PROBLEMAS DE BIOQUMICA 1 DE BIOLOGA CIDOS, BASES Y TAMPONES Producto inico del agua Ionizacin del agua: el agua tiene

una ligera tendencia a ionizarse, disocindose en un protn (H+) y un in hidroxilo (OH-): H2O H+ + OHLa constante de equilibrio de esta reaccin es: [OH-] [H+] Keq = = 1,8 10-16 M [H2O] Sustituyendo la concentracin del agua pura por su valor [H2O] = 55,5 M y despejando: 55,5 M Keq = [H+][OH-] Kw = [H+][OH-] = 55,5 M 1,8 10-16 M Kw = [H+][OH-] = 10-14 M2 Este valor (Kw) se denomina producto inico del agua. El producto inico del agua siempre permanece constante, por lo que si en una disolucin aumenta la concentracin de H+, disminuye la concentracin de OH-, y viceversa. Concepto de pH: Se define como el logaritmo decimal, cambiado de signo, de la concentracin de protones en disolucin acuosa o el logaritmo de la inversa de la concentracin de protones. 1 pH = - log [H ] = log -----[H+]
+

Por extensin, este concepto tambin se aplica a [OH-]: 1 pOH = - log [OH ] = log ------[OH-]
-

CIDOS y BASES cido: toda molcula capaz de ceder protones. Base: toda molcula capaz de aceptar protones. Anftero: molcula que en disolucin tiene capacidad de liberar o aceptar protones.

cidos y bases fuertes son aquellos que en disolucin se ionizan en su totalidad (HCl, H2SO4, KOH, NaOH, etc.). cidos y bases dbiles son los que se disocian slo parcialmente (v.g. el actico). Par cido-base conjugado: en disolucin, los cidos dbiles (HA) estn parcialmente disociados, el grado de disociacin depende del pH. Al disociarse se origina la base conjugada (A-). 1

HA H+ + Ala constante de equilibrio de esta reaccin se denomina Ka (constante de equilibrio del cido): [A-] [H+] Ka = [HA] Concepto de pKa: El pKa es el valor de pH en el que se produce el punto medio de la valoracin de un par cidobase conjugado. El pKa se define como el logaritmo negativo de la constante de equilibrio (Ka) pKa = - log Ka Por tanto, a partir del valor del pKa de la reaccin se puede calcular el valor de la constante de equilibrio del cido (Ka): Ka = 10-pKa Problema 1 Averige a) la concentracin de H+ y b) el pH de una disolucin 0,001 M de HCl. Solucin: a) El HCl es un cido inorgnico fuerte, es decir est prcticamente disociado (ionizado) al 100 % en disoluciones diluidas. Por tanto, si disolvemos 0,001 M de HCl en agua se forman 0,001 M de H+ y los mismos de Cl-. b) pH = - log [H+] = - log 10-3 = 3 Problema 2 Cul es la concentracin de HNO3 en una disolucin que tiene un pH de 3,4? Solucin: El HNO3 se disocia de la siguiente manera: HNO3 NO3- + H+ [H+] = 10-pH = 10-3,4 = 10-4 x 100,6, se busca el antilogaritmo de 0,6 que es igual a 3,98. Por tanto, [H+] = 3,98 x 10-4. Como el cido ntrico es un cido fuerte, y a estas concentraciones asumimos que est totalmente disociado, su concentracin ser igual a la determinada para la [H+]. Problema 3 Cuntos iones H+ hay en 250 ml de una disolucin de pH 3? Solucin: [H+] = 10-pH = 10-3 M = 10-3 ion-g/litro; dado que 1 ion-g/litro = 6,023 x 1023 iones/litro (n de Avogadro), entonces 10-3 ion-g/litro = 6,023 x 1020 iones/litro. Pero como tenemos 250 ml los iones 2

que hay en esa cantidad sern: 6,023 x 1020 iones/litro x 0,25 litros = 1,50 x 1020 iones. CLCULO DEL pH DE UN DISOLUCIN Hay tres posibles casos: cido dbil, sal cida y sal. cido dbil: Los cidos dbiles se disocian segn la reaccin HA H+ + APara calcular el pH hay que calcular primero la concentracin de protones ([H+]) en la disolucin a partir de la frmula de la constante de disociacin del cido: [A-] [H+] Ka = [HA] La concentracin inicial de cido es n, pero parte de las molculas del cido (x) se van a disociar. Por tanto, la concentracin real de cido ser n - x. Como cada molcula de cido se disocia en una de base conjugada y un protn, la concentracin final de base conjugada ser x y la de protones ser tambin x. Sustituyendo estos valores en la ecuacin de equilibrio del cido: xx x2 Ka = = nx nx A partir del valor de pKa del cido, se calcula el valor de Ka (Ka = 10-pKa), por tanto x2 10-pKa = nx que es la una ecuacin de segundo grado (ax2 + bx + c = 0) que se soluciona mediante la expresin: -b b2 - 4ac x = 2a obtenindose dos soluciones, considerndose vlida nicamente la solucin positiva. Una vez calculada la concentracin de protones (x), se calcula el pH de la disolucin (pH = log [H ]).
+

Problema 4 Cul es el pH de una disolucin 0,2 M de H3PO4? (pKa1 = 2,12)

Solucin: pKa1 H3PO4 H2PO4- + H+ 2,12 0,2 x x x [H2PO4-] [H+] xx Ka1 = ------------------- = ---------[H3PO4] 0,2 x Ka1 = 10- pKa1 = 10-2,12 = 10-3 x 100,88; siendo 100,88 = antilog 0,88 = 7,59; luego Ka1 = 7,59 x 10-3 Y sustituyendo en la ecuacin anterior y resolviendo: X = 3,48 x 10-2 = [H+] y pH = -log [H+] = -log (3,48 x 10-2) = 1,46 Sales cidas: Las sales cidas son aquellas sales de los oxocidos en las cuales no se encuentran reemplazados todos los hidrgenos y, por tanto, quedan hidrgenos en la molcula (V.g. bicarbonato sdico, NaHCO3). Las sales cidas se disocian segn la reaccin: NaHA HA- + Na+ El compuesto HA- es una sustancia anftera, ya que es capaz tanto de ceder protones (cido) como de aceptarlos (base), como se puede apreciar en las siguientes reacciones en cada una de las cuales se libera o se acepta un protn: +H+ H2A

HA

- H+

-H+

A2-

+ H+

En el caso de las sustancias anfteras, el pH de la disolucin es la media aritmtica de los valores de los pKas de las reacciones entre las que se forma el anftero: H2A pKa1

HA

pKa2

A2-

pKa1 + pKa2 pH = 2 Problema 6 Cul es el pH de una disolucin 0,2 M de KH2PO4? (pKa1 = 2,12, pKa2 = 7,21) Solucin: El KH2PO4 se disocia en: KH2PO4 H2PO4- + K , y el H2PO4- puede tanto ceder como captar protones: 4
+

pKa1 pKa1 H3PO4 H2PO4- HPO42,12 7,21 2,12 + 7,21 pH = ------------------- = 4,66 2 Sales: Todas las sales son neutras (sin carga) y en disolucin acuosa se disocian completamente: NaA A- + Na+ Por tanto, cuando se disuelve una sal se forma la base conjugada (A-) La base conjugada reacciona con una molcula de agua segn la reaccin: A- (+ H2O) HA + OHbase): La constante de equilibrio de esta reaccin se denomina Kb (constante de equilibrio de la [HA] [OH-] Kb = [A-] El pKb se define como el logaritmo negativo de la constante de equilibrio (Kb) pKb = -log Kb El valor de la constante de equilibrio de la base (Kb) se puede calcular a partir del valor del pKa, teniendo en cuenta que: Ka = 10-pKa pKa + pKb = 14 Ka Kb = 10-14 = Kw Kb = 10-pKb O sea, que a partir del valor de pKa se puede calcular el de Kb bien calculando Ka y despus Kb, o bien calculando primero pKb y despus Kb: Ka = 10-pKa pKa pKa + pKb = 14 pKb Ka Ka Kb = 10-14 = Kw

Kb = 10-pKb Kb

Una vez conocido el valor de Kb, se puede calcular la concentracin de iones hidroxilo ([OH-]) a partir de la ecuacin de la constante de equilibrio de la base, de forma similar a como se calcula la concentracin de protones ([H+]), a partir de la ecuacin de la constante de equilibrio del cido: [HA] [OH-] Kb = [A-] La concentracin inicial de base es n, pero parte de las molculas de la base (x) se van a disociar. Por tanto, la concentracin real de base ser n - x. Como cada molcula de base origina una de cido y un in hidroxilo, la concentracin final de cido ser x y la de iones hidroxilo ser tambin x. Sustituyendo estos valores en la ecuacin de equilibrio de la base: xx x2 Kb = = nx nx Que es la una ecuacin de segundo grado (ax2 + bx + c = 0) que se soluciona mediante la expresin: -b b2 - 4ac x = 2a obtenindose dos soluciones, considerndose vlida nicamente la solucin positiva. Una vez calculada la concentracin de iones hidroxilo (x), se calcula la concentracin de protones mediante la ecuacin del producto inico del agua: Kw = [H+][OH-] = 10-14 M2 Y, con este valor, el pH de la disolucin (pH = -log [H+]). Problema 7 Cul es el pH de una disolucin 0,2 M de K3PO4? (pKa3 = 12,32) Solucin: El K3PO4 se disocia en PO43- y 3K+, y ahora: pKa3 PO43- HPO42- + OH+ 12,32 0,2 x x x [HPO42-] [OH+] x2 Kb1 = -------------------- = ---------[PO43-] 0,2 x pKa3 + pKb1 = 14; pKb1 = 14 - pKa3 = 14 12,32 = 1,68 Kb1 = 10- pKb1 = 10-1,62 = 10-2 x 100,32 = 2,09 x 10-2 6

Sustituyendo en la ecuacin y resolviendo: x = 5,5 x 10-2 = [OH-]; pOH = 1,26 pH + pOH = 14; pH = 14 pOH = 14 1,26 = 12,74 Ecuacin de Henderson-Hasselbach: Partiendo de la constante de equilibrio de la reaccin de disociacin de un cido dbil (HA H + A ),
+ -

[A-] [H+] Ka = [HA] Se despeja de esta ecuacin el valor de [H+] [HA] [H+] = Ka + [A-] Y aplicando logaritmo negativo a ambos trminos [HA] - log [H+] = - log Ka + (- log ) [A-] Y como: - log [H+] = pH; -log Ka = pKa; y el logaritmo de un nmero es igual al logaritmo negativo de su inverso (log X = - log 1/X), sustituyendo se obtiene la ecuacin de HendersonHasselbach: [A-] pH = pKa + log [HA] La ecuacin de Henderson-Hasselbach permite calcular: El pKa de un par cido-base conjugado El pH de una mezcla dador/aceptor de protones La relacin dador/aceptor de protones para un determinado valor de pH

Clorhidrato: Sal formada entre una base orgnica (B) y cido clorhdrico (HCl). BCl B+ + ClTAMPONES Un tampn es algo que resiste un cambio. En qumica, un regulador de pH, o tampn, es una sustancia, o mezcla de sustancias, que permite a las disoluciones evitar grandes cambios en el pH por adicin de pequeas cantidades de iones H+ u OH-. Por decirlo de otra forma, un tampn ayuda a mantener un pH casi constante ante la adicin de pequeas cantidades de iones H+ u OH- a una disolucin. 7

Las mezclas reguladoras corrientes contienen dos sustancias, un cido y una base conjugados. Un tampn cido contiene un cido dbil y una sal de ste (base conjugada). Un tampn bsico contiene una base dbil y una sal de la base dbil (cido conjugado). Las dos especies juntas (cido y base conjugados) evitan grandes cambios de pH absorbiendo parcialmente las adiciones de iones H+ u OH- al sistema. Si se aaden iones H+ a la disolucin tamponada, reaccionan parcialmente con la base conjugada para dar el cido conjugado. As se eliminan iones H+ del medio. Si se aaden iones OH- a la disolucin tamponada, reaccionan parcialmente con el cido conjugado para dar H20 y la base conjugada. As se eliminan iones OH- del medio. Las disoluciones tamponadas s cambian su pH por adicin de iones OH- o H+. Sin embargo, el cambio es mucho menor que en ausencia del tampn. La magnitud del cambio, depende de la fuerza del tampn y de la proporcin [A-]/[HA]. La capacidad tampn de una solucin de un cido dbil (HA) y su base conjugada (A-) es mxima cuando [A-] = [HA], es decir, cuando el pH de la solucin es igual al pKa del cido dbil. Asimismo, el cambio de pH que se produce al aadir una cantidad dada de cido o base ser menor cuanto mayor sea la concentracin de [HA] y [A-], es decir, cuanto ms concentrada sea la solucin tampn. Problema 8 Cules son las concentraciones de HOAC y OAc- en un tampn acetato 0,2 M, pH = 5,00? La Ka para el cido actico es 1,70 x 10-5, pKa = 4,77. Solucin: Podemos utilizar dos procedimientos: mediante la Ka o por la ecuacin de HendersonHasselbalch. En el primer caso tenemos: [OAc-] [H+] Ka = -------------------[HOAC] [H+] = 10-pH = 10-5; [HOAC] + [OAc-] = 0,2 M; [HOAC] = 0,2 M - [OAc-] Sustituyendo tenemos: [OAc-] 10-5 1,70 x 10-5 = --------------------; 0,2 M - [OAc-] Y resolviendo: [OAc-] = 0,126 M [HOAC] = 0,074 M Y en el segundo caso ser: [OAc-] pH = pKa + log ------------[HOAC] Y [HOAC] + [OAc-] = 0,2 M; [HOAC] = 0,2 M - [OAc-] 8

Sustituyendo tenemos: [OAc-] 5 = 4,77 + log -------------------0,2 M - [OAc-] Y resolviendo obtendremos: [OAc-] = 0,126 M [HOAC] = 0,074 M Problema 9 a) EI tris es una base dbil (Ka = 8,3 X 10-9 (mol l-1) que se utiliza frecuentemente como tampn en sistemas bioqumicos. Cul es la relacin entre la concentracin de tris y la de su cido conjugado a pH = 8,0? Solucin: [tris] pH = pKa + log -------------[tris-H+] y pKa = - log Ka = 8,08 [tris] 8,0 = 8,08 + log -----------[tris-H+] [tris] 8,0 - 8,08 = - 0,08 = log ------------[tris-H+] [tris] ----------- = 0,83 [tris-H+] b) Si en la solucin anterior la concentracin total de tris es 100 mmol l-1, cul sera el cambio de pH despus de aadir H30+ 5 mmol l-1? Si la concentracin total de tris se reduce a 20 mmol l-1, cul ser el nuevo cambio en el pH? Solucin: Si Y [tris] ---------- = 0,83 (del apartado anterior) [tris-H+] 9 [tris] + [tris-H+] = 0,1 mol l-1,

Entonces [tris] = 0,045 mol l-1, Y [tris-H+] = 0,055 mol l-1 El efecto de la adicin de H30+ 0,005 mol l-1 es reducir [tris] y aumentar [tris-H+] en esta cantidad, es decir, despus de la adicin [tris] = 0,040 mol l-1 y [tris-H+] = 0,060 mol l-1. As, aplicando la ecuacin de Henderson-Hasselbalch. [tris] pH = pKa + log -------------[tris-H+] 0,04 pH = 8,08 + log -------------- = 7,9 0,06 caso, Es decir, la adicin de H30+ 5 mmol l-1 ha disminuido el pH en 0,1 unidades. En el segundo [tris] + [tris-H+] = 0,02 mol l-1 y [tris] -------------- = 0,83 [tris-H+] Entonces [tris] = 0,009 mol l-1 Y [tris-H+] = 0,011 mol l-1 Despus de aadir H3O+ la [tris] se reduce a 0,004 mol l-1 y [tris-H+] = 0,016 mol l-1. Operando como antes: [tris] pH = pKa + log -------------[tris H+] 0,004 pH = 8,08 + log -------------0,016 pH = 7,48 En este caso el pH cambia 0,52 unidades. De esta forma se ilustra que las soluciones tampn son ms eficaces a concentraciones elevadas. 10

En ausencia de solucin tampn, el pH final habra sido 2,3 (es decir, - log [0,005]). Problema 10 Describir la preparacin de 3 litros de un tampn acetato 0,2 M, pH 5,00, partiendo de acetato sdico trihidratado slido (PM = 136) y una disolucin 1 M de cido actico. Dado que queremos preparar tres litros de tampn, el nmero de moles totales ([HOAC] + [OAc-]) que precisamos sern 3 l x 0,2 M = 0,6 moles. Ahora, lo primero que tenemos que hacer es calcular los moles de cada una de las especies ([HOAC] y [OAc-]) que se necesitan para formar el tampn. Para ello utilizamos la ecuacin de Henderson-Hasselbalch: [OAc-] [OAc-] pH = pKa + log ------------; 5 = 4,77 + log ------------; y [HOAC] + [OAc-] = 0,6; [HOAC] = 0,6 - [OAc-] [HOAC] [HOAC] Y resolviendo tendremos: [OAc-] = 0,378 moles y [HOAC] = 0,222 moles Los 0,378 moles provienen del NaOAc slido n de moles = mg/PM; 0,378 moles = mg/136; mg = 51,4 g Y los 0,222 moles de HOAc provienen de una disolucin 1 M n de moles = l x M; 0,222 moles = l x 1 M; l = 0,222 = 222 ml Por tanto, para preparar 3 litros de tampn, disolvemos 51,4 g del acetato sdico en agua, aadimos 222 mI del cido actico 1 M y se completa hasta un volumen final de 3 litros. Problema 11 Describir la preparacin de 5 litros de tampn acetato 0,3 M, pH 4,47, partiendo de una disolucin 2 M de cido actico y de una disolucin 2,5 M de KOH. pKa = 4,77 Solucin Dado que la disolucin tampn debe ser 0,3 M, es decir 0,3 moles/l, y tenemos que preparar 5 l, debemos tomar 5 l x 0,3 M = 1,5 moles para preparar el tampn. Esos 1,5 moles sern parte de HOAc y parte de OAc-, por ello debemos calcular las proporciones de las dos especies de acetato que tienen que estar presentes en el tampn al pH indicado: [OAc-] [OAc-] pH = pKa + log -----------; 4,47 = 4,77 + log ----------[HOAc] [HOAc] [HOAc] + [OAc-] = 1,5 moles ; [HOAc] = 1,5 moles + [OAc-] Sustituyendo y resolviendo tendremos: 11

[HOAc] = 1mol y [OAc-] = 0,5 moles Como tenemos una disolucin de partida 2 M de HOAc, deberemos tomar los 1,5 moles de dicha disolucin: V x M = n de moles; V x 2 M = 1,5 moles; V = 0,75 l = 750 ml de HOAc 2 M De esos 1,5 moles habr que neutralizar 0,5 mediante el la disolucin de KOH 2,5 M: V x M = n de moles; V x 2,5 = 0,5 moles; V = 0,2 l = 200 ml Por tanto, se toman 750 ml de HOAc 2 M, 200 ml de KOH 2,5 M y se aade agua destilada hasta completar los cinco litros. cidos poliprticos Un cido poliprtico se ioniza en sucesivas etapas: H2A H + HA
+

Ka1

H+ + A2-

Ka2

[H+] [HA-] [H+] [A2-] Ka1 = -----------------; Ka2 = ---------------[H2A] [HA-] Ntese que HA- es la base conjugada de H2A, pero el cido conjugado de A2-. Para la mayora de los cidos poliprticos dbiles corrientes, Ka1 es, al menos, de un orden de magnitud mayor que Ka2. Por consiguiente, el pH de una disolucin de H2A se establece casi exclusivamente por la primera ionizacin. Los clculos para valoracin y tampones de cidos diprticos y triprticos dbiles son exactamente iguales que los de cidos monoprticos dbiles. La nica consideracin nueva que hay que hacer es qu valor de Ka o pKa se debe utilizar. Claramente, se utiliza la constante apropiada que describa el equilibrio entre las especies que manejamos. El pH en cualquier punto a lo largo de la curva de valoracin, viene dado por: [A2-] [HA-] PH = pKa1 + log -------- y pH = pKa2 + log ---------[H2A] [HA-] As, si conocemos la proporcin exacta de cada par cido-base conjugado, podemos calcular el pH. Al revs, si conocemos el pH podemos calcular las proporciones de [HA-]/[H2A] y de [A2-]/ [HA] y, por tanto, la proporcin entre las tres especies. Problema 12 Describir la preparacin de 10 litros de tampn fosfato potsico 0,045 M y pH 7,5. pKa1 = 2,12; pKa2 = 7,21; pKa3 = 12,32. Solucin: El fosfrico se disocia de la siguiente manera: pKa1 pKa2 pKa3 12

H3P04 H2P04- HP042- P0432,12 7,21 12,32 El pH del tampn que se quiere preparar est un poco por encima del pKa2 del H3P04, Por consiguiente, las dos especies inicas principales son H2P04- (cido conjugado) y HP042- (base conjugada) entre las que predomina HPO42-. El tampn se puede preparar de varias maneras (1) mezclando K2HPO4 y KH2P04 en las proporciopes adecuadas, (2) comenzando con H3PO4 y pasndolo a KH2P04 y K2HP04 con la cantidad apropiada de KOH, (3) empezando con KH2P04 y pasando una parte de ste a K2HPO4 con KOH, (4) empezando con K2HP04 y pasando una parte a KH2PO4 con un cido fuerte como HCl, (5) empezando con K3PO4 y convirtindolo en KH2P04 y K2HP04 con HCl y (6) mezclando K3PO4 y KH2PO4 en las proporciones adecuadas. Independientemente del mtodo utilizado, la primera etapa es calcular la proporcin y cantidades de las dos especies inicas presentes en el tampn. El tampn contiene un total de 10 litros x 0,045 M = 0,45 moles de fosfato. Ahora tenemos que averiguar cunto est como H2P04- y cunto como HP042-. Para ello, y como siempre utilizaremos el siguiente sistema de ecuaciones: pH = pKa2 + log HP042-/ H2P04-; 7,5 = 7,21 + log HP042-/ H2P04y H2P04- + HP042- = 0,45; H2P04- = 0,45 - HP042Sustituyendo y operando tendremos que se necesitan 0,15 moles de H2P04- y 0,30 moles de HP042-. 1. A partir de KH2P04 y de K2HP04. Se pesan 0,30 moles de K2HP04 (52,8 g) y 0,15 moles de KH2P04 (20,4 g) y se disuelven en agua destilada suficiente hasta un volumen final de 10 litros. O, si tenemos disoluciones madre de los dos fosfatos, se miden los volmenes adecuados de cada uno y se diluye hasta 10 litros. En la prctica, se podran preparar disoluciones 0,045 M de K2HP04 y de KH2P04 y simplemente mezclarlas hasta que el pH (medido con un pH-metro) sea 7,5. Ya que las dos disoluciones madre son 0,045 M, la concentracin total de fosfato ser 0,045 M, independientemente de los volmenes tomados de cada disolucin. 2. A partir de H3P04 y KOH. Partimos de 0,45 moles de H3P04 y se aade cantidad suficiente de KOH para neutralizar completamente 1 hidrgeno (0,45 moles) y parcialmente el segundo hidrgeno (0,30 moles): OHOHH3P04 H2P04- HP042Por ejemplo, supongamos que tenemos slo una disolucin concentrada de H3P04 (15 M) y una disolucin madre de KOH 1,5 M. Necesitamos 0,45 moles de H3P04. V x M = n de moles; V x 15 = 0,45 moles; V = 0,03 l = 30 ml Tomamos 30 mI de H3P04. Se aaden 0,45 moles de KOH para convertir todo el H3P04 en H2P04-; a continuacin se aaden otros 0,30 moles de KOH para pasar 0,3 moles de H2P04- a HPO42. En definitiva, se requieren 0,75 moles de KOH en total. Como tenemos KOH 1,5 M, podemos calcular la cantidad de esta disolucin que hay que aadir: V x M = n de moles; V x 1,5 = 0,75; V = 0,5 l = 500 ml 13

Se aaden 500 mI de KOH a los 30 mI de H3P04; a continuacin se diluye con agua destilada hasta un volumen final de 10 litros. 3. A partir de KH2P04 y KOH. Podemos comenzar con KH2P04 y aadir KOH suficiente para pasar 2/3 del H2P04- a HPO42-: OHH2P04- HP042Por ejemplo, supongamos que tenemos solamente KH2P04 slido y KOH. Necesitamos 0,45 moles de KH2P04: mg/PM = n de moles; mg = 0,45 x 136 = 61,2 g Se disuelve el KH2P04 en agua; se aaden a continuacin los 0,30 moles de KOH (slido o disuelto en algo de agua): mg = 0,30 x 56 = 16,8 g de KOH A continuacin, se aade agua destilada hasta un volumen final de 10 litros. 4. A partir de K2HP04 y HCl. El HPO42- puede ser convertido en H2P04- con HCI: H+ HP042- H2P04Debemos partir de 0,45 moles de HPO42- y neutralizar 0,15 moles de ese HPO42- para obtener los o,15 moles H2P04- necesarios para el tampn. Supongamos que tenemos K2HP04 slido y una disolucin 2 M de HCI. Se pesan 0,45 moles de K2HP04: mg = n de moles x PM; mg = 0,45 x 174 = 78,3 g Se disuelve el KH2P04 en agua, se aaden 0,15 moles de HCl: V x M = n de moles: V x 2 = 0,15; V = 0,075 l = 75 ml Se aaden 75 mI de HCI 2 M. Se completa con agua destilada hasta un volumen final de 10 litros. 5. A partir de K3P04 y HCl. Partimos de 0,45 moles de K3P04 y se aade suficiente HCI para pasar todo el P043- a HPO42-. Se aade ms HCI para pasar 1/3 del HPO42- a H2P04-: H+ H+ P043- HP042- H2P04Necesitamos 0,45 moles de K3P04: mg = n de moles x PM; mg = 0,45 x 212 = 95,4 g Se disuelve el K3PO4 en agua. Se aaden 0,45 moles de HCI para pasar todo el PO43- a HPO4 . A continuacin se aaden otros 0,15 moles de HCI para pasar 0,15 moles de HPO42- a H2P04-. La disolucin final contiene, por tanto, 0,15 moles de H2P04- y 0,30 moles de HPO42-. Ahora
2-

14

se aade agua destilada hasta un volumen final de 10 litros. 6. A partir de KH2PO4 y K3PO4. El KH2P04 y el K3PO4 reaccionan para dar K2HPO4. El H2PO4- acta como un cido y el PO43- como una base: P043- + H2P04- = 2HP042Ntese que cada mol de H2PO4- y de PO43- dan dos moles de HPO42-. Por tanto, para dar 0,30 moles de HPO42- se necesitan 0,15 moles de H2PO4- y 0,15 moles de PO43-. Pero, adems de los 0,30 moles de HPO42-, la disolucin final contiene tambin 0,15 moles de H2PO4-. Por tanto, se disuelven 0,30 moles de KH2PO4 y 0,15 moles de K3PO4 en agua. De los 0,30 moles iniciales de KH2PO4, 0,15 moles reaccionan con el PO43- para dar 0,30 moles de HPO42-, quedando 0,15 moles como H2P04-. Se diluye hasta 10 litros de volumen total con agua destilada. AMINOCIDOS Los aminocidos comunes son sencillamente cidos poliprticos dbiles. Los clculos del pH, preparacin y capacidad de tampones, etc., se hacen exactamente igual que lo ya visto en las secciones precedentes. Los aminocidos neutros (por ejemplo, glicocola; alanina, treonina) se consideran como cidos diprticos. Los aminocidos cidos (cido asprtico y cido glutmico) y los bsicos (lisina, histidina y arginina) se consideran como cidos triprticos, igual que se vio para el cido fosfrico. La glicocola se puede obtener en tres formas: (a) hidrocloruro de glicocola; (b) glicocola isoelctrica (a veces llamada glicocola, base libre), y (c) glicocolato sdico.

Clorhidrato de glicocola

El asprtico, y tambin el glutmico, existe en cuatro formas: (a) Hidrocloruro de asprtico; (b) cido asprtico isoelctrico: (c) aspartato monosdico, y (d) aspartato disdico.

Clorhidrato de

Los aminocidos bsicos, lisina, arginina e histidina, existen tambin en cuatro formas. Tomando como ejemplo la lisina tendramos (a) dihidrocloruro de lisina; (b) hidrocloruro de lisina; (c) lisina isoelctrica, y (d) lisinato sdico.

15

Na+
-

Cl

Cl-

ClLisina Lisinato isoelctrica (AA) Sdico (AA-)

diclorhidrato clorhidrato de lisina (AA2+) de lisina (AA+) Problema 13

Calcular el pH de una disolucin 0,1 M de (a) hidrocloruro de glicocola, (b) glicocola isoelctrica y (c) glicocolato sdico. Solucin: (a) El hidrocloruro de glicocola es un cido diprtico. Debido a que el grupo carboxilo es mucho ms fuerte como cido (Ka1 = 4,57 x 10-3, pKa1 = 2,34) que el grupo amino cargado (pKa2 = 9,6), el pH de la disolucin se establece casi exclusivamente por el grado de ionizacin del grupo carboxilo.

[AA][H+] Ka1 = -------------[AA+] La concentracin inicial de AA+ es n, pero parte de las molculas de AA+ (x) se van a disociar. Por tanto, la concentracin real de AA+ ser n - x. Como cada molcula de AA+ se disocia en AA y un protn, la concentracin final de AA ser x y la de protones ser tambin x. AA+ AA + H+ 0,1 x x x x2 Ka1 = --------------- = 4,57 x 10-3 0,1 x Calculando tendremos: x = [H+] = 1,92 x 10-2; pH = 1,72 (b) La glicocola isoelctrica es un ion intermedio de un cido poliprtico. El pH de una disolucin de un ion intermedio es independiente de la concentracin del ion. El pH se puede calcular a partir de los valores de pKa de las dos ionizaciones; es decir, a partir del pKa del siguiente grupo cido a ionizar y del pKa del anterior grupo cido ionizado. 16

pH = (pKa1 + pKa2) = (2,34 + 9,6) = 5,97 (c) El glicocolato sdico es una base diprtica. el pH de la disolucin depende del grado de ionizacin del grupo amino. Podemos comprobar la fortaleza relativa como base calculando la Kb para el grupo amino: Kb1 = Kw/Ka2 = 10-14/10-9,6 = 10-4,4 = 3,98 x 10-5 AA- AA + OH0,1 x x x x2 [OH-][AA] Kb1 = ---------------- = ---------[AA-] 0,1 - x Debido a que la concentracin del glicocolato sdico es muy grande en comparacin con Kb1, podemos despreciar x en el denominador. Sustituyendo y operando tenemos: x = [OH-] = 2 x 10-3; pOH = - log 2 x 10-3 = 2,7; pH = 14 pOH = 11,3 Problema 14 Descrbase la preparacin de 1 litro de tampn de histidina, 0,2 M, pH 6,5, a partir de diclorhidrato de histidina slido (PM = 228), y una disolucin de KOH 1 M. (pKa1 = 1,82; pKa2 = 6,00; pKa3 = 9,17) Solucin: La histidina se disocia de la siguiente manera:
2+

pKa1

AA

AA

pKa2

1,82

AA AA6,00 9,17

pKa3

El tampn que se pide est integrado por las formas cida y bsica de la histidina alrededor de su pKa2 = 6,0. Para preparar 1 l de este tampn 0,2 M se pesan 0,2 x 228 = 45,6 g del aminocido, se disuelven en agua destilada, y posteriormente se ajusta el pH aadiendo KOH 1 M. A partir de la ecuacin de Henderson-Hasselbach, tenemos: [AA] [AA] pH = pKa2 + log ------------; 6,5 = 6 + log ----------[AA+] [AA+] [AA+] + [AA] = 0,2 M; [AA+] = 0,2 - [AA] Sustituyendo y resolviendo: [AA+] = 0,048 y [AA] = 0,152 Como partimos de AA2+ (diclorhidrato de histidina) debemos gastar 0,2 moles de KOH para pasar de AA2+ a AA+ y posteriormente otros 0,152 moles de KOH para obtener el AA necesario para 17

formar el tampn. En total 0,352 moles de KOH. n de moles = l x M; 0,352 = l x 1 M; l = 0352 l = 352 ml Por tanto, para preparar el tampn hay que disolver en 352 ml de KOH 1 M 45,6 g de diclorhidrato de histidina y aadir agua destilada hasta completar 1 l de disolucin. Problema 15 Calclese el volumen de disolucin de KOH 0,4 M necesario para llevar 0,5 l de una disolucin de clorhidrato de histidina 0,1 M, pH 2,2, a pH 9,3 (pKa1 = 1,82; pKa2 = 6,00; pKa3 = 9,17). Solucin: La histidina se disocia de la siguiente manera: pKa1 AA
2+

AA AA AA+

pKa2

pKa3

1,82

6,00

9,17

La disolucin de partida tiene un pH = 2,2, lo que indica que tenemos las formas AA2+ y AA+ del aminocido. Como siempre, operamos con la ecuacin de Henderson-Hasselbalch: [AA+] [AA+] pH = pKa2 + log ------------; 2,2 = 1,82 + log ----------[AA2+] [AA2+] [AA2+] + [AA+] = 0,05 moles (ya que hay que preparar 0,5 de tampn = 0,1 M) Resolviendo tenemos: [AA2+] = 0,015 moles y [AA+] = 0,035 moles Operando de forma similar a pH 9,3 tendremos: [AA-] [AA-] pH = pKa2 + log ------------; 9,3 = 9,17 + log ----------[AA0] [AA0] [AA0] + [AA-] = 0,05 moles Resolviendo tendremos: [AA0] = 0,021 moles y [AA-] = 0,029 moles El paso del pH 2,2 al pH 9,3 lo tenemos que hacer con KOH 0,4 M. Para saber el n de moles de KOH que tenemos que emplear tenemos que tener en cuenta que habr que pasar los moles de las formas iniciales del aminocido hasta las formas finales: 0,015 moles de KOH para pasar AA2+ a AA+. Ahora tendremos 0,05 moles de AA+ que debemos pasar a AA por lo que habr que gastar otros 0,5 moles de KOH. Por ltimo, tenemos que utilizar 0,029 moles de KOH para pasar una cantidad equivalente de AA a AA- y as tener el tampn. En total debemos usar 0,094 moles de KOH que debemos tomar del KOH 0,4 M que tenemos: N de moles = V x M; 0,094 moles = V x 0,4; V = 0,235 l = 235 ml 18

PROBLEMAS NO RESUELTOS 1. Calclese el pH de las siguientes disoluciones a) HCl 10-3 M; b) HCl 10-6 M; c) KOH 10-2 M; d) KOH 10-7 M. Soluciones: a) 3; b) 5,96; c) 12, y d) 7,3. 2. Calclese el pH de una disolucin 0,05 M de: a) clorhidrato de Gly; b) Gly en forma isoelctrica; c) glicinato sdico. Pka1 = 2,34; pka2 = 9,6. Soluciones: a) 1,88; b) 5,97, y c) 11,14. 3. Calclese el pH de una disolucin 1mM de clorhidrato de cido asprtico. pKa1 = 2,09; pKa2 = 3,86; pKa3 = 9,82. Solucin: 3,04. 4. Calclese el pH de una disolucin de Asp monosdico 0,2 M. pKa1 = 2,09; pKa2 = 3,86; pKa3 = 9,82. Solucin: 6,84. 5. Calclese el pH de una disolucin de glutamato monosdico 0,5 M. pKa1 = 2,19; pKa2 = 4,25; pKa3 = 9,67. Solucin: 6,96. 6. Calclese el volumen de disolucin 0,1M de NaOH necesario para neutralizar completamente a) 500 ml de una disolucin 0,2 M de monoclorhidrato de Ser ; b) 100 ml de una disolucin 0,1 M de Leu isoelctrica; c) 400 ml de una disolucin 0,1 M de Glu monosdico; d) 400 ml de una disolucin 0,1 M de Asp isoelctrico. Soluciones: a) 2 litros; b) 0,1 litros; c) 0,4 litros, y d) 0,8 litros. 7. Calclese el volumen de disolucin 0,1 M de HCl necesario para neutralizar completamente a) 200 ml de la forma isoelctrica de serina 0,2 M b) 300 ml de una disolucin 0,1 M conteniendo la forma isoelctrica de glutmico c) 500 ml de una disolucin 0,5 M de la sal sdica de lisina d) 100 ml de una disolucin 0,3 M conteniendo la forma isoelctrica de arginina. Soluciones: a) 400 ml; b) 300 ml; c) 7500 ml, y d) 600 ml. 8. Calclese el volumen de disolucin KOH 0,4 M necesario para llevar 0,5 litros de una disolucin de clorhidrato de His 0,1 M, pH 2,2 a pH 9,3. pKa1 = 1,82; pKa2 = 6,00; pKa3 = 9,17. Solucin: 0,2335 litros de KOH 0,4 M. 9. Describir la preparacin de 40 litros de tampn fosfato 0,02 M y pH 6,9 a partir de: a) disoluciones de H3PO4 2 M y KOH 1 M; b) disolucin de H3PO4 0,8 M y NaOH slido (Pm = 40); c) disoluciones 1 M de KH2PO4 y Na2HPO4; d) K2HPO4 slido (Pm = 174) y HCl 1,5 M. Fosfrico: pKa1 = 2,12; pKa2 = 7,21; pKa3 = 12,32. Soluciones: a) 0,4 litros de H3PO4 2 M y 1,064 litros de KOH 1 M; b) 1 litro de H3PO4 0,8 M y 42,4 g de NaOH; c) 0,260 litros de Na2 HPO4 1 M y 0,540 litros de KH2PO4, y d) 139,2 g de K2HPO4 slido y 0,360 ml de HCl 1,5 M. 10. Calclese la concentracin de arginina en forma isoelctrica presente en un tampn de pH = 8,04, cuya concentracin total de arginina es 0,1 mM. pKa1 = 2,17; pKa2 = 9,04; pKa3 = 12,48. Solucin: 9,1 10-6 M que supone el 10 % aproximadamente del total de arginina presente. 11. Qu cantidad de glicocola isoelctrica y qu volumen de HCl 0,5 M se requieren para preparar un litro de una solucin tamponada a 0,25 M y pH 2,4? (PM = 75,1). pKa1 = 2,34; pKa2 = 9,60. Solucin: 0,24 l de HCl 0,5 M, 18,77 g de Glyo y completar hasta 1 litro con agua destilada. 12. Cmo se preparara 1 litro de una solucin tampn de alanina 0,1 M pH 9 a partir de alanina isoelctrica slida e hidrxido sdico slido? (Pm Ala = 89; NaOH = 40). pKa1 = 2,34; pKa2 = 9,69. Solucin: 8,9 g de alanina y 0,68 g de hidrxido sdico. 13. Descrbase la preparacin de 1 litro de tampn His 0,2 M y pH = 6,5 a partir de clorhidrato de His 19

slido (PM = 228), y una disolucin de KOH 1 M. pKa1 = 1,82; pKa2 = 6,00; pKa3 = 9,17. Solucin: 45,6 g de clorhidrato de His y 152 ml de KOH. 14. Cuando se disuelven 1,8 g de un aminocido con valores de pKa de 2.34 y 9,6 en 100 ml de NaOH 0,2 N y se enrasa hasta 1 litro con agua, se obtiene una disolucin de pH = 10,3. Calclese el peso molecular del aminocido e indquese de que especie puede tratarse. Solucin: PM = 75 (Gly). RESOLUCIN DE LOS PROBLEMAS Determinacin del pH 1. Calclese el pH de las siguientes disoluciones a) HCl 10-3 M; b) HCl 10-6 M; c) KOH 10-2 M; d) KOH 10-7 M. Soluciones: a) 3; b) 5,96; c) 12, y d) 7,3 Tanto el HCl como el KOH son cido y base fuerte, respectivamente, y se puede considerar que se disocian en su totalidad. a) HCl H+ + ClpH = - log [H+] = - log 10-3 = 3 b) Como en el caso anterior HCl H+ + Cl-, pero en este caso, al ser la concentracin tan baja hay que tener en cuenta la [H+] del agua, ya que en este caso s tiene influencia. [H+] = 10-6 + 10-7 = 11 x 10-6 pH = - log [H+] = - log (11 x 10-6) = 5,96 c) KOH K+ + OH[H+] [OH-] = 10-14; [H+] = 10-14/10-2 = 10-12 pH = - log [H+] = - log 10-12 = 12 d) Como en el caso b) hay que tener en cuenta la disociacin del agua: [OH-] = 10-7 + 10-7 = 2 x 10-7 pOH = - log 2 x 10-7 = 6,7; pH + pOH = 14; pH = 14 6,7 = 7,3 2. Calclese el pH de una disolucin 0,05 M de: a) clorhidrato de Gly; b) Gly en forma isoelctrica; c) glicinato sdico. Pka1 = 2,34; pka2 = 9,6. Soluciones: a) 1,88; b) 5,97, y c) 11,14. En el tema hemos visto que los aminocidos (aas) sin restos polares ionizables tienen tres formas: la forma clorhidrato, la isoelctrica y la salina (Gly+, Gly y Gli-, en este caso, o ms general, aa+, aa y aa-). 20

a) En este caso sera, Gly+ Gly + H+ 0,05 x x x [Gly] [H+] Ka1 = -----------------; [Gly+] Y resolviendo tendremos que X = [H+] = 12,92 x 10-3; pH = - log [H+] = 1,88 b) Como sabemos, la forma isoelcrica de un aminocido se disocia tanto en la forma + como en la forma -, comportndose como una sal cida, en cuyo caso el pH es igual a la semisuma de ambos pKas: aa+ aa aa2,34 + 9,6 pKa1 + pKa2 pH = ------------------ = ------------------ = 5,97 2 2 c) El glicocolato sdico es el gly- y se disocia de la siguiente manera: Gly- Gly + OH0,05- x x x Tenemos que tener en cuenta el pKb1: pKa2 + pKb1 = 14; pKb1 = 14 pKa2; pKb1 = 14 9,6 = 4,4 Kb1 = 10-pKb1 = 10-4,4 = 3,98 x 10-5 [Gly] [OH-] x2 -5 Kb1 = -----------------; 3,98 x 10 = ----------[Gly-] 0,05 x Y operando tenemos que [OH-] = 1,38 x 10-3 Y pOH = - log [OH-] = - log 1,38 x 10-3 = 2,86 Ahora, pH = 14 pOH = 14 2,86 = 11,14 3. Calclese el pH de una disolucin 1mM de clorhidrato de cido asprtico. pKa1 = 2,09; pKa2 = 3,86; pKa3 = 9,82. Solucin: 3,04 Como ya hemos visto, el Asp tiene cuatro formas posibles: clorhidrato de asprtico, la forma isoelctrica, el aspartato monosdico y el aspartato disdico. Estas formas las podemos escribir de la manera siguiente: pKa1 pKa2 pKa3 pKa1 pKa2 pKa3 Asp+ Asp Asp- Asp2-; o ms generalmente aa+ aa aa- aa2pKb3 pKb2 pKb1 pKb3 pKb2 pKb1 21 x2 4,57 x 10 = ----------0,05 x
-3

Por tanto, estamos en la forma Asp+ como forma de partida y podemos escribir: Asp+ Asp + H+ 10-3 x x x Ka1 = 10 - pKa1 = 10-2,09 = 8,13 x 10-3 x2 [Asp] [H+] Ka1 = ------------------; 8,13 x 10-3 = -----------[Asp+] 10-3 x Y operando tenemos que: X = [H+] = 9,12 x 10-4; pH = - log [H+] = - log 9,12 x 10-4 = 3,04 4. Calclese el pH de una disolucin de Asp monosdico 0,2 M. pKa1 = 2,09; pKa2 = 3,86; pKa3 = 9,82. Solucin: 6,84. Como hemos visto en el problema anterior, el aspartato monosdico ser Asp-, que se disocia de la siguiente manera: pKa2 pKa3 Asp Asp- Asp23,86 9,82 pH = (pKa2 + pKa3) = (3,86 + 9,82) = 6, 84 5. Calclese el pH de una disolucin de glutamato monosdico 0,5 M. pKa1 = 2,19; pKa2 = 4,25; pKa3 = 9,67. Solucin: 6,96. El glutamato monosdico es similar al aspartato monosdico y, por ello, estamos en el mismo caso que en el problema anterior: pKa2 pKa3 Glu Glu- Glu24,25 9,67 pH = (pKa2 + pKa3) = (4,25 + 9,67) = 6,96 6. Calclese el volumen de disolucin 0,1M de NaOH necesario para neutralizar completamente a) 500 ml de una disolucin 0,2 M de monoclorhidrato de Ser ; b) 100 ml de una disolucin 0,1 M de Leu isoelctrica; c) 400 ml de una disolucin 0,1 M de Glu monosdico; d) 400 ml de una disolucin 0,1 M de Asp isoelctrico. Soluciones: a) 2 litros; b) 0,1 litros; c) 0,4 litros, y d) 0,8 litros. a) La serina tiene tres formas: Ser+, Ser y Ser-. La forma monohidrato es la primera (Ser+). Por tanto, habr que pasar todos los moles de Ser+ a Ser y posteriormente parte desde Ser a Ser-, todo ello con el NaOH. Los moles de Ser+ presentes en 500 ml de una disolucin 0,2 M seran: n de moles = V x M; 0,5 l x 0,2 M = 0,1 moles Es decir, necesitamos 0,1 moles de NaOH para pasarlo todo a Ser y otros 0,1 moles de NaOH 22

para pasar de Ser a Ser-; en total 0,2 moles de NaOH. N de moles = V x M; V = 2 litros Se precisan 2 litros de NaOH 0,1 M para neutralizar completamente 500 ml de monoclorhidrato de serina 0,2 M b) La leucina isoeltrica es Leu y como tenemos que pasar todo a Leu- necesitaremos: n moles = V x M = 0,1 l x 0,1 M = 0,01 moles de NaOH por tanto, V x 0,1 M = 0,01 moles; V = 0,1 l = 100 ml c) El Glu tiene cuatro formas posibles : Glu+, Glu, Glu- y Glu2La forma monosdica es la tercera (Glu-). Operando de forma similar a lo realizado con anterioridad tendremos : a Glu
2-

0,4 l x 0,1 M = 0,04 moles de Glu-. Necesitaremos, por tanto, 0,04 moles de NaOH para pasar V x 0,1 M = 0,04 moles ; V = 0,4 l = 400 ml

Se precisan 400 ml de NaOH 0,1 M para neutralizar los 400 ml de Glu- a Glu2d) El Asp es similar al Glu : Asp+, Asp, Asp- y Asp2-, pero ahora partimos de la forma isoelctrica (Asp). Los moles de Asp que tenemos son 0,4 l x 0,1 M = 0,04 moles. Por tanto, habr que utilizar 0,04 moles de NaOH para pasar de Asp a Asp- y otros tantos para passar de Asp- a Asp2-, en total 0,08 moles de NaOH : V x 0,1 M = 0,08 moles; V = 0,8 l = 800 ml Se precisan 800 ml para pasar desde Asp a Asp27. Calclese el volumen de disolucin 0,1 M de HCl necesario para neutralizar completamente a) 200 ml de la forma isoelctrica de serina 0,2 M b) 300 ml de una disolucin 0,1 M conteniendo la forma isoelctrica de glutmico c) 500 ml de una disolucin 0,5 M de la sal sdica de lisina d) 100 ml de una disolucin 0,3 M conteniendo la forma isoelctrica de arginina. Soluciones: a) 400 ml; b) 300 ml; c) 7500 ml, y d) 600 ml. a) Como ya hemos visto, la serina tiene tres formas: Ser+, Ser y Ser-. Por tanto, estamos hablando del paso de Ser a Ser+. Dado que la neutralizacin es mol a mol, tendremos que 200 ml de Ser 0,2 M tendran V x M = n de moles; 0,2 l x 0,2 M = 0,04 moles. Estos moles los tendramos que neutralizar con HCl: V x 0,1 M = 0,04 moles; V = 0,4 l = 400 ml de HCl b) El glutamato tiene cuatro formas posibles: Glu+, Glu, Glu- y Glu2-. Como partimos de Glu tendremos que neutralizar hasta glu+ 0,3 l x 0,1 = 0,03 moles de Glu 23

Luego tendremos que utilizar 0,03 moles de HCl para pasar a Glu+: V x 0,1 M = 0,03; V = 0,3 l = 300 ml de HCl 0,1 M c) La lisina tiene cuatro formas: Lys2+, Lys+, Lys y Lys-. El problema indica que el punto de partida es la forma Lys-, luego tendremos que neutralizar primero hasta Lys, luego pasar a Lys+ y, por ltimo, hasta Lys2+. 0,5 l x 0,5 l = 0,25 moles de LysDeberemos neutralizar esos 0,25 moles de Lys- con 0,25 moles de HCl 0,1 M para tener Ly, con los mismos moles de HCl pasaramos a Lys+ y con otros tantos tendramos la neutralizacin total hasta Lys2+. En total 0,75 moles. V x 0,1 M = 0,75 moles; V = 7,5 litros de HCl 0,1 M d) La arginina, al igual que la Lys, tiene cuatro formas posibles: Arg2+, Arg+, Arg y Arg-. La forma de partida sera la forma Arg, y, por tanto, habra que pasar desde esta forma hasta la Arg2+ con el HCl. 0,1 l x 0,3 M = 0,03 moles de Arg Necesitaramos 0,03 moles de HCl 0,1 M para pasar a Arg+ y la misma cantidad para obtener la forma Arg2+: V x 0,1 M = 0,06 moles; V = 0,6 l = 600 ml 8. Calclese el volumen de disolucin KOH 0,4 M necesario para llevar 0,5 litros de una disolucin de clorhidrato de His 0,1 M, pH 2,2 a pH 9,3. pKa1 = 1,82; pKa2 = 6,00; pKa3 = 9,17. Solucin: 0,2335 litros de KOH 0,4 M. His2+ pKa1 His+ 1,82 pKa2 His 6,00 pKa3 His9,17

Los moles de His en 0,5 l de tampn 0,1 M sern 0,5 l x 0,1 M = 0,05 moles. Ahora tenemos que ver las concentraciones de las diferentes formas de la His que deber haber a los dos pH de las condiciones del problema. Los pKas a tener en cuenta sern el pKa1 para el primer pH, y el pKa3 para el segundo. Las concentraciones de partida sern: 2,2 = 1,82 + log [His+]/[His2+]; [His+] + [His2+] = 0,05 Resolviendo el sistema tendremos que la [His+] = 0,0353 moles y la [His2+] = 0,0147 moles Las concentraciones finales sern: 9,3 = 9,17 + log [His-]/[His] [His-] + [His] = 0,05 Resolviendo el sistema tendremos [His-] = 0,0287, e [His] = 0,213 24

Por tanto, habr que pasar la cantidad que hay de His2+ hasta His+, luego desde aqu a His y, por ltimo, parte de este His a His-. Todo ello con KOH 0,4 M. Los moles necesarios de KOH sern la suma de 0,0147 moles para pasar de His2+ a His+, 0,05 moles para pasar de His+ a His y 0,0287 moles para obtener la cantidad de His- necesaria para el tampn. En total se precisan 0,0934 moles de KOH. El volumen necesario de KOH 0,4 M ser: V x 0,4 M = 0,0934 moles; V = 0,2335 l = 233,5 ml 9. Describir la preparacin de 40 litros de tampn fosfato 0,02 M y pH 6,9 a partir de: a) disoluciones de H3PO4 2 M y KOH 1 M; b) disolucin de H3PO4 0,8 M y NaOH slido (Pm = 40); c) disoluciones 1 M de KH2PO4 y Na2HPO4; d) K2HPO4 slido (Pm = 174) y HCl 1,5 M. Fosfrico: pKa1 = 2,12; pKa2 = 7,21; pKa3 = 12,32. Soluciones: a) 0,4 litros de H3PO4 2 M y 1,064 litros de KOH 1 M; b) 1 litro de H3PO4 0,8 M y 42,4 g de NaOH; c) 0,260 litros de Na2 HPO4 1 M y 0,540 litros de KH2PO4, y d) 139,2 g de K2HPO4 slido y 0,360 ml de HCl 1,5 M. Para preparar 40 litros de tampn fosfato 0,02 M debemos tomar 40 l x 0,02 M = 0,8 moles del producto o productos de los que dispongamos. Adems, como el pH que queremos es de 6,9, nos estamos moviendo en el entorno del pKa2, que es 7,21, y las especies que hay en este entorno son H2PO4- y HPO42-. Para saber las cantidades exactas de ambas especies tendremos que aplicar el siguiente sistema de ecuaciones: [sal] [HPO42-] pH = pKa + log ----------; 6,9 = 7,21 + log ------------[cido] [H2PO4-] [sal] + [cido] = 0,8 moles ; [H2PO4-] = 0,8 [HPO42-] Sustituyendo y operando tendremos que para tener un tampn fosfato de las caractersticas del problema necesitamos 0,26 moles de HPO42- y 0,54 moles de H2PO4-, que deberemos obtener de las diferentes condiciones planteadas. a) Si partimos de dos disoluciones, una de H3PO4 2 M y otra de KOH 1 M, tendremos primero que tomar los 0,8 moles necesarios para el tampn del H3PO4 2 M y neutralizarlos hasta H2PO4-, para luego neutralizar 0,26 moles del mismo para tener los 0,26 moles de HPO42- que necesitamos, todo ello con KOH. Recordemos que V x M = n de moles, por tanto, V x 2 M= 0,8 M; V = 0,8 moles/2 M = 0,4 l = 400 ml de H3PO4 Estos 0,8 moles habr que neutralizarlos con KOH. Para ello procedemos de la misma forma que en el caso anterior: V x 1 M = 0,8 moles; V = 0,8 moles/1 M = 0,8 l = 800 ml de KOH Si a 400 ml de H3PO4 le aadimos 800 ml de KOH, tendremos 0,8 moles de H2PO4-. Ahora debemos neutralizar parcialmente este H2PO4- para tener los 0,26 moles HPO42- que necesitamos para tener el tampn. V x 1 M = 0,26 moles; V = 0,26 moles/1 M = 0,26 l = 260 ml de KOH En resumen, necesitamos 400 ml de H3PO4 2 M, 800 ml + 260 ml = 1060 ml de KOH, y completar hasta 40 litros con agua destilada. 25

b) Para tener los 0,8 moles de H3PO4 que necesitamos de inicio, a partir de la disolucin 0,8 M de H3PO4, habr que hacer lo siguiente: V x 0,8 M = 0,8 moles; V = 1 l = 1000 ml Ahora, los 0,8 moles de H3PO4 habr que neutralizarlos completamente con NaOH slido. mg/PM = n de moles; mg = n de moles x PM = 0,8 moles x 40 = 3,2 g de NaOH Si ponemos 1 litro de disolicin 0,8 M de H3PO4 y 3,2 g de NaOH tendremos 0,8 moles de H2PO4-. De estos 0,8 moles tendremos que pasar 0,26 a HPO42Mg/40 = 0,26 moles; mg = 10,4 g Es decir, tomaramos 1 litro de H3PO4 0, 8 M, 42,4 g de NaOH slido y completaramos hasta 40 l con agua destilada. c) Como las disoluciones nos proporcionan H2PO4- y HPO42-, tendramos que tomar las cantidades necesarias de cada una de ellas para formar el tampn: Cantidad necesaria de H2PO4- = 0,54 moles Cantidad necesaria de HPO42- = 0,26 moles V x 1 M = 0,54 moles de H2PO4-; V = 540 ml de KH2PO4 V` x 1 M = 0,26 moles de HPO42-: V` = 260 ml de Na2HPO4 O lo que es lo mismo, 540 ml de KH2PO4 1 M, 260 ml de Na2HPO4 1 M y aadir agua destilada hasta 40 litros. d) Ahora tenemos todo en la forma HPO42-; tendremos que tomar 0,8 moles de l. Como es slido operamos de la forma siguiente: mg/PM = n de moles; mg = 139,2 g de K2HPO4 slido Ahora tenemos que neutralizar parcialmente este HPO42- (0,54 moles) con HCl 1,5 M, para tener los 0,54 moles de H2PO4- que necesitamos: V x 0,15 = 0,54 moles; V = 360 ml de HCl Por tanto, se utilizan 139,2 g de K2HPO4 slido, 360 ml de HCl 1,5 M y completar hasta 40 l con agua destilada. 10. Calclese la concentracin de arginina en forma isoelctrica presente en un tampn de pH = 8,04, cuya concentracin total de arginina es 0,1 mM. pKa1 = 2,17; pKa2 = 9,04; pKa3 = 12,48. Solucin: 9,1 10-6 M que supone el 10 % aproximadamente del total de arginina presente. Arg
2+

pKa1 pKa2 pKa3 + Arg Arg Arg2,17 9,04 12,48 26

A pH 8,04 las formas predominantes son Arg+ y Arg y las cantidades de cada una de ellas se deduce por la ecuacin de Henderson-Hasselbalch. 8,04 = 9,04 + log Arg/Arg+ Arg+ + Arg = 0,1 x 10-3 M Arg = 9,1 x 10-6 M 11. Qu cantidad de glicocola isoelctrica y cul es el volumen de HCl 0,5 M que se requieren para preparar un litro de una solucin tamponada a 0,25 M y pH 2,4? (PM = 75,1). pKa1 = 2,34; pKa2 = 9,60. Solucin: 0,24 l de HCl 0,5 M, 18,77 g de Glyo y completar hasta 1 litro con agua destilada. Gly
+

pKa1 pKa2 Gly Gly 2,34 9,6

Necesitamos 0,25 moles de Gly como partida: mg/PM = n de moles; mg/75,1 g/mol = 0,25 moles; mg = 18,775 g de Gly Para obtener el tampn necesitamos neutralizar parcialmente la Gly a Gly+ con el HCl 0,5 M. La cantidad de Gly+ necesaria viene determinada por la ecuacin de Henderson-Hasselbalch: 2,4 = 2,34 + log [Gly]/[Gly+] [Gly] + [Gly+] = 0,25 moles Y resolviendo tenemos que la [Gly+] = 0,12 moles Es decir, tendremos que neutralizar 0,12 moles de Gly con HCl 0,5 M para obtener los 0,12 moles de Gly+ que necesitamos para tener el tampn: V x 0,5 M = 0,12 moles; V = 0,24 l = 240 ml Por tanto, habr que tomar 18,775 g de Gly, 240 ml de HCl 0,5 M y completar hasta 1 litro con agua destilada. 12. Cmo se preparara 1 litro de una solucin tampn de alanina 0,1 M pH 9 a partir de alanina isoelctrica slida e hidrxido sdico slido? (Pm Alanina = 89; NaOH = 40). pKa1 = 2,34; pKa2 = 9,69. Solucin: 8,9 g de alanina y 0,68 g de hidrxido sdico. Ala
+

pKa1 Ala 2,34

pKa2 Ala 9,69

1 litro de Ala contiene 0,1 moles mg/PM = 0,1 moles; mg = 0,1 moles x 89 g /mol = 8,9 g de Ala Para preparar el tampn necesitaramos pasar cierta cantidad de Ala a Ala- con el NaOH. Con objeto de conocer la cantidad necesaria aplicaremos la ecuacin de Henderson-hasselbalch: 9 = 9,69 + log [Ala-]/[Ala] 27

[Ala-] + [Ala] = 0,1 moles Y resolviendo tendremos: [Ala-] = 0,017 moles Es decir tenemos que pasar 0,017 moles de Ala a Ala- con el NaOH slido para preparar el tampn: mg/40 g/mol = 0,017 moles; mg = 0,68 g de NaOH Por consiguiente, tendremos que poner 8,9 g de Ala slido, 0,68 g de NaOH slido y completar hasta 1 litro con agua destilada. 13. Descrbase la preparacin de 1 litro de tampn His 0,2 M y pH = 6,5 a partir de clorhidrato de His slido (PM = 228), y una disolucin de KOH 1 M. pKa1 = 1,82; pKa2 = 6,00; pKa3 = 9,17. Solucin: 45,6 g de clorhidrato de His y 152 ml de KOH. His2+ pKa1 His+ 1,82 pKa2 His 6,00 pKa3 His9,17

La forma de partida es la His+. Puesto que en 1 litro de tampn His 0,2 M tenemos 0,2 moles y que mg/PM = n de moles tendremos que mg = PM x n de moles = 228 g/mol x 0,2 moles = 45,6 g de His+ slida que son necesarios para preparar el tampn. Por otra parte, tenemos que a pH 6,5 las formas predominantes son His+ e His; como partimos de His+ tenemos que calcular, mediante la ecuacin de Henderson-Hasselbalch, la cantidad de His que necesitamos, y dicha contidad tendremos que obtenerla a partir de la His+ y KOH 1 M: 6,5 = 6 + log [His]/[His+] [His] + [His+] = 0,2 moles Y resolviendo tendremos [His] = 0,152 moles Luego habr que tomar 0,152 moles de KOH 1 M V x 1 M = 0,152 moles; V = 0,152 l = 152 ml de KOH 1 M Es decir, 45,6 g de His+ slida, 152 ml de KOH 1 M y agua destilada hasta 1 litro se requieren para preparar el tampn solicitado. 14. Cuando se disuelven 1,8 g de un aminocido con valores de pKa de 2,34 y 9,6 en 100 ml de NaOH 0,2 N y se enrasa hasta 1 litro con agua, se obtiene una disolucin de pH = 10,3. Calclese el peso molecular del aminocido e indquese de que especie puede tratarse. Solucin: PM = 75 (Gly). Dado que el aminocido en cuestin solamente tiene dos pKas, este presenta tres formas: aa+ pKa1 pKa2 aa aa 2,34 9,6 28

Al pH final obtenido, las formas predominantes son aa y aa-. Mediante la ecuacin de Henderson/Halsselbalch podemos saber la relacin entre ambas: 10,3 = 9,6 + log [aa-]/[aa]; aa-/aa = 5,1 La forma de partida es aa, puesto que neutralizamos con NaOH, y habremos pasado tanto aa a aa- como moles de NaOH hemos aadido. Por tanto, podemos saber los moles de aa- que tenemos en el tampn. V x M = n de moles, y como en el NaOH N = M, tenemos 0,1 l x 0,2 M = 0,02 moles de NaOH gastado = 0,02 moles de aa- presentes. Sustituyendo este valor en la ecuacin anterior tenemos: 0,02 moles/aa = 5,01; aa = 0,004 moles. Luego el total de aa de partida ser 0,02 moles + 0,004 moles = 0,024 moles Como mg/PM = n de moles; PM = mg/n de moles = 1,8 g/ 0,024 moles = 75 El aminocido que tiene este peso molecular es la glicocola.

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