UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA DE LA SELVA

Facultad de Recursos Naturales Renovables

Departamento Acadmico de Recursos Naturales Renovables
MENCIN FORESTALES

PROYECTO DE TESIS "Identificacin de agentes patgenos causantes de la pudricin del tornillo (Cedrelinga catenaeformis Ducke) en Tingo Mara Huanuco
EJECUTOR ASESOR : : Jordn Erwin GALLO LVAREZ Ing. Jorge Vergara Palonimo Ing. Fernando Gutierrez Huamn Ing. Oscar Cabezas Huayllas LUGAR DE EJECUCIN DURACIN INICIO : : : BRUNAS

COASESORES

6 Meses Noviembre 2006 Mayo 2007

TERMINO

Tingo Mara Per

I. INTRODUCCIN

El tornilo perteneciente al grupo de especies forestales comerciales del Reglamento de Extraccin y Transformacin forestal, Ley Forestal 27308 se encuentra en la categora C, denominada como intermedias. Esta especie por sus propiedades fisicas, mecanicas y tecnolgicas, hace que en el mercado tenga una alta demanda, el mismo que su comercializacin se hace a nivel regional, nacional e internacional cuya demanda cada ao se incrementa. Unos de los grandes problemas y a su vez poco estudiados en el campo de la patologa forestal, son de aquellos agentes biolgicos que causan la pudricin inicindose de la medula del rbol. La madera por ser un material de origen orgnico, est expuesta a una serie de ataques ya sea por microorganismos, bacterias, hongos y insectos, cuando estas encuentran las condiciones ambientales adecuadas para su desarrollo tales como: Alimentacin, humedad, fuente de oxgeno, temperatura, pH adecuado. Los agentes biolgicos atacan a la madera porque para ellos se constituye en su fuente de alimento o una va para conseguir el mismo, no todas las maderas se comportan en forma similar frente a estos agentes, algunas especies producen materiales llamados extractivos que le confieren cierto nivel de resistencia frente a hongos e insectos, son aceites esenciales, resinas y taninos, compuestos fenlicos, extractivos que se acumulan en el duramen o cerno y que no se presenta en la albura o smago; porque la albura almacena azcares y almidones que son apetecidos por ciertos hongos e insectos xilfagos, en consecuencia la albura es susceptible al ataque de estos agentes.

Planteamiento del problema. Ciertos agentes biolgicos como: hongos, mohos, insectos, etc, provocan perforaciones medulares afectando seriamente el rendimiento de la madera, estas perforaciones madurez latzales ocasionado se producen cuando a de origen el rbol alcanza la aprovechable, pero tambin se por agentes encontrado perforaciones en animal (insectos xilfagos),

provocando la muerte de la planta; Las bacterias no constituyen un peligro importante en la destruccin de la madera; sin embargo se ha comprobado que existen relaciones con los ascomicetas que causan cierto tipo de pudricin o mancha. Estas perforaciones son producidas como resultado de la accion enzimatica sobre las paredes de las celulas leosas (pudricin), ya que la madera es un material de origen orgnico, y est expuesta a una serie de ataques ya sea por microorganismos, bacterias, hongos, insectos, perforadores marinos e inclusive animales superiores o por causas no biolgicas como el fuego, desgastes mecnicos y accin de la intemperie. En la actualidad, existen pocos estudios sobre quienes son estos agentes que causantes la pudricin, para el caso de la cedrelinga catenaeformis, los estudios son muy generales. Por tanto este proyecto de tesis busca dar respuestas a algunas de estas interrogantes: Quienes son los agentes que causan la pudricion del tornillo? Cual es la biologia de estos agentes? Cmo influyen los agentes que causan la pudricin en cuanto al rendimiento de la madera del tornillo?

Por lo tanto, el presente proyecto de tesis siguientes objetivos. Objetivo general:

pretende alcanzar los

Caracterizar y identificar los agentes que causan la pudricin del tornillo. Objetivos especficos: Caracterizar los agentes causantes de la pudricin del tornillo. Identificar los agentes causantes de la pudricin del tornillo. Determinar el impacto de la pudricin sobre el rendimiento de la madera del tornillo.

II. JUSTIFICACION: El tornillo. C. catenaeformis es actualmente la especie forestal nativa ms promisoria en la Amazona peruana. Es una especie forestal con caractersticas maderables valiosas y tiene un uso muy difundido en el Per. Est considerada entre las cinco especies forestales ms apreciadas por el poblador amaznico desde el punto de vista econmico y comercialmente es una de las maderas ms utilizadas. La importancia de realizar este estudio, permitir conocer aquellos agentes que causan problemas a la madera de la especie Cedrelinga catenaeformis, y asi una vez reconocidas y estudiada la biologia de estos agentes, se podr aplicar medidas de control preventivas con la finalidad de reducir los daos que causan a la madera acompaado de una adecuada planificacin silvicultural.

III.

ANTECEDENTES (REVISION BIBLIOGRAFICA):

3.1. Descripcion de la especie. 3.1.1. Taxonomia. (Sistema de clasificacin de Artur Cronquist) Reino Divisin Clase Orden 2 Familia 1 Genero Especie : : : : : : : PLANTAE MAGNOLIOPHYTA MAGNOLIOPSIDA (Dicotiledneas) Rosidae Fabales MIMOSACEAE Credrelinga Credrelinga catenaeformis Ducke.

Sub clase V :

3.1.2. Descripcin botnica. rbol del dosel superior, de fuste recto, corteza agrietada, con grandes aletas y races superficiales, dimetros hasta de 2 m. Hojas alternas, glabras y bipinnnadas; peciolo cilndrico de 3-4 cm de largo, longitudinalmente estriado, con una glndula en su pice; raquis principal de 3.5-7 cm de largo, tenuemente angulado y estirado. Las flores son hermafroditas, de color blanco. La florescencia es terminal en pequeas cabezuelas (captulos); fruto tipo legumbre, lomento membranosos compuesto de 9 a 12 artejos plegados en zigzag, oblongo ovales, que llegan a medir hasta 50 cm de largo.

3.1.3. Distribucin geogrfica. Se encuentra distribuida en la Amazonia peruana, brasilea, colombiana, ecuatoriana, y en Surinam. Su distribucin en el Per va desde los 120 hasta 800 msnm, con temperaturas que varan de 15 C hasta 38 C y precipitaciones desde 2500 hasta 3800 mm.

3.1.4.

Aspectos Ecolgicos. En el Per (Cedrelinga) se encuentra en bosques aluviales y

bosques de colina. En el Bosque Nacional Alexander Von Humboldt se localiza dentro de la zona de vida Bosque muy hmedo-Premontano Tropical (BmhPT), transicional a bosque hmedo tropical. (Cedrelinga catenaeformis) es una especie gregaria, se la encuentra en concentraciones. En la Amazonia peruana, las principales especies que se encuentran asociadas con esta especie que son: moena (gneros Aniba, Ocotea, Persea y Nectandra), nogal (Juglans neotropica), Manchinga (Brosimum alicastrum), Mashonaste (Clarisia racemosa), almendro (Caryocar sp.), quinilla (Manilkara bidentata), sapote (Matisia sp.), cedro de altura (Cedrela sp). En cantidades menores; requia (Guarea sp.), bolaina blanca (Guazuma crinita), capirona (Calycophyllum sp.), cumala (Virola sp.), estoraque (Miroxylom balsamun).

3.1.5. Fenologia. La floracin ocurre entre agosto y diciembre, siendo ms frecuente en octubre, a principios de la poca lluviosa. Los frutos son lomentos largos y membranosos que maduran en 2-3 meses. La cada de los frutos tiene lugar entre enero y abril, pero es ms frecuente en febrero, durante la poca de lluviosa. En ocasiones muy excepcionales, algunos rboles pueden diseminar sus semillas en otras pocas del ao. 3.1.6. Semillas. Descripcin: Las semillas son grandes y elpticas, entre 1.8 a 3.5 cm de largo, 1.0 a 2.5 cm de ancho y muy comprimidas lateralmente, (entre 0.2 a 0.3 cm). Cubierta seminal delgada, casi transparente.

3.2.

Pudricin de la madera. Segn Martnez (1952), la pudricin de la madera viene hacer el

resultado de la accin enzimtico sobre las paredes de las clulas leosas. Martnez (1952), distingue a la pudricin blanca como aquella que es destruida o alterada la lignina, dejndose en la madera al final de este proceso, un complejo de celulosa mas o menos blanquecino que rara vez es de tono uniforme, l que da lugar a que se clasifique este tipo de pudricin por su aspecto, en alveolar, veteada, cavernosa y otros. Los hongos que atacan a la celulosa, dejando residuo carbonceo, formado por lignina mas o menos indemne, produce la pudricin negra, llamada tambin pudricin parda. Kollam (1959), encuentra que hay algunos hongos que concentran su ataque sobre la celulosa y blanquean los compuestos residuales de lignina sin destruirla, por lo cual la madera tiene el aspecto de estar atacada por una pudricin blanca tpica, pero en realidad no es as, la llaman pudricin mixta Hunt y Garrat (1952), sealan otro tipo de pudricin, la pudricin seca, que se presenta en maderas de construccin interna, cuando esta posee un bajo contenido de humedad. La pudricin transforma a la madera en una masa deleznable. 3.3. Clasificacion de agentes causantes de la pudricion de la madera. 3.3.1. Hongos Xilfagos. Entre los cuales tenemos: a) Polyporus sanguineus Lex Fr. Especie est tropicales del mundo. Gonzlez ampliamente distribuida en las zonas (1977) en el Per, la extrajo del bosque

tropical hmedo de Yurimaguas, pero la especie es comn en otros tipos de bosque. Madhosingh (1942) anota que Polyporus sanguineus Lex Fr. bien delgado y algo flexible.

Posee un carpforo anual, corchoso, mas inferior. El hongo es de color rojo ladrillo.

Presenta un himenio ligeramente arrugado, con tubos o poros en s cara

Martnez (1952) indica que Polyporus sanguineus Lex Fr. Causa en mamadera una pudricin corrosiva caracterizada por la destruccin de la lignina, dejando al final un complejo de celulosa, mas o menos blanquecino, que se presenta en forma de alveolos o de betas blancas, separadas por zonas de maderas sanas , de color normal. El laboratorio de productos forestales de Madison (1946) indica que la descomposicin de la lignina por accion de los hongos poliporos es, en primer trmino, un proceso de oxidacin, por ello, Polyporus sanguineus Lex Fr que descompone la lignina de la madera da reaccin positiva a la prueba de la oxidasa, indicando con ello que es evidente la presencia de enzimas oxidantes en el micelio de este hongo. b) Polyporus versicolor L. ex Fr. Segn Hunt y Garratt , esta es considerada como subcosmopolita encontrandose en climas tropicales y sub tropicales del mundo. Bessey (1952) sobrevive hasta dos aos. Comnmente es dbil notndose que el cuerpo fructfero del hongo queda como adosado a la superficie de la madera sobre la cual se encuentra. Martnez (1952) indica que la madera afectada por

Polyporus versicolor L. ex Fr es decolorada, pero que conserva su forma y volumen, mostrando hacia afuera rajaduras contradas por las que a veces

asoma un micelio blanquecino. Algunas veces, la madera presenta paredes de color canela, lo cual se conoce como linea de pudricin Torres (1960) Seala que Polyporus versicolor L. ex Fr ataca a maderas en estacioanamiento, las que muestran al comienzo una podredumbre insignificante, que luego se vuelve muy fuerte, hasta logararse la descomposicin completa de la madera. c) Armillaria mellea Quel Fernndez (1952) dice que este hongo es muy comn, encontrndoselo en muchas especie templados 3.4. Estudios patologicos de las maderas latifoliadas. SCHWYZER, observ ataque de hongos en heridas causadas por un corte de machete, por pisadas repetidas en las raices superficiales cerca del fuste. El ataque de hongos por las raices produce un alta tasa de mortalidad. Tambien encontr larva de cerambicide en arboles de tornillo de 30 a 40 meses de edad, el arbol no pierde la vigorocidad a pesar de que en la medula ya existe un tunel de un metro de largo, pero esta puede ser unas de las posibildades de como se inica la pudricin del interior del fuste. 3.5. Agentes destructores de la madera Vaca, F. (1998), la madera por ser un material de origen orgnico, est expuesta a una serie de ataques ya sea por microorganismos, bacterias, hongos, insectos, perforadores marinos e inclusive animales superiores o por causas no biolgicas como el fuego, desgastes mecnicos y accin de la intemperie. Estos microorganismos para sobrevivir requieren de: Fuente de alimentacin forestales, principalmente en climas

Humedad adecuada Fuente de oxgeno Temperatura pH adecuado a. Principales causas de degradacin Los agentes biolgicos atacan a la madera porque para ellos se

constituye en su fuente de alimento o una va para conseguir el mismo, no todas las maderas se comportan en forma similar frente a estos agentes, algunas especies producen materiales llamados extractivos que le confieren cierto nivel de resistencia frente a hongos e insectos, son aceites esenciales, resinas y taninos, compuestos fenlicos, extractivos que se acumulan en el duramen o cerno y que no se presenta en la albura o smago; porque la albura almacena azcares y almidones que son apetecidos por ciertos hongos e insectos xilfagos, en consecuencia la albura es susceptible al ataque de estos agentes. Las bacterias no constituyen un peligro importante en la destruccin de la madera; sin embargo se ha comprobado que existen relaciones con los ascomicetes que causan cierto tipo de pudricin o mancha. El bacillus polymixa es la bacteria capaz de atacar a la madera sumergida en el agua dulce, pero esta degradacin es poco significativa. Los insectos se constituyen tambin en los principales agentes capaces de atacar a la madera. Entre ellos tenemos: a los colepteros (escarabajos), que con las termitas o comegenes hormigas y avispas carpinteras obligan a tomar medidas de proteccin. Los perforadores marinos atacan todo tipo de madera que se encuentra sumergida en agua de mar, Vaca, F. (1998).

b.

Hongos

Vaca F. (1998), existen muchas variedades de hongos que utilizan a la madera como fuente de alimentacin, los daos por estos organismos pueden originarse incluso cuando un rbol est de pie, los altos contenidos de humedad los previene del ataque por hongos e insectos, pero cuando el rbol es derribado, comienza la perdida del contenido de humedad en sus tejidos, las esporas de los hongos que circulan en el medio encuentran el sustrato apropiado para su germinacin y su posterior penetracin en el tejido leoso. Las preferencias alimenticias de los hongos son muy variadas, mientras unos desintegran las paredes celulares causando pudriciones, otros se alimentan de azcares y almidones que forman parte del contenido celular y originan cambios de coloracin en la madera. Los hongos inferiores llamados tambin saprfitos son incapaces de producir por si solos sus alimentos. La caractrstica ms importante de este grupo de destructores de la madera, es que crecen por micelio y se reproducen mediante esporas. La constitucin de los hongos es relativamente simple, el cuerpo fructfero se conforma de clulas individuales llamadas hifas, clulas muy finas, dimetro aproximadamente 2u.m., microscpicas, poseen ramificaciones, paredes transparentes conformadas por quitina. El micelio, mediante la secrecin de enzimas son las encargadas de suministrar alimento a los hongos, tanto las hifas como el micelio son los verdaderos destructores de la madera.

Los hongos se desarrollan mediante las esporas que son las responsables de la propagacin y se producen dentro de los cuerpos fructferos que dan lugar a los principales grupos de agaricales y polyporales. Vaca, F. (1998). Agaricales Cuerpo fructfero laminar de consistencia generalmente suave, llamados hongos de sombrero o setas; himenio con lminas o agallas, lminas pocas veces separadas. Fig. 3: Ilustracin esquemtica del desarrollo del hongo

a) Desarrollo del hongo b) Germinacin de las esporas y desarrollo del micelio Polyporales Cuerpo fructfero en estratos de consistencia generalmente dura o coriacea, llamados hongos en repisa o casco de caballo himenio con tubos o poros, algunas veces en forma laminar. Las esporas para su germinacin necesitan un sustrato y condiciones climticas (temperatura, humedad). Una vez germinada la espora crece la hifa y luego da origen al micelio, el mismo que adquiere un tamao adecuado y da lugar a los cuerpos fructferos con tejido formador de esporas, que son trasladadas por el viento, agua y otros que ponindose en contacto

con el pedazo de madera y que rene las condiciones forman races llamadas hiphae. Los hongos superiores capaces de producir diferentes pudriciones y deterioro son responsables de desintegrar la materia orgnica. Los basidiomicetes se constituyen en el grupo de hongos de

mayor nmero de especies que se caracterizan por la produccin de esporas; su estructura principal son los basidios que se encuentran dispuestos en estratos definidos en el micelio llamado tambin himenio; el micelio formado por hifas septadas y bien desarrolladas. Los hongos al desarrollar sus hifas forman el micelio, elemento que penetra y permanece en la madera, en consecuencia la pudricin no es fcil de reconocer en sus primeras etapas, pero s se los puede detectar cuando la madera cambia de color, pierde peso y poca consistencia cuando el hongo ha cumplido su ciclo biolgico con la formacin de su esporocarpo. La madera presenta los cuerpos fructferos o esporocarpos, la remocin de estos no obstaculiza el proceso de degradacin.

c.

Mohos Son hongos que desarrollan su micelio en la superficie de la

madera (ofreciendo el conjunto de los micelios una cubierta algodonosa blanca), penetrando las hifas en el interior a poca profundidad y provocando coloraciones o manchas, las cuales junto con la pelusa blanquecina, pueden eliminarse mediante un cepillado leve, se alimentan de sustancias en reserva depositadas en el interior de las clulas parenquimticas de la albura, no lesionando las paredes celulares por lo que no alteran en grado alguno las propiedades mecnicas de la madera afectada. Los hongos cromgenos son los que producen manchas en la superficie de la madera, siendo los ms comunes la mancha azul, se presentan en madera almacenada, aserrada y en troncas, esta coloracin no puede ser eliminada, desvalorizando en algunos usos. Se alimentan de sustancias de reserva en las clulas

parenquimticas de la albura, las hifas penetran a travs de los radios leosos mediante presin mecnica del extremo de las hifas, sin secrecin de ectoenzimas que producirn la lisis de la pared celular, por esta razn estos hongos no alteran la propiedades fsicas y mecnicas de la madera. d) Agentes Destructores de Origen Animal El segundo grupo de organismos vivos enemigos naturales de la madera son los insectos, el mayor nmero de estos agentes destructores se ubican taxonmicamente dentro el orden de los colepteros, siendo los ms importantes los escarabajos y los insectos pertenecientes al orden ispteros como las termitas.

3.6.

Tipos de pudricion: 3.6.1. Pudricin Blanca Los hongos responsables de este tipo de pudricin descomponen

todos los elementos de la pared celular, entre ellos la lignina mediante la accin de sus ectoenzimas, la madera afectada pierde su color caracterstico, se vuelve fibrosa y se parte con facilidad, la lignina es una sustancia derivada de la unin del fenil propano siringilo y guayacilo, se encuentra como material de incrustacin en la lmina media y paredes celulares de la madera, por tratarse de un proceso de oxidacin y no de hidrlisis los hongos que degradan lignina deben poseer enzimas catacolasas o difenil oxidasas (LECLERCQ A. 1989).

Fig.5: Podredumbre blanca Fuente : Leclercq A. 3.6.2. Pudricin Marrn o Parda La madera que presenta este tipo de pudricin tiene la apariencia resquebrajada en sentido transversal a la fibra, se la conoce tambin como

pudricin cbica o rmbica, pierde peso afectando las propiedades fsico mecnicas, (LECLERCQ A. 1989).

Fig. 6: Podredumbre cbica Fuente: Leclercq A. Este tipo de pudricin se caracteriza por la degradacin de la celulosa por accin enzimtica, es un proceso complicado, la cadena de celulosa formada por unidades B-D glucosas que es el monmero que se halla unido por enlaces glucosdicos B. Las fases de la degradacin de la celulosa son:

Fases de la degradacin de la Celulosa

Cuadro 1: Comparacin entre Caractersticas de las Pudriciones Blanca y Marrn en la Madera.

3.7.

Efectos del Ataque del Hongo de Pudricin sobre las Propiedades de la Madera Cuando se desarrollan estos hongos pueden producir ciertas

alteraciones importantes en las caractersticas fsicas y qumicas de la madera infectada, dependiendo de la intensidad de la pudricin y de efectos especficos de los microorganismos. Los efectos de estos organismos sobre la madera son: Alteraciones de la composicin qumica Disminucin de peso Reduccin de la resistencia Modificacin del color natural Reduccin de la capacidad acutica Incremento de inflamabilidad Disminucin del poder calorfico Confiere mayor susceptibilidad al ataque de ciertos insectos

IV. 4.1.

MATERIALES Y METODOS

Ubicacin del area de trabajo. 4.1.1. Localizacin poltica. Sector 1: BRUNAS; se encuentra ubicado en la margen derecha

del Ro Huallaga del Distrito de Rupa rupa, Provincia de Leoncio Prado, Departamento de Huanuco. En la parte de selva alta con una altitud promedio de 670 m.s.n.m. Sector 2. Concesin Carlos Muoz; se encuentra ubicada en el Sector : Ri Huamuco - La Morada, Distrito de Cholon, Provincia : Maran, Departamento : Hunuco. 4.1.2. Localizacin geogrfica. Sector 1. Geograficamente el brunas se encuentra ubicada en las siguientes coordenadas: Cuadro N 5. Coordenadas UTM del BRUNAS

Punto 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Este (E) 390627 390344 390120 390005 390035 389892 389943 390078 390130 390272

Norte (N) 8971182 8971001 8970837 8970759 8970719 8970631 8970505 8970568 8970522 8970338

11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22

390243 390406 390351 390345 390477 390552 390591 390667 390957 391986 392095 392471

8970335 8970064 8970031 8970015 8970058 8970065 8970009 8969744 8969795 8970033 8969907 8969887

Sector 2. Geograficamente la concesion se ecuentra ubicada: Concesin Norte (N) Referencia 9008148 P1- P2 Ri Huamuco 9003532 9015000 9015000 9017993 9018017 9013556 9013556

Vert. V1 V2 V3 V4 V5 V6 V7 V8

Este (E) 363597 355000 355000 355935 360109 360738 360738 363597

4.2. MATERIALES. 4.2.1. Equipos. Cmara digital

Computadora. Microscopio. Balanza. Horno microonda. Autoclave. Refrigeradora.

4.2.2.

Herramientas. Algodn Frascos de Frugos. Pinzas Cajas petri (4) Mechero(1) Vaso de precipitacin (1) Encendedor Pinza (1) Tijera Papel higinico esterilizado Paraflim Varilla de vidrio.

4.2.3.

Vestuario de campo. Botas. Cazco. Mascarilla. impermeable.

4.2.4.

Reactivo.

Hipoclorito de sodio.

Agua destilada. 4.2.4. Material vegetativo. 4.2.5. Cedrelinga catenaeformis Ducke. Tornillo

Material biolgico. Hongos, mohos, insectos, etc.

4.2.6.

Medio de cultivo. -Papa agar dextrosa PDA. 4.2.7. Otros. Adherente. Disolvente (agua)

4.3. METODOLOGA. 4.3.1. Fase de campo. El trabajo de campo se realizar en dos zonas: una estar ubicada en el Bosque Reservado de la UNAS y la otra ser en la concesin del Sr. Carlos Muoz ubicada en el Sector : Ri Huamuco - La Morada. Distrito : Cholon. Provincia : Maraon. Departamento : Hunuco. Los pasos a seguir en cada sector son las siguientes. Reconocimento del area de trabajo. Identificacion de la especie en estudio. Caracterizar la especie identificada. Formato de apunte de carcaterisitcas de la especie. Sector:......................................... Numero de rbol

1 DAP Altura total Altura comercial Edad aproximado Calidad de fuste Vigoricidad Estado fitosanitario Ancho de copa Nmero de rama primaria Nmero de ramas secundarias Agentes extraos en fuste(nidos, perforaciones, colonias de hogos, etc) Ubicacin Este Ubicacin Norte

Recoleccin de muestras de agentes biolgicos si hubiera en la superficie externa del fuste, para esto se contar con envases esterelizado. de hidrios de tapa de cierre ermtico y

Posteriormente se hara el talado del rbol. Recoleccin de muestras de agentes biolgicos de la parte interna del envases fuste, tales de hidrios de como: Hongos, tapa de algas, mohos, contar con ermtico y insectos, larvas, huevos, etc., para tambien se cierre esterelizado.

4.3.2 Fase de gabinete. La fase de gabinete que consistira en la identificacion de estos agentes biologicos que causa la pudricion de la madera, para ello se realizara cultivos ya sea de hongos, mohos, etc.

En esta fase se realizar en el laboratorio de patologa de la Facultad de Ciencias Forestales de la Universidad Nacional Agraria la Molina y en el laboratorio de fitopatologa de la SENASA (Lima). Para ello se realizarn las siguientes actividades. 1. preparacion de medio de cultivo. PDA Pesar PDA 20 gr.

Vasear a un vaso de precipitacin, 400 ml de H2O destilada. Echar el PDA, mezclar empleando la varilla. Colocar en los frascos esta mezcla Poner al horno microondas por una duracin de 3 minutos . Colocar los algodones como tampones y para mas seguridad capuchas de papel. Luego llevar al autoclave. Despus a la cmara de flujo laminar para vaciar en las cajas petri y guardarlas hasta la obtencin de muestras para el cultivo.

2. Aislamiento del hongo Separar una parte del tejido enfermo. dos minutos . - Luego retirar una por una con la pinza y llevarlo a enjuague en tres cajas petri que contienen agua destilada, esta operacin se realiza con un mechero con la finalidad de impedir el ingreso de los microorganismos del ambiente. - Sacarlo en el papel esterilizado con la pinza para que sequen las muestras . - Cortar con la tijera en trozos mas pequeos para realizar el cultivo. - Colocar los trozos en los agares - Colocar el paraflim en las cajas petri para que no penetren microorganismos del ambiente. - Marcar cada una de las muestras y llevar a la incubadora - Desinfeccin de los trozos de tejido en este caso de la raz en leja por

3. Identificacion del agente. Para la identificacion, se contara con la ayuda de especialista en clasificacionde hongos, insectos, etc. Pero antes de ellos se reauira realizar las siguientes actividades. Colocar en el porta objeto una muestra del agente biolgico. Observa con el micrsocopio. Desacribir lo observado. Para tener fe de los resultyados, se realizar comparaciones fotograficas de las caracteristicas macroscopicas y microscopicas de estos agentes.

4.4.

DURACIN El trabajo de tesis tendr una duracin de 6 meses. Inicio Termino : : 1 de Noviembre del 2006. 1 de junio del 2007.

V.

CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES.

Actividades Preparacin del proyecto Aprobacin del Proyecto Reconocimiento de Campo

Noviembre. Diciemb. Enero X X X X

Febrero Marzo

Abril

Ubicacin de los rboles muestras Recoleccin de muestras Identificacin en gabinete Redaccin del Informe Presentacin del informe final Sustentacin de tesis

X X X X

X X X

X X X X

X X X

X X X X

VI. Descripcion unidad

PRESUPUESTO Cantidad Ps. Unitario Sub Total (s/.) 5463.8 2533 825 5 25

Insumos, mano de obra y otros Insumos Equipos Cmara fotogrfica digital Alquiler/dia

Motosierra Alquiler/dia Computadora Alquiler/dia Herramientas Machete Unidad Tijera Unidad Pinzas Unidad Navaja de mano unidad Materiales Algodn Paquete Frascos de vidrios Unidad Cajas petrix Unidad Mechero Unidad Encendedor Unidad Paraflin Unidad Papel higinico esterilizado unidad Placa porta objetos unidad Placa cubre objeto unidad Mascarilla unidad alfiler Caja Tecnopor Plancha Casco unidad Impermeable unidad Linterna unidad Combustible Gls. Reactivos Hipoclorito de sodio Lt. Acetato de sodio Lt. Agua destilada Lt. Medio de cultivo PDA Lt. Mano de obra Labores de campo Talado de rboles jornal Alimentacin Dias/h Labores de gabinete Alimentacin (Lima) Das Otros gastos Pasajes Tingo Mara - La Morada Viajes Tingo Mara - Lima Viajes Imprevistos 10% del total

10 10 5 1 1 3 5 30 50 3 2 5 4 50 50 4 2 1 4 4 4 30 2 2 5 6

50 30 12 5 10 10 3 8 6 10 1 15 3 0.5 0.5 12 3 10 15 20 5 11 10 50 5 30

20 80 30

20 15 15

8 4

20 35

500 300 105 60 5 10 30 1278 15 240 300 30 2 75 12 25 25 48 6 10 60 80 20 330 145 20 100 25 180 180 2120 2120 400 1200 70 450 810.8 300 160 140 510.8 510.8

VII. -

BIBLIOGRAFIAS:

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