener como base la composicin de los alimentos para su posterior reformulacin en los diferentes productos a realizar.
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8.
BIBLIOGRAFIA Bioqumica de Lehninger; Ediciones Omega SA.
9.
CUESTIONARIO 1. Cmo se manifiesta la desnaturalizacin de la clara de huevo? 2. Cul de los tres agentes utilizados tiene mayor poder de desnaturalizacin? 3. Cmo podramos saber que una sustancia desconocida es una protena? 4. Qu coloracin da la reaccin del Biuret? 5. Una protena coagulada podra dar la reaccin del Biuret? 6. Si se realiza la reaccin del Biuret sobre un aminocido como la Glicina es positiva o negativa? Por qu?
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LABORATORIO N 05 EXTRACCIN DE LA CASEINA Y DETERMINACIN DEL PUNTO ISOELECTRICO

2. OBJETIVO La determinacin del punto isoelctrico de la casena una vez extrada, mediante procedimiento qumico de la leche entera liquida. 3. MARCO TEORICO La leche contiene vitaminas (principalmente tiamina, riboflavina, cido pantotico y vitaminas A, D y K), minerales (calcio, potasio, sodio, fsforo y metales en pequeas cantidades), protenas (incluyendo todos los aminocidos esenciales), carbohidratos (lactosa) y lpidos. Los nicos elementos importantes de los que carece la leche son el hierro y la vitamina C. La casena es una protena conjugada de la leche del tipo fosfoprotena que se separa de la leche por acidificacin y forma una masa blanca. Las fosfoproteinas son un grupo de protenas que estn qumicamente unidas a una sustancia que contiene cido fosfrico. En la casena la mayora de los grupos fosfato estn unidos por los grupos hidroxilo de los aminocidos serina y treonina. La casena en la leche se encuentra en forma de sal clcica (caseinato clcico). La casena representa cerca del 77% al 82% de las protenas presentes en la leche y el 2,7% en composicin de la leche lquida. La casena est formada por alpha(s1), alpha(s2)-casena, -casena, y kappa-casena formando una micela o unidad soluble. Ni la alfa ni la beta casena son solubles en la leche, solas o combinadas. Si se aade la kappa casena a las dos anteriores o a cada una de ellas por separado se forma un complejo de casena que es solubilizado en forma de micela. Esta micela est estabilizada por la kappa casena mientras que las alfa y beta son fosfoprotenas que precipitan en presencia de iones calcio.
La kappa casena, sin embargo, tiene pocos grupos fosfato y un alto contenido de carbohidratos unidos a ella. Tambin tiene todos sus residuos de serina y treonina con sus correspondientes grupos hidroxilo, as como los carbohidratos dispuestos en una sola cara de su superficie por lo que esta parte exterior es fcilmente soluble en agua gracias a los grupos polares que posee. La otra parte de su superficie se une fcilmente a las alfa y beta casena insolubles, lo que da lugar a la formacin de la micela. La propiedad caracterstica de la casena es su baja solubilidad a pH 4,6. El pH de la leche es 6,6 aproximadamente, estando a ese pH la casena cargada negativamente y solubilizada como sal clcica. Si se aade cido a la leche, la carga negativa de la superficie de la micela se neutraliza (los grupos fosfato se protonan) y la protena neutra precipita Ca2+ Caseinato + 2HCl Casena + CaCl2 La conformacin de la casena es similar a las protenas desnaturalizadas globulares. El alto numero de residuos de prolina en la casena causa un especial plegamiento en la cadena de protena e inhibe la formacin de una fuerte y ordenada estructura secundaria. La casena no contiene puentes di sulfuro. De igual manera la falta de estructura secundaria es importante para la estabilidad de la casena frente a la desnaturalizacin por calor. La carencia de estructura terciaria facilita la situacin al exterior de los residuos hidrofbicos lo que facilita la unin entre unidades proteicas y la convierte en prcticamente insoluble en agua. En cambio es fcilmente dispersable en lcalis diluidas y en soluciones salinas tales como oxalato sdico y acetato sdico. La funcin biolgica de las micelas de caseina es transportar grandes cantidades de Ca y P altamente insoluble en forma liquida a los lactantes y formar un coagulo en el estomago para favorecer una nutricin eficiente. Adems de casena, Ca y P la micela formada tambin contiene citrato, iones, lipasa, enzimas plasmticos y suero. Estas micelas ocupan del 6-12% del volumen total de la leche. Las protenas que aparecern en el sobrenadante cuando precipitemos la casena en medio cido son protenas globulares, hidrofilicas y fcilmente solubles en agua as como susceptibles
de desnaturalizacin por calor. Las principales son -lacto globulina, alphalactalbumina, bovine serum albumin (BSA), y inmunoglobulinas (Ig). La casena se emplea en la industria para la fabricacin de pinturas especiales y en el apresto de tejidos, la clarificacin de vinos, la elaboracin de preparados farmacuticos y la fabricacin de plsticos. La pintura de casena ha sido usada desde la antigedad por los egipcios. PUNTO ISOELECTRICO: Todas las macromolculas de la naturaleza adquieren una carga cuando se dispersan en agua. Una caracterstica de las protenas y otros biopolmeros es que la carga total que adquieren depende del pH del medio. As, todas las protenas tienen una carga neta dependiendo del pH del medio en el que se encuentren y de los aminocidos que la componen, as como de las cargas de cualquier ligando que se encuentre unido a la protena de forma covalente (irreversible). Debido a la composicin en aminocidos de la protena, los radicales libres pueden existir en tres formas dependiendo del pH del medio: catinicos, neutros y aninicos. Cualquier protena tendra una carga neta positiva si se encuentra en un medio lo suficientemente cido debido a que los grupos COOH de los aminocidos asprtico y glutmico estaran en su forma neutra pero los grupos amino de Arginina y lysina estaran protonados (-NH3 +). De igual forma si la protena se encuentra en un medio con un pH muy alto estara cargada negativamente ya que en este caso los grupos carboxilo estaran desprotonados (COO-) y los grupos amino estaran en su forma neutra (NH2). De lo anterior se deduce que las protenas tienen un pH caracterstico al cual su carga neta es cero. A este pH se le denomina punto isoelctrico (pI). En el punto isoelctrico (pI), se encuentran en el equilibrio las cargas positivas y negativas por lo que la protena presenta su mxima posibilidad para ser precipitada al disminuir su solubilidad y facilitar su agregacin. Si suponemos una protena formada nicamente por aminocidos sin grupos laterales ionizables la carga neta de la protena dependera exclusivamente de la protonacin / desprotonacin de los grupos amino y carboxilo terminal. En la realidad las protenas estn formadas por multitud de aminocidos unidos mediante enlaces peptdicos y la carga va a depender de los grupos ionizables que poseen los aminocidos que la componen (anexo I) y del pH del medio.
4.
MATERIALES Y EQUIPOS
5.
Equipos materiales Dos vasos de precipitados de 50ml Un vaso de precipitado de 250ml Probeta de 50ml Matraz aforado de 50 ml pipeta graduada de 5,0 ml pipeta graduada de 1,0 ml pipeta graduada de 10,0 ml Embudo de vidrio mediano Papel de filtro Termmetro
Reactivos Agua destilada Acetato sdico 0,1 N cido actico 0,01 N cido actico 0,1 N cido actico 1,0 N NaOH 1N ter etlico Etanol al 70% Soluciones buffer pH 4,0 y 7,0 para calibrar el potencimetro Potencimetro (pH-metro) Leche entera corriente ( 1 litro)
6.
DESCRIPCION DE LA PRACTICA AISLAMIENTO DE LA CASENA:
1. Caliente en un vaso de precipitado 150ml de agua destilada a 38C, aada 50ml de leche y
luego gota a gota y con agitacin, adicione cido actico 1M hasta que observe que se forma un precipitado (la leche se corta).
2. Deje sedimentar y filtre sobre papel de filtro usando un embudo de cristal. 3. Lave el precipitado con 20ml de etanol en el mismo filtro. 4. Seque el precipitado colocando varios pliegues de papel de filtro. 5. Coloque el precipitado en un vaso de precipitado pequeo previamente pesado, vuelva a
pesar el vaso con el precipitado y luego adicione 5ml/g de ter etlico.
6. Filtre nuevamente. 7. Deseche el lquido quedando un precipitado blanco de fcil manipulacin que es la 8. casena.
PREPARACIN DE LA SOLUCIN DE CASENA:
1. Coloque aproximadamente 250 mg de casena en un vaso de 50ml. 2. Agregue 20ml de agua destilada y 5 ml de NaOH 1N; agite hasta lograr una solucin total de
la casena.
3. Una vez disuelta la casena, se vierte en un matraz aforado de 50 ml, adicione 5 ml de cido
actico 1N y diluya con agua destilada hasta 50ml y mezcle bien.
4. La solucin debe ser clara y limpia y si no es as, debe volver a filtrar.

DETERMINACIN DEL PI DE LA CASENA:
1. En diez vasos de 25 ml limpios y secos adicione exactamente los volmenes de los

reactivos segn la siguiente tabla:
2. 2. 2. 2. 2. 2. 2. 2. 2. 2. 2. 2. 2. 2. 2.
Medir experimentalmente el pH de todos los vasos, que debe cubrir un rango aproximado semejante al terico (3 a 6,5).
3. Anotar los valores reales en la Tabla, que deben ser semejantes a los expresados y en todo
caso crecientes.
4. Aadir 1 ml de disolucin de casena a cada tubo. 5. Agitar suavemente cada uno y esperar aproximadamente 3 minutos. 6. Medir la absorbancia de cada muestra a 640 nm con las cubetas de colorimetra de 1 cm de
paso ptico, teniendo la precaucin de agitar bien el contenido de cada tubo para obtener una solucin / suspensin homognea antes de verter una parte en la cubeta.
7. Anotar resultados, representar la absorbancia frente al pH, y determinar el pI aproximado de

la casena. 7. RESULTADOS Y DISCUSION Anotar los resultados obtenidos en la practica
8.
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES El aislamiento de la casena en la leche se realiza para la determinacin de la existencia de dicha protena en la misma as como el reconocimiento de su estado bsico o lcali, como modelo para el aislamiento de otras protenas.
9.
BIBLIOGRAFIA Miller D.D. 2001. Qumica de Alimentos, Manual de Laboratorio. Limusa Wiley, Mxico
10.
CUESTIONARIO
1. Cul es el punto isoelctrico de la casena? 2. Por qu las protenas tienen solubilidad mnima en el pI?
LABORATORIO N 06 RECONOCIMIENTO DE LA PROTEINA EN LA CLARA DE HUEVO.

2. OBJETIVO El objetivo de esta prctica consiste en reconocer la presencia de protenas en la clara de huevo. Para ello utilizaremos la prueba Xantoproteica. 3. MARCO TEORICO En el caso de haber protenas en la clara de huevo, al aadir HNO3 y calentarlo, sta debe tomar un color amarillo suave, y al aadir NH3 deber tomar un tono anaranjado. Experimentacin Tenemos clara de huevo en un vaso de precipitado. Tomamos una muestra con una jeringuilla y la vertemos en un tubo de ensayo. Aadimos el HNO3 y calentamos: Resultados Dado que los resultados de la prueba Xantoproteica dan positivos, queda demostrada la presencia de protenas en la clara de huevo. El hecho de que la clara solidifique en contacto con el HNO3 es debido a que al cambiar el pH de la disolucin, las protenas que en ella hay se denaturalizan y se vuelven insolubles. 4. MATERIALES Y EQUIPOS
Equipos materiales Dos vasos de precipitados de 50ml Un vaso de precipitado de 250ml Probeta de 50ml Matraz aforado de 50 ml pipeta graduada de 5,0 ml pipeta graduada de 1,0 ml pipeta graduada de 10,0 ml Tubo de ensayo
Reactivos Agua destilada Acetato sdico 0,1 N cido actico 0,01 N cido actico 0,1 N cido actico 1,0 N
5.
6.
DESCRIPCION DE LA PRACTICA 1. Colocar en un tubo de ensayo una pequea cantidad de clara de huevo. 2. Aadir 5 gotas de cido actico y calentar el tubo a la llama del mechero. 3. Observar al experiencia
7.
RESULTADOS Y DISCUSION
8.
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
9.
LABORATORIO N 07 RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS

1. OBJETIVO: Que el alumno reconozca la presencia de un monosacrido, as como su fundamente terico establecido. 2. MARCO TEORICO: Los glcidos son compuestos orgnicos constituidos por carbono, hidrgeno y oxgeno; en algunos casos pueden tener adems otros elementos qumicos como nitrgeno o azufre. Se les ha llamado hidratos de carbono porque algunos responden a la frmula general Cn(H2O)m y azcares por su sabor dulce, aunque slo los de baja masa molecular lo tienen. Qumicamente son polihidroxialdehdos, polihidroxicetonas, sus derivados o sus polmeros. Algunos son molculas de relativamente baja masa molecular; la glucosa tiene una Mm=180 da. Otros, como el almidn, tienen masas moleculares de ms de 100000 da y son grandes molculas, macromolculas. Sus propiedades fsicas y qumicas son muy variadas. Y en cuanto a sus funciones biolgicas: La glucosa, sacarosa, glucgeno y almidn son sustancias energticas. Los seres vivos obtienen energa de ellas o las usan para almacenar energa. Esta energa est contenida en determinados enlaces que unen los tomos de estas molculas. glcidos. Celulosa y quitina son estructurales. Forman parte de las paredes de las clulas Ribosa y desoxirribosa forman parte de los cidos nucleicos. vegetales (celulosa) o de las cubiertas de ciertos animales (quitina).
Estos son slo algunos ejemplos que nos pueden ilustrar sobre las funciones que cumplen los
CLASIFICACIN DE LOS GLCIDOS Atendiendo a su complejidad se clasifican en:
A)
Monosacridos u osas: Son los ms sencillos. No son hidrolizables; esto es, no se
pueden descomponer por hidrlisis en otros glcidos ms simples. Qumicamente son polihidroxialdehdos, polihidroxicetonas o sus derivados. Un polihidroxialdehdo es un compuesto orgnico que tiene una funcin aldehdo en el primer carbono y en los restantes carbonos una funcin alcohol. Las polihidroxicetonas en lugar de una funcin aldehdo tienen una funcin cetona, normalmente en el carbono 2. Los monosacridos que tienen funcin aldehdo se llaman aldosas y cetosas los que tienen una funcin cetona. Los monosacridos responden a la frmula emprica Cn(H2O)n, de aqu proviene el nombre de hidratos de carbono. El valor de n normalmente est comprendido entre 3 y 7. Segn el nmero de tomos de carbono se clasifican en : Triosas........n=3 Tetrosas.......n=4 Pentosas.......n=5 Hexosas........n=6 Heptosas.......n=7 As, un monosacrido con 6 tomos de carbono y con la funcin aldehdo ser una aldohexosa; si tiene cuatro tomos de carbono y una funcin cetona, ser una cetotetrosa, y as sucesivamente. Constituyen los monmeros a partir de los cuales se forman los dems glcidos. Fsicamente los monosacridos son slidos, cristalinos, incoloros o blancos, de sabor dulce. Como los grupos hidroxilo son polares, los monosacridos son muy solubles en agua, pues se establecen enlaces polares con las molculas de agua. Qumicamente el grupo carbonilo reduce fcilmente los compuestos de cobre (licor Fehling) y de plata oxidndose y pasando a grupo cido. Esta propiedad es caracterstica de estas sustancias y permite reconocer su presencia, pues la reduccin de las sales cpricas del licor de Fehling a cuprosas hace virar el reactivo del azul al rojo ladrillo.
Cu+ +-----------------Cu+ Azul rojo
B) sidos: Formados por la unin de varios monosacridos mediante enlaces "Oglicosdicos",pudiendo poseer en su molcula otros compuestos diferentes de los glcidos. Son hidrolizables, descomponindose en los monosacridos y dems compuestos que los constituyen. Se dividen en: Holsidos: Son aquellos que estn constituidos por carbono, hidrgeno y oxgeno, exclusivamente. A su vez se subclasifican en: Oligosacridos, formados por entre 2 y 10 monosacridos unidos. Polisacridos, formados por un gran nmero de monosacridos. Hetersidos. Formados por osas y otros compuestos que no son glcidos. Por lo tanto, adems de carbono, hidrgeno y oxgeno, contienen otros elementos qumicos. ESQUEMA DE IDENTIFICACIN
(-) No azcar Benedict (-) no reductor: Sacarosa (hidrlisis y selivanoff) Baraun (+) Azcar Molisch Fehling Espejo de plata (+) monodacarido Selivanolf (-) tollens (-) glucosa (+) fructuosa (+)galactosa (+) Reductor Barfoed (-) disacrido lactosa (hidrlisis y barfoed)
I. REACCIN DE MOLISCH: Esta reaccin sirve para el reconocimiento de todo tipo de azcares. Los azcares, en medio cido fuerte se deshidratan formando furfurales. Estos furfurales al reaccionar con el a-naftol originan complejos de intenso color. II. REACCIN DE FEHLING: Esta prueba se utiliza para el reconocimiento de azcares reductores. El poder reductor que pueden presentar los azcares proviene de su grupo
carbonilo, que puede ser oxidado a grupo carboxilo con agentes oxidantes suaves. Si el grupo carbonilo se encuentra combinado no puede presentar este poder reductor. Los azcares reductores, en medio alcalino, son capaces de reducir el in Cu2+ de color azul a Cu+ de color rojo. Para ello el grupo carbonilo del azcar se oxida a grupo carboxilo. En medio fuertemente bsico como en nuestro caso el NaOH el in Cu2+ formara Cu (OH)2 insoluble por eso aadimos tartrato sdico potsico que acta como estabilizador al formar un complejo con el Cu2+. III. REACCIN DE BENEDICT: Esta prueba sirve para el reconocimiento de azcares reductores. Se basa en la reduccin de Cu2+ a Cu+ en medio bsico dbil. Aunque es similar a la reaccin de Fehling, el medio bsico dbil (HNaCO3) y el estabilizante (citrato sdico) usados hacen que este test sea ms sensible y estable. IV. REACCIN DE BRAUN: Esta reaccin sirve para el reconocimiento de azcares reductores. Los azcares reductores en medio alcalino pueden reducir el picrato, de color amarillo, a picramato, de color rojo en medio alcalino (Na2CO3). V. PRUEBA DE BARFOED: Esta prueba sirve para el reconocimiento de monosacridos. En medio cido, tan slo los monosacridos son capaces de reducir el Cu2+ a Cu+. El Cu+ as producido reduce al cido fosfomolbdico a un complejo de intenso color azul oscuro. VI. PRUEBA DEL ESPEJO DE PLATA: Esta prueba sirve para el reconocimiento de monosacridos. Los monosacridos son capaces de reducir, en medio amoniacal, el in Ag+ a Ago (plata metlica), que se deposita en las paredes del tubo. VII. PRUEBA DE SELIVANOFF: Esta prueba es especfica para las cetosas. Las cetosas se deshidratan ms rpidamente que las aldosas, dando furfurales. Estos se condensan con el resorcinol produciendo un complejo coloreado. Si el tiempo de ebullicin se prolonga, puede dar tambin positivo para otros azcares. VIII. PRUEBA DE TOLLENS: Esta prueba es anloga a la de Selivanoff, pero para el reconocimiento de galactosa y sus derivados. La galactosa, algunas pentosas y el cido
glucurnico dan un color rojo con el HCl y floroglucina. La glucosa da tambin un color rojo con la floroglucina, pero muy opaco, en contraste con el color rojo transparente de la galactosa. IX. HIDRLISIS CIDA DE UN DISACRIDO: En el caso de que la disolucin problema de azcar fuese sacarosa o lactosa se hace una comprobacin. En primer lugar se hidroliza el disacrido en sus componentes (sus dos monosacridos) mediante una hidrlisis cida X. PRUEBA DEL AZUL DE METILENO: A una solucin de glucosa en medio bsica (20 g de glucosa y 25 g de KOH en 1 l) se le agregan unas gotas de azul de metileno al 1%. Agitar, observar su coloracin y dejar reposar unos minutos. Observar el cambio de color y agitar nuevamente. Repetir el proceso numerosas veces. 3. MATERIALES Y EQUIPOS
Equipos materiales Balanza analtica Vagetas Tubos de ensayo Gradilla Mechero bunsen Pipeta de 10 ml. Vasos precipitados 250 ml. Vasos precipitados de 100 ml. Matraz de 100 ml Fiolas 100 ml.
Reactivos Glucosa Sacarosa Fructosa Lactosa Galactosa -naftol al 1% Acido sulfurico concentrado Fehling A Fehling B Reactivo benedict Acido picrico saturado Carbonato de sodio Disolucin acida de cobre Nitrato de plata Amoniaco al 30% Reactivo Saliwanoff Acido clohidrico concentrado
Dloroglucina Acido clohidrico al 0.1 N Azul de metileno al 1 %
4.
5.
DESCIPCION DE LA PRACTICA Laboratorio 03-01: REACCIN DE MOLISCH Precaucin: el cido sulfrico concentrado puede causar quemaduras graves en la piel. Manejarlo con mucho cuidado. 1. Pipetear en un tubo de ensayo 2 ml de disolucin de azcar problema 2. Aadir 2 gotas de -naftol al 1% y se mezclar bien. 3. Con una pipeta se dejan resbalar por la pared del tubo de ensayo 2 ml de cido sulfrico concentrado con mucho cuidado procurando que no se mezcle para que forme una capa bajo la disolucin de azcar. En la superficie de separacin de ambas capas se producir la deshidratacin del azcar y su reaccin con el a-naftol formndose un anillo de color oscuro en dicha interfase. Molisch positivo: anillo oscuro. REACCIN DE FEHLING 1. Mezclar en un tubo de ensayo: Fehling A (CuSO4) 2 ml
Fehling B (Tartrato/NaOH) 2 ml 2. Agitar y calentar a ebullicin (aproximadamente 1 min). 3. Aadir 1 ml de la disolucin de azcar y hervir durante un minuto. Si se reduce el cobre se forma un precipitado de Cu2O de color rojizo. Fehling positivo: color rojizo. REACCIN DE BENEDICT 1. Pipetear en un tubo de ensayo 5 ml de reactivo de Benedict 2. Calentar a ebullicin. 3. Aadir 1 ml de la solucin de azcar, mezclar bien y se volver a calentar a ebullicin. Si la reaccin es positiva aparece un precipitado rojizo, aunque si la cantidad de azcar es pequea puede dar color anaranjado o verdoso REACCIN DE BRAUN 1. Aadir en un tubo de ensayo: - Disolucin de azcar 4 ml - cido pcrico saturado 2 ml (OJO, MUY VENENOSO) - Na2CO3 1M 2 ml 2. Calentar a ebullicin. Si el test es positivo, el color amarillo pasa a rojo. PRUEBA DE BARFOED 1. Pipetear en un tubo de ensayo: - Disolucin de azcar 1 ml - Disolucin cida de cobre 1 ml 2. Calentar a ebullicin durante 3 minutos. 3. Enfriar en agua durante 2 min 4. Aadir 1 ml del reactivo de fosfomolibdato. Si la prueba es positiva aparece un color azul oscuro muy intenso. PRUEBA DEL ESPEJO DE PLATA 1. Aadir en un tubo de ensayo: - AgNO3 1% 1 ml
- NH3 30% 1 ml - Disolucin de azcar 1 ml 2. Mezclar bien y se calentar durante 2 minutos. 3. Sacar y dejar reposar. Si el ensayo es positivo la plata metlica, que precipita, se va depositando en la pared deltubo formando un espejo (espejo de plata). PRUEBA DE SELIVANOFF 1. En un tubo de ensayo pyrex se aadir: - Reac. Selivanoff (resorcinol/HCl) 1 ml - Disolucin de azcar 1 ml 2. Hervir durante 1 minuto en el bao a ebullicin. La aparicin de un color rojo o un precipitado rojo es indicativa de la presencia de cetosas. PRUEBA DE TOLLENS 1. Aadir en un tubo: - Disolucin de azcar 2 ml - HCl (concentrado) 2 ml - Floroglucina (Tollens) 0,1 ml 2. Calentar a ebullicin. El color puede aparecer hasta 5 minutos despus de calentar. HIDRLISIS CIDA DE UN DISACRIDO 1. En un tubo de ensayo limpio aadir: - Disolucin problema 1 ml - HCl 0,1N 1 ml 2. Hervir durante 1 minuto. 3. Realizar la prueba de Selivanoff si se trata de sacarosa o la reaccin de Barfoed si se trata de lactosa. PRUEBA DEL AZUL DE METILENO A una solucin de glucosa en medio bsico (20 g de glucosa y 25 g de KOH en 1 l)
se le agregan unas gotas de azul de metileno al 1%. Agitar, observar su coloracin y dejar reposar unos minutos. Observar el cambio de color y agitar nuevamente. Repetir el proceso numerosas veces. 6. RESULTADOS Y DISCUSION GLUCOSA MOLISCH FEHLING BENEDICT BRAUN BARFOED ESP. PLATA SELIVANOFF TOLLENS 7. CONCLUSION Y RECOMENDACIONES La prctica realizada indicara el reconocimiento cualitativo de los glusidos, basado en reacciones con sustancias y permitiendo el reconocimiento. Realizar la practica con gafas previniendo cualquier accidente. 8. BIBLIOGRAFIA Bioqumica de Lehninger; Ediciones Omega SA. 9. CUESTIONARIO 1. Explicar brevemente qu funcin tienen los siguientes compuestos: - Citrato sdico. - Cu2+ - H2SO4 - cido pcrico - Ag+ - Tartrato sdico potsico 2. Cmo se explica el experimento del azul de metileno? SACAROSA FRUCTOSA LACTOSA GALACTOSA
LABORATORIO N 08 RECONOCIMIENTO E HIDRLISIS DEL ALMIDON
1. OBJETIVO Que el alumno reconozca un polisacrido y su hidrlisis. 2. MARCO TEORICO Es un polisacarido de reserva vegetales. Para reconocerlo se utiliza la solucin de Lugol. (yodo y yoduro potasico en medio acido). Al aadir tal solucin el almidn adquiere una coloracin oscura, azul-violeta. Esta coloracin no es debida a ninguna reaccin qumica sino a que el lugol se adsorbe a la superficie del almidn, de forma que si lo calentamos se separan y la coloracin desaparece. El almidn cuando se hidroliza libera amilasa y amilo pectina, si la hidrlisis prosigue se van liberando oligosacardos de glucosa y finalmente glucosas. 3. MATERIALES Y EQUIPOS Equipos materiales Tubos de ensayo Cuentagotas Pipeta Luna de reloj Porta y cubre objetos Microscopio Vaso de precipitado Tripo con rejilla Mechero de ron vidrio Mechero Vasos de precipitados Pipetas Cuchillo Reactivos Solucin de almidn. Solucin de lugol Reactivos de Fehling A y B Papa
4. METODOLOGIA El alumno tendr que aplicar el mtodo experimental para el desarrollo de esta practica as como el mtodo analtico para obtener los resultados citados. 5. DESCRIPCION DE LA PRACTICA HIDRLISIS DEL ALIMIDON 1. Colora en un tubo de ensayo 2 ml. De solucin de almidn, y aadir 2 o 3 gotas de lugol. 2. Observar y anotar la coloracin. HIDRLISIS DEL ALIMIDON DE LA PAPA 1. Colorar el liquido re raspado de la papa en un portaobjetos, aadir un poco de lugol y observar en un microscopio la forma de los granos de almidn. 2. Se puede hacer una observacin antes de la aplicacin del lugol. 3. Colocar en un tubo de ensayo 2ml de aceite y 2ml de NaOH al 20%.. 4. Agitar enrgicamente y colocar el tubo al bao Mara de 20 a 30 minutos. 5. Pasado este tiempo, se pueden observar en el tubo 3 fases: una inferior clara que contiene la solucin de sosa sobrante junto con la glicerina formada, otra intermedia semislida que es el jabn formado y una superior lipdica de aceite inalterado. PODER REDUCTOR DEL ALMIDON
1. Colocar en un tubo 2 ml. De almidn mas 1 ml. De fehling A mas 1 ml. De fehling B 2. Calentar al bao mara y observar lo que ocurre. 3. Colocar en un tubo 2 ml de almidn mas saliva, para que la hidrlisis se favorezca
calentamos el tubo en bao mara y dejamos transcurrir 10 minutos.
4. Aadir 1 ml. De reactivo Fehling a y 1 ml. De fehling B calentamos y observamos lo

ocurrido.
6. RESULTADOS Y DISCUSION Colocar sus apreciaciones Laboratorio 04-01 Laboratorio 04-02 Laboratorio 04-03
7. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES Realizar la practica con gafas previniendo cualquier accidente. 8. BIBLIOGRAFIA Bioqumica de Lehninger; Ediciones Omega SA.
LABORATORIO N 09 RECONOCIMIENTO DE LOS LIPIDOS

1. OBJETIVO Identificar a travs de pruebas bioqumicas los lpidos en las muestras problemas. Brindar al alumno los reconocimientos bsicos para desarrollar anlisis en grasas y aceites. 2. MARCO TEORICO SAPONIFICACIN: Las grasas reaccionan en caliente con el hidrxido sdico o potsico descomponindose en los dos elementos que las integran: glicerina y cidos grasos. stos se combinan con los iones sodio o potasio del hidrxido para dar jabones, que son en consecuencia las sales sdicas o potsicas de los cidos grasos. En los seres vivos, la hidrlisis de los triglicridos se realiza mediante la accin de enzimas especficos (lipasas) que dan lugar a la formacin de cidos grasos y glicerina. TINCIN: Los lpidos se colorean selectivamente de rojo -anaranjado con el colorante Sudn III. SOLUBILIDAD: Los lpidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequesimas gotas formando una emulsin de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo por reagrupacin de las gotitas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sita sobre el agua. Por el contrario, las grasas son solubles en disolventes orgnicos, como el ter, cloroformo, acetona, benceno, etc.
3. MATERIALES Y EQUIPOS
Equipos materiales Tubos de ensayo Gradilla Varillas de vidrio Mechero Vasos de precipitados Pipetas 4. METODOLOGIA
Reactivos Solucin de NaOH al 20% Solucin de Sudn III Tinta china roja Eter, cloroformo o acetona Aceite de oliva
El alumno tendr que aplicar el mtodo experimental para el desarrollo de esta practica as como el mtodo analtico para obtener los resultados citados. 5. DESCRIPCION DE LA PRACTICA SAPONIFICACION 1. Colocar en un tubo de ensayo 2ml de aceite y 2ml de NaOH al 20%. 2. Agitar enrgicamente y colocar el tubo al bao Mara de 20 a 30 minutos. 3. Pasado este tiempo, se pueden observar en el tubo 3 fases: una inferior clara que contiene la solucin de sosa sobrante junto con la glicerina formada, otra intermedia semislida que es el jabn formado y una superior lipdica de aceite inalterado. TINCIN:
1. Disponer en una gradilla 2 tubos de ensayo colocando en ambos 2ml de aceite. 2. Aadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solucin alcohlica de Sudn III. 3. Al otro tubo aadir 4-5 gotas de tinta roja. 4. Agitar ambos tubos y dejar reposar. 5. Observar los resultados: en el tubo con Sudn III todo el aceite tiene que aparecer teido,
mientras que en el tubo con tinta, sta se ir al fondo y el aceite no estar teido. SOLUBILIDAD:
1. Poner 2ml de aceite en dos tubos de ensayo. 2. Aadir a uno de ellos 2ml de agua y al otro 2ml de ter u otro disolvente orgnico, 3. Agitar fuertemente ambos tubos y dejar reposar. 4. Observar los resultados: Se ver cmo el aceite se ha disuelto en el ter y, en cambio no lo
hace en el agua y el aceite subir debido a su menor densidad. 6. RESULTADOS Y DISCUSION Colocar sus apreciaciones Laboratorio 04-01 Laboratorio 04-02 Laboratorio 04-03
7. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES Realizar la practica con gafas previniendo cualquier accidente. 8. BIBLIOGRAFIA Bioqumica de Lehninger; Ediciones Omega SA. 9. CUESTIONARIO 1. Qu son los jabones? 2. Cmo se pueden obtener los jabones? 3. Por qu en la saponificacin la glicerina aparece en la fase acuosa? 4. Qu enzima logra en el aparato digestivo la hidrlisis de las grasas? 5. Indica lo que ocurre con la mezcla aceite-Sudn III y aceite-tinta y explica a qu se debe la diferencia entre ambos resultados. 6. Qu ocurre con la emulsin de agua en aceite transcurridos unos minutos de reposo?Y con la de benceno y aceite?A qu se deben las diferencias observadas entre ambas emulsiones?
LABORATORIO N 10 EXTRACCION DE ADN
10.
OBJETIVO
Realizar una extraccin casera de la presencia de ADN en vegetales.

11. MARCO TEORICO La extraccin de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los iones salinos son atrados hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su disolucin y posterior extraccin de la clula. Se empieza por lisar (romper) las clulas mediante un detergente, vacindose su contenido molecular en una disolucin tampn en la que se disuelve el ADN. En ese momento, el tampn contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN, carbohidratos, protenas y otras sustancias en menor proporcin. Las protenas asociadas al ADN, de gran longitud, se habrn fraccionado en cadenas ms pequeas y separadas de l por accin del detergente. Slo queda, por tanto, extraer el ADN de esa mezcla de tampn y detergente, para lo cual se utiliza alcohol isoamlico, probablemente el nico reactivo de esta prctica que no suele haber en una cocina. 12. MATERIALES Y EQUIPOS
Equipos materiales
Reactivos
Muestra vegetal Batidora Nevera Colador o centrfuga Vaso precipitados Tubo de ensayo Varilla fina
Agua (destilada o mineral) Sal de mesa Bicarbonato sdico Detergente lquido o champ Alcohol isoamlico a 0C
13.
METODOLOGIA El alumno tendr que aplicar el mtodo experimental para el desarrollo de esta prctica as como el mtodo analtico para obtener los resultados citados.
14.
DESCRIPCION DE LA PRACTICA
1.
Preparar el tampn con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en un bao de hielo triturado: 120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo. 1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura. 5 g de bicarbonato sdico. 5 ml de detergente lquido o champ.
2. 3. 4. 5.
Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que pueda haber (cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos. Triturar la muestra con un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas a impulsos de 10 segundos. As se rompern muchas clulas y otras quedarn expuestas a la accin del detergente. Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampn fro y agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar despus los restos vegetales ms grandes del caldo molecular hacindolo pasar por un colador lo ms fino posible. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y despus pipetear el sobrenadante.
6. 7.
Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y aadir con pipeta 10 ml de alcohol isoamlico enfriado a 0C. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo ste inclinado. El alcohol quedar flotando sobre el tampn.
8.
Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separacin entre el alcohol y el tampn. Remover la varilla hacia delante y hacia atrs y poco a poco se irn enrollando los fragmentos de mayor tamao de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedar adherido a su estremo con el aspecto de un copo de algodn mojado.
15.
RESULTADOS Y DISCUSION
16.
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
17.
BIBLIOGRAFIA
Miller D.D. 2001. Qumica de Alimentos, Manual de Laboratorio. Limusa Wiley, Mxico
LABORATORIO N 11 RUTAS METABOLICAS

1.
OBJETIVO Reconocer la degradacin de la glucosa, dando por consiguiente el proceso de la gluclisis y respiracin (ciclo de Kreb).
2. MARCO TEORICO
La degradacin de la glucosa es realizada por el proceso de gluclisis en el citoplasma por la accin del ADP obteniendo acido piruvico, De acuerdo a las circunstancias puede realizarse dos procesos: 1.- Sin oxigeno obtenemos el proceso de fermentacin con la obtencin de etanol o acido lactico. 2.- con oxigeno pasando al ciclo de Kreb obteniendo diferentes sustancia, la cual se realiza en el mitocondrias.
LA GLUCLISIS: Comienza con una molcula de glucosa. En este proceso, primero se invierte energa por transferencia de un grupo fosfato desde una molcula de ATP, una por cada paso, a la molcula de azcar. La molcula de 6 carbonos luegos se escinde y, de all en adelante, la secuencia produce energa. En cierto momento se reduce una molcula de NAD+ a NADH y H+ almacenandose parte de la energa producida por la oxidacin del gliceraldehdo fosfato. En los pasos finales las molculas de ADP toman energa del sistema, fosforilndose a ATP. Glucosa+2ATP+4ADP+2Pi+2NAD=>2cido pirvico+2ADP+4ATP+2NADH+2H+2H2O De esta forma, una molcula de glucosa se convierte en dos molculas de cido pirvico. La ganancia neta, la energa recuperada, es dos molculas de ATP y dos molculas de NADH por molcula de glucosa. Las dos molculas de cido pirvico contienen todava una gran parte de la energa que se encontraba almacenada en la molcula de glucosa original. La serie de reacciones que constituyen la gluclisis se lleva a cabo virtualmente en todas las clulas vivas, desde las clulas procariticas hasta las clulas eucariticas de nuestros propios cuerpos. LAS VIAS AEROBICAS - RESPIRACIN: En el curso de la respiracin, las molculas de tres carbonos de cido pirvico producido por la gluclisis son degradadas a grupos acetilo de dos carbonos, que luego entran al ciclo de Krebs. En una serie de reacciones en el ciclo de Krebs, el grupo acetilo de dos carbonos es oxidado completamente a dixido de carbono. En el curso de la oxidacin de cada grupo acetilo se reducen cuatro aceptores de electrones (tres NAD+ y un FAD) y se forma otra molcula de ATP.
El ciclo de Krebs. En el ciclo de Krebs. los carbonos donados por el grupo acetilo se oxidan a dixido de carbono y los electrones pasan a los transportadores de electrones. Lo mismo que en la gluclisis, en cada paso interviene una enzima especfica. La coenzima A es el nexo entre la oxidacin del cido pirvico y
el ciclo de Krebs. A modo de resumen: en el ciclo de Krebs se producen una molcula de ATP, tres molculas de NADH y una molcula de FADH2 que representan la produccin de energa de este ciclo. Se necesitan dos vueltas del ciclo para completar la oxidacin de una molcula de glucosa. As, el rendimiento energtico total del ciclo de Krebs para una molcula de glucosa es dos molculas de ATP, seis molculas de NADH y dos molculas de FADH. La etapa final de la respiracin es el transporte terminal de electrones, que involucra a una cadena de transportadores de electrones y enzimas embutidas en la membrana interna de la mitocondria. A lo largo de esta serie de transportadores de electrones, los electrones de alta energa transportados por el NADH de la gluclisis y por el NADH y el FADH2 del ciclo de Krebs van "cuesta abajo" hasta el oxgeno. En tres puntos de su pasaje a lo largo de toda la cadena de transporte de electrones, se desprenden grandes cantidades de energa libre que impulsan el bombeo de protones (iones H+) hacia el exterior de la matriz mitocondrial. Esto crea un gradiente electroqumico a travs de la membrana interna de la mitocondria. Cuando los protones pasan a travs del complejo de ATP sintetasa, a medida que vuelven a fluir a favor del gradiente electroqumico al interior de la matriz, la energa liberada se utiliza para formar molculas de ATP a partir de ADP y fosfato inorgnico. Este mecanismo, en virtud del cual se lleva a cabo la fosforilacin oxidativa, se conoce como acoplamiento quimiosmtico. En esta representacin de la cadena respiratoria, las molculas que se indican: flavina mononucletido (FMN), coenzima Q (CoQ) y los citocromos b, c, a y a3, son los principales transportadores de electrones de la cadena. Al menos otras nueve molculas transportadoras funcionan como intermediarias adems de las que se muestran aqu. Los electrones transportados por la NADH entran en la cadena cuando son transferidos a la FMN, que entonces se reduce (azul). Casi instantneamente, el FMN cede los electrones al CoQ. El FMN vuelve as a su forma oxidada (naranja), listo para recibir otro par de electrones, y la CoQ se reduce. CoQ entonces pasa los electrones al siguiente aceptor, y vuelve a su forma oxidada. El proceso se repite en sentido descendente. Los electrones, al pasar por la cadena respiratoria, van saltando a niveles energticos sucesivamente inferiores. Los electrones que son transportados por el FADH2 se encuentran en un nivel energtico ligeramente inferior que los del NADH. En consecuencia, entran en la cadena de transporte ms abajo, a la altura de la CoQ. Los electrones finalmente son aceptados por el oxgeno, que se combina con protones (iones hidrgeno) en solucin, y forman agua. Los electrones que son transportados por el FADH2 se encuentran en un nivel energtico ligeramente inferior que los del NADH. En consecuencia, entran en la cadena de transporte ms
abajo, a la altura de la CoQ. Los electrones finalmente son aceptados por el oxgeno, que se combina con protones (iones hidrgeno) en solucin, para formar agua. LAS VAS ANAEROBIAS: En ausencia de oxgeno, el cido pirvico puede seguir una de varias vas llamadas anaerbicas. Veremos brevemente dos de las vas anaerbicas ms interesantes. El cido pirvico puede convertirse en etanol (alcohol etlico) o en uno de varios cidos orgnicos diferentes, de los cuales el cido lctico es el ms comn. En el primer paso de la gluclisis se desprende dixido de carbono. En el segundo, se oxida el NADH y se reduce el acetaldehdo. La mayor parte de la energa qumica de la glucosa permanece en el alcohol, que es el producto final de la secuencia. Sin embargo, regenerando NAD+, estos pasos permiten que la gluclisis contine, con su pequeo, pero en algunos casos vitalmente necesario, rendimiento de ATP.
Pasos por los cuales el cido pirvico, formado en la gluclisis, se convierte anaerbicamente en etanol. El cido lctico se forma a partir del cido pirvico, por accin de una variedad de microorganismos y tambin por algunas clulas animales cuando el O2 es escaso o est ausente.
Reaccin enzimtica que produce cido lctico anaerbicamente a partir de cido pirvico en las clulas musculares. En el curso de esta reaccin, el NADH se oxida y el cido pirvico se reduce. Las molculas de NAD+ producidas en esta reaccin se reciclan en la secuencia glucoltica. Sin este reciclado, la gluclisis no puede seguir adelante. La acumulacin de cido lctico da como resultado dolor y fatiga muscular. OTRAS VAS CATABLICAS Y ANABLICAS: La mayora de los organismos no se alimentan directamente de glucosa. Otros alimentos son degradados y convertidos a molculas que pueden entrar en esta va central.Dado que muchas de estas sustancias, como las protenas y los lpidos, pueden degradarse y entrar en la va central, se puede suponer que es posible el proceso inverso, o sea, que los distintos intermediarios de la gluclisis y del ciclo de Krebs pueden servir como precursores para la biosntesis. Y as es. Sin embargo, las vas biosintticas, aunque son semejantes a las catablicas, se diferencian de ellas. Hay enzimas diferentes que controlan los pasos y hay varios pasos crticos del anabolismo que difieren de los de los procesos catablicos. Para que ocurran las reacciones de las vas catablica y anablica debe haber un suministro constante de molculas orgnicas que puedan ser degradadas para producir energa y deben estar presentes molculas que sern los ladrillos de construccin. Sin el suministro de estas molculas, las vas metablicas dejan de funcionar y la vida del organismo finaliza. Las clulas hetertrofas (incluyendo a las clulas hetertrofas de los vegetales, tales como las clulas de las races) dependen de fuentes externas, especficamente de clulas auttrofas, para obtener las molculas orgnicas que son esenciales para la vida. Las clulas auttrofas, por el contrario, son capaces de sintetizar monosacridos a partir de molculas inorgnicas simples y de una fuente externa de energa. Luego, estos monosacridos se utilizan no slo para suministrar energa, sino tambin
como sillares de construccin para la variedad de molculas orgnicas que se sintetizan en las vas anablicas. Las clulas auttrofas ms importantes, sin lugar a dudas, son las clulas fotosintticas de las algas y las plantas que capturan la energa de la luz solar y la utilizan para sintetizar las molculas de monosacridos de las cuales depende la vida en este planeta.
Vas principales del catabolismo y el anabolismo en la clula.
3.
MATERIALES Y EQUIPOS
Equipos materiales Matraz Tapon de jebe con dos agujeros. Vasos precipitados pHmetro Bureta Bageta Matraz aforado de 50 ml pipeta graduada de 5,0 ml pipeta graduada de 1,0 ml Tubo de ensayo Termmetros METODOLOGIA
Reactivos Agua destilada Hidroxido de sodio Levadura Enzimas
4.
El alumno tendr que aplicar el mtodo experimental para el desarrollo de esta practica as como el mtodo analtico para obtener los resultados citados.
5.
DESCRIPCION DE LA PRACTICA Laboratorio 09-01 1. Armar los instrumentos como el diseo: Preparacin de un fermento sin aire. Preparacin de un fermento con aire
2.
Aplicar
en
cada
envase
un
caldo de cultivo conformado por:
Azcar 200 g. Agua 500 ml. Levadura 50 gr. 3. Controlar los parmetros de pH, temperatura, acidez. 4. Por espacio de 6 dias 5. Apreciar los resultados y analizar.
6.
RESULTADOS Y DISCUSION Horas de Dia/ fecha pH Acidez

monitoreo
% azucar
Apariencia del caldo
Observaciones
Inicial:
Hora: 24 24 12 12 12 12 12 12 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8
7.
CONCLUSIONES Y RECOMENDACUONES Colocar sus apreciaciones asi mismo como va cambiando segn el crecimiento de las levaduras a travez del experimento.
8.
9.
CUESTIONARIO 1. Por qu el cido pirvico se convierte en cido lctico slo para volver a convertirse en cido pirvico? 2. Cmo extraen energa de las grasas o de las protenas?

Practica Bioquimica 2013

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Universidad Nacional FEDERICO VILLARREAL

CURSO DE BIOQUIMICA Ing.. Marleni Bautista Espinoza

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OBJETIVO GENERAL DEL CURSO

1. El laboratorio es un lugar donde se desarrollan prcticas elegidas por el profesor para

6. En el caso de que el experimento no resultara como est planeado, el alumno deber

1. No deben efectuarse experimentos no autorizados, a menos que estn supervisados

2. Cualquier accidente debe ser notificado de inmediato al docente o al responsable del

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9. Cuando se calientan sustancias contenidas en un tubo de ensaye, no se debe apuntar

10. La dilucin de cidos concentrados debe hacerse de la siguiente manera:

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LABORATORIO N 01 PREPARACION DE SOLUCIONES ACIDOS Y BASES, MEDICION DE Ph

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H+ 100 10-1 10-3 10-5 10-7 10-9 10-11 10-13 10-14

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INDICADOR Azul de timol Azul de bromofenol Anaranjado de metilo

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TITULACION DE UN ACIDO Gasto de base pH de la solucin Productos Aceite Leche Vinagre pH

TITULACION DE UNA BASE Gasto de acido pH de la solucin Acidez

carbohidratos, lpidos, protenas en el mismo. Explicar?

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Se disolvieron 20 ml. De acido actico (CH3COOC) 0.5 N hasta 100 ml. Y la

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LABORATORIO N 02 PROPIEDADES FISICO QUIMICAS DEL AGUA

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hidrocarburos del petrleo).

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LABORATORIO N 03 PREPARACIN DE SOLUCIONES ISOTNICAS, HIPOTNICAS E HIPERTNICAS.

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LABORATORIO N 04 RECONOCIMIENTO DE LAS PROTEINAS

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BIBLIOGRAFIA Bioqumica de Lehninger; Ediciones Omega SA.

LABORATORIO N 05 EXTRACCIN DE LA CASEINA Y DETERMINACIN DEL PUNTO ISOELECTRICO

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DESCRIPCION DE LA PRACTICA AISLAMIENTO DE LA CASENA:

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4. La solucin debe ser clara y limpia y si no es as, debe volver a filtrar.

1. En diez vasos de 25 ml limpios y secos adicione exactamente los volmenes de los

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7. Anotar resultados, representar la absorbancia frente al pH, y determinar el pI aproximado de

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LABORATORIO N 06 RECONOCIMIENTO DE LA PROTEINA EN LA CLARA DE HUEVO.

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LABORATORIO N 07 RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS

CLASIFICACIN DE LOS GLCIDOS Atendiendo a su complejidad se clasifican en: