Los actuales progresos cientficos y tecnolgicos han permitido identificar innumerables protenas en el plasma, lquidos y tejidos del organismo.

El valor total de las protenas plasmticas es de 6 a 8 g%: la albmina 3.3 a 5.5 g/dl y las globulinas 2 a 3.5 g/dl ml. Dentro de las gammaglobulinas inmunoglobulina D, inmunoglobulina E, inmunoglobulina G y inmunoglobulina M. Mediante la electroforesis de las protenas plasmticas y la inmunoelectroforesis de las protenas sricas y urinarias se pueden establecer diagnsticos de un grupo de enfermedades; igualmente la determinacin de anticuerpos especficos es de gran valor para el diagnstico de las enfermedades que tienen un trasfondo autoinmune.

La composicin de las protenas es muy heterognea, la electroforesis permite distinguir, por lo menos cinco bandas bien definidas y gracias al uso de sistemas de integracin ptica se obtienen trazos electroforticos compuestos por desniveles fcilmente discernibles. Dentro de estas bandas, la ms rpida y densa (de acuerdo a la velocidad de migracin) es, en condiciones normales la albmina; seguida por las agrupaciones de globulinas alfa1, alfa2, beta y gamma.

Las protenas plasmticas pueden incrementarse o disminuir en un grupo heterogneo de enfermedades; as se tiene:

HIPERPROTEINEMIA

1. Gammapatas:

Policlonales: enfermedades inflamatorias crnicas, enfermedades hepticas (cirrosis), Enfermedades autoinmunes (lupus eritematoso sistmico (LES)), infecciones parasitarias (KalaAzar) y enfermedades malignas. Monoclonales: mieloma mltiple, Macroglobulinemia de Waldenstrm, gammapatas monoclonales de significado indeterminado y amiloidosis primaria

2. Hemoconcentracin (deshidratacin) 3. Pseudo-hiperproteinemia (desecacin parcial de muestras de suero conservadas en tubos insuficientemente tapados)

HIPOPROTEINEMIA.

Disminucin en la ingesta de protenas Absorcin intestinal deficiente Disminucin en la sntesis proteica (enfermedades hepticas) Prdidas renales y gastrointestinales Gammapatas de cadenas ligeras (mieloma de Bence-Jones) que cursa con hipogammaglobulinemia.

SEMIOLOGA DE LAS ALTERACIONES ELECTROFORTICAS DEL SUERO

ALBMINA SRICA.

Es la protena que produce el hgado en mayor cantidad, representa el 50% de las protenas plasmticas y contribuye en 2/3 de la presin coloidosmtica del plasma. La albmina tiene un peso molecular de 68.000 D, consta de 584 aminocidos y es extremadamente hidrosoluble. El hgado sintetiza de 10 a 15 g de albmina diariamente, su vida media es de 16 horas, pasa del plasma a los sitios de almacenamiento como son el espacio intersticial de la piel, msculos y vsceras donde tiene una vida media de 20 das. La mayora de las enfermedades conducen a una disminucin de los niveles de la albmina srica. Cuando es muy marcada se debe pensar en enfermedad heptica, renal o sistmica significante. En lneas generales, la hipoalbuminemia puede ser por disminucin de la sntesis como en las hepatopatas crnicas, alcoholismo, desnutricin (por falta de aminocidos), infecciones graves y, por prdida excesiva como en el sndrome nefrtico, quemaduras, malabsorcin intestinal y enteropatas perdedoras de protenas.

GLOBULINAS SRICAS.

Estas protenas estn formadas por las globulinas alfa y beta producidas por los hepatocitos y, por las globulinas gamma (inmunoglobulinas) producidas por los linfocitos B y plasmocitos. Se analizarn las globulinas ms tiles en la prctica diaria.

Globulinas alfa1 (valores normales= 0.2-0.4 g/dl). En este grupo de protenas se encuentra la antitripsina alfa1, la glucoprotena cida, lipoprotenas de alta densidad, alfa-fetoprotenas y algunas protenas transportadoras de hormonas (cortisol y tiroxina).

Hipoglobulinemia alfa1: deficiencia hereditaria de alfa1-antitripsina, deficiencia no hereditaria de alfa1 antitripsina, sndrome de membrana hialina y sndrome nefrtico. La antitripsina alfa1 (valores normales= 85-213 mg/dl), representa el 70% de la fraccin de la alfa1 y, su funcin es la de inhibir la tripsina; valores bajos estn relacionados con el enfisema pulmonar y la cirrosis heptica.

Hiperglobulinemia alfa1: neoplasias malignas, procesos inflamatorios, obstrucciones biliares, embarazo y medicamentos (estrgenos). La glicoprotena cida alfa1 representa el 30% de la fraccin alfa1, se encuentra elevada en las enfermedades inflamatorias crnicas y degenerativas y, muy elevadas en las enfermedades malignas.

Globulinas alfa2 (valores normales= 0.5-1 g/dl). En este grupo se encuentran la ceruloplasmina, la haptoglobina y la alfa2-macroglobulina y en menor proporcin la eritropoyetina.

Hipoglobulinemia alfa2

Hipoceluroplasminemia. Adquiridas: sndrome de Menke, sndrome nefrtico, sndrome de malabsorcin y hepatopatas. Hereditarias: enfermedad de Wilson.

Hipohaptoglobulinemia. Anemia hemoltica autoinmune, anemia microangiopticas, reacciones post- transfusionales, paludismo y hemoglobinuria paroxstica nocturna. La haptoglobina (valores normales= 16que se eleva en presencia de inflamacin aguda, necrosis o destruccin tisular; es muy importante para el diagnstico de las crisis de las anemias hemolticas, situacin que hace disminuir sus niveles sricos.

Hiperglobulinemia alfa2

Hiperceluroplasminemia: neoplasias, infecciones, embarazo y anticonceptivos orales y estrgenos. Hiperhaptoglobulinemia: neoplasias, infecciones, traumatismos y terapia andrognica Hipermacroglobulinemia alfa2. Representa el 25% del valor de la globulina alfa2, se eleva en el sndrome nefrtico, enteropata perdedora de protenas, cirrosis heptica, diabetes mellitus, mieloma mltiple y linfoma no Hodgkin

Globulinas beta (valores normales= 0.6-1.2 g/dl). Tienen un contenido proteico del 25% y transportan la mayor parte de los lpidos sricos. En este grupo de protenas se encuentran la transferrina, varias fracciones del complemento (C2, C3, C4, C6, C7), la hemopexina y la protena C reactiva. La transferrina (valores normales= 230-390 mg/100 ml), normalmente representa el 60% de las beta1 y es importante para el transporte del hierro. La ferritina (valores normales= Hombres: 30 a 284 ng/ml; Mujeres: 6 a 186 ng/ml), es la protena que almacena el hierro, razn por lo que funciona como la reserva de hierro del organismo; su disminucin orienta al diagnstico de anemia ferropriva y su elevacin a anemias de las enfermedades crnicas (neoplasias, infecciones)

Hipoglobulinemia beta

Hipotransferrinemia. Congnita: atransferrinemia. Adquiridas: desnutricin, hepatopatas crnicas, infecciones crnicas, neoplasias renales, enteropatas con prdida de protenas, sndrome nefrtico y quemaduras.

Hipohemopexinemia: procesos hemolticos, sndrome nefrtico, hepatopatas y lupus eritematoso sistmico.

Hiperglobulinemia beta

Hipertransferrinemia: anemias por deficiencia de hierro. Hiperhemopexinemia: sales de hierro (endovenoso), hiperliproteinemia, hipercolesterolemia primaria y la secundaria a sndrome nefrtico. Otras: diabetes mellitus, mixedema, ictericia obstructiva, xantomatosis, arterioesclerosis, hipertensin maligna y periarteritis nudosa.

Gammaglobulinas (valores normales= 0.7-1.7 g/dl). Dentro de este grupo se encuentran cinco tipos de inmunoglobulinas: inmunoglobulina G (615-300 mg/dl), inmunoglobulina A (60-300 mg/dl), inmunoglobulina M (50-350 mg/dl), inmunoglobulina D (0-14 mg/dl) y E (10-180 mg/d). Su elevacin puede ser en forma de una espiga (monoclonal) o amplia (policlonal). La elevacin monoclonal de las gammaglobulinas se observa en enfermedades como: mieloma mltiple, Macroglobulinemia de Waldenstrm y enfermedad de cadenas pesadas y, la elevacin policlonal, en la cirrosis, artritis reumatoide e infecciones crnicas (tuberculosis).

Se presenta un raro tipo de nefropata membranosa de la infancia producida por anticuerpos anti-albmina del suero bovino y antgenos catinicos derivados del suero bovino capaces de depositarse en los elementos aninicos de la pared capilar glomerular induciendo la formacin in situ de complejos inmunes. Este estudio fue publicado por Hanna Debiec, Ph, MD, y col. desde la Universidad Pierre et Marie Curie de Paris, en el nmero del 2 de junio de 2011 del New Eng J Med. La nefropata membranosa es la causa ms comn de sndrome nefrtico del adulto, pero es un hallazgo raro en nios. La patognesis central consiste en la formacin de depsitos inmunes subepiteliales responsables de las alteraciones funcionales de la pared capilar glomerular. Hasta el momento han sido identificados dos antgenos involucrados en esta patologa. El primero es la endopeptidasa neutra, un aloantigeno responsable en casos de nefropata membranosa de recin nacidos. El segundo es el receptor de la fosfolipasa A2 tipo-M (PLA2R), que ha sido identificado en la nefropata membranosa idioptica considerada una enfermedad autoinmune. Casos de nefropata membranosa secundaria involucra a antgenos exgenos de tipo viral, bacteriano o tumorales. Dado el nmero creciente de antgenos identificados, muchos casos considerados hasta el momento como "idiopticos" probablemente sean reclasificados como secundarios.

Estudios epidemiolgicos han identificado elementos nutricionales como factores de riesgo para el desarrollo de autoinmunidad en personas genticamente susceptibles. La albmina srica bovina es una de las protenas de la carne y la leche de vaca que pueden escapar de la barrera intestinal y por lo tanto inducir la formacin de de anticuerpos anti-albmina srica bovina. Hoy en da, ingredientes de alimentos estn sujetos a una variedad de condiciones de procesamiento que pueden inducir modificaciones de sus protenas, lo que podra afectar a la digestin de las mismas y permitir su paso a la circulacin sangunea. Se estudiaron 9 nios y 41 adultos con nefropata membranosa idioptica, biopsiados entre 2004 y 2009 quienes carecan de antecedentes alrgicos a los productos lcteos de vaca. Como grupos controles se tomaron muestras de suero de 63 pacientes con otras patologas glomerulares y 109 sanos sin proteinuria matcheados por edad.

Debido a que los anticuerpos anti-albmina de suero bovino son comunes en la poblacin general, investigaron la presencia de epitopes reconocidos productores de nefropata membranosa. Estos fueron detectados en 4 de 5 nios menores de 5 aos de edad y en 7 de 41 adultos con nefropata membranosa. Los niveles de estos anticuerpos fueron menores en nios de similar edad con otras patologas no proteinricas. La hiptesis es que estos anticuerpos anti-albmina bovina reaccionan primariamente con epitopes cuya secuencia de amino-cidos difieren de la abmina humana. Las protenas catinicas cargadas positivamente tendran la capacidad de pegarse a la membrana basal glomerular y servir como un blanco para la formacin de complejos inmunes in-situ. La histopatologa de los pacientes con nefropata membranosa y niveles circulantes elevados de anticuerpos anti-albmina de suero bovino mostraron depsitos granulares subepiteliales en la membrana basal glomerular. Estos no fueron observados en pacientes controles con nefropata membranosa a pesar de tener anticuerpos anti-albmina de suero bovino circulantes pero no las formas catinicas. El humano est expuesto a la albmina bovina a travs de la dieta, mientras que en la primera infancia la fuente principal es la leche de vaca. Pequeas cantidades de protenas enteras o digeridas son absorbidas por el aparato digestivo en personas sanas. Anticuerpos IgG para protenas de leche de vaca estn presenten en virtualmente todos los infantes expuestos a este producto y son considerados fisiolgicos. Para que estos anticuerpos sean detectados en complejos inmunes deben ser qumicamente modificados, efecto producido probablemente por el proceso de coccin o industrializacin. El tratamiento con calor de la albmina bovina desnaturaliza la protena y reduce la protelisis que ocurrir en el estmago del infante con relativamente ms alto pH que del adulto. De esta manera una cantidad mayor de albmina

bovina intacta entrar a la circulacin sangunea del infante. Esta podra ser an mayor en nios con gastroenteritis. Aunque se necesitan mayores estudios epidemiolgicos, la absorcin de albmina bovina y la inmunizacin contra la misma debera ser considerada como una causa potencial de nefropata membranosa del infante.

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MESES Revisin bibliogrfica. Caracterizacin de la eficiencia cuntica de la BSA en ausencia de nanopartculas de Ag. Sntesis de las nanopartculas de Ag. Preparacin de las soluciones de nanopartculas de Ag y BSA. Caracterizacin de las soluciones por espectroscopia de fluorescencia. Escritura del libro.

RUBROS REACTIVOS QUMICOS ANALISIS Microscopia electrnica FLUORESCENCIA DLS UV-VIS PAPELERIA PUBLICACIN DE RESULTADOS TOTAL

COSTOS (PESOS) 1.000.000 1.500.000 3.000.000 3.000.000 300.000 200.000 1.000.000 10.000.000