Departamento de Microbiologia Instituto de Cincias Biolgicas Universidade Federal de Minas Gerais http://www.icb.ufmg.

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Citologia e fisiologia bacteriana

Introduo As bactrias possuem vrias formas e tamanhos. Elas podem variar de menos de 0,1 m a at 1,0 mm, ficando o tamanho mdio da maioria em torno de 1,0 m, sendo apenas vistas ao microscpio ptico. O menor grupo de bactrias acreditava-se, at bem pouco tempo, ser as dos gneros Chlamydia e Rickettsia, com 0,2 m e 0, 3 m de comprimento, respectivamente, mas recentemente foram descobertas bactrias, denominadas nanobactrias, que podem chegar a at 0,05 m de comprimento. Bactrias gigantes tambm j foram descritas como as da espcie Thiomargarita namibiensis que chegam a medir 0,8 mm de comprimento. Quanto forma, as bactrias podem ser classificadas basicamente em cocos esfricos, em bacilos (forma de basto) e em espiral. Essas formas podem ainda apresentar variaes. Os cocos, por exemplo, podem tambm se apresentar ovais (cocode), alongados (cocobacilos) ou achatados em uma das extremidades. Os bacilos tambm podem ter variaes em suas extremidades, sendo arredondadas, afiladas (fusobactria) ou quadradas (retangulares), e em forma de meia lua. As bactrias espirais podem ser curvas com extremidade arredondada, parecendo vrgulas (vibries), afiladas, ou serem espiraladas, lembrando um saca-rolha (espirilos) ou com o corpo flexvel (espiroquetas). Essas clulas tambm podem se agrupar formando uma variedade de arranjos. Os cocos podem aparecer isolados, aos pares (diplococos), em cadeia (estreptococos), em cachos (estafilococos), em grupo de quatro clulas formando uma ttrade ou tetranca, ou em grupo de oito clulas formando um cubo (sarcina). Os bastonetes tambm podem se apresentar isolados ou agrupados, podendo ser encontrados em dupla (diplobacilos), formando uma cadeia (estreptobacilos), em paliada, lembrando uma parede de tijolos, em forma de letra chinesa, ou formando agrupamentos miceliais, lembrando fungos filamentosos (Quadro 1). A forma das clulas bacterianas determinada por fatores genticos e pela presena da parede celular. Remodelagens nos peptideoglicanos que compem a parede celular podem alterar a forma da clula, indicando que a localizao e a sntese desses polissacardeos influenciam na morfologia bacteriana geral. A gentica tem comprovado que um agrupamento de genes, como mreB, mreC, mreD e rodA, codificam fatores que esto envolvidos na sntese de pertideoglicanos e na sua remodelagem. Recentemente, tambm foi descoberta a existncia de citoesqueleto em bactrias, e sua participao como sendo um dos elementos responsveis pela forma da clula bacteriana.

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Quadro 1: Formas bsicas e arranjos celulares em bactrias. Formas bacterianas Arranjos celulares Representao esquembsicas tica das formas Esfricos Isolados Cocides Cocobacilos Diplococos Estreptococos Estafilococos Ttrades Sarcinas Extremidades arredondadas Retangulares Fusobactria Meia lua Bacilos ou bastonetes Diplobacilos Estreptobacilos Em paliada Em forma de letra chinesa Micelial Vibries Espiral Espirilos Espiroquetas
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Exemplos

Chlamydia trachomatis Enterococcus Mycoplasma, Brucella Neisseria gonorrhoeae Streptococcus hemolytiStaphylococcus aureus Micrococcus Sarcha ventriculi Salmonella, E. coil, Pseudomonos Bacillus anthracis Fusobacterium Selenomonas Diplobacillus variabilis Bacillus megaterium Corynebacterium Corynebacterium diphteriae Streptomyces Vibrio cholerae Campylobacter Spirillum Treponema Leptospira, burgdorferi pylori, pallidum, Borrelia

Cocos

Isolados

Ultraestrutura bacteriana A clula bacteriana possui vrias estruturas, algumas delas sendo essenciais, estando sempre presentes nas clulas, e outras fazendo parte apenas de determinadas espcies ou grupos de bactrias (Figura 1).

Figura 1: Representao esquemtica das estruturas de uma clula bacteriana tpica. Neste corte longitudinal possvel a visualizao das estruturas internas e externas. Um modelo de estudo a E. coli.

1. Cpsula e glicoclix Nem todas as bactrias possuem essa estrutura, sendo divididas em capsuladas e acapsuladas. Ela a parte mais externa da clula e um determinante de virulncia de muitas espcies patognicas, como as dos gneros Streptococcus, Staphylococcus e Bacillus e as da famlia Enterobacteriaceae. Algumas bactrias de importncia industrial tambm a possuem, como as Leuconostoc e as Xanthomona, produtoras das gomas dextrana e xantana, respectivamente. A cpsula uma camada gelatinosa que envolve toda a bactria e esta fortemente associada superfcie celular, de forma generalizada ela chamada de glicoclix. composta por polissacardeos sintetizados por enzimas presentes na superfcie celular, exceto em Bacillus anthracis e Bacillus liceniformis, que composta de cido poli-D-glutanato. O glicoclix pode apresentar variaes na espessura e na flexibilidade. Se ele mais condensado e rgido, o glicoclix chamado de cpsula, se mais frouxo e no inclui partculas, chama-se camada limosa, ou mucosa ou de slime. O glicoclix no uma estrutura essencial para a clula bacteriana mais pode desempenhar importantes papis. Tem funo na proteo contra dissecao do meio e pode ser um reservatrio de gua e nutrientes. A cpsula tambm atua na aderncia da bactria na superfcie do hospedeiro e de substratos, devido a receptores especficos que servem com stios de ligao com outras superfcies. Uma causa dessa adeso a formao de biofilmes que so responsveis por problemas industriais e hospitalares. Na indstria, a formao de biofilmes em tubulaes pode perfur-los causando vazamento de materiais, como leo. Muitas infeces hospitalares podem ter relao com a formao de biofilmes em cateteres. Mas esses polmeros extracelulares tambm podem ter fins econmicos na indstria alimentcia e de cosmticos, por exemplo, como emulsificantes e espessantes, alm de outras utilizaes.
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O glicoclix desempenha ainda outras funes. As bactrias encapsuladas patognicas tm maior capacidade invasiva e so dificilmente reconhecidas e destrudas por fagcitos, alm de inibir o sistema de complemento. Os microrganismos formadores de biofilme tm maior resistncia a biocidas. 2. Parede clula A parede celular a estrutura comum a todas as bactrias, com exceo de uma nica espcie, Mycoplasma, que so circundadas apenas pela membrana celular. Como j dito, ela atua conferindo rigidez e mantendo a forma celular. Tambm tem a funo de suportar a presso de turgor sofrida pela clula bacteriana, devido s altas concentraes de solutos dissolvidos em seu interior, e importante na diviso celular, dando origem ao septo que separa as duas clulas. A parede celular de procariotos de difcil visualizao ao microscpio ptico, mas pode ser observada ao microscpio eletrnico. A estrutura, os componentes e as funes da parede celular distinguem as bactrias em gram-positivas e gram-negativas e em lcool-cido resistentes (B.A.A.R), estas ltima sendo representadas pelo gnero Mycobacteruim. Este grupo de bactrias tem a particularidade de possuir em sua parede cerdeos e cidos miclicos que lhes confere resistncia a corantes cidos, no sendo facilmente corado pela tcnica de Gram como nas demais bactrias. O domnio Archaea tambm no apresenta uma parede tpica de bactrias, tendo somente um tipo de cido em sua estrutura ou apenas protenas. O constituinte bsico da parede celular das bactrias Gram positivas e negativas so os peptideoglicanos, tambm chamados de murena ou mucopeptdio, que so polmeros complexos. As Gram positivas apresentam uma espessa camada dessas macromolculas (90% da parede), alm de cidos teicicos e lipoteicico, enquanto as Gram negativas apresentam uma fina camada de peptideoglicanos (10% da parede), um espao periplasmtico e uma membrana externa, incluindo lipopolissacardeos (LPS) (Figura 2). O peptideioglicano uma estrutura macromolecular covalente formada por rgidas camadas de glicano formando uma trama em meio a flexveis pontes de peptdeos. Ele constitudo por mais duas partes: um arcabouo, composto por N-acetilglicosamina (GlcNAc) e cido N-acetilmurmico (MurNAc) alternados; e um conjunto de cadeias laterais de tetrapeptdios ligados ao MurNAc (Figura 3). Os componentes e a modelagem dos peptideioglicanos esto bem elucidados, mas a sua organizao ainda no bem compreendida. Acreditava-se que eles eram arranjados eram em paralelo membrana plasmtica, mas estudos recentes tm demonstrado que esse arranjo em posio perpendicular, mudando uma viso tradicional sobre a parede celular de bactrias.

Figura 2: Representao esquemtica da parede celular de bactrias Gram positivas e Gram negativas. (a) Parede de Gram positivas, mostrando uma espessa camada de peptideioglicanos, englobando cidos teicicos e cidos lipoproticos, que se estendem para a membrana celular. (b) Parede de Gram negativa, formada por uma membrana externa, que inclui porinas e lipopolissacardeos, ligada a uma fina camada de peptideioglicano por lipoprotenas. A camada de peptideoglicano fica dentro do espao periplasmtico, localizado entre as membranas.
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Na parede de bactrias Gram positivas o cido tecico pode compreender at 50% da massa seca da parede. Ele um polmero formado por resduos de glicerol ou ribitol ligados por fosofodister, sendo divididos em cido teicico e lipoteicico, estes esto intimamente ligados poro lipdica da membrana celular. A parede celular das bactrias Gram-negativa mais complexa. A membrana externa formada por uma dupla camada lipdica, a sua parte interna composta basicamente de fosfolipdeos e hidrofbica, e a parte voltada para o exterior por lipopolissacardeos e protenas e hidroflica. O LPS, tambm chamado de endotoxina, constitudo por um lipdio complexo, o lipdio A, ligado ao antgeno O. As principais protenas da membrana externa so as porinas que formam poros permitindo a passagem passiva de solutos. O espao periplasmtico, localizado entre a membrana externa e citoplasmtica, contm a camada de peptideoglicano, enzimas hidrolticas, para quebra de macromolculas, enzimas capazes de inativar drogas e protenas transportadoras de solutos.

Figura 3: Representao esquemtica da estrutura qumica do peptideoglicano. As repeties constitudas por N-acetilglicosamina (GlcNAc) e cido N-acetilmurmico (MurNAc) formam os vertentes de glicano que so ligados por pontes peptdicas cruzadas. Essas ligaes so dependentes do cido diaminopimlico (DAP). Setas vermelhas indicam reaes de sntese e as amarelas, clivagem. (a), atividade transglicosilase; (b), atividade transpeptidase, com perda do terminal D-alanina e um pentapeptdeo; (c), atividade transglicosilase ltica; (d), atividade endopeptidase; (e), atividade carboxipeptidase; (f), atividade amidase; (g), atividade N-acetilglicosaminidase.

As Tabelas 1 e 2 mostram as principais funes dos constituintes das paredes celulares de bactrias Gram positivas e Gram negativas.
Tabela 1: Constituintes da parede celular de bactrias Gram positivas e suas principais funes
Constituinte Peptideoglicano

cido teicico e lipoteicico

Principais funes Possibilita o suporte rgido e a forma celular; protege contra presso osmtica; o stio de ao das penicilinas e das cefalosporinas; degradada com lisozima Principal antgeno de superfcie; promove a aderncia do microrganismo s mucosas; facilita a ligao e a regulao da entrada e sada de ctions na clula; regula a atividade das autolisinas na diviso celular; constitui stios de recepo de bacterifagos

Constituinte Peptideoglicano

Tabela 2: Constituintes da parede celular de bactrias Gram negativas e suas principais funes
Principais funes Mesma funo que na Gram-positiva

Espao periplasmtico Membrana externa

LPS

Contm enzimas envolvidas no transporte, na degradao e sntese de substncias. As enzimas que inativam drogas podem tornar a bactria resistente a elas Estabilidade e transporte; fornece uma barreira contra a entrada de molculas grandes ou hidrofbicas, como antibiticos, lisozina, detergentes, metais pesados, sais de bile, enzimas digestivas e alguns corantes; fator importante na inibio de fagcitos e do complemento durante a invaso de um hospedeiro Endotoxina promovendo respostas fisiolgicas em hospedeiros; potente estimulador da resposta imunolgica

3. Membrana citoplasmtica A membrana celular bacteriana tem uma estrutura em bicamada lipdica semelhante s deCitologia e fisiologia bacteriana - www.icb.ufmg.br/mic

mais membranas celulares, sendo constituda por 70% de protenas e 30% de fosfolipdios. Diferindo da membrana dos eucariotos pela ausncia de esterides, com exceo dos micoplasmas que incorporam colesterol quando crescem em meio que o contm. Os cidos graxos dos lipdeos so responsveis pela hidrofobicidade da parte interna da membrana, enquanto a parte hidroflica fica voltada para o meio externo aquoso. Interaes hidrofbicas, pontes de hidrognio e ctions, como Mg++ e Ca++, mantm a integridade dessa estrutura. A membrana plasmtica forma uma barreira, separando o meio interno do externo e a ela so atribudas muitas das funes encontradas na membrana eucaritica. Suas principais funes a permeabilidade seletiva e o transporte de solutos, o transporte de eltrons e fosforilao oxidativa em espcies aerbias, excreo das exoenzimas hidrolticas, localizao das enzimas e molculas transportadoras que atuam na biossntese do DNA e a localizao dos receptores e outras protenas do sistema quimiottico dos outros sistemas de transduo sensorial. 4. Citoplasma O citoplasma apresenta duas reas distintas quando visualizado ao microscpio eletrnico: uma matriz amorfa que contm ribossomos, grnulos nutrientes, vacolos gasosos, metablitos e ons; e uma regio mais interna contendo o nucleide. a) Ribossomos: Assim como os de eucariotos, o stio de sntese protica, diferindo apenas em tamanho e em composio qumica. Os ribossomos bacterianos apresentam tamanhos diferentes. b) Grnulos: O citoplasma contm vrios tipos diferentes de grnulos que funcionam como stios de armazenamento para nutrientes e se coram caracteristicamente com determinados corantes. c) Vacolo gasoso: Encontrados em procariotos que vivem flutuando em lagos ou mares. Sua parede celular composta apenas de unidades repetidas de protenas, formando uma estrutura rgida que permite apenas a entrada de gases. d) Mesossomo: uma invaginao enovelada da membrana citoplasmtica que atua como um apoio para ligar e, posteriormente, separar os cromossomos das clulas filhas durante a diviso celular. 5. Nucleide As bactrias no possuem membrana nuclear, ficando o material gentico empacotado e compactado em uma regio chamada de nucleide. A nica exceo so as planctomicetes, um grupo divergente de bactrias aquticas, com nucleide delimitado por uma carioteca. Geralmente, encontrado nas bactrias um nico cromossomo circular contnuo com peso molecular aproximado de 2 a 3 x 109d. Entretanto, pode-se encontrar bactrias com mais de uma cromossomo, como so nas espcies Vibrio cholerae e Brucella melitensis. A quantidade de cromossomos na clula depende da velocidade de crescimento, bactrias que crescem rpido necessitam de mais nucleide que as de crescimento lento. Nos procariotos algumas espcies tm o cromossomo linear e no circular, como em Burrelia burgdorferi, que parece apresentar repeties formando grampos nas extremidades do DNA, e Streptomyces coelicolor, que apresenta protenas covalentemente ligadas a essas extremidades. O DNA bacteriano de cadeia dupla e por ter somente uma cpia de cada gene, todas as bactrias so geneticamente haplides. A replicao semiconservativa, os genes esto organizados em operons, no apresentam ntrons, tem alto contedo G + C e possuem baixa frequncia de sequncias repetidas.
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6. Plasmdeo Os plasmdeos so pequenos fragmentos de DNA de fita dupla, a maioria circular, so extracromosomais, replicam-se independentemente do cromossomo e podem existir em nmero varivel na clula. So mais comuns em bactrias Gram negativas. Embora no seja essencial sobrevivncia da clula bacteriana, conferi-lhe vantagens seletivas. A maioria do DNA plasmidial se encontra na forma superenovelada. A replicao do plasmdeo diferente nas bactrias, enquanto nas Gram negativas acontece de modo similar replicao em cromossomos, nas Gram positivas, ocorre por crculo rolante, similar ao fago x174. Os plasmdeos lineares se replicam com a participao de uma protena ligada extremidade 5 das duas fitas, atuando como iniciador da sntese de DNA. Todos eles carregam consigo os genes para a sua prpria replicao. O principal mecanismo de transferncia de plasmdeos de uma clula bacteriana a outra a conjugao. Aqueles que comandam sua prpria transferncia so chamados de plasmdeos conjugativos. O plasmdeo mais estudado o de resistncia (Fator R), que confere resistncia a drogas e a vrios inibidores de crescimento. Os genes carregados pelo plasmdeo R codificam protenas que inativam antibiticos ou interferem na sua captao pela clula. Muitos fatores de virulncia so codificados por genes plasmidiais. Alguns outros tipos de plasmdeos so os responsveis pelo fator de fertilidade bacteriano (Fator F), o plasmdeo COL (Fatos colicolgnico), os responsveis pela fixao de nitrognio no solo, os que degradam metais pesados, os codificadores de toxinas, entre outros. 7. Endsporos Nem todas as bactrias formam endsporos, ficando mais restrito a alguns gneros de Gram positivas, como Bacillus (aerbio obrigatrio), Clostridium (anaerbio obrigatrio), Thermoactinomyces, Sporolactobacillus, Sporosarcina, Sporotomaculum, Sporomusa e Sporohalobacter. Essas estruturas so formadas dentro das clulas por um processo chamado esporulao, que um tipo de diferenciao que ocorre em resposta a situaes desfavorveis no meio ambiente, de depleo de alguns nutrientes (com falta de carbono, nitrognio ou fsforo). Vrias mudanas estruturais ocorrem na clula vegetativa at ela se transformar em esporo, envolvendo a produo de enzimas e metablitos e desaparecimento de vrios componentes celulares. Essa diferenciao promove a ativao de muitos genes e modificao da transcrio de RNA polimerase. Estruturalmente, os esporos so muito complexos, possuindo vrias camadas. A parte mais externa o exsporo, um envoltrio fino e delgado formado por lipoprotenas; abaixo uma camada de queratina, a capa. Mais internamente se encontra o crtex, constitudo de peptideoglicanos frouxamente associados. Por baixo dessas camadas se encontra o protoplasma, que o citoplasma compactado, e um ncleo, circundados por uma membrana (Figura 4). O endsporo altamente resistente dissecao, ao calor e aos agentes qumicos. Quando encontram condies favorveis, germinam produzindo uma clula vegetativa. Um endsporo pode permanecer dormente por muitos tempos (um esporo de Clostridium aceticum foi encontrado aps 34 anos em um frasco em um depsito da Universidade da Califrnia; em fragmentos de runas de stio arqueolgico romano no Reino Unido, foram encontrados esporos de Thermoactinomyces datados de 2.000 anos). Quando a posio intracelular, o endsporo pode ser central, subterminal ou terminal. Em actinobactrias, os endsporos so exteriorizados, podendo ser nicos, conidisporos; enfileirados ou esporangisporos; dentro de um sculo (Figura 5).
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Figura 4: Representao esquemtica das estruturas internas de um endsporo bacteriano.

Figura 5: Localizao do endsporo na clula bacteriana.

8. Fmbrias e Pili Alguns autores fazem distino entre fmbrias e pili, mas as considerando como estruturas similares aos flagelos, constitudas de protenas (pilina), porm sem est relacionadas motilidade celular. Enquanto as fmbrias (ou pili comuns) so consideradas mais curtas e em maior nmero, de 100-200 por clula, os pili (ou pili sexuais) so mais longos e presente em menor nmero, de 1-4 por clula (Figura 6a). Os pili comuns podem apresentar adesinas nas suas pontas e por isso tem a capacidade de fixao, estando relacionados capacidade de adeso de certas bactrias simbiticas e patognicas a superfcies, e tambm formao de pelculas ou biofilmes. Os pili sexuais esto envolvidos no processo de conjugao, fixando a bactria doadora receptora (Figura 6b).

Figura 6: Representao esquemtica dos apndices superficiais das bactrias. (a) Visualizao de um bastonete (podendo ser E. coli) mostrando vrios pili comuns ao longo da superfcie celular, um pili sexual, mais longo e flexvel, com partculas de fagos aderidas, e um flagelo, mais comprido e mais espesso. (b) Processo de conjugao entre duas clulas bacterianas, atravs da presena de um pili sexual. comum ver vrus especficos se aderirem ao pili.

9. Flagelo Os flagelos so apndices longos e finos com cerca de 20-25 nm de dimetro, em forma de chicote, que movem as bactrias na direo de nutrientes e outros atrativos ou as deslocam em direo contrria, no caso de algum fator hostil. So formados por estruturas proticas em arranjo helicoidal, chamadas flagelinas, que se movem atravs de um potencial de membrana gerado pela quebra de ATPs. Apresentam-se em nmero variado nas diversas bactrias, sendo comuns em bastonetes e em bactrias curvas (Vibries, E. coli, Salmonella, Bacillis, Micrococcus, entre outros), mas tambm podem estar presentes em alguns cocos.
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O comprimento do flagelo geralmente maior do que o da clula. Sua forma e tamanho so determinados pela flagelina, sua base apresenta uma regio mais larga, chamada de gancho, conectando o filamento a regio do motor flagelar. A estrutura do flagelo semi-rgida, quase no sofrendo flexo, deslocando-se rapidamente. O movimento flagelar rotatrio, semelhante a uma hlice, sendo transmitida pelo motor. Os flagelos bacterianos formam arranjos diferentes, sendo encontrado quatro tipos de disposio flagelar na clula: monotrquio (nico flagelo polar), lofotrquio (tufo de flagelos nas extremidades), anfitrquio (um flagelo em cada extremidade) e peritrquio (flagelo presentes em toda superfcie celular) (Figura 7). Metabolismo bacteriano Os microrganismos tm a capacidade de realizar reaes qumicas e de organizar as molculas em estruturas especficas, para que ocorra a replicao celular. O metabolismo bacteriano rene todas as reaes bioqumicas que estes microrganismos podem realizar para a manuteno das atividades vitais da clula. Essas reaes podem ser catablicas, quando h liberao de energia, ou anablicas, quando ocorre o consumo de energia. As reaes anablicas envolvem a sntese de compostos orgnicos estruturais, como as protenas, e funcionais, como os hormnios. Elas so importantes para o crescimento, a construo e o reparo de estruturas celulares. As rea-

Figura 7: Disposio dos flagelos na clula bacteriana.

es anablicas envolvem a sntese de compostos orgnicos estruturais, como as protenas, e funcionais, como os hormnios. Elas so importantes para o crescimento, a construo e o reparo de estruturas celulares. As reaes catablicas envolvem a degradao de compostos orgnicos em molculas mais simples, fornecendo energia para processos vitais, tais como motilidade, transporte e sntese de molculas complexas. Quando as formas de obteno de energia, as bactrias podem manter o metabolismo autotrfico ou hetertrofo. As autotrficas so capazes de utilizar CO2 como principal fonte de carbono, obter energia pela sntese de ATP pela oxidao de compostos inorgnicos (quimiossintetizantes) ou captao de energia luminosa (fotossintetizantes). As heterotrficas ou organotrficas fazem a sntese de ATP a partir da energia liberada pela oxidao de compostos orgnicos, transformando-os em molculas mais simples e utilizadas como fonte de carbono. O modo como as bactrias podem transformar a energia define seu processo metablico. As que oxidam compostos qumicos empregam os processos de respirao aerbia, anaerbia ou fermentao, enquanto as que utilizam luz como fonte de energia, fazem fotossntese. Na respirao aerbia ocorre a oxidao do piruvato, na gliclise, a dixido de carbono e gua. Todos os organismos aerbios tm ampla diversidade e esto presentes em todas as partes do globo. Os microrganismos anaerbios utilizam outros aceptores finais de eltrons que no sejam o O2, como o sulfato em bactrias do gnero Desulfovibrio.
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A fermentao o processo de obteno de energia no qual a molcula orgnica a ser metabolizada no totalmente oxidada, no liberando toda a sua energia. Os substratos mais comuns no processo de fermentao so os acares e os aminocidos, e os produtos obtidos dependem do substrato inicial. Algumas bactrias fermentadoras tm importncia econmica, como as espcies Streptococcus thermophilus e Lactobacillus bulgaricus, que so produtoras de iogurte. Todos os organismos fermentadores tm nichos restritos a ambientes anaerbios, onde a fonte de carbono aproveitvel. A capacidade de crescer em presena ou ausncia de oxignio divide as bactrias em: aerbias estritas, que crescem onde h disponibilidade de oxignio, como as do gnero Pseudomonas; microaerfilas, essas requerem uma quantidade reduzida de oxignio, porque este composto txico a elas em altas concentraes, e altas concentraes de CO2, como so as do gnero Campylobacter; anaerbias facultativas, que utilizam oxignio no seu metabolismo, mas podem crescer em sua ausncia, como todos os membros da famlia Enterobacteriaceae; anaerbias aerotolerantes, podendo suporta a presena do oxignio, mas sem utiliz-lo no seu metabolismo, exemplo a espcie Lactobacillus acidophillus; e anaerbias estritas, que no crescem na presena de oxignio. Muitas das espcies anaerbias estritas vivem no solo ou em micro-ambientes em organismos animais que tenham se tornado anaerbicos, como ferimentos profundos ou a juno das gengivas com os dentes, alguns exemplos so as espcies Clostridium tetani (causadora do ttano), Clostridium botulinum (causadora do botulismo), Porphiromonas gengivallis e Prevotella intermdia (associadas a doenas periodontais).

Crescimento bacteriano O crescimento bacteriano deve-se a um aumento do nmero de clulas em uma populao. As bactrias se dividem por fisso binria, processo no qual uma clula parental se divide para formar duas novas clulas idnticas queles que lhes deu origem. Dessa forma, diz-se que as bactrias possuem crescimento exponencial, ou seja, para qualquer quantidade de clulas crescendo exponencialmente, quanto maior a quantidade existente dessas clulas, mais rpido crescer a populao bacteriana. Assim, a taxa de crescimento corresponde variao do nmero de clulas ou da massa celular por unidade de tempo. O crescimento exponencial se apresenta inicialmente com uma taxa lenta de diviso celular, acelerando posteriormente, havendo um nmero explosivo de clulas nos estgios finais. O ciclo de crescimento de uma populao de bactrias pode ser observado em uma cultura em batelada (crescimento microbiano em um recipiente fechado), o que permitiu a construo grfica de uma curva de crescimento tpica, dividida em quatros fases: fase lag, fase exponencial ou log, fase estacionria e fase de morte ou de declnio. O Grfico 1 representa a curva de crescimento de uma cultura de bactrias, crescendo em um recipiente fechado.
Grfico 1: Curva de crescimento de uma cultura bacteriana. Neste grfico possvel distinguir as quatro fases de crescimento. A fase lag, caracterizada por um perodo de crescimento pouco significativo; a fase log, de crescimento exponencial; a fase estacionria, quando o nmero de clulas que se dividem proporcional quele de clulas que morrem; e a fase de declnio, no qual o nmero de clulas morrendo maior do que aquele que se dividem. Lembra-se que a plotao de grficos de crescimento refletem os eventos que ocorrem em uma populao bacteriana e no em uma nica clula.
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a) Fase lag: Quando uma populao microbiana inoculada em um meio de cultura, no ocorre crescimento imediato. Essa fase caracterizada por um perodo de crescimento inexpressivo, podendo variar de curto a longo e at mesmo inexistir. Um inculo provindo de uma cultura mais velha, em fase estacionria, ter uma fase lag, porque as clulas que se encontram em falta de determinados nutrientes, requerero de um tempo para sintetiz-los novamente. Outra situao que ocorre essa fase quando na cultura h clulas danificadas, necessitando elas de um tempo para sofrerem reparos. b) Fase log: Nesta fase se observa o crescimento exponencial. As clulas que passam por essa fase geralmente esto em condies saudveis. A taxa de crescimento exponencial varivel, sofrendo influncias do ambiente, como temperatura e composio do meio, e das caractersticas genticas do prprio organismo. Geralmente, ao final da fase log, as bactrias passam a apresentar fentipos novos, decorrentes do processo de comunicao denominado quorum sensing. c) Fase estacionria: Em uma cultura em batelada, esta fase caracterizada por uma limitao no crescimento da populao, decorrente a uma carncia de nutrientes, devido ao seu consumo, e/ou a presena de algum produto de excreo que atinge uma concentrao inibitria e promove a interrupo do crescimento exponencial. Nesta fase no observado aumento ou diminuio no nmero de clulas, uma vez que est ocorrendo crescimento lento e morte celular ao mesmo tempo e em mesmas propores, equilibrando o nmero de clulas, o que chamado de crescimento crptico. d) Fase de declnio: Em uma cultura inalterada, aps atingir a fase estacionria, as clulas podem continuar vivas ou morrer por lise celular, entrando assim em uma fase de declnio. Essa fase tambm pode ser exponencial ou acontecer em uma taxa inferior taxa de crescimento exponencial, o que mais comum.

Necessidades nutricionais e fsicoqumicas para o crescimento As bactrias esto presentes em todos os ambientes, tendo que crescer e sobreviver neles, para isso, possuem uma grande variedade de exigncias nutricionais. Nem todos os nutrientes so exigidos nas mesmas quantidades pela clula, os macronutrientes (carbono e nitrognio, principalmente) so necessrios em grande quantidade, os micronutrientes, em menor quantidade, ou apenas traos. Os fatores de crescimento so compostos orgnicos, como as vitaminas, aminocidos, purinas e pirimidinas, necessrios em pequenas quantidades por alguns tipos de clulas. No somente as condies nutricionais devem estar adequadas para o crescimento de uma populao bacteriana, mas tambm as condies fsico-qumicas, que variam de uma espcie para outra, tanto quanto as necessidades nutricionais. Em relao s condies fsico-qumicas como temperatura e pH, as bactrias apresentam comportamento extremamente variado, podendo ser psicroflicas, com timo em temperaturas baixas (Polaromonas vacuolata 4C), mesoflicas, com timo em temperaturas medianas (Escherichia coli 39C), termoflicas, com timo em temperaturas altas (Bacillus stearothermophilus 60C), ou hipertermfilas, com timo em temperaturas muito elevadas (Thermococcus celer 88C; Pyrolobus fumarii 106C); acidfilas obrigatrias, com timo em pH baixo (Thiobacillus e vrios gneros de Archaea), neutfilas, com timo em torno do pH 7, ou alcaloflicas, com timo em pH alto (bactrias aerbias marinhas e muitos Bacillus). A gua tambm um fator que afeta o crescimento microbiano. A sua disponibilidade, expressa geralmente em atividade de gua, depende do contedo aquoso do ambiente e da concentrao de solutos, uma vez que a associao de solutos s molculas de gua, torna-as indisponvel ao microrganismo.
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Literatura recomendada
CABEEN, Matthew T.; JACOBS-WAGNER, Christine. Bacterial cell shape. Nature reviews/microbiology. Vol. 3. 601-610. August 2005. JAWETZ; MELNICK; ADELBERG. Microbiologia mdica. 24 ed. Rio de Janeiro. Editora McGraw-Hill Interamericana do Brasil Ltda. 2009. LEVINSON, Warren; JAWETZ, Ernest. Microbiologia mdica e imunologia. 7 ed. Editora Artmed. Porto Alegre. 2005. MADIGAN, Michael T.; MARTNKO, John M.; PARKER, Jack. Microbiologia de Brock. 12 ed. Editora: Artmed. So Paulo. 2010. MURRAY, Patrick R; ROSENTHAL, Ken S; PFALLER, Michael A. Microbiologia mdica. 6. ed. Rio de Janeiro. Edotira Elsevier. 2008. TORTORA, Gerard J.; FUNKE, Berdell R.; CASE, Christine L. Microbiologia. 8 ed. Editora Artmed. Porto Alegre. 2009. TRABULSI, Luiz Rachid; ALTERTHUM, Flvio. Microbiologia. 5 ed. So Paulo. Editora: Atheneu. 2008.

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