CUANTIFICACION DE GLUCOSA Y CORTISOL COMO INDICADOR DE ESTRS EN LA ESPECIE BRYCON SIEBENTHALAE (YAMU) MEDIANTE LA UTILIZACION DE TRANQUILIZACION Y ANESTESIA EN EL MUNICIPIO

DE CUMARAL META.

DIANA CATALINA AGUDELO CASTRO EMILY ANDREA LUGO BARACALDO NATALY RIVEROS RODRIGUEZ

CORPORACION EDUCATIVA NACIONAL C.E.N. AUXILIAR CLINICO VETERINARIO BOGOTA D.C 2012

CUANTIFICACION DE GLUCOSA Y CORTISOL COMO INDICADOR DE ESTRS EN LA ESPECIE BRYCON SIEBENTHALAE (YAMU) MEDIANTE LA UTILIZACION DE TRANQUILIZACION Y ANESTESIA EN EL MUNICIPIO DE CUMARAL META.

DIANA CATALINA AGUDELO CASTRO EMILY ANDREA LUGO BARACALDO NATALY RIVEROS RODRIGUEZ Trabajo final como requisito para optar por el certificado aptitudinal de ocupacin de auxiliar en clnica veterinaria

ASESORA SANDRA LILIANA MARTINEZ ZOOTECNISTA UNIVERSIDAD NACIONAL CORPORACION EDUCATIVA NACIONAL C.E.N. AUXILIAR CLINICO VETERINARIO BOGOTA D.C 2012

A nuestras familias, especialmente nuestros padres, porque creyeron en nosotras, y fueron los impulsores en esos momentos tan difciles de la carrera, porque se sienten orgullosos de nosotros y por haber fomentado ese deseo de superacin, solo resta decir GRACIAS.

Este proyecto de investigacin es un esfuerzo y un triunfo logrado, gracias a las diferentes personas que siempre nos apoyaron, en especial a la profesora Sandra Liliana Martnez zootecnista de la Universidad Nacional, nuestra directora de proyecto y amiga incondicional durante todo este proceso, al Codirector profesor Luis Gabriel Quintero, director de laboratorio de Ictiologa de la Universidad Nacional, al profesor Miguel ngel Landines director de la Estacin Pisccola La Terraza, al profesor Carlos moreno y colaboradores por habernos dado entrada en laboratorio de pequeos animales de la Universidad Nacional y habernos brindado sus conocimientos. Nuestra gratitud a los docentes que hicieron parte de nuestra educacin y nos brindaron su tica y profesionalismo y muy especialmente a Dios por permitirnos levantarnos cada da para continuar este paso que culmina y permitirnos comenzar con el laboral.

GLOSARIO

GLOSARIO Agente patgeno: Toda aquella entidad biolgica capaz de producir enfermedad o dao en la biologa de un husped (humano, animal, vegetal, etc.) sensiblemente predispuesto. Artrpodos: Los artrpodos son los animales invertebrados que forman el filo ms diverso del reino animal. se caracterizan porque tienen su cuerpo y sus patas articulados, es decir, divididos en piezas que se mueven. Ataxia: Ausencia o irregularidad en la coordinacin de los movimientos musculares producida por diversas causas. Carcido: Son peces que posee hbitos de vida muy variados. Hay variedades pacficas, otras vegetarianas, cazadores de barro y predadores como las piraas. Suelen ser buenos nadadores y requieren agua bien oxigenada. Carbohidratos: Hidratos de carbono o tambin llamados azucares, son los compuestos orgnicos mas abundantes y a su vez los mas diversos.

Clulas cromafines: De la mdula adrenal est inervada por los nervios esplacnicos y secretan adrenalina (epinefrina), noradrenalina (norepinefrina) y encefalina. Estas substancias juegan un papel importante en la respuesta de lucha-huida.

Cortisol: Es la principal hormona que el organismo segrega en respuesta al estrs, al tiempo que es la responsable de regular la presin arterial y las defensas. Enzima: Las enzimas son protenas que ayudan a que las reacciones qumicas ocurran con mayor rapidez. Glucosa: La principal fuente de energa para el metabolismo celular, esta se obtiene fundamentalmente a travs de la alimentacin, y se almacena principalmente en el hgado. Glucmetro: Aparato para medir la glicemia

Hematocrito: Examen de sangre que mide el porcentaje del volumen de toda la sangre que est compuesta de glbulos rojos. Hematopoyesis: Es el proceso de formacin, desarrollo y maduracin de los elementos formes de la sangre (eritrocitos, leucocitos y plaquetas) a partir de un precursor celular comn e indiferenciado con clulas reticuloendoteliales formado por un grupo de clulas cuya funcin es la de capturar partculas inertes que circulan por el organismo. Heparina: Un anticoagulante. Hormonas Esteroideas: Son hormonas derivadas por el colesterol y producidas en el sistema nervioso centra, el hgado, la placenta, los testculos, la corteza suprarrenal y ovarios. Son hormonas especficas encargadas de secretar sustancias como estrgeno, testosterona, aldosterona, cortisol y ACTH.

INPA: Instituto Nacional de Pesca y Acuicultura Muestreo: Tcnica usada en estadstica que es indispensable en la investigacin cientfica para seleccionar a los sujetos a los que les aplicaremos las tcnicas de investigacin elegidas, segn el enfoque en que se trabaje (cuantitativo, cualitativo o mixto) Osmoregulacin: Mecanismos por los cuales son controladas las concentraciones de sales y agua, o sea, los valores de presin osmtica de los fluidos corporales.

Sistema endocrino: El sistema endocrino est formado por todos aquellos rganos que se encargan de producir y secretar sustancias, denominadas hormonas, hacia al torrente sanguneo.

INTRODUCCION

Con la realizacin de este trabajo se pretende dar a conocer los niveles de glucosa y regulacin del cortisol generados por estrs en peces Brycon Siebenthalae (Yam) en el momento de la manipulacin para la toma de muestras de sangre en peces de cultivo, utilizando como mtodos la anestesia y la tranquilizacin para la extraccin sangunea y de esta forma analizar los resultados obtenidos de las muestras y llegar a una conclusin. El genero Brycon es uno de los mas representativos de las zonas neotropicales con mas de 60 especies, de las cuales en Colombia se han reportado 11 denominadas doradas, sabaletas, brincones o Yamus. El pez Yam se caracteriza por ser originario de las cuencas del rio Orinoco, y del amazonas, de cuerpo comprimido, de coloracin que varia del gris a los tonos verdes azulosos, su gran capacidad de produccin y calidad de carne y crecimiento ligero hacen que sea de alta demanda en los mercados regionales, su adaptabilidad en cultivo es muy favorable ya que su alimentacin es omnvora, con tendencia carnvora, pero acepta muy bien el alimento concentrado, Es un pez que es utilizado para el consumo humano, pero especialmente recomendado para la pesca deportiva por su voracidad y combatividad. La anestesia y tranquilizacin de los peces es un mtodo muy habitual para intervenciones quirrgicas rpidas, de igual forma favorece el transporte de grandes o cortas distancias, manipulacin, muestreo, entre otras practicas. Para el estudio del tejido sanguneo en peces se han adecuado tcnicas de laboratorio usadas originalmente en el humano y a nivel veterinario, por lo tanto, los resultados se deben interpretar a la luz del criterio metodolgico empleado. La interpretacin correcta de los resultados de las tcnicas hematolgicas aplicadas en peces se realiza tomando en cuenta mltiples factores por ejemplo el estrs, alimentacin, calidad del agua, etc.

1. DESCRIPCION DEL PROYECTO

El presente trabajo pretende evaluar los niveles de glucosa y cortisol generados en el momento de captura y manipulacin de los peces en un cultivo. Para el desarrollo del trabajo se contara con un total de 24 peces, la cual es una muestra representativa del 10 % de los 240 peces del cultivo a visitar en el municipio de Cumaral Meta. Se dividirn en grupos de 8 peces para una mejor manipulacin y as minimizar estrs; se utilizaran dos mtodos a travs de la tranquilizacin y la anestesia, la toma de muestras sanguneas se realizara por puncin de la vena caudal, y sern almacenadas a una temperatura de 4 centgrados de congelacin, para evitar su alteracin en el transporte hacia el laboratorio clnico de pequeos animales de la Universidad Nacional sede Bogot, donde se llevara acabo el anlisis de las muestras.

2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 2.1 DESCRIPCION DEL PROBLEMA Los estudios hematolgicos sobre peces nativos de Colombia son escasos y puntuales, a pesar de ser de gran utilidad para la comprensin de la fisiologa, as como para el diagnstico clnico ya sea de poblaciones naturales o de sistemas de cultivo, mas aun si se considera la ascendente contaminacin ambiental y proliferacin de agentes patgenos que los pueden afectar (Eslava et al.1995a). El Brycon siebenthalae (Yam), especie nativa de los Llanos Orientales, recientemente incorporada con gran expectativa a los sistemas de produccin pisccola, Esta especie tiene gran importancia econmica al ser su carne muy apetecida, su demanda es muy alta y la pesca se obtiene en el mbito artesanal o deportiva.1

Valoracin hematolgica y qumica sangunea del Yam Brycon siebenthalae en tres etapas del cultivo por arias castellanos j.a. bilogo; Benavides bustos m.v.z.; Hernndez Arvalo g. mvz; eslava mocha p.r. mv

En los sistemas de cultivo la manipulacin de los peces es frecuente en las actividades bsicas del manejo, en este trabajo se evaluaran los niveles de glucosa y cortisol en peces de cultivo, generados en el momento de la captura. La glucosa es la principal fuente de energa para el metabolismo celular, esta se obtiene fundamentalmente a travs de la alimentacin, y se almacena principalmente en el hgado, encargndose del mantenimiento de los niveles de glucosa en la sangre; el cortisol es la principal hormona que el organismo segrega en respuesta al estrs, al tiempo que es la responsable de regular la presin arterial y las defensas.

2.2 FORMULACION DEL PROBLEMA Los mtodos de tranquilizacin por choque trmico y anestesia empleados para la manipulacin en la toma de sangre afecta los niveles de glucosa y Cortisol en el pez Brycon Siebenthalae (Yam)?

2.3 DELIMITACION DEL PROBLEMA Este trabajo se realizara en el municipio de Cumaral que cuenta con una temperatura de 25c y 452 metros sobre el nivel del mar ubicado en el departamento del Meta, se tomara un muestreo del 10% de la poblacin de un cultivo de peces con una densidad de 240 animales, cuentan con un peso promedio de 200 gr a 300 gr, las muestras sanguneas sern extradas a partir de dos mtodos diferentes de tranquilizacin y anestesia, como lo son el choque trmico y los anestsicos como la Benzocana y el MS222, estas muestras a su ves sern analizadas en el laboratorio de la estacin pisccola la Terraza y el laboratorio clnico de pequeos animales de la Universidad Nacional sede Bogot; esta investigacin experimental se tardara un promedio de 120 das para ser escrita y sustentada con sus resultados finales.

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3. OBJETIVOS

3.1 OBJETIVO GENERAL Cuantificar los niveles de la glucosa y el cortisol como indicadores de estrs en la especie de peces Brycon Siebenthalae (Yam) en un cultivo, mediante la utilizacin de anestesia y tranquilizacin en el municipio de Cumaral Meta.

3.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS

Describir los mtodos de tranquilizacin y anestesia usados para la extraccin de muestras sanguneas en peces. Analizar los resultados obtenidos de las muestras sanguneas Comparar los resultados de los niveles de glucosa y cortisol generados en la manipulacin con los dos mtodos.

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4. ANTECEDENTES

En primer lugar se tiene que el 19 de agosto de 2003 fue presentado en la Facultad de medicina veterinaria del Instituto de acuicultura Universidad de los Llanos, el trabajo especial de grado VALORACION HEMATOLOGICA Y QUIMICA SANGUINEA DEL YAMU BRYCON SIEBENTHALAE EN TRES ETAPAS DEL CULTIVO por ARIAS CASTELLANOS J.A. Bilogo; BENAVIDES BUSTOS M. MVZ; HERNNDEZ ARVALO G. MVZ; ESLAVA MOCHA P.R. MV2 En este trabajo se compararon las variables hematolgicas y los valores de qumica sangunea en alevinos, juveniles y reproductores cultivados, estas muestras sanguneas fueron obtenidas por puncin de la vena caudal. No se hallaron diferencias en el recuento de eritrocitos entre alevinos y juveniles pero s entre estos y adultos. Esto indica, de manera general, la influencia de la edad en los indicadores hematolgicos de la especie, as como estado nutricional, patologas, factores ambientales, del comportamiento, y estado del desarrollo reproductivo.

SOBRE LA ECOLOGIA DE BRYCON SIEBENTHALAE y MYLOSSOMA DURIVENTRIS, EN EL RIO CAFRE, ORINOQUIA. CARLOS USECHE - L. PLUTARCO CALA HUMBERTO HURTADO - R. Departamento de Biologa, Universidad Nacional de Colombia, Apartado 23227, Santaf de Bogot, Colombia.3 En este trabajo se reportan nuevos aspectos sobre la biologa de Brycon siebenthalae (Yam) y de Mylossoma duriventris (Palometa). La reproduccin de especies est altamente relacionada con la estacionalidad hdrica; en ambas especies predomina un hbito alimenticio macroherbvoro, correspondiente a frutos, semillas, hojas, flores y cortezas: para el Yam en un 93% y para la palometa en 99%.

Valoracin hematolgica y qumica sangunea del Yam Brycon siebenthalae en tres etapas del cultivo por arias castellanos j.a. bilogo; Benavides bustos m.v.z.; Hernndez Arvalo g. mvz; eslava mocha p.r. mv
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Sobre la ecologa de Brycon siebenthalae y Mylossoma duriventris, en el rio cafre, Orinoquia. Carlos Useche - l. Plutarco CALA HUMBERTO HURTADO - R. Departamento de Biologa, Universidad Nacional de Colombia

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CARACTERIZACIN CITOGENTICA DEL PEZ NEOTROPICAL BRYCON HENNI, DIANA DAVID LPEZ, GONZALO VSQUEZ PALACIO, TATIANA RUIZ CORTS Y MARTA OLIVERA NGEL. GRUPO BIOGNESIS, UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA, UNIDAD DE GENTICA MDICA, FACULTAD DE MEDICINA, UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA. REVISTA DE BIOLOGA TROPICAL.4

En este trabajo se tratan datos de aspecto ambiental, morfolgico, fisiolgico del pez Brycon henni, genticamente se trataron aspectos diferenciando cromosomas entre especies como el amazonicus, grediff y Montoya entre otros; para dicho procedimiento se emplearon materiales biolgicos y mtodo de toma de muestras.

HEMATOLOGA Y QUMICA SANGUNEA DE JUVENILES DE RUBIO (Salminus affinis PISCES: CHARACIDAE) DEL RO SIN. VCTOR ATENCIO-GARCA; FERNANDO GENES LPEZ Profesional en Acuicultura; DIANA MADARIAGA MENDOZA Profesional en Acuicultura; SANDRA PARDO CARRASCO. Centro de Investigacin Pisccola, Universidad de Crdoba, CINPIC, Montera, Crdoba, Colombia. Universidad Nacional de Colombia, Sede Medelln.5 En este trabajo se analizaron hematolgicamente a peces salmn los cuales fueron atrapados con atarraya y se mantuvieron en aptas condiciones para el proceso de extraccin sangunea.

ESTRESSE EM PEIXES CULTIVADOS. AGRAVANTES E ATENUANTES PARA O MANEJO RENTVEL. ELIANE TIE OBA, WAGNER DOS SANTOS MARIANO & LAILA ROMAGUEIRA BICHARA DOS SANTOS. Manejo e sanidade de peixes em cultivo Tavares-Dias, M (organizador) Embrapa Amap, Macap.
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SOBRE LA ECOLOGIA DE BRYCON SIEBENTHALAE y MYLOSSOMA DURIVENTRIS, EN EL RIO CAFRE, ORINOQUIA. CARLOS USECHE - L. PLUTARCO CALA HUMBERTO HURTADO - R. Departamento de Biologa, Universidad Nacional de Colombia. revista de biologa tropical.
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Hematologa y qumica sangunea de juveniles de rubio (Salminus affinis pisces: characidae) del ro Sin. Vctor Asencio Garca; Fernando Genes Lpez profesional en acuicultura; Diana Madariaga Mendoza profesional en acuicultura; Sandra pardo carrasco. centro de investigacin pisccola, universidad de crdoba, Cinpic, Montera, Crdoba, Colombia. Universidad Nacional de Colombia, sede Medelln.

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En este trabajo se estudiaron los niveles de alimentacin balanceada y de los factores ambientales, dentro de los niveles ideales, los cuales son algunos requisitos bsicos para conseguir un rentabilidad deseada dentro de la piscicultura; dieron como respuesta tres niveles de estrs los cuales dividieron en primarios, secundarios y terciarios, dando como conclusiones el entendimiento bsico de la fisiologa del estrs y las alteraciones ambientales durante un cultivo.6

ESTRESSE EM PEIXES CULTIVADOS. AGRAVANTES E ATENUANTES PARA O MANEJO RENTVEL. ELIANE TIE OBA, WAGNER DOS SANTOS MARIANO & LAILA ROMAGUEIRA BICHARA DOS SANTOS. Manejo e sanidade de peixes em cultivo Tavares-Dias, M (organizador) Embrapa Amap, Macap.

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5. MARCO TEORICO

5.1 CUMARAL META El nombre de Cumaral viene de las palmas de Cumare, que por tiempo de su fundacin, se encontraba silvestre en toda la regin. Esta situado al noreste del departamento del Meta. El Cumare era antiguamente muy abundante en la llanura. De las hojas del nuevo cogollo, ripiadas y torcidas, hacen los indgenas los mecates, cinturones y telas caractersticas de los pueblos amaznicos y las lindas hamacas sencillas con adornos de elegantes flecos, tan elegantes y tiles en el rancho llanero. La airosa palma de Cumare hace parte de la belleza del panorama llanero como lo dice la copla de Luis Ariel Rey. Hay si, si; como la palma de coco, como la palma de coco, como la palma de Cumare. Adems de sus utilidades industriales de elemento de belleza paisajstica, el Cumare ha cobijado con su nombre casi por tres centurias en la poblacin objeto de esta minimonografa. El municipio de Cumaral se encuentra localizado en la parte noroccidental del departamento del Meta, sus coordenadas son 4 grados 16`08 latitud norte y 73 grados 28`59 de longitud oeste, zona del piedemonte llanero. La altura sobre el nivel del mar, es de 452 metros. Limita al norte con el departamento de Cundinamarca y el municipio de San Juanito, al suroeste con el municipio de Restrepo al este con los municipios de Puerto Lpez y Cabuyaro. Su temperatura media es de 21 grados centgrados A 26 kilmetros de Villavicencio.

5.2 FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNICA DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL La historia de la Medicina Veterinaria en Colombia, se inicia con la llegada al pas del Doctor Oton Felipe Brown, veterinario alemn, que se destac en varias batallas de la independencia y mereci del Libertador el grado de Gran Mariscal de Montenegro. El 12 de Junio de 1884 llega a Colombia el sabio profesor e investigador francs y discpulo de Pasteur: Doctor Claude Vericel.

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5.3 ESTACION PSICICOLA LA TERRAZA VILLAVICENCIO La estacin pisccola la Terraza, localizada en la ciudad de Villavicencio (Meta), dedicada a la produccin de peces tanto de consumo como ornamentales. Dirigido por el doctor Miguel ngel Landines Parra actual director de la carrera de Zootecnia de la universidad de Colombia Sede Bogot.

5.4 EL BRYCON SIEBENTHALAE (YAMU) El Yam (Brycon siebenthalae), un carcido neotropical, nativo de los ros de la cuenca del Orinoco ha demostrado un gran potencial para la acuicultura por su excelente calidad de carnes, su fcil adaptacin a condiciones de estanques, posibilidad de reproducirlo artificialmente y su gran velocidad de crecimiento (Arias et al. 1995, Murillo 1999); tales caractersticas han hecho que cada vez sea ms utilizado como un nuevo recurso de la industria pisccola nacional, llegando en 1999 a producirse 256.07 toneladas para el consumo nacional (lNPA 2001). No obstante, la informacin que se tiene sobre tecnologa de cultivo est limitada a unos pocos estudios publicados sobre manejo y reproduccin; se considera que an no existe un paquete tecnolgico completo para su explotacin a nivel comercial. La parte dorsal del Yam es oscura, disminuyendo su intensidad a medida que desciende dorsoventralmente, hasta quedar completamente clara en la regin ventral, la boca del Yam es terminal, dentadura tipo masticadoraplastador y se puede clasificar como un macroherbvoro segn la clasificacin de Welcomme (1979). A finales del periodo seco (abril) los individuos se encuentran en su mximo desarrollo gonadal, es en la temporada donde se realiza la reproduccin, son altamente estacionales y en general su reproduccin se realiza en las inundaciones o al subir el nivel de las aguas al comienzo de la estacin lluviosa. El alimento del Yam consiste principalmente en frutos, semillas y en general de material vegetal terrestre proveniente de la vegetacin aledaa a los cursos fluviales. Insectos y otros artrpodos constituyen una parte insignificante en la dieta. En Colombia las pesqueras del Yam se concentran en el ro Meta, en la poca de inicio de las lluvias (abril y mayo), donde se han registrado hasta 10 toneladas/mes con talla total media de captura de 52 cm. La distribucin altitudinal de la especie se delimita entre los 50-500 m.s.n.m. dado su requerimiento de aguas clidas con rangos de temperatura de 26-

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30 C; estas aguas deben contener O2 disuelto entre 4-7 mg/L, un pH entre 6-7 y una dureza de 15-45 mg/L. La especie es nativa de la cuenca del ro Orinoco y su prevalencia es mayor en afluentes de los ros Meta, Ariari y Guaviare, en Colombia, y los ros Arauca y Apure, en Venezuela.7 La cuenca del rio Orinoco, se caracteriza por los desniveles poco pronunciados que presenta en todo su trayecto, lo cual lo hace propicio en periodo lluvioso (entre marzo y abril) para generar inundaciones temporales, esto contribuye a la adaptacin de distintas especies. El Yam, Brycon Siebenthalae es la especie ms comn de los Llanos Orientales colombianos y la ms explorada para piscicultura, dado su hbito alimenticio omnvoro, su crecimiento rpido y la gran eficiencia alimenticia con raciones con bajos niveles de protena de origen vegetal, ptima calidad de su carne.8

5.5 ESTRS EN PECES La acuicultura en Colombia ha tenido un desarrollo importante en los ltimos aos en cuanto a la produccin de carne de pescado. Segn los datos del Instituto Nacional de Pesca y Acuicultura INPA, la produccin acucola ha venido en franco aumento: en 1991 represent el 7.2% del total de la produccin pesquera nacional, en 1992 se increment para 14.5%, en 1994 lleg a ser del 20.7% y finalmente en 1995 de 21.2%; en el ao 1999 la acuicultura continental alcanz una produccin de 42.969 toneladas, lo que correspondi al 24.0% del total de la produccin acucola nacional (INPA, 2001), convirtindose en una opcin real de produccin de alimentos de alta calidad.9 El estrs es la situacin en la cual el estado de homeostasis (equilibrio) de un organismo es modificado como consecuencia de la accin de un

7 Revista Colombiana de Ciencias pecuarias: Jos A Arias Bilogo, Ms, Phd: Instituto de Acuicultura de la Universidad de los Llanos
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Sobre la ecologa de Brycon siebenthalae y Mylossoma duriventris, en el rio cafre, Orinoquia. Carlos Useche - l. Plutarco CALA HUMBERTO HURTADO - R. Departamento de Biologa, Universidad Nacional de Colombia
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Evaluacin de diferentes proporciones de energa/protena en dietas para juveniles de Yam Brycon Siebenthalae (EIGENMANN, 1912): Yudy M. Lpez Zootecnista, Walter Vsquez T. Bilogo, lvaro Wills F. profesor Instituto de Acuicultura de la Universidad de los Llanos y Universidad Nacional.

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estimulo intrnseco estresante.10

extrnseco,

al

animal,

denominado

agente

Los posibles agentes estresantes en el cultivo de la especie son mltiples y de variado origen:

Manipulacin Factores fsico-qumicos del agua no ptima alimentacin deficiente alta densidad de cultivo baja oxigenacin del agua fotoperiodo y/o termoperiodo no adecuado, vibraciones y ruidos Se manifiesta a travs de Ataxia, Dificultades respiratorias, Cambio de color retraso o nulo crecimiento por la existencia de un metabolismo alterado fallos en la reproduccin por un mal funcionamiento del sistema reproductor alta susceptibilidad a agentes patgenos debido a una disminucin en el sistema inmunitario

De este modo, la existencia de una situacin de estrs crnico en el cultivo originar las respuestas primarias, secundarias y terciarias tpicas de una situacin de estrs. De lo anteriormente expuesto, es lgico comprender que en la prctica acucola es prioritario conseguir eliminar cualquier fuente de estrs para el animal cultivado.

5.6 HISTOLOGIA E HISTOPATOLOGIA La histologa e histopatologa es un campo no investigado suficientemente. Las diversas alteraciones histolgicas que pueden observarse en los peces son resultados de muy distintas situaciones (edad, estrs, infecciones etc.).Por otro lado el examen hematolgico es otra herramienta que permite identificar diversas enfermedades de peces en base a diferentes resultados cualitativos y cuantitativos.

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El sistema de estrs en peces telesteos: Juan Miguel Mancera, Mara del Pilar del Rio, profesores titulares del depto. De Biologa, Facultad de Ciencias del Mar, Universidad de Cdiz.

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Los estudios hematolgicos sobre peces nativos de Colombia son escasos y puntuales a pesar de ser de gran utilidad para la comprensin de la fisiologa, as como para el diagnostico clnico ya sea de poblaciones naturales o de sistemas de cultivo mas aun si se considera la ascendente contaminacin ambiental y proliferacin de agentes patgenos que los pueden afectar.11 Este examen junto con la histopatologa y exploracin fsica del caso individual correspondiente posee un valor definitivo a la hora de emitir un diagnostico.

5.7 HEMATOCRITO Es un examen de sangre que mide el porcentaje del volumen de toda la sangre que est compuesta de glbulos rojos. Esta medicin depende del nmero de glbulos rojos y de su tamao. El hematocrito casi siempre se ordena como parte de un conteo sanguneo completo (hemograma).12 Tras una centrifugacin de la sangre total se pueden apreciar dos niveles, uno con el depsito de los glbulos rojos, principalmente, y otro nivel del plasma total. La relacin porcentual entre ambos es lo que describe el hematocrito y describe el porcentaje de clulas transportadoras de oxgeno con respecto al volumen total de sangre.13 Un hematocrito reducido puede ser un indicador de anemia y un valor elevado se observa en casos de deshidratacin. El valor del hematocrito constituye un ndice indirecto de la capacidad de transporte de oxigeno de la sangre y es un parmetro importante para detectar una anemia o una policitemia.14

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Valoracin hematolgica y qumica sangunea del Yam Brycon siebenthalae en tres etapas del cultivo por arias castellanos j.a. bilogo; Benavides bustos m.v.z.; Hernndez Arvalo g. mvz; eslava mocha p.r. mv
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Bunn HF. Approach to the anemias. In: Goldman L, Schafer AI, eds. Cecil Medicine. 24th ed. Philadelphia, Pa: Saunders Elsevier; 2011:chap 161.
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ndice Hematocrito, anlisis de laboratorio; tuotromedico.com Estudio de las determinaciones hematolgicas en sangre; Laboratorio de Fisiologa-Fisiologa animal.

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5.8 PROTEINAS Las protenas son complejas sustancias orgnicas nitrogenadas y tienen un papel fundamental en la estructura y funcin de las clulas tanto animales como vegetales. Cada especie tiene protenas caractersticas, lo que le confiere su carcter especifico, tanto gentico como inmunolgico. La palabra protena viene del griego proteos que quiere decir el primero, ya que forma parte bsica de la estructura corporal. Este trmino fue sugerido por Mulder, qumico holands en el siglo XIX para designar el componente universal de todos los tejidos vegetales y animales. Sin protenas no hay vida en nuestro planeta, a travs de ellas se producen los principales fenmenos de la vida. El principal papel de las protenas de la dieta es servir como fuente principal de aminocidos, los cuales son utilizados para la sntesis de protenas nuevas en nuestro organismo.15 El plasma sanguneo contiene protenas que son esenciales para cumplir determinadas funciones del organismo, son comnmente llamadas protenas plasmticas, y constituyen la mayor parte de solidos del plasma. La concentracin total de estas protenas en sangre es de entre 6 a 8 gramos por cada 100 mililitros. Sus funciones son el transporte y almacenamiento, el balance de fluidos (agua y electrolitos), respuesta de fase aguda con anticuerpos en el sistema inmune como complementos, construyen y reparan tejidos, funcionan como enzimas y hormonas, ayudan en la coagulacin. La sntesis de las diferentes protenas se realiza en diversos rganos entre los que cabe destacar el hgado, aunque tambin se sintetizan en los tejidos perifricos, diferentes mucosas y linfocitos.16

5.9 METODOS DE EXTRACCION SANGUINEA Los mtodos de extraccin sangunea en peces se pueden realizar de dos formas:

CON EL PEZ VIVO: Se introduce el pez en agua y se le pone un anestsico: Benzocana, MS 222. Se hace la extraccin de la vena caudal (debajo de la columna) con una aguja de insulina. Para que no coagule la sangre, se introduce inicialmente en la

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Protenas plasmticas; Brandan Nora, Bioqumica, Universidad del Nordeste, Facultad de medicina, catedra de Bioqumica.
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Protenas Plasmticas; Fundacin Universitaria San Martin, Facultad de medicina Veterinaria y Zootecnia.

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agujas HEPARINA, un anticoagulante. Se aplica una gota en la lmina y se extiende con otra lmina, se realiza tincin y listo.

SI EL PEZ ES PEQUEO: Se medio sacrifica/anestesia con hielo y se le secciona la zona caudal y lo que gotea se recoge.

Para manipular los peces es necesario tener en cuenta si los ejemplares pueden o no ser sacrificados. Si el animal debe ser sacrificado, puede realizarse de diferentes formas: decapitacin, por sobredosis de anestesia, por frio, por concusin.17

5.10

SEDACIN/ANESTESIA

El choque trmico o hipotermia consiste en la introduccin de los peces en un congelador o en hielo picado, prolonga el periodo de consciencia y no reduce la capacidad de sentir dolor Como norma general debemos hacer llegar los animales a la anestesia del modo ms cmodo para nosotros, que seguramente, sea el menos estresante para los animales. Evitar dosis menores de las indicadas para que la induccin sea rpida. Consideremos a los animales anestesiados justo cuando habiendo perdido el equilibrio natatorio cesen los movimientos branquiales y no muestre reflejos tctiles. El tiempo prctico de utilizacin de los animales se reduce a un par de minutos fuera del agua. Si se observase alguna reaccin del animal se lo puedo volver a sumergir en la solucin anestsica unos segundos. Puede mantenerse al animal con la zona opercular tapada por un trapo muy hmedo (la misma solucin anestsica) para saturar el aire de humedad.

USO DE ANESTSICOS: Se utilizan anestsicos para las siguientes actividades: inmovilizacin, transporte, manipulacin, muestreos, exmenes patolgicos.

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Tcnicas bsicas para el diagnostico de enfermedades de peces. Reme Cabrera.

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5.10.1 ANESTSICOS MS USADOS: * MS 222: Dosis- 1g/10 litros Precauciones: Toxico, posible cancergeno. Utilizar siempre guantes. Observaciones: Anestesia aparentemente buena. Induccin rpida pero recuperacin estresante. No utilizar si se pueden utilizar cualquiera de los dos siguientes. * FENOXIETANOL: Dosis-0.6-1 ml /1 litro Precauciones: Utilizar con guantes Observaciones: Buen anestsico en general, pero se producen variaciones individuales bastante acusadas. Sensibilidad individual muy variable a la sobredosificacin. Recuperacin de la anestesia es buena. * ESENCIA DE CLAVO: Dosis-50 a 100 ppm (5-10ml/100 litros) Precauciones: Si no se manipula con cuidado puede anestesiar localmente, labios, parpados, etc. Olor tpico muy penetrante. Aunque es inocuo es aconsejable utilizarlo con guantes, como norma general de laboratorio y para evitar el contacto contino durante los muestreos. Observaciones: Anestsico seguro, que permite ciertos errores en las dosis, puede utilizarse como preanestsico. Recuperacin muy buena. Permite anestesias de larga duracin, se disuelve con dificultad en el agua, por lo que conviene prepararlo con antelacin y agitacin severa con aire o diluirlo en etanol en el momento del uso. Cuando se utiliza directamente en los acuarios conviene despus vaciar todo el acuario para eliminar todos los restos del producto porque al tratarse de un aceite se mantiene en superficie siendo difcil de eliminar rpidamente por la dilucin. * BENZOCAINA: Dosis 20 a 30 mg/L Precauciones: Primero se disuelve en etanol o acetona generalmente 100g/L, no es seguro para exposiciones de mas de 15 minutos, Observaciones: Su eficacia no se ve afectada por la dureza o el ph del agua, es soluble en grasa. produce menos hper-actividad y la reaccin de estrs, tiene una margen de seguridad, aunque parece ser que se reduce a temperaturas altas, la recuperacin puede ser prolongada en peces de mas edad o hembras grvidas. PREANESTESIA: Como tranquilizante anterior a la anestesia usara Fenoxietanol o Aceite de clavo. Las dosis son variables en funcin de lo que se quiera realizar. Como idea general no

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se utilizara ms del 30% de la dosis anestsica para evitar la defensa a la induccin. Despus anestesiar rpidamente RECUPERACION: Si el caudal en el acuario de estabulacin es el correcto y esta lleno, lo mejor es recuperarlos en el acuario. Si no es as se debe recuperar en un recipiente similar al de anestesia con buen caudal de agua para retirar rpidamente los restos de anestsico y sus metabolitos. Cuando el animal parezca recuperar la natacin devolverlo al acuario de estabulacin. Se trata de evitar otra manipulacin estresante para el animal.18

5.10.2 GRADOS DE SEDACION

SEDACION LIGERA: movimientos y ventilacin reducidos SEDACION PROFUNDA: sedacin ligera + leve anestesia ANESTESIA LIGERA: analgesia profunda + perdida de equilibrio ANESTESIA PROFUNDA: tono muscular nulo, perdida de equilibrio y ventilacin COLAPSO MEDULAR / SHOCK ANESTESICO: infarto cardiaco + muerte.

18

Anestesia en peces; Tomado de un libro de google.

23

Tabla n1 Estados anestsicos; Tomado de Gonzales Mantilla JF. Asociacin de veterinarios de vida silvestre (vvs) ISSN 2011 9348

5.11

GLUCOSA

La glucosa es un tipo de protena llamada enzima que ayuda a que los glbulos rojos trabajen apropiadamente. El producto principal de la digestin de los carbohidratos es la glucosa originada principalmente a partir del almidn, la glucosa se mueve por el organismo a travs de la sangre y su nivel se mantiene dentro de unos limites bastantes estrechos, esto se debe al resultado de dos procesos opuestos; paso de glucosa a sangre procedente del alimento y de la acumulada en el hgado y otros rganos y salida de glucosa del torrente circulatorio con fines de oxidacin y sntesis en los tejidos donde sea requerida.

24

Es de conocimiento que la glucosa es esencial en animales superiores para el funcionamiento de los tejidos (cerebro, sistema nervioso central, eritrocitos, gnadas, etc). Los peces poseen la habilidad de mantener la concentracin de glucosa sangunea en nivel constante19

5.12

CORTISOL

El cortisol es un hormona esteroidea producida por la glndula suprarrenal, derivada del colesterol, la cual es segregada como respuesta ante el estrs, de esta forma aumenta la concentracin de glucosa en la sangre a partir de la reserva de grasa, disminuye la utilizacin de la glucosa por la mayora de las clulas para aumentar el aporte de la glucosa a las clulas cerebrales y cardiacas, utiliza las protenas para reparar tejidos, y suprime las respuestas inmunes e inflamatorias, por lo tanto un animal estresado es mas propenso a contraer enfermedades. El cortisol es sintetizado en clulas interrenales, situadas en la porcin ceflica del rin. El rin de los peces es un rgano mixto, compuesto por elementos hematopoyticos, reticuloendoteliales, endocrinos y excretores, que participan en la osmoregulacin, hematopoyesis, metabolismo endocrino y excrecin (Matty, 1985). En esta aparente simplicidad anatmica se localizan las glndulas interrenales, clulas cromafines, folculos tiroideos y una amplia red vascular y nerviosa. Esta disposicin no es casual, demostrando la importante relacin entre sistema inmune, endocrino y nervioso, que se presenta aun en las especies filogenticamente mas antiguas.20

19

Caracteristicas hematolgicas de telesteos brasileiros .I: Serie vermelha e dosagens de cortisol e glicose do plasma sanguneode especmenes de Colossoma
20

Respuestas neuroendcrinas al estrs en peces telesteos, Carolina Flores Quintana, Facultad de ciencias veterinarias. Insitituto de ictiologa del Nordeste (INICNE) Universidad Nacional del Nordeste.

25

METODOLOGIA

Para el desarrollo del trabajo, se tomara una muestra representativa de 24 animales de un cultivo de peces ubicado en Cumaral Meta, los cuales se encuentran en estanques de tierra de donde sern sustrados y trasladados dos das antes del experimento a la ciudad de Villavicencio a la estacin pisccola la Terraza, los cuales sern dejados en piletas para su mejor manejo. Los 24 peces se dividirn en grupos de 8 peces para una mejor manipulacin y evitar de esta forma estrs anticipado, utilizando dos mtodos de tranquilizacin y anestesia para la toma de las muestras sanguneas: CHOQUE TERMICO: Se preparo una tina con 2 litros de agua con temperatura de 25C en la cual se adiciono hielo, bajando su temperatura a 7C. Se introdujeron los peces de 1 a 2 minutos tiempo que se demoraron los animales en quedarse sedados, a cada uno de estos se le realizo la extraccin de 3ml de sangre a travs de la puncin en la vena caudal, con jeringa de 5 ml, y aguja calibre 22. Al terminar la puncin y el pesaje, los peces fueron colocados en una tina con 2 litros de agua a temperatura ambiente para su recuperacin.

Figura N1 Y 2 CHOQUE TERMICO Fotos tomadas por: Diana Agudelo y Natali Riveros

ANESTESIA: Se prepararon dos tinas cada una con 2 litros de agua a temperatura ambiente, en la primera tina se agreg anestsico MS222 (TRICAINA METANOL-SULFATO) con una dosis de 2gr por cada 20 litros, y en la segunda tina se agreg Benzocana (ETIL AMINOBENZOATO) disuelto en etanol con una dosis de 2.5 gr por cada 2 litros, seguidamente se trajo el segundo grupo de 8 peces y se colocaron en el primer anestsico

26

durante 1 minuto, tiempo que se demoraron los animales en quedar anestesiados, a cada uno de estos se le realizo la extraccin de 3ml de sangre a travs de la puncin en la vena caudal, con jeringa de 5 ml, y aguja calibre 22. Al terminar la puncin y el pesaje, los peces fueron colocados en una tina con 2 litros de agua a temperatura ambiente para su recuperacin. Para finalizar se trajo el tercer grupo de 8 peces y se colocaron en el segundo anestsico durante 1.5 minutos, tiempo que se demoraron los animales en quedar anestesiados, a cada uno de estos se le realizo la extraccin de 3ml de sangre a travs de la puncin en la vena caudal, con jeringa de 5 ml, y aguja calibre 22.

Figura N3 MS222 Foto tomada por: Natali Riveros

Figura N4 BENZOCAINA Foto tomada por: Natali Riveros

27

NUMERO DE ANIMALES 24

ANESTESIA MS22 8

ANESTESIA BENZOCAINA 8

CHOQUE TERMICO. 8

TABLA N 2 NUMERO DE PECES MUESTREO

Se tomaron 3 ml de sangre de cada pez, de los cuales 1.5 ml se utilizaron para analizar hematocrito, protenas y glucosa y el resto fue centrifugado, quedando de esta forma el suero de la sangre, y de esta manera congelarlo para su almacenamiento a una temperatura de 4 centgrados en hielo, para evitar su alteracin en el transporte hacia el laboratorio clnico de pequeos animales de la Universidad Nacional sede Bogot, donde se llevo acabo el anlisis del suero sanguneo para el anlisis del cortisol. 6.1 Anlisis de microhematocrito: se tomo sangre de cada una de las muestras con un capilar de vidrio y se llena 2/3 se sello con plastilina el extremo que no estuvo en contacto con la sangre. se coloco el capilar sobre la plataforma del cabezal de la microcentrfuga, con el extremo sellado hacia afuera se centrifugo por 5 minutos a 10.000 rpm. la lectura de los resultados se realiza manualmente con el baco establecido para peces. Se enrasa el capilar a nivel 0 con el limite de la plastilina y con una lnea recta se coloca al 100 con el final de la muestra y se lee donde termina la capa eritrocitaria.
Figura N5 MICROCENTRIFUGADOR Foto tomada por: Emily Lugo Figura N6 CAPILAR tomada por: Emily Lugo

Figura N7 ABACO MICROHEMATOCRITO Foto tomada por: Emily Lugo

28

6.2

Anlisis de la glucosa; Se utilizo un glucmetro de marca Accu-Chek Active, el cual cuenta con prendido automtico apenas se le coloca tira reactiva, se espero a que saliera la imagen de anlisis y se aplic la gota de sangre en esta, seguidamente arrojo los resultados de los niveles de glucosa en sangre.

Figura N8 GLUCOMETRO Foto tomada por: Diana Agudelo Figura N9 USO GLUCOMETRO Foto tomada por: Emily Lugo

6.3

Anlisis de las protenas: Se Utilizo un refractmetro digital porttil, en el cual se introdujo una gota del suero plasmtico, para observar la concentracin de los solidos solubles de protena.

Figura N10 REFRACTOMETRO Foto tomada por: Diana Agudelo

29

7. RESULTADOS Y ANALISIS

CHOQUE TERMICO IDENTIFICACION PEZ 1 PEZ 2 PEZ 3 PEZ 4 PEZ 5 PEZ 6 PEZ 7 PEZ 8 PROMEDIO desviacion desviacion % PESO gr GLUCOSA mg/dl HEMATOCRITO % PROTEINA g/dl CORTISOL nmol/L 230,50 71,00 55,00 3,50 1243 231,50 55,00 56,00 5,30 1590 223,00 69,00 48,00 4,40 1316 223,00 82,00 39,00 4,70 1020 467,50 57,00 64,00 7,60 1637 244,50 70,00 56,00 6,40 1547 264,50 77,00 45,00 5,20 1480 246,70 72,00 50,00 6,10 1454 278,20 71,17 50,33 5,73 1409 0,82 0,96 0,77 1,20 206 0,29 1,35 1,53 20,93 14,65

Tabla n 3; Resultados tratamiento choque trmico

ANESTESIA MS222 PESO IDENTIFICACION gr GLUCOSA mg/dl HEMATOCRITO % PROTEINA g/dl CORTISOL nmol/L PEZ9 215 89 65 4,2 1215 PEZ 10 177,7 101 61 4 1142 PEZ 11 147,4 87 65 5,9 1523 PEZ 12 293,8 74 47 5,3 1419 PEZ 13 285,7 77 45 4,4 1416 PEZ 14 195,7 79 44 4,6 1450 PEZ 15 200,2 112 61 4,9 813,9 PEZ 16 132 93 40 3,4 1168 PROMEDIO 209,13 87,00 50,33 4,75 1298 desviacion 58,54 12,88 10,45 0,78 232 desviacion % 27,99 14,81 20,76 16,44 17,89

Tabla n 4; Resultados tratamiento MS222

30

ANESTESIA BENZOCAINA PESO IDENTIFICACION gr GLUCOSA mg/dl HEMATOCRITO % PROTEINA g/dl CORTISOL nmol/L PEZ 17 229,5 91 37 3,8 1473 PEZ 18 289,4 72 45 4 1101 PEZ 19 245,3 100 48 4,7 1008 PEZ 20 268 99 49 4,7 1020 PEZ 21 260,3 127 41 4,1 1346 PEZ 22 236,3 101 46 4,1 1411 PEZ 23 269,3 86 48 4,7 1363 PEZ 24 188,5 115 46 4,1 749 PROMEDIO 244,62 104,67 46,33 4,40 1150 Desviacion 31,04 16,93 4,07 0,37 253 desviacion % 12,69 16,18 8,79 8,31 21,99

Tabla n 5; Resultados tratamiento Benzocana

7.1 TABLAS DE COMPARACION

NIVELES NORMALES

GLUCOSA HEMATOCRITO PROTEINA mg/dl % g/dl 70 a 110 90 40 a 50 45 2a6 4

CORTISOL nmol/L 689.75 a 827.7 758.725

Tabla n 6; niveles normales componentes sanguneos

Tratamiento 1 2 3

MEDIAS DE COMPARACION GLUCOSA PROTEINA mg/dl HEMATOCRITO% g/dl 71,17 50,33 5,73 87,00 50,33 4,75 104,67 46,33 4,40

CORTISOL nmol/L 1409 1298 1150

Tabla n 7; medias de comparacin tratamientos

31

En la tabla n7 se muestran los valores de las medias de los tratamientos 1, 2 y 3, los cuales nos muestran: a) los valores de la glucosa se encuentran mas aumentados en los tratamientos 2 y 3, con respecto al tratamiento n 1. El tratamiento n 3 muestra que si la glucosa se encuentra aumentada, el hematocrito, las protenas y el cortisol tienden a disminuir.

GLUCOSA mg/dl
120,00 nNIVELES DE GLUCOSA 100,00 80,00 60,00 40,00 20,00 0,00 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 TRATAMIENTOS GLUCOSA mg/dl

GRAFICA N 1; DISPERSION MEDIAS PARA GLUCOSA

En la grafica n1 se observan los niveles de glucosa por cada tratamiento:

Tratamiento 1 y 2: La glucosa se encuentra por debajo de la media pero se encuentra dentro del rango normal.

32

Tratamiento 3: La glucosa se encuentra por encima de la media pero se encuentra dentro del rango normal.

HEMATOCRITO%
51,00 50,50 50,00 49,50 49,00 48,50 48,00 47,50 47,00 46,50 46,00 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 TRATAMIENTOS NIVELES DE HEMATOCRITO

HEMATOCRITO%

GRAFICA N2; DISPERSION MEDIAS PARA HEMATOCRITO

En la grafica n2 se observan los niveles de hematocrito por cada tratamiento

Tratamiento 1 y 2: El hematocrito se encuentra por encima de la media y por encima de los rangos normales.

Tratamiento 3: El hematocrito se encuentra por encima de la media, pero dentro del rango normal.

33

PROTEINA g/dl
7,00 NIVELES DE PROTEINA 6,00 5,00 4,00 3,00 2,00 1,00 0,00 0 1 2 TRATAMIENTOS 3 4 PROTEINA g/dl

GRAFICA N 3; DISPERSION MEDIAS PARA PROTEINA

En la grafica n3 se observan los niveles de protena por cada tratamiento.

Tratamiento 1: La protena se encuentra por encima de la media y fuera del rango normal.

Tratamientos 2 y 3: La protena se encuentra por encima de la media pero dentro del rango normal.

34

CORTISOL nmol/L
1600 NIVELES DE CORTISOL 1400 1200 1000 800 600 400 200 0 0 1 2 TRATAMIENTOS 3 4 CORTISOL nmol/L

GRAFICA N 4; DISPERSION MEDIAS PARA CORTISOL

En la grafica n4 se observan los niveles de cortisol por cada tratamiento.

Tratamientos 1,2 y 3: El cortisol se encuentra por encima de la media y por fuera del rango normal, resaltando que el tratamiento n 3 tuvo un incremento menor con respecto a los tratamientos 1 y 2.

35

8. CONCLUSIONES

Las practicas de manejo en la piscicultura, son estresantes para los peces afectando directamente los costos de la produccion, las practicas de manejo adoptadas deben ser realizadas con cuidado, de forma que al disminuir el estrs concecuentemente disminuyen los riesgos de mortalidad Cuando hay mal regulacion de los niveles de glucosa en sangre, se ven afectados varios tejidos como cerebro, globulos rojos y musculo blanco puesto que la glucosa es el combustible de estos. Durante las pruebas experimentales con cada uno de los tratamientos los niveles plasmaticos de la glucosa y el cortisol tuvieron cambios en cuanto a las medias de cada uno.

El incremento de cortisol en los peces inhibe el desempeo reproductivo, el creciemiento y la conversion alimenticia, por esta razon es importante en la manipulacion de los peces aplicar un metodo de sedacion u anestesia adecuado que genere el menor estrs. Segn los resultados obtenidos se concluye que el tratamiento mas adecuado para la manipulacin de los peces , y asi evitar ndices de estrs altos es la Benzocana (acetil-benzoato) por sus compuestos activos y sus propiedades como anestesico.

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9. SUGERENECIAS Y RECOMENDACIONES

Evitar la utilizacin del choque trmico como mtodo de manipulacin, puesto que este prolonga el periodo de conciencia y no reduce la capacidad de sentir dolor en peces. El uso de anestsicos como el MS222, debe realizarse bajo supervisin de personal calificado, ya que deben tenerse en cuenta las contraindicaciones en su utilizacin y manejo.

La benzocana como anestsico es un mtodo favorable puesto que es confiable en su utilizacin y es econmico en el mercado, adems de que la recuperacin en peces es muy rpida. Realizar ms estudios enfocados en otros mtodos de anestesia o sedacin en peces, ya sea de la especie utilizada para este proyecto o en otras especies.

Realizar estudios enfocados en las diferentes patologas que se pueden desencadenar por estrs en peces, utilizando las diferentes ayudas cientficas que se puedan presentar y que se tenga accesibilidad. Aprovechar y acudir a las diferentes instalaciones forneas donde se lograron accesos, para ofrecerle ms credibilidad a los diferentes proyectos investigativos que se den en un futuro en la Corporacin Educativa Nacional CEN.

37

10. BIBLIOGRAFIA

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38

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40

12. ANEXOS

CONSUMOS

COSTO

Viticos Transporte Compra Animales y asistencia tcnica Materiales Hielo y nevera Glucmetro Tiras reactivas Anlisis de laboratorio: Hematocrito y protena Cortisol TOTAL $280.000 $ 110.000 $ 160.000

$ 240.000

$ 791.000

TABLA N 8 PRESUPUESTO

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Actividades

AGO

SEP

OCT

NOV

DIC

1.a 2.a 3.a 4.a 5.a 6.a 7.a 8.a 9.a 10.a 11.a 12.a 13.a 14.a 15.a 16.a 17.a 1. Entrega sustentacin anteproyecto 2.Entrega anteproyecto corregido 3. Visita y toma de muestras sanguneas. 4. Anlisis muestras sanguneas de y

5. Sustentacin avance de anteproyecto 1 6 Realizacin poster 7. Entrega poster 8. Exposicin del poster 9. Avance anteproyecto numero 2 10. Entrega trabajo final para revisin

11. Ajustes trabajo final 12. Sustentacin trabajo final 13. Entrega del artculo, medio magntico.

Tabla n 9 cronograma de trabajo

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ALBUM FOTOGRAFICO

Foto tomada por: Emily Lugo

Foto tomada por: Natali Riveros

Foto tomada por: Sandra Martnez

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Foto tomada por: Nataly Riveros

Foto tomada por: Natali Riveros

Foto tomada por: Natali Riveros

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Foto tomada por: Emily Lugo

Foto tomada por: Emily Lugo

Foto tomada por: Diana Agudelo

Foto tomada por: Emily Lugo

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Foto tomada por: Diana Agudelo

Foto tomada por: Emily Lugo

Foto tomada por: Emily Lugo

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Foto tomada Agudelo

por:

Diana

Foto tomada por: Emily Lugo

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