Isolation(culture) Agarplate/ colonies Liquidmediatest tubebulk Identication&taxonomy Family Genus Species Type Strain

Biochemical(physiological)tests Moleculartests DNADNAhomology 16SrRNAsequencing Chemicalproling Nonculturebaseddetection Polymerasechainreaction(PCR) Agglutination(antigendetection) Stain Serology(antibodydetection)

 Familia:grupodegnerosrelacionados. Gnero:grupodeespeciesrelacionadas. Especies:grupodecepasrelacionadas. Tipo:grupodecepasdentrodeunaespecie(e.g.biotipos, serotipos). Cepa:unorganismoaisladodentrodeunaespecieen particular.

 Relacinentrecaractersticasiolgicayfuncincelular Relacinentrelasactividadesquellevanacaboensu ambientenatural Relacinconlostrayectosmetablicosmicrobianos

FermentacindeAzcares

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 Utilizacindecompuestosorgnicoscomofuentede carbonoyenerga
Catabolismooxidacindemolculasorgnicasparaproducir energa
Fermentacin Respiracin

Anabolismoutilizacindeenergaparasintetizarmaterial celular

Bacteriasoxidativas Molculadeazcarserompe completamente

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 Oxidacinparcialdeuncompuestoorgnico utilizandointermediariosorgnicoscomo donantesyaceptadoresdeelectrones

TodoelATPesproducidoporfosforilacina niveldesustrato

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Homolctica
Lactobacillus,LactococcusylamayoradelosStreptococcus

Mixta
MayormenteEnterobacteriaceae Produccindecidolctico,actico,frmico,succinatoyetanol

Butanediol
Klebsiella,Enterobacter

cidobutrico
Clostridia cidoactico,CO2yH2 Clostridiumacetobutylicum

Butanolacetona

cidoproponico
PropionibacteriumandBidobacterium

 Glucosa Lactosa Manitol Inositol Sorbitol Ramnosa Melibiosa

Amigdalina Adonitol Arabinosa Dulcitol

 Importanteenla identicacinde bactericasentricas comolas Enterobactericeae Fermentadorasde lactosa:Escherichia, Klebsiella,Enterobacter Nofermentadoras: Salmonella,Proteusy Shigella

 Aerbicosyfacultativosanaerbicos Gramnegativo Noformadoresdeesporas Formadebacilo Fermentanlactosa,conproduccindecidoygasdentro de48hra35oC

 Produccindecidosrojo fenolcomoindicadordepH TuboDurhamproduccinde gas Pruebasdefermentacinen: glucosa,lactosaymanitol

 Tresazcares:glucosa, lactosaysucrosa Rojofenolcomo indicadordepH Contienehierropermite detectarlaproduccinde H2Sapartirdeamino cidos Puededetectarse produccindegas
A.Salmonellasp. B.Escherichiacoli C.Unknown D.Proteusmirabilis

 Deteccindeactividadesenzimticasbacterianas
ONPGsustratoarticialanlogodelalactosa Ureacompuestonitrogenadosencillo Casenaprotenaprincipaldelaleche Gelatinaprotenaderivadadelcolgenoanimal Almidnpolisacridodeorigenvegetal Lpidosograsas

 Produccindegalactosa yonitrofenol Amarilloencondiciones alcalinas

 Ureasaatacaenlace entrecarbonoy nitrgenoprociendo CO2,aguayamonaco Rojofenol

Urea

 Pruebatilpara distinguirProteusde otrasbacteriasentricas Gram

 Protenapredominanteenlaleche Protenamuygrandeparapasarporlamembranapero algunasbacteriasliberancaseinasaquedegradala protenaeincorporanlosaminocidosqueseliberan

 Bacteriaspuedenproducirlaexoenzimagelatinasa,que rompelaestructuradelagelatinaylalica Lacapacidaddeunabacteriadeproducirgelatinasase puedecorrelacionarconelgradodepatogenicidado virulencia,yaquelaenzimapermitemoverseatravsdel tejidoconectivoenelcuerpo. Unapruebagelatinaseevalaobservandolaconsistencia enfro SeutilizaparadiferenciarentreS.aureusyS.epidermidis

 Algunasbacteriaspuedenproduciramilasa,produciendo dextrinas,glucosaymaltosa

 Produccindelipasasparaproducircidosgrasosy glicerol PruebasellevaacaboenagarSpiritBluequetieneun indicadordepH.LahidrlisisbajaelpHocurriendoun cambiodecoloraazulintenso

 ParalosbacilosGramnegativos Indol Rojometilo(MR) VogesProskauer(VP) Citrato(C)

 Hidrlisisdetriptfanoproduciendoindol,cidopirvicoy amonaco Elindolseacumulaenelmedioporquenoestilala bacteria SeaadereactivodeKovacquereaccionaconelindol produciendouncompuestorojizorosado

 Pruebaparalafermentacinmixtapresenciadecidos acticos,lactico,frmicoysuccnico Laadicinderojodemetilo,quedistinguegradosde acidez:amarilloapH8,incoloroapH7yrojoapHde4

 Produccindealcoholy2,3butanodiolenlugardecidos apartirdeunazcar EspeciesdeEnterobacterySerratiayalgunasGram positivocomoBacillus Semideacetonaqueesunprecursorde2,3butanodiol Luegodeperododeincubacinseaadeelreactivode Barrit:alfanaftol5%yKOH40%enalcoholabsoluto Pruebapositivaeslaformacindeuncomplejorojo rosado

 Algunasbacteriaspuedenutilizarcitratocomonica fuentedecarbonoencondicionesaerbicas Lapermeasadecitratopermiteeltransportedecitratoal interiordelaclulaylaenzimacitrasaconvierteelcitrato encidopirvicoyCO2 Mediocontienecitratodesodio,salesdeamonioyazul bromotimolcomoindicadordepH ElCO2liberadosecombinaconelsodioyaguayforman carbonatodesodioqueesalcalinocambiandoel bromotimoldeverdeaazulintenso

TSITripleSugarIronAgar

SIMSuldeIndoleMotility

Fermentacindeazcares yproduccindeH2S ProduccindeH2Symotilidad

 Remocindelgrupoaminodefenilalaninaporfenilalanasa produciendocidofenilpirvico Diferenciaentregnerosdeenterobacterias Seaadesolucin10%clorurofrrico

 Remocindelgrupocarboxilodelosaminocidosque producenaminasyCO2 Seutilizancaldosquecontienenelaminocido correspondiente,glucosayunindicadordepHcomo bromocresolvioleta Seaadeaceitemineralparacrearcondicionesanaerbicas Loscidosproducidosporlafermentacinactivala decarboxilasaqueproducenaminasalcalinasqueneutralizanel mediolocualcambiaelmediodeamarillo(cido)avioleta Pruebanegativamedioamarillo

 Pruebaquecombinadiferentesreacciones
Fermentacindeazcares
Lactosa

Reaccionesdehidrlisis
Casena

Lechedesnatadaal10%conlitmus(azolitmin)como indicadordepH

 Bacteriasquimioorganoheterotrcasutilizanelnitrato comoaceptadornaldeelectronesduranterespiracin anaerbica NO3+2e+2H+NO2+H2O

Relacinalciclonitrgeno Elmediodecultivocontieneextractodecarne,peptonay nitratodepotasio(KNO3)

 Serequierelaadicinde cidosulfanlico(A)y dimetilnaftilamina(B) Sedetectalapresencia denitrito Pruebapositivacolor rojo Seconrmaprueba negativaconZn

 Detectalaproduccinde unaenzimaquecoagula lasprotenasdelasangre Sehaceenmedioque tieneplasma TpicadelasGram positivo

S.aureus

 Detectapresenciade deoxiribonucleasa Pruebatpicaparacocos Grampositivo Tpicodebacterias patgenasquerompen DNAenclulasdel hospedero Eltintesepegaalascargas negativasdelDNA; ausenciadeltinte,ausencia DNA

 Detectapresenciade catalasaoperoxidasaque rompeelperxidoen aguayO2

 Pruebarepresentativadelosprocesosaerbicospropiosde bacteriasoxidativas Bacteriasoxidativasenergaapartirdecompuestosorgnicos utilizandooxgenoyliberandoCO2yagua Lasoxidasassonenzimasimportantesenlacadenade transportedeelectronesduranterespiracinaerbica Pruebaimportanteparadistinguirciertosgruposdebacterias Pruebarequiereelusodetetrametilpfenilendiaminaque reaccionanhaciauncolorazuloscuroalreaccionarconla citocromacoxidada

Lasenterobacteriassonoxidasanegativa

EnterotubeII

API20E

 Pruebasrpidas:sistemaparalaidenticacin bioqumicadeEnterobacteriacaeyotrasbacterias Gramneg. Consistedetirasplsticascon20uldesustratos deshidratadosqueseutilizanparadetectar caractersticasbioqumicas. Lossustratossoninoculadosconcultivospuros suspendidosensalina. Luegodeunperodode5hr24hrslas20pruebasson convertidasaunalecturade79dgitos.
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 Limitadoabacterias Gram,oxidasaneg

positive negative

ONPG(galactosidase);ADH(argininedihydrolase);LDC(lysinedecarboxylase);ODC (ornithinedecarboxylase);CIT(citrateutilization);H2S(hydrogendisulphideproduction); URE(urease);TDA(tryptophandeaminase);IND(indoleproduction);VP(VogesProskauer testforacetoin);GEL(gelatinliquefaction);thefermentationofglucose(GLU),mannitol (MAN),inositol(INO),sorbitol(SOR),rhamnose(RHA),sucrose(SAC);Melibiose(MEL), amygdalin(AMY),andarabinose(ARA);andOXI(oxidase).

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OXI0 ARA22 + AMY0 MEL4 + SAC27 + RHA1 + SOR4 + INO05 MAN1 +

GLU4 + GEL04 VP0 IND4 + TDA04 URE0 H2S0 CIT01 ODC1 + LDC4 + ADH05 ONPG1 +
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normal7digitcode 5144572=E.coli

 EnterotuboIIenterobacteriasoxidasaneg EntericTek Oxi/FermGramNegativeRodsIdenticationpara bacteriasoxidasaposyoxidasaquenofermentan glucosa APIStaphIdentpara13especiesdeestalococos Biolog MicroIDenterobacteriasoxidasaneg Minitek