LACTATO DESHIDROGENASA. 1.La lactato deshidrogenasa (LD o LDH) cataliza la reduccin del piruvato por NADH,obtenindose lactato y NAD+.

La concentracin cataltica se determina a partir de la velocidad de desaparicin del NADH, medido a 340 nm1,2. Piruvato + NADH + H+ LDH Lactato + NAD+ Corresponde a la categora de las oxidorreductasas, dado que cataliza una reaccin redox, en la que el piruvato es reducido a lactato gracias a la oxidacin de nadh a nad+. Dado que la enzima tambin puede catalizar la oxidacin del hidroxibutirato, ocasionalmente es conocida como hidroxibutirato deshidrogenasa (HBD). 2. La LDH Utiliza como cofactor NADH, el cual sale de la reaccin oxidado a NAD+. La regeneracin a NADH requerira otra enzima. 3. Se encuentra en muchos tejidos del cuerpo, pero su presencia es mayor en el corazn, hgado, riones, msculos, glbulos rojos, cerebro y pulmones. 4. Valores normales: Lctico deshidrogenasa (LDH) Valores normales: < 120-230 U/ml Aumento importante: infarto de miocardio (LDH1), hepatitis vricas (LDH4, LDH5) Aumento moderado: hemlisis, accidente cerebro-vascular, distrofia muscular 5. Participa en el metabolismo energtico anaerobio, reduciendo el piruvato (procedente de la gluclisis) para regenerar el nad+, que en presencia de glucosa es el sustrato limitante de la va glucoltica. El examen sirve para verificar la cantidad de deshidrogenasa lctica (LDH, por sus siglas en ingls) presente en la sangre. La LDH se encuentra en muchos tejidos del cuerpo, como el corazn, el hgado, los riones, el msculo esqueltico, el cerebro, las clulas sanguneas y los pulmones. La LDH pasa a la sangre ante toda destruccin de estos tejidos (traumtica, infecciosa o neoplsica), por lo que su elevacin en el suero es un signo inespecfico de organicidad de un proceso, es decir, de que un rgano o tejido ha sido lesionado. Tambin es un ndice de proliferacin en el seguimiento de una neoplasia y es relatvamente valiosa para el diagnstico y seguimiento del infarto agudo de miocardio pues su elevacin en este proceso es poco especfica. 6. Los reactivos suministrados son estables hasta la fecha de caducidad especificada en las etiquetas a 2-8C. Proteja el reactivo de la luz solar. El reactivo de trabajo es estable por 24 horas a 2-8C y por 4 horas a 18-26C cuando se protege de la luz. Puede usarse cualquier analizador con control de temperatura de 0.5C que sea capaz de leer la absorbancia con exactitud, con una sensibilidad de 0.001 de absorbancia a 340 nm. El ancho de banda deber ser de 10 nm o menos, la desviacin de la luz de 0.5% o menos y la exactitud de longitud de onda dentro de 2 nm.

La muestra de eleccin es suero fresco, claro y no hemolizado. Las muestras para anlisis deben separarse del cogulo y analizarse tan pronto como sea posible despus de su recoleccin. Las muestras de suero almacenadas a 18-26C son estables por 2-3 das. El almacenamiento en refrigeracin puede ocasionar una prdida de la actividad de la LDH (1) 7. En primer lugar se preparan los reactivos y se mezclan en una cubeta de espectrofotmetro, de manera que las concentraciones de los substratos (Piruvato y NADH) estn por encima de sus respectivos KM. La enzima se aade al aadir la muestra de suero. Se mide entonces la velocidad de reaccin como moles consumidos de NADPH por minuto. Se expresa este valor en Unidades de Actividad Enzimtica (IU) Se refiere dichas unidades al volumen que se haba aadido de suero. Se expresa el resultado final como Unidades de actividad enzimtica (enzima por ml de suero.) Wacker y col. (2) publicaron un mtodo para medir la lactato deshidrogenasa (LDH) utilizando lactato como substrato y dinucletido de nicotinamida adenina (NAD) como coenzima indicadora. Wroblewski y LaDue (3) describieron el uso de la reaccin inversa, de piruvato a lactato (LDH-P). Amador y col. (4) afirman que el mtodo de lactato a piruvato (LDH-L) es el mtodo de eleccin debido a que amplia la linealidad de la reaccin y mejora la estabilidad de los reactivos utilizados. Gay y col. (5) estudiaron posteriormente la reaccin LDH-L 8. La LDH existe en 5 formas, las cuales difieren ligeramente en estructura.

La LDH-1 se encuentra principalmente en el msculo cardaco y en los glbulos rojos. La LDH-2 se concentra en los glbulos blancos. La LDH-3 es ms alta en los pulmones. La LDH-4 es ms alta en los riones, la placenta y el pncreas. La LDH-5 es ms alta en el hgado y en el msculo esqueltico.

Todas ellas se pueden medir en la sangre. 9. Aumento importante: infarto de miocardio (LDH1), hepatitis vricas (LDH4, LDH5)