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Ipatinga 2009
Ipatinga 2009
INTRODUO Um antibiograma um ensaio que mede a susceptibilidade ou resistncia de uma bactria aos antibiticos atravs do espectro de sensibilidade identificados na placa de cultura. gar Meller Hinton um meio de cultura em placas recomendado para a realizao de antibiograma (teste de sensibilidade), rico protenas e carboidratos que fornece o substrato ideal para o desenvolvimento e crescimento de cepas bacterianas de interesse clnico. recomendado pelo U.S. Food and Drug Administration (FDA) e pela Organizao Mundial da Sade (OMS) para o teste de sensibilidade/resistncia a antibiticos de bactrias Gram positivas e Gram negativas, aerbicas ou anaerbicas facultativas, comumente encontradas em alimentos e espcimes clnicos. O teste feito utilizando-se discos de difuso antibiticos depositados sobre a superfcie do meio onde se inoculou, por espalhamento, uma amostra de uma cultura bacteriana previamente crescida em meio lquido.
PRTICA
Materiais utilizados Placa de Petri; gar Meller Hinton; Pipeta (com ponteira descartvel), 100 ml; Ala de Drigalski; Discos de difuso de antibiticos; Cultura bacteriana em Caldo Nutriente; Bico de Bunsen. Antibiticos utilizados: Azitromicina (Azi)15mcg; Cefalexina (Cfe)30mcg; Cloranfenicol (Clo)30mcg; Eritromicina( Eri)15mcg; Lincomicina (Lin)2mcg.
PROCEDIMENTO De incio preparamos a placa de cultura com a mostra das bactrias do Caldo Nutriente, previamente preparado. A amostra fora retirada da garganta de um de nossos colegas de sala de aula. Para aplicar uma pequena quantidade do caldo na placa com gar Meller Hinton, devemos estar atentos s tcnicas para no haver contaminao da amostra ou do meio de cultura, ser preparado, por bactrias do meio ambiente. Abrimos o tubo do Swab, contendo o caldo nutriente com as bactrias cultivadas, por trs do bico de Bunsen. Flambamos a abertura do tubo antes e depois da coleta do material. Para espalhar a amostra pela placa com gar utilizamos a ala de Drigalski. Esta deve ser mergulhada no lcool e flambada antes do uso. E logo aps deve ser flambada, mergulhada no lcool e flambada novamente. Espalhadas as bactrias pelo gar, selecionamos de aplicamos com a pina, que deve ser flambada antes do manuseio, os discos de difuso de antibiticos, nada mais so que pequenos discos de papel poroso embebidos em antibitico. Devemos estar atentos para que os discos fiquem bem aderidos ao gar, para haver uma boa difuso e no descolarem durante o manuseio. Terminados estes procedimentos, encaminhamos a placa de Petri para a estufa 37C durante 24 horas. Logo depois para a geladeira at o dia da anlise dos resultados. No dia determinado conferimos as placas contendo as bactrias cultivadas, porm, notam-se falha do crescimento ao redor dos discos. Utilizamos uma rgua para determinar o halo de resistncia de cada disco.
Azitromicina (Azi) - 21mm; Cefalexina (Cfe) - 25mm; Cloranfenicol (Clo) - 31mm; Eritromicina( Eri) - 27mm; Lincomicina (Lin) - 22mm.
CONCLUSO Tendo como base a tabela de Teste de Susceptibilidade (em anexo), podemos comparar os resultados e concluir a eficcia de cada antibitico em inibir o crescimento das bactrias cultivadas. As bactrias demonstraram um alto grau de sensibilidade todos os antibiticos utilizados. Mas, por ordem, classificamos (atravs dos dados fornecidos), o Cloranfenicol como antibitico com maior espectro de inibio e a Azitromicina de menor espectro.
O antibiograma facilita na investigao de antibiticos efetivos contra a proliferao de bactrias no organismo. Porm, deve-se levar em conta outros fatores alm da eficincia da inibio, que so: a toxicidade do medicamento para o paciente e custo financeiro, determinando um tratamento eficaz e vivel.
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Fonte: The national Committee for Clinical Laboratory Standards-NCCLS. Performance for Antimicrobial Susceptibility Testing. Pennsylvania: NCCLS, 2001. (NCCLS Document, M100-S11, v.21, n.1).
. BIBLIOGRAFIA. Tabela de Teste de Susceptibilidade antimicrobiana fornecida pelo professo Jorgino, em sala de aula.