DETERMINACIN DEL FSFORO ASIMILABLE (MTODO OLSEN). FUNDAMENTO. El fsforo asimilable es el fsforo disponible para las plantas.

Los iones que absorben las plantas se presentan en forma soluble y en forma de cambio. Dentro de estas dos formas las ms fcilmente distinguibles son los iones que estn en la disolucin del suelo. Los iones necesarios en la nutricin vegetal se agrupan segn las cantidades que necesiten: 1) Macroelementos o macronutrientes: N, P, K, Ca, S y Mg; 2) Microelementos o micronutrienetes u oligoelementos: Fe, Ba, B, Cu, Zn y Mo. Un exceso de determinados elementos, sobre todo en forma asimilable, puede causar fitotoxicidad (p.e. Al en suelos cidos y Na en suelos salinos). Entre otros factores, la disponibilidad de nutrientes depende del pH, as a pH cido estn solubles (o disponibles): Al, Fe, Mn, Cu y Zn, y a pH bsico: Ca, Mg y Mo. El N, S y K estn disponibles por las plantas en un amplio rango de pH, mientras que otros como el P estn disponibles en un rango de pH muy estrecho (6,5-7,0). El P a pH cido precipita con el Fe y el Al, formando fosfatos de Fe y Al, que son insolubles (no asimilables); a pH bsico el P se une con el Ca para formar fosfatos biclcicos tambin insolubles. En el suelo tambin existen formas insolubles de iones esenciales que pueden ser utilizados pero a largo plazo, cuando sean liberados de las estructuras que los contienen. El modo de conocer la cantidad de cada una de esas formas es extraerlas con un agente extractante. Cada mtodo comporta distintos resultados y hay que tenerlo presente a la hora de interpretarlo. El N es el nico in que no se determina por una extraccin de este tipo. El conocimiento del P asimilable es importante ya que, junto al N, K y Mg, es extrado por los vegetales en grandes cantidades. Para determinar el P asimilable los diferentes mtodos de extraccin usan distintos agentes extractantes, cada uno de ellos con distinta fuerza de extraccin. Hay tres mtodos: - Extraccin con cido dbil (actico muy diluido). Extrae el P soluble o inmediatamente asimilable, pero existe una mayor dificultad para extraer otro tipo de P (p.e. el del complejo de cambio). - Mtodo Olsen. Se considera que es el que mejor mtodo para extraer el P asimilable. - Mtodo Bray-Kurt. Como extractante utiliza una mezcla de cidos fuertes. Por su agresividad adems del P asimilable tambin extrae una parte del asimilable a largo plazo (el que est en forma de reserva). Los resultados obtenidos son proporcionales a la agresividad del extractante: resultados bajos, altos e intermedios. MTODO OLSEN (extraccin de P asimilable con extractante bicarbonato sdico 0'5 N, pH 8'2). a) Reactivos. NaHCO3 0'5 N (pH 8'2); Solucin A: tartrato de antimonio y potasio, molibdato amnico, H2SO4 y agua destilada; Solucin B: cido ascrbico + solucin A; Solucin patrn de P: PO4H2K, H2SO4 concentrado y agua destilada. b) Procedimiento. (1) A 1 gr de suelo se le extrae el fsforo asimilable con 5 ml NaHCO3 0,5 N (pH = 8,2). Seguidamente se filtra, se coge 1 ml del filtrado al que se le aaden 2 gotas de H2SO4 concentrado y se agita suavemente para que expulse el CO2. A la mezcla se le aaden 10 ml de solucin B, si existe fsforo se desarrollar color azul, debido a que reacciona con el molibdato amnico de la solucin A que contiene la solucin B, formndose un complejo fosfomolbdico, alcanzando la mxima coloracin a los 10 minutos. La absorbancia se mide con un espectrofotmetro a 882 nm y se compara con la curva patrn. (2) Preparacin del blanco. Se coloca 1 ml de extractante (NaHCO3 0'5 N, pH 8'2) en un matraz y se aaden 2 gotas de H2SO4 concentrado y 10 ml de solucin B. (3) Preparacin de patrones para elaborar la curva patrn. A partir de la disolucin madre de 2 ml P/L se preparan los patrones, conteniendo 0.16, 0.08 y 0.04 ml P/L. Se les aade 1 ml de solucin extractante, 2 gotas de H2SO4 concentrado y 10 ml de solucin B. Despus se mide la absorbancia (882 nm) para construir la curva patrn. c) Resultados. Despus de preparar 50 ml con cada patrn (1, 2 o 4 ml de extractante), la absorbancia (882 nm con espectrofotmetro) del P2 debe ser el doble del P1 y el P3 el doble del P2, en relacin a sus concentraciones. Absorvancia (882 nm) P1 P2 P3 Muestra 0'035 0'07 0'13 0'05 Concentracin (mg P/L) 0'04 0'08 0'16 Extrapolacin en la curva patrn

El resultado de la extrapolacin result ser el siguiente: Como el resultado se muestra en relacin a 1 L, tenemos que calcular la cantidad de fsforo respecto al volumen que hemos utilizado (50 ml): 0'057 mg 1000 ml x mg 50 ml Los 50 ml proceden a su vez de 1 ml de alcuota que hemos tomado de los 50 ml de extracto: 2'85.10 1 ml alcuota

y 50 ml de extracto. Como los 50 ml de extracto estn referidos a los 2'5 g de suelo que pesamos inicialmente, debemos relacionarlos con 1000 g para poder expresar el resultado en mg P/Kg: 0'1425 mg 2'5 g de suelo z 1000 g de suelo El resultado tambin puede expresarse como mg de P2O5: Pm P2O5 = 141'94 mg 61'94 mg de P X 57 mg de P d) Interpretacin de resultados. Se considera por el Mtodo Olsen la siguiente tabla: 0-1 mg de P/Kg de suelo 1-3 mg de P/Kg de suelo 3-6 mg de P/Kg de suelo Suelo muy deficiente en P asimilable Suelo deficiente en P asimilable Suelo normal en P asimilable

6-10 mg de P/Kg de suelo Suelo alto en P asimilable >10 mg de P/Kg de suelo Suelo muy alto en P asimilable Nuestra muestra tiene un contenido en P de 57 mg P/Kg, lo que supone > 10 mg P/Kg, por lo que el contenido en P asimilable de nuestro suelo es muy alto.

Mtodo Olsen (1954)

El mtodo de Olsen con bicarbonato de sodio fue desarrollado por Sterling R. Olsen y sus colaboradores en 1954 para predecir la respuesta del cultivo a la adicin de fertilizantes de P en suelos calcreos. Se utiliza como mtodo predilecto en suelos calcreos, particularmente aquellos con 2% de carbonato de calcio, pero se ha demostrado en algunas investigaciones ser razonablemente eficaz para suelos cidos. El mtodo se basa en el uso de una solucin NaHCO3 0,5 M para disminuir las concentraciones de solucin de Ca2+ soluble por precipitacin como CaCO3 y Al3+ y Fe3+ por la formacin de oxi-hidrxidos de Al y Fe, con lo que aumenta la solubilidad del P. Las cargas superficiales negativas mayores y/o la disminucin del nmero de sitios de absorcin en las superficies de xidos de Fe y Al en los niveles altos de pH tambin mejoran la desorcin de P disponible en la solucin. Para Olsen un valor de 10 mg/kg se considera generalmente ptimo para el crecimiento vegetal. Requerimientos: Muestras de suelo tamizado a 2 mm. Papel de filtro Whatman N 42. Agitador con capacidad de 200 (o ms) r.p.m. Reactivos (solucin extractante NaHCO3 0,5 M, pH 8,5): Disolver 420 g de bicarbonato de sodio en agua destilada y completar a un volumen final de 10 L. Ajustar el pH de la solucin a un valor de 8,5 aadiendo hidrxido de sodio al 50%. Procedimientos: 1. Pese 1 g de suelo y transfiralo a un matraz Erlenmeyer de 50 ml. 2. Aada 20 ml de solucin extractora de Olsen a cada matraz y agite a 200 o ms r.p.m. durante 30 minutos a una temperatura ambiente menor a 24-27 C. 3. Si es necesario, para obtener un filtrado incoloro, agregue 1 cm3 (aprox. 200 mg) de carbn vegetal a cada matraz. 4. Pasar los extractos por un papel de filtro Whatman N 42. Filtrar de nuevo, si los extractos no son claros. 5. Analizar el P disponible en el blanco y los patrones realizados con la solucin Olsen por colorimetra. Clculos:

Pextractable(mg/kg) = Concentracin de P en extracto Olsen (mg/L) x 0,020 L extracto/0,001 Kg de suelo