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CAPTULO 1: GUA
OBJETIVOS: Conhecer as caractersticas e propriedades da gua. Conhecer a estrutura da gua pontes de hidrognio. Definir os pontos de dissociao da gua. Descrever a equao de Henderson Hasselbalch. Verificar as interaes biolgicas de solues tampo. As clulas vivas contm carboidratos, lipdeos, aminocidos, protenas, cidos nucleicos, nucleotdeos e compostos relacionados em quantidades variveis. A massa de cada um desses compostos de estruturas qumicas muito variadas constituda basicamente por carbono (C), hidrognio (H), oxignio (O), nitrognio (N), fsforo (P) e enxofre (S). Dois desses elementos, hidrognio e oxignio, combinam-se para formar o mais abundante componente celular, a gua (H2O), que no se inclui em nenhuma das categorias acima mencionadas. Mais de 90% do plasma sanguneo H 2O, o msculo contm cerca de 80% de H2O e ela constitui mais da metade da maioria dos outros tecidos animais ou vegetais. Alm de ser o mais abundante componente celular, a H2O tambm indispensvel vida. Os nutrientes que a clula consome, o oxignio usado na oxidao deles e os produtos residuais formados so todos transportados pela gua. Assim importante observar que esse composto qumico tem um nmero excepcional de propriedades que o tornam sobremaneira peculiar e bastante apropriado para o desempenho como solvente da vida. Propriedades da gua Entre solventes, como: etanol, metanol, acetona, acetato de etila, clorofrmio, amnia etc., a gua possui: 1. o mais alto ponto de ebulio; 2. o mais alto calor especfico de vaporizao; 3. o mais alto ponto de fuso. Isto ocorre devido s grandes foras intermoleculares que atuam entre molculas de gua adjacentes em soluo. Uma molcula de gua consiste de dois tomos de hidrognio ligados a um tomo de oxignio. A distncia da ligao O-H de 0,958 ngstrons (1 ngstrom equivale a 10-10 m), e o ngulo formado pelos trs tomos de 104,50. Os tomos de hidrognio no esto arranjados linearmente, pois os quatro orbitais hbridos sp3 do oxignio estendem-se aproximadamente na

direo dos vrtices de um tetraedro. Os tomos de hidrognio ocupam duas vrtices do tetraedro, e os pares de eltrons no-ligantes do tomo de oxignio ocupam os dois outros vrtices (em uma molcula perfeitamente tetradrica, como o metano, CH4, os ngulos de ligao so de 109,5). A molcula de gua altamente polarizada, pois os tomos de oxignio eletronegativos tendem a atrair eltrons do tomo de hidrognio, deixando uma carga positiva residual cercando o prton. Devido a essa polarizao, as molculas de gua comportam-se como dipolos, uma vez que elas podem ser orientadas em ambas as direes como ons positivos e negativos. essa propriedade que d gua a capacidade de atuar como solvente. Os elevados pontos de ebulio e de fuso da gua e seu alto calor de vaporizao so resultado da interao entre molculas de gua vizinhas. Cada molcula de gua em soluo tende a ficar rodeada por quatro outras molculas com tomos de oxignio negativamente polarizados, ficando atrados aos prtons carregados positivamente. A atrao entre o oxignio de uma molcula e o hidrognio de outra representado como H.....O, e chamada ponte de hidrognio ou ligao de hidrognio. Embora a energia necessria para romper esta ligao seja bem menor que a necessria para quebrar uma ligao O-H covalente, o efeito aditivo com a ponte de hidrognio explica as propriedades incomuns da gua. As pontes de hidrognio so foras de natureza eltrica do tipo dipolo permanente, porm bem mais intensas.

INFOESCOLA.COM.BR

Dissociao da gua e seu Produto Inico (Kw) A gua uma molcula neutra com leve tendncia a ionizar-se. Essa ionizao expressa como: H2O H+ + OH-

Na verdade no existem prtons livres em soluo. O prton est sim associado a uma molcula de gua sob a forma de on hidrnio, H 3O+, porm continuaremos representando esses ons por H+. A ionizao da gua descrita pela expresso de equilbrio: [H+] [OH-] Ka = [H2O] K a constante de ionizao. J que a concentrao da gua no dissociada bem maior que as concentraes dos ons que a compem, ela pode ser considerada constante e incorporada K para produzir uma expresso para a ionizao da gua: Kw = [H+] [OH-] A gua um eletrlito fraco e a sua dissociao para formar H + e OH- muito reduzida. H2O H+ + OH-

[H+] [OH-] K= [H2O] A concentrao da gua pura muito grande em comparao com qualquer concentrao possvel de solutos e pode ser considerada constante. O valor numrico 55,5 M e pode ser obtido ao se dividir o nmero de gramas de gua em um litro, 1000g, pelo peso molecular da gua, 18 g/mol. [H+] [OH-] Ka = 55,5 Ka x 55,5 = [H+] [OH-] = Kw Kw a constante do produto inico da gua, e a concentrao da gua est inclusa em seu valor. O valor numrico de Kw pode ser determinado de forma experimental ao se medir a concentrao de ons hidrognio em gua pura. A concentrao de ons hidrognio tambm igual por definio concentrao do on hidroxila, porque a gua um cido monoprtico (libera um nico prton por molcula), a 25 C, em gua pura, donde,

[H+] = 10-7 M = [OH-] Assim, a 25 C, o valor numrico de Kw = [H+] [OH-] = (10-7) (10-7) = 10-14. Essa relao vlida para qualquer soluo aquosa, seja ela neutra, cida ou bsica. O valor de Kw, a constante de ionizao da gua 10 -14 M2 a 250 C. A gua pura deve conter quantidades equimolares de H+ e OH-, de forma que: [H+] = [OH-] = 10-7M Solues com [H+] = 10-7 M so ditas neutras, as com [H+] > 10-7 M so ditas cidas, e as com [H+] < 10-7 M so ditas bsicas. Os valores de [H+] para a maioria das solues so muito pequenos e, portanto, no so prticos para fins de comparao. Uma forma mais prtica conhecida como pH. Sendo: pH = -log10 [H+] Quanto mais alto o pH, menor ser a concentrao de H+; quanto menor o pH maior ser a concentrao de H+. O pH da gua pura 7,0, enquanto solues cidas tm pH < 7,0 e solues bsicas tm pH > 7,0. Como na gua pura [H+] = 1 x 10-7 M e pH = 7,0, calcular o pH das seguintes solues aquosas: a) 1,1 x 10-3 M de HCl. b) 2,1 x 10-3 M de NaOH. Uma quantidade semelhante, o pKa, pode ser definida por analogia com a definio de pH: pKa = -log10Ka O valor de pKa uma outra medida que indica a fora do cido: quanto menor seu valor, mais forte ser o cido. A situao o inverso da observada

em Ka, em que maiores valores implicam cidos mais fortes. A definio de cido mais importante para a Bioqumica a de Bronsted, que diz ser: cido: qualquer substncia que pode doar prtons. Base: qualquer substncia que pode aceitar prtons. Ex: HCl CH3COOH NH4+ H+ + ClH+ + CH3COO-

NH3 + H+ H + + A-

Expresso Geral: HA Bases correspondentes: Cl- + H+ HCl NH4+

CH3COO- + H+

HA: cido de Brnsted (pode fornecer um prton) A- : Base conjugada (pode aceitar o prton para formar o cido) Eletrlitos fortes: Em soluo aquosa so quase completamente dissociados em ons. Ex: Na+ClHCl Na+ + Cl-

H+ + Cl-

HCl em H2O = ionizao HCl + H2O H3O + Cl- ou (c. Conj.)2 + (Base Conj.)1

(c. Conj.)1 + (Base Conj.)2

Ionizao de cidos Fracos Um cido fraco apenas parcialmente ionizado em soluo aquosa. Ex: HA + H2O H3O+ + A- ou

(c. Conj.)1 + (Base Conj.)2

(c. Conj.)2 + (Base Conj.)1

Constante de Equilbrio = Constante de Ionizao = Kion Keq = Kion = [H3O+] [A-] [HA] [H2O] Sendo [H2O] = Constante (55,5 moles/L), ento: Ka = Kion = [H3O+] [A-] [HA] HA H+ + A- logo Keq = [H+] [A-] [HA] Ionizao de Bases Fracas BOH B+ + OH-

Keq = Kb = [B+] [OH-] [BOH] Bases Fracas: Aminas Orgnicas RNH2 + H2O RNH3 + OH- ou (cido Conjugado)1 + (Base

(Base Conjugada)1 + (cido Conjugado)2 Conjugada)2

A H2O serve como cido doando prtons para RNH2. Seria ento o mesmo que: A- + H2O HA + OH- ou (c. Conj.)1 + (Base Conj.)2

(Base. Conj.)1 + (c. Conj.)2 Kion = [HA] [OH-] [A-] [H2O] Kion e [H2O] combinados do Kb Kb = [HA] [OH-]

[A-] Serve para calcular a [OH-] de uma base fraca Agora se: [OH-] = Kb = [A-] [HA] E se: [H+] = Ka = [HA] [A-] [H+] [OH] = Kw Ka[HA] . Kb [A-] = Kw [A-] [HA]

Ka . Kb = Kw = 10-14 Logo: logKa + logKb = log Kw ou - logKa - logKb = - log Kw Ento como: pH = log [H+] pKa = logKa pKb = - logKb pKa + pKb = - log Kw = 14 Equao de Henderson Hasselbalch a equao que relaciona o valor de Ka de qualquer cido fraco ao pH da soluo que contm esse cido e sua base conjugada. Essa relao muito usada na prtica bioqumica, principalmente quando necessrio controlar o pH para condies ideais de reao. Muitas reaes deixam de se processar quando o pH no est no valor ideal. Alm de muitas reaes no ocorrerem, algumas consequncias fisiolgicas drsticas podem resultar a partir de variaes de pH no organismo.

Aplicando a lei da ao das massas ionizao dos cidos fracos, tem-se: HA de onde tem-se: H+ + AKa = [H+] [A-] [HA] Logo: [H+] = Ka [HA] [A-] Aplicando-se logaritmo dos dois lados, tem-se: log[H+] = logKa + log [HA] [A-] Multiplicando por (-1) :

- log[H+] = -logKa log [HA] [A-] Se: - logKa = pKa e log [HA] = log [A-] [A-] [HA] Ento vem que: pH = pKa + log [A-] [HA] pH = pKa + log [base conjugada] [cido conjugado]

Essa a relao conhecida como equao de Henderson-Hasselbalch e til para prever as propriedades de solues tampo utilizadas para controlar o pH de misturas de reaes. Soluo Tampo Soluo tampo aquela soluo que resiste a uma variao do pH quando se adiciona cido ou base. Consiste de uma mistura de cido fraco de Brnsted e sua base conjugada. Ex: Misturas de cido actico e acetato de sdio ou hidrxido de amnio e cloreto de amnio. A importncia da soluo tampo est em sua capacidade de impedir mudanas bruscas de pH. Por exemplo, o plasma sanguneo a soluo tampo ideal para conservar os valores do pH do sangue em 7,2 7,3 0,2, pois fora desse intervalo no h vida. Outro fator de importncia de uma soluo tampo reside no fato de que enzimas do processo metablico apresentam mxima ao cataltica dentro de limites definidos de pH.

Ex: Adicionando NaOH a uma mistura de cido actico e acetato de potssio: OH- + CH3COOH CH3COOH CH3COO- + H2O H2O

CH3COO- + H+ OH-

Adicionando base, h dissociao adicional do CH3COOH para dar mais prtons, conservando a [H+] ou o pH sem variar. Adicionando cido a uma soluo de tampo de acetato: H+ + CH3COOCH3COOH

Os prtons adicionadas (HCI, por exemplo) combinam-se com o CH3COO- presente na mistura tampo (como acetato de potssio) para formar o cido fraco no dissociado CH3COOH. Logo o pH resultante muito menor do que ocorreria, se a base conjugada estivesse ausente. Eficincia ou capacidade tamponante da soluo Os fatores de eficincia de um tampo so: Concentrao molar dos camponentes do tampo. A capacidade tamponante diretamente proporcional concentrao molar dos componentes. Relao entre concentrao da base conjugada e cido fraco. A soluo tampo mais eficiente tem: [cido] = [Base] Tampes Fisiolgicos Os tampes fisiolgicos dependem de vrios fatores, entre os quais da concentrao molar dos componentes do tampo, da relao entre [base conjugada] e [cido fraco]. O primeiro desses fatores j exclui componentes encontrados nos metabolismos intermedirios de baixa concentrao, tais como steres fosfricos da glicose, cidos orgnicos do ciclo de Krebs e os aminocidos livres. Nas plantas, alguns cidos orgnicos, como mlico, ctrico e isoctrico podem acumular-se nos vacolos, tendo importante papel no pH da clula. Nos animais, existe um sistema tampo complexo e vital no sangue circulante. So componentes desse sistema: CO2 HCO3; NaH2PO4 Na2HPO4; As formas oxigenada e desoxigenada da hemoglobina; As protenas plasmticas. O pKa do H2CO3 igual a 6,1. No entanto, a razo entre base conjugada e cido fraco aproximadamente 20:1 no intervalo do pH do sangue: 7,35 7,45.

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Era de se esperar que esse sistema no fosse muito eficaz como tampo. Porm H2CO3 HCO3- um tampo muito importante para o sangue, pois o cido fraco H2CO3 entra rapidamente em equilbrio com o CO2 dissolvido no plasma: H2CO3 CO2 dissolvido + H2O

O CO2 dissolvido est em equilbrio com o CO2 da atmosfera e, dependendo da presso parcial do CO2 da fase gasosa, escapar para o ar (como nos pulmes, onde o CO2 expirado) ou penetrar no sangue (como nos tecidos perifricos, onde o CO2 produzido pela respirao das clulas). O sistema tampo funciona no pela alterao da razo 20:1, mas mantendo essa razo e aumentando ou diminuindo a quantidade total dos componentes do tampo.

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QMCWeb - Revista Eletrnica de Qumica

Outro tampo importante do sangue: Hemoglobina oxigenada: HhbO 2 (c. Forte: pKa = 6,2) e Hemoglobina desoxigenada: HHb (pK a = 7,7). Nos pulmes, onde a presso parcial de O2 maior, HHbO2 predomina em relao HHb, e o sangue tende a ser mais cido. Nos tecidos perifricos, onde a presso parcial de O2 mais baixa, h predominncia de HHb (pKa = 7,7) e o pH tende a aumentar. Esses efeitos so compensados pela diminuio da concentrao de CO2 dos pulmes em relao dos tecidos perifricos, os dois efeitos em conjunto so responsveis pela variao mnima do pH do sangue. HHbO2 HHb H+ + HbO2 H+ + HbpKa = 6,2 pKa = 7,7

Sistemas de Tamponamento de Importncia Fisiolgica O pH da maioria dos sistemas vivos aproximadamente 7, e o principal tampo em clulas o par: H2PO4- / HPO42-. No sangue, a concentrao dos ons fosfato insuficiente para uma ao tamponante, por isto opera um sistema tampo diferente. No pH do sangue, a maior parte do CO2 dissolvido presente est na forma de HCO3-. O CO2, que transportado para os pulmes para ser expirado, encontra-se como HCO3-. HCO3-(bicarbonato) o composto-

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tampo mais significativo no sangue. A capacidade tamponante do sangue depende principalmente de dois equilbrios: (1) CO2 + H2O (2) H2CO3 H2CO3 (CO2 gasoso dissolvido no sangue e cido carbnico) (cido carbnico e o bicarbonato formado pela dissoluo de H+)

H+ + HCO3-

Quando o pH do sangue diminui (devido produo metablica de H+), o equilbrio entre HCO3- e H2CO3 desloca-se na direo do cido carbnico. Ao mesmo tempo, o H2CO3 perde H2O para se tornar CO2, que expirado dos pulmes como CO2 gasoso. Quando o pH do sangue aumenta, relativamente mais HCO3- formado e a respirao ajustada de modo que quantidades aumentadas de O2 nos pulmes possam ser reintroduzidas no sangue para converso em H2CO3. Distrbios no Sistema Tamponante Distrbios cido-Base Os distrbios cido-base so caracterizados como metablicos e respiratrios. A Acidose Metablica resulta de um aumento de produo ou acmulo de cidos ou por perda de excessiva de bicarbonato, atravs dos rins ou do trato intestinal. A Alcalose Metablica resulta da administrao ou do acmulo de bicarbonato ou seus precursores, perda excessiva de cido ou perda de lquido extracelular contendo mais cloreto do que bicarbonato. A Acidose Respiratria causada pela ventilao diminuda e consequente reteno de dixido de carbono. Isso ocorre agudamente com apnia do sono, asma e cronicamente com a sndrome de hipoventilao da obesidade, doena pulmonar obstrutiva crnica e certas doenas neuromusculares. A Alcalose Respiratria resulta de ventilao aumentada e eliminao de dixido de carbono. Isso pode ser mediado por ansiedade, acidente vascular cerebral, pneumonia, altas altitudes, embolia pulmonar entre outros.

HIPERTEXTO 1. Acidose: quando o pH fica to baixo quanto 7,1. Tratamento: NAHCO3 intravenoso. Onde ocorre: Doenas pulmonares obstrutivas. Ex: Enfisema (doena que impede a expirao eficiente de CO2). 2. Alcalose: quando pH fica to alto quanto 7,6.

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Tratamento: A alcalose metablica pode ser tratada com KCL ou NACL e a alcalose respiratria melhora com respirao de uma atmosfera rica em CO2. Onde ocorre: A hiperventilao acelera a perda de CO2. Consequncias Fisiolgicas do Tamponamento do Sangue O processo de respirao exerce papel importante no tamponamento do sangue. Uma elevao na [H+] pode ser corrigido com uma elevao na taxa de reao, pois: a) H+ (aq.) + HCO3-(aq.) H2CO3(aq.) b) uma elevao [H2CO3] aumenta os nveis de CO2 dissolvido e finalmente a quantidade de CO2(g) nos pulmes. H2CO3 (aq) CO2(aq) CO2(aq) + H2O () CO2(g)

c) Uma elevao na taxa de respirao REMOVE o excesso de CO 2 dos pulmes, iniciando um deslocamento no equilbrio das reaes anteriores. d) A remoo do CO2(g) diminui a quantidade de CO2 dissolvido, fazendo o H+ reagir com HCO3: Resultado: H diminuio na concentrao de [H+] no sangue, retornando-o ao seu nvel original. Assim o pH do sangue mantido constante.

CONTEXTUALIZANDO Hiperventilao: Ocorre quando h uma respirao muito rpida e profunda (removendo uma tal quantidade de CO2 dos pulmes que o pH do sangue sobe, levando fraqueza e ao desmaio). Atletas usam o aumento do pH pela hiperventilao nas corridas de 100 metros rasos, pois alcalinizam o sangue antes da corrida com exerccios e, quando a produo de cido ltico comea a crescer fazendo baixar o pH do sangue, no haver um decrscimo to grande que venha a provocar dores musculares. Qualquer cido que entre na corrente sangunea, eleva a [H+], logo h abaixamento do pH, ocasionando excesso de CO2 nos pulmes. Ex: A ingesto de altas doses de aspirina pode causar envenenamento por aspirina. Exposio a elevadas altitudes semelhante hiperventilao ao nvel do mar. A taxa de respirao aumenta (por causa do ar rarefeito) ento mais CO2 removido dos pulmes abaixando a concentrao de H+ no sangue e, portanto, elevando o pH. Hipoventilao: Muitas vezes quando se est soluando, as pessoas alertam para segurar a respirao. O que ocorre uma hipoventilao que provoca aumento na [CO2] nos pulmes, resultando no abaixamento do pH.

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ATIVIDADES DE AVALIAO 1) Definir cido e base segundo Brnsted. 2) Caracterizar um sistema tampo e indicar os fatores que determinam sua eficncia. 3) Definir pKa e descrever os procedimentos experimentais para determinar o valor do pKa do cido actico. 4) Escrever a equao de Henderson Hasselbalch e mostrar sua utilidade na anlise de um sistema tampo. 5) Dar exemplos de tampo biolgicos. 6) O tampo bicarbonato (HCO3- / H2CO3), presente no plasma em equilbrio com CO2, apresenta pKa igual a 6,1. Descrever o funcionamento deste sistema, mostrando o efeito da adio de H+ e de CO2 sobre o pH do plasma. 7) O produto inico da gua possibilita calcular a concentrao de H+ para uma dada concentrao de OH- e vice-versa; portanto responda: Qual a concentrao de H+ em uma soluo de NaOH 0,1M? 8) Qual a concentrao de OH- em uma soluo na qual a contrao de H+ 0,00013 M? 9) Calcular o pKa do cido lctico, sabendo-se que, quando a concentrao do cido lctico 0,010 M e a concentrao de lactato 0,087M, o pH da soluo 4,8. 10) Calcular o pH de uma mistura que contm cido actico 0,1M e acetato de sdio 0,2M. O pKa do cido actico 4,76. 11) Calcular a relao entre as concentraes de acetato e de cido actico requerida para um sistema tampo com pH 5,3.

Bibliografia Comentada Campbell, M. K.; Farrel, S. O. Bioqumica. Vol 1. So Paulo: Cengage Learning 2011. Tampes e Sistemas de Tamponamento de Importncia Fisiolgica so comentados no livro, no Captulo 2. Conn, E. E.; Stumpf, P. K. Introduo Bioqumica. 4 Ed. So Paulo, Edgard Blucher, 1980. A Ionizao de cidos Fracos e de Bases Fracas comentada no Captulo 1 desse livro. Mahan, K.; Escott-Stump. Alimentos, nutrio & dietoterapia. 9 ed. So Paulo: Roca, 1998. Distrbios cido-Base so comentados no Captulo 8. Voet, D.; Voet, J. G.; Pratt, C. W. Fundamentos de Bioqumica. Porto Alegre: Artmed, 2000. A Qumica cido-Base comentada no Captulo 2.

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LEITURA, VDEOS E SITES RECOMENDADOS http://qmc.ufsc.br/qmcweb/ FILME UMA VERDADE INCONVENIENTE 2006 (documentrio de AL Gore) VDEO UMA VERDADE INCONVENIENTE 2006

CAPTULO 2: CARBOIDRATOS
OBJETIVOS: Observar a importncia dos carboidratos para a vida humana. Verificar a presena dos carboidratos em alimentos e vegetais. Diferenciar os tipos de carboidratos. Classificar os carboidratos quanto a sua estrutura. Classificar os carboidratos quanto a sua funo biolgica.

Os carboidratos constituem do mundo biolgico e aproximadamente 80% do aporte calrico da humanidade. A glicose o carboidrato mais importante. sob essa forma que a maior parte dos carboidratos da dieta absorvida pela corrente sangunea ou em glicose que o fgado converte os outros acares. Tambm a partir de glicose que todos os carboidratos do organismo so formados. Os carboidratos classificam-se em: monossacardeos, dissacardeos, oligossacardeos e polissacardeos. Quando a palavra carboidrato foi inventada, referia-se originalmente aos compostos com frmula geral Cn(H2O)n. No entanto, somente os acares simples, ou monossacardeos, encaixam-se exatamente nessa frmula. Os outros tipos de carboidratos baseiam-se em unidades de monossacardeos e apresentam frmulas gerais ligeiramente diferentes. Os dissacardeos, como os polissacardeos, no atravessam a parede intestinal. S so aproveitados como fonte de energia se previamente hidrolisados a monossacardeos, que passam rapidamente do trato intestinal corrente sangunea. Os oligossacardeos e os polissacardeos no hidrolisados passam ao largo do intestino delgado at o intestino grosso, onde exercem um efeito benfico (fibra). Os oligossacardeos podem ser atacados pela microflora intestinal gerando produtos metablicos: cido actico e lctico. Em grandes quantidades tm efeito laxante podendo causar diarreia.

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Os carboidratos proporcionam tambm texturas desejveis, palatabilidade agradvel, poder edulcorante. Dos polissacardeos do mundo biolgico, o homem s digere amido, glicognio e certas dextranas. O glicognio semelhante amilopectina do amido, porm mais ramificado. Constitui a reserva energtica dos animais, armazenando-se principalmente no fgado e, em menor quantidade, no msculo. O amido e o glicognio comeam a ser hidrolisados na boca pela ao da amilase contida na saliva. Ela produz um fragmento de seis unidades de glicose que so tambm hidrolisados produzindo maltose, maltotreose e maltotetrose. O alimento vai para o estmago e, no duodeno, ocorre uma hidrlise. L, amilase ataca o amido e os fragmentos da ao da amilase, liberando unidades de maltose. A maltose hidrolisada glicose pela enzima maltase e transportada corrente sangunea. Os polissacardeos diferentes do amido e glicognio no so hidrolisados pelas enzimas gastrointestinais passando ao intestino grosso, mais ou menos intactos. So eles: celulose, hemicelulose e pectina das paredes vegetais. Eles facilitam a passagem do bolo fecal atravs do sistema digestivo. A eliminao rpida de produtos no absorvidos evita o aparecimento de condies propcias ao desenvolvimento de cncer, ajudam a diminuir o colesterol do sangue e retardam o aparecimento de arterioscleroses. Carboidratos digerveis proporcionam aproximadamente 4 Kcal/g, energia equivalente proporcionada por 1g de protena e inferior s 9Kcal/g dos lipdeos.

Dissacardeos
Acar Fonte
Maltose Digerido pela amilase ou hidrlise do amido. Cereais e malte em germinao.

Significado Clnico

Lactose

Leite. Pode ocorrer na urina durante a gravidez.

Na deficincia de lactase. A m absoro provoca diarreia e flatulncia. Na deficincia da sacarase. A m absoro provoca diarreia e flatulncia.

Sacarose

Acar de cana e beterraba. Sorgo. Abacaxi. Raiz de cenoura.

Trealose

Fungos e leveduras. Principal acar da hemolinfa de insetos.

Dglicopiranosil-(11)-Dglicopiransido.

Pentoses de importncia fisiolgica

Acar
D-Ribose

Fonte
cidos nucleicos

Importncia bioqmica
Elementos estruturais dos cidos

Significado clnico

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nucleicos e coenzimas, p. ex., ATP, NAD, NADP, flavoprotenas. As ribosefosfatos so intermedirias da via das pentoses-fosfato. D-Ribulose D-Arabinose D-Xilose Formada nos processos metablicos Goma arbica. Gomas da ameixa e da cereja. Gomas de madeiras, proteoglicanas, glicosaminoglicanas. Msculo cardaco. A ribulose-fosfato um intermedirio da via das pentoses-fosfato. Constituinte das glicoprotenas. Constituinte de glicoprotenas.

D-Lixose L-Xilulose

Constituinte de uma lixoflavina isolada do msculo cardaco humano. Encontrada na urina

Intermedirio da via do cido urnico.

Hexoses de importncia fisiolgica

Acar
D-Glicose

Fonte
Sucos de frutas. Hidrlise do amido, do acar de cana, da maltose e da lactose.

Importncia bioqmica
o acar do organismo. O acar transportado pelo sangue, e o principal usado pelos tecidos.

Significado clnico
Presente na urina (glicosria) no diabetes mellitus devido ao aumento da glicose sangunea (hiperglicemia). Intolerncia hereditria a frutose conduz ao acmulo de frutose e hipoglicemia. A falha na metabolizao conduz galactosemia e catarata.

D-Frutose

Sucos de frutas. Mel. Hidrlise do acar de cana e da inulina (da alcachofra de Jerusalm).

Pode ser transformada em glicose no fgado e assim usada no organismo.

D-Galactose

Hidrlise da lactose.

Pode ser transformada em glicose no fgado e metabolizada. Sintetizada na glndula mamria para formar a lactose do leite. Um ___________________________

Carboidratos Polissacardeos indigerveis

1. Celulose 2. Hemicelulose 3. Pectinas 4. Gomas e mucilagens 5. Subst. derivadas de algas 1. Inulina 2. Galactgenos 3. Manoses 4.Rafinose 5. Estaquiose 6.Pentosanas

Fontes

Prod. finais da digesto

-

Observao

Talos e folhas de vegetais. Camada externa de revestimento de gros. Frutas Sementes e secrees vegetais Plantas marinhas e algas

Polissacardeos parcialmente digerveis

Alcachofra, cebola, alho, cogumelos. Escargot Leguminosas Acar de beterraba, feijo, feijo branco, lentilhas Feijo Frutas e gomas Frutose Galactose Manose Glicose, frutose e galactose Pentoses -

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Polissacardeos digerveis
1. Amido e dextrinas 2. Glicognio Gro; vegetais (especialmente leguminosas e tubrculos) Produtos de carne e frutos do mar. Glicose Glicose

Carboidratos

Fontes

Prod. finais da digesto

Glicose e Frutose Glicose e Galactose No metabolizados Glicose Glicose

Observao

Dissacardeos e Oligossacardeos
1. Sacarose 2. Lactose 3. Lactulose Acar de cana e beterraba, melao e xarope de bordo Leite e derivados Produtos sintticos

No aparece em alimentos; sinttico, no digervel e usado como laxativo.

4. Maltose e Maltotriose 5. Trealose

Produtos do Malte; alguns cereais matinais Cogumelos, insetos, leveduras

Carboidratos Monossacardeos
1. Glicose Sorbitol* 2. Frutose 3.Galactose 4.Manose Manitol*

Fontes

Prod. finais da digesto

Observao

Frutas, mel, xarope de milho Frutas, vegetais e produtos dietticos Frutas e mel Abacaxi, azeitona, aspargos, batata-doce, cenoura e produtos diet

Glicose Frutose Galactose

Em frutas e vegetais, as concentraes de glicose e frutose dependem do amadurecimento da espcie e do estado de preservao. Esses monossacardeos no ocorrem na forma livre no alimento.

Manose

Carboidratos Pentoses
1. Ribose 2. Xilose Xilitol*

Fontes

Prod. finais da digesto

Ribose

Observao

Frutas, vegetais, cereais, cogumelos, frutos do mar, gomas de mascar dietticas e outros produtos dietticos -

Xilose

3.Arabinose

Ribose, Xilose e Arabinose no ocorrem na forma livre nos alimentos. So derivados de pentosanas de frutas, dos cidos nucleicos de produtos da carne e frutos do mar.

Arabinose

Carboidratos Derivados de Carboidratos

1. lcool Etlico 2. cido Lctico 3. cido Mlico

Fontes

Prod. Finais da digesto

Observao

Licores fermentados Leite e produtos lcteos Frutas Absorvidos nessa forma So produtos da quebra natural ou induzida de carboidratos.

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Os carboidratos tm funo estrutural por causa do DNA e RNA. Tm funo relacionada aos receptores de membranas, que so de natureza glicoproteicas. Sua frmula geral Cn(H2O)n = CnH2nOn. Fotossntese A fotossntese o processo pelo qual a energia luminosa transformada em energia qumica. A equao geral da fotossntese : 6 CO2 + 6 H2O C6H12O6 + 6O2 G0 = + 2.870 kJ. mol-1

Como quase todos os organismos que no fazem fotossntese dependem da energia qumica presente nos compostos produzidos pelos seres fotossintetizadores, pode-se dizer que toda a energia consumida pelos sistemas biolgicos deriva primariamente da energia solar. A equao da fotossntese exatamente o inverso da equao de oxidao total da glicose que ocorre em todas as clulas aerbias: C6H12O6 + 6O2 6 CO2 + 6 H2O G0 = - 2.870 kJ. mol-1

Porm incorreto afirmar que a fotossntese um processo inverso ao da respirao, definida como comumente como a oxidao da glicose a CO 2 e H2O. Monossacardeos, Dissacardeos, Oligossacardeos e Polissacardeos Os monossacardeos so incapazes de serem hidrolisados a uma forma mais simples. Os dissacardeos podem ser hidrolisados, dando duas molculas de monossacardeos. Os carboidratos conhecidos como monossacardeos so as Hexoses (Acares com 6C) e as Pentoses (acares com 5C). Os oligossacardeos produzem de 3 a 10 unidades de monossacardeos, enquanto os polissacardeos produzem de 10 a 10.000 ou mais unidades de monossacardeos. Monossacardeos Os monossacardeos podem ser poliidroxialdedos (aldose) ou poliidroxicetonas (cetose). Os monossacardeos mais simples possuem trs tomos de carbono. So as trioses. O gliceraldedo a aldose com trs carbonos (uma aldotriose), e a diidroxiacetona a cetose com trs carbonos (uma cetotriose). Aldoses que possuem 4, 5, 6, e 7 tomos de carbono so chamadas aldotetroses, aldopentoses, aldoexoses e aldoeptoses, respectivamente e as cetoses correspondentes so cetotetroses, cetopentoses, cetohexoses e cetoheptoses. Os acares com seis carbonos so os mais

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abundantes na natureza, porm dois acares com cinco carbonos, a ribose e a desoxirribose, esto presentes nas estruturas de RNA e DNA, respectivamente. Acares com 4 e 7 carbonos tm importantes papis na fotossntese e em vias metablicas. Algumas molculas no podem ser superpostas em suas imagens especulares. Essas imagens so ismeros pticos (estereoismeros) umas das outras. Um tomo de carbono quiral (assimtrico) o objeto da isomeria ptica. O carboidrato mais simples, que contm um carbono quiral, o gliceraldedo, podendo existir em duas formas isomricas que so imagens especulares uma da outra. Elas so designadas D-gliceraldedo e L-gliceraldedo. Os estereoismeros de imagem especular so tambm chamados enantimeros. Os dois enantimeros do gliceraldedo so os nicos estereoismeros possveis nos acares de trs carbonos, mas as possibilidades aumentam conforme as estruturas possuam mais tomos de carbono. Para mostrar as estruturas das molculas resultantes, preciso usar-se a perspectiva bidimensional da estrutura molecular, denominada mtodo de projeo de Fischer. Nesse mtodo, as ligaes escritas verticalmente no papel, que bidimensional, representam as ligaes direcionadas para trs do papel, se forem consideradas trs dimenses, ao passo que as ligaes escritas horizontalmente representam as ligaes direcionadas para a frente do papel. A designao da configurao como L ou D depende do arranjo do carbono quiral com nmero mais alto.

Estereoismeros de imagens no-especulares e que no podem ser sobrepostos so chamados diastereoismeros. So chamados epmeros os diasteroismeros que diferem uns dos outros na configurao em somente um C quiral. Ex: D eritreose e D treose; D galactose e D glicose e D Manose. A maioria dos acares importantes encontrados na natureza possui a configurao D, baseada no D-gliceraldedo.

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Acares especialmente os que possuem cinco ou seis carbonos existem normalmente como molculas cclicas em vez das cadeias abertas. A ciclizao resultante da interao entre os grupos funcionais em carbonos distantes, como C-1 e C-5, para formar um hemiacetal cclico (em aldoexoses). Outra possibilidade a formao de um hemicetal cclico (em cetoexoses) atravs da interao entre C-2 e C-5. Em ambos os casos, o carbono carbonlico torna-se um novo centro quiral chamado carbono anomrico. O acar cclico pode assumir qualquer uma das duas formas diferentes e , e so chamados anmeros um do outro. Alm das frmulas de projeo de Fischer, existem tambm as frmulas de projeo de Haworth que representam mais precisamente o formato nas molculas ctricas com cinco ou seis membros. O anel de cinco membros chamado furanose, e o de seis, piranose. H H C C O OH H

HO C H H

C OH C OH CH2OH

D-Glucose (Est presente em frutas, mel, milho e razes). armazenada no fgado e nos msculos, como o glicognio. CH2OH C HO C O H

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H H

C C

OH OH

CH2OH D- Frutose (Levulose ou acar da fruta. Est presente em mel e frutas). Galactose: No encontrada na forma livre na natureza. produzida a partir da lactose (acar do leite) por hidrlise no sistema digestrio.

Reaes dos Monossacardeos Reaes de Oxidorreduo Essas reaes dos acares so fundamentais na bioqumica. A oxidao dos acares responsvel pelo fornecimento de energia para que os processos vitais dos organismos sejam realizados. Reaes de Esterificao Os grupos hidroxila dos acares podem reagir com cidos e derivados para formar steres. Os steres de fosfato so muito importantes por serem intermedirios na degradao de carboidratos para fornecer energia. Formao de Glicosdeos Ocorre a formao de glicosdeos quando um grupo hidroxila de acar ligado a um carbono anomrico reage com outra hidroxila formando uma ligao glicosdica. Essa ligao no um ter, pois os glicosdeos podem ser hidrolisados aos alcois originais. As ligaes glicosdicas entre monossacardeos so a base para a formao de dissacardeos, oligossacardeos e polissacardeos. Diferentes formas estereoqumicas so possveis em ligaes glicosdicas, com importantes consequncias para a funo das substncias assim formadas. Dissacardeos So formados pela unio de dois monossacardeos por ligaes glicosdicas. Os mais importantes so: sacarose, lactose e maltose. A sacarose formada por - D- Glicose + D- Frutose. o acar de uso comum. Est presente na cana de acar, acar de beterraba, melao, xarope de bordo, xarope de milho, acar de bordo, frutas, vegetais e mel. A lactose, o acar presente no leite, um dissacardeo formado por D- lactose e D- glicose. A galactose um epmero C-4 da glicose. A maltose um dissacardeo obtido da hidrlise do amido, consistindo em dois resduos de D-glicose. A levedura, especialmente a da cerveja, contm enzimas que hidrolisam o amido no broto

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da cevada (malte), primeiro em maltose e depois em glicose, que fermentada na preparao da cerveja. : Hidrolisada por enzimas digestivas ou fervida com cido, dando partes iguais de glicose + frutose. Esta mistura se chama acar invertido. (Enzima: invertase) e causa crie dentria. Em vez de hiperatividade, o consumo de carboidrato aumenta a produo de serotonina que traz um efeito sedativo ao sistema nervoso.
SACAROSE

: Acar do malte. No encontrado livre na natureza. produzida durante a digesto, por enzimas que quebram grandes molculas de amido em fragmentos de dissacardeos, que podem ser quebrados em duas molculas de glicose para facilitar a absoro. Isto ocorre na natureza. Quando a semente de um gro de cereal brota, suas enzimas convertem o gro em maltose. Ex.1: Malte da cevada usado como adoante. Ex.2: Fabricao da cerveja: o amido hidrolisado pela distase, uma enzima obtida de gros germinantes.
LACTOSE

MALTOSE

:: : Acar do leite. No existe em vegetais. Est limitada quase que exclusivamente s glndulas mamrias de animais lactentes. Por hidrlise d: galactose + glicose. Problemas com esse acar: 1 - Pessoas com ausncia da enzima lactase, no fazem uma hidrlise eficiente. 2 Crianas pequenas nascidas sem a enzima do fgado que converte galactose em glicose.

Polihidrxilcoois ou Polilcoois Os polihidrxilcoois ou polilcoois inibem uma elevao rpida de acar no sangue. So usados em produtos para pessoas incapazes de tolerar grandes ingestes de acar, pois so absorvidos mais lentamente no trato digestrio e, portanto, inibem uma elevao rpida do acar no sangue.

SACAROSE MANOSE XILOSE

forma alcolica: SORBITOL forma alcolica: MANITOL

forma alcolica: XILITOL

SORBITOL: naturalmente encontrado em frutas. Tem poder adoante igual ao da glicose. bem absorvido e tem o mesmo valor energtico da glicose. MANITOL: Existe nas frutas, precariamente digerido, produz metade das calorias da glicose, por grama.

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XILITOL: Absorvido apenas 1/5 to rpido quanto a glicose. usado em gomas de mascar sem acar porque as bactrias cariognicas so incapazes de uslo como substrato.

sacarose

lactose

Adoantes Alternativos So mais doces que os acares naturais. So digeridos ou absorvidos. No tm valor nutritivo. HIPERTEXTO Mel de Abelhas O nctar da flor que contm sacarose levado pela abelha para a colmeia. No favo, a abelha envolve o nctar com a enzima invertase que hidrolisa a maioria da sacarose em glicose e frutose. Aps vrias horas de evaporao, o mel amadurecido e concentrado armazenado em clulas seladas. A doura do mel varia com a concentrao dos acares e grau de cristalizao. Vitaminas e minerais aparecem como quantidades traos. A absoro entre acar e mel quase igual. As diferenas entre mel e acar de mesa esto no fato de o mel conter, alm de maior teor de frutose, outros componentes minoritrios, como vitaminas, compostos fenlicos, flavonoides, minerais, entre outros. A frutose no sangue principalmente convertida em glicognio no fgado, um processo que no precisa de insulina. Porm, o alto contedo de glicose faz do mel um alimento que deve ser controlado para diabticos, no insulino-dependentes. Polissacardeos Os polissacardeos de interesse so: amido, dextrina, glicognio. So menos solveis e mais estveis que os acares mais simples. O amido e o glicognio so geralmente completamente digerveis.

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: : encontrado apenas em vegetais, em ambas as formas: a) Amilose - que possui cadeias retas e longas de unidade de glicose; b) Amilopectina - que possui cadeias ramificadas de unidades de glicose. Os grnulos de amido de vrios tamanhos e formas esto encerrados dentro das clulas do vegetal pelas paredes de celulose. Caractersticas do amido: 1. Os grnulos so insolveis em H2O fria; 2. O cozimento causa o intumescimento dos grnulos e a mistura se torna um gel; 3. O cozimento edemacia e rompe a clula para deixar o amido disponvel para os processos digestivos enzimticos. Amido Alimentar Modificado (amido resistente ao das enzimas): agente espessante usado em alimentos preparados comercialmente, como molhos de saladas, recheios de tortas, sopas enlatadas, caldos, pudins enlatados e alimentos para bebs. A modificao permite a reteno de propriedades espessantes desejveis, perdidas no amido comum aps esfriamento e estocagem.

AMIDO

: Produtos intermedirios que ocorrem na hidrlise do amido. So formadas durante a digesto e tambm como resultado de uma variedade de processos comerciais que usam cidos, enzimas ou calor seco. Diminuindo em tamanho, as molculas dos sacardeos vo aumentando em solubilidade e doura. Aplicaes comerciais: em xarope de milho (rico em dextrinas). Dextrose: a glicose produzida pela hidrlise de amido de milho.

DEXTRINAS

GLICOGNIO : : Forma de armazenamento de carboidratos em humanos e

animais. a primeira e a mais prontamente disponvel fonte de glicose e energia. Consiste de: cadeias ramificadas de unidades de glicose semelhantes quelas do amido de vegetal. (~ 340g de glicognio armazenado no fgado e nos msculos). As pequenas quantidades de glicognio nos alimentos animais so convertidas em cido lctico antes de estarem disponveis para o consumo.

: Constituem a estrutura celular dos vegetais. A C celulose lembra o amido, pois contm muitas molculas de glicose em forma no ramificada parecida com a amilose, porm unidas de uma forma que no

CELULOSE E HEMICELULOSE

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so hidrolisadas pelas enzimas que hidrolisam o amido. encontrada apenas em vegetais: polpa de frutas e vegetais, peles, talos, folhas, cobertura externa de gros, nozes, sementes e leguminosas. As hemiceluloses so polissacardeos no celulsicos. Diferem das celuloses na estrutura, pois tm menos unidades de glicose. Podem consistir de hexoses, pentoses e formar cidos destes compostos. Os produtos de fibra sintticos, como a metilcelulose e a carboximetilcelulose, so usados em laxativos, assim como na produo de alimentos de baixas calorias devido a sua propriedade de produzir volume e sociedade.

: Polissacardeo, no celulsico, constitudo de unidades de um derivado de galactose. Como absorve H2O e forma um gel, usada para fazer geleias e gelatinas. encontrada em mas, frutas ctricas, morangos e outros.

PECTINA

: So semelhantes pectina, exceto pelo fato de que as unidades de galactose esto combinadas a outros acares (glicose) e polissacardeos, encontrados em secrees vegetais ou sementes e so adicionadas a alimentos processados para conferir propriedades ou qualidades especficas.

GOMAS E MUCILAGENS

So encontrados em frutos do mar e algas. Ex.: carragenina, adicionada como agente espessante e estabilizante em muitos produtos alimentares processados.

POLISSACARDEOS DE ALGAS :

CONTEXTUALIZANDO Intolerncia Lactose Mais de 75 % dos adultos do mundo inteiro sofrem com a intolerncia lactose. Isso ocorre especialmente em certas raas. Por exemplo: at 90% dos adultos com ascendncia africana ou asitica so deficientes em lactase sendo, portanto, menos capazes de metabolizar lactose que os indivduos originrios do norte da Europa. O mecanismo pelo qual a enzima perdida

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com a idade no est claro, mas determinado geneticamente e representa uma reduo na quantidade da protena enzimtica, e no uma enzima modificada e inativa. O tratamento para esse distrbio a reduo do consumo de leite passando a ingerir iogurtes e queijos, alm de comer vegetais verdes como brcolis, de modo a assegurar a ingesto adequada de clcio, usar produtos com adio de lactase ou ingerir a lactase em comprimidos antes das refeies (Champe, Harvey, Ferrier, 2009, p. 88).

ATIVIDADES DE AVALIAO 1. Defina os seguintes termos: a) polissacardeo; b) furanose; c) piranose; d) aldose; e) cetose; f) ligao glicosdica; g) oligossacardeo; h) glicoprotena. 2. Citar exemplos de polissacardeos estruturais e de reserva. 3. Descrever a estrutura do glicognio e indicar a poro da molcula que sofre alongamento ou encurtamento. 4. Quais so as principais diferenas entre as paredes celulares das plantas e das bactrias? 5. Como a quitina se difere da celulose em estrutura e funo? 6. Como o glicognio se difere do amido em estrutura e funo? 7. Que so epmeros? Exemplifique. 8. O polilcool mais frequentemente usado em chiclete e em doces dietticos o -sorbitol. Boa parte desse lcool obtido pela reduo da D-glicose. Compare essas duas estruturas e explique o modo pelo qual isso pode acontecer. 9. Qual a base metablica para a observao de que muitos adultos no podem ingerir grandes quantidades de leite sem ter dificuldades gstricas? 10. Qual o benefcio das fibras na alimentao? 11. Pesquise e indique resumidamente o papel das glicoprotenas como determinantes antignicos para os grupos sanguneos.

Bibliografia Comentada

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Campbell, M. K.; Farrel, S. O. Bioqumica. Vol. 3. So Paulo: Thomson Learning, 2008. Monossacardeos, Dissacardeos, Oligossacardeos so comentados no Captulo 16. Champe, P. C.; Harvey, R. A.; Ferrier, D. R. Bioqumica Ilustrada. 4 Ed. Porto Alegre: Artmed, 2009. O Captulo 7 da Unidade II expe sobre Carboidratos. Liberato, M. C. T. C. Estudo Qumico e Bioprospeco de Produtos da Abelha Apis mellifera L. do Estado do Cear. Tese. (Doutorado em Biotecnologia) Universidade Estadual do Cear Renorbio. Fortaleza. 2011. O assunto Mel e os monossacardeos nele contidos so abordados exaustivamente. Mahan, K.; Escott-Stump. Alimentos, nutrio & dietoterapia. So Paulo: Roca, 2005. Na Parte I, que trata dos Princpios Nutricionais, no Captulo 3, so apresentados tpicos relativos aos carboidratos.

LEITURA, VDEOS E SITES RECOMENDADOS http://www.quimica2000.cjb.net/

CAPTULO 3: LIPDIOS
OBJETIVOS: Conhecer as macromolculas estruturais e de revestimento, que so as gorduras, chamadas quimicamente de lipdios. Conhecer os tipos de lipdios e onde so encontrados no nosso organismo e ainda os principais alimentos que contm grande quantidade dessas molculas. Classificar os vrios tipos de lipdios. Aprender as funes dos lipdios, em animais e vegetais. Observar a localizao celular dos diversos lipdios. Estudar a funes do colesterol e das vitaminas lipossolveis, suas transportadoras. Aprender sobre a deficincia das protenas e as doenas relacionadas. Os lipdios so compostos que ocorrem na natureza. Pode-se tambm defini-los como molculas orgnicas naturais isoladas de clulas e tecidos por extrao com solventes orgnicos no polares. As caractersticas que melhor definem os lipdeos esto relacionadas com sua solubilidade, pois so relativamente insolveis na gua e so solveis nos solventes no polares, tais

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como o ter, o clorofrmio e o benzeno. Gorduras e leos so lipdeos tpicos em termos de solubilidade, mas esse fato no define realmente sua natureza qumica. Qumicamente, pode-se dizer que o lipdeo uma mistura de compostos que compartilham algumas propriedades com base em semelhanas estruturais, principalmente uma preponderncia de grupos apolares. Uma classificao que se relacione com a sua natureza qumica poderia ser aquela que encaixa os lipdeos em dois grupos principais. O primeiro grupo consiste em compostos de cadeia aberta com grupos de cabea polar e longas caudas apolares, e inclui os cidos graxos, os triacilgliceris, os esfingolipdios, os fosfoacilgliceris e os glicolipdios. O segundo grupo principal consiste em compostos de anis fundidos (cadeias cclicas), os esteroides, sendo um importante representante desse grupo o colesterol. Tambm possvel classificar os lipdeos como simples e complexos. Nesse caso, so chamados Lipdeos simples os steres que, por hidrlise total do origem somente a cidos graxos e alcois. Podem ser: 1. Gorduras e leos, que so steres de cidos graxos com o glicerol. So denominados triacilgliceris (TAG). 2. Ceras que so steres de cidos graxos com lcoois monohidroxlicos de pesos moleculares mais elevados e geralmente de cadeia linear. Os Lipdeos complexos (ou lipdeos compostos) so os steres de cidos contendo outros grupos alm de lcoois e de cidos graxos, como 1. Fosfolipdeos (ou Fosfatdeos) que so lipdeos que contm, alm de cidos graxos e um lcool, um resduo de cido fosfrico e, frequentemente, tm bases nitrogenadas e outros substituintes, como nos glicerofosfolipdeos, o lcool o glicerol e, nos esfingolipdeos, o lcool a esfingosina. 2. Glicolipdeos (Glicoesfingolipdeos), que so lipdeos que contm um cido graxo, esfingosina e carboidrato. Outros Lipdeos Complexos so lipdeos tais como Sulfolipdeos (contm enxofre) e Aminolipdeos (contm grupos amino). As lipoprotenas tambm podem ser enquadradas nesta categoria, bem como os Precursores e derivados de lipdeos que so obtidos na sua maioria por hidrlise dos lipdeos simples e composto. Incluem: cidos graxos, glicerol, esteroides, alcois, alm do glicerol e esteris, aldedos graxos e corpos cetnicos, hidrocarbonetos, vitaminas lipossolveis, hormnios e pigmentos. cidos Graxos So cidos carboxlicos alifticos. So considerados compostos anfipticos porque o grupo carboxila hidroflico e a cauda de hidrocarboneto hidrofbica. Ocorrem como steres nas gorduras naturais e nos leos. Neste caso, geralmente, tm cadeia linear e nmero par de tomos de carbono. Podem ter cadeia saturada ou insaturada. As propriedades fsicas e fisiolgicas dos cidos graxos dependem do comprimento da cadeia e do grau de insaturao. Ex.: Os pontos de fuso dos cidos graxos, com o n. par de tomos de carbono, aumentam com o aumento do comprimento da cadeia e

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diminuem com a insaturao. Os cidos graxos possuem cadeias retas de hidrocarboneto terminando em um grupo carboxila de um lado e um grupo metila no outro. A maioria das cadeias dos cidos graxos tem entre 4 e 22C, com aqueles de 16 e 18 carbonos, ou cidos graxos de cadeia longa, sendo os de maior prevalncia. No organismo, os cidos graxos so uma parte importante dos Fosfolipdeos nas Membranas Celulares. Os cidos graxos so classificados pelo n de C, pela posio da 1 dupla ligao e pelo n de duplas ligaes. A localizao da 1 dupla ligao, contada a partir da terminao metila do cido Graxo, designada pelo n (mega). Ex.: cido Linoleico: 6 (mega-6) 18:2. Ou seja: possui 18C, 2 duplas, sendo a 1 dupla no C6 contado a partir do CH3.

cidos Graxos Saturados Contm o n mximo de H que a cadeia pode suportar. Esto concentrados em certos alimentos animais (carnes bovina, frango, porco, laticnios) e alimentos vegetais (palmeira, semente de palmeira e leo de coco). O nvel de saturao determina a consistncia da gordura temperatura ambiente. Em geral, quanto > a cadeia, mais saturada ela e mais dura a gordura de coco ser em temperatura ambiente. Exceo: leo de coco (altamente saturado e lquido temperatura ambiente por causa da prevalncia ou predominncia dos cidos Graxos de cadeia curta; menos que seis tomos de carbonos. cidos Graxos Monoinsaturados

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Contm apenas uma dupla ligao. Ex.: cido oleico (presente em azeite de oliva, leo de canela, leo de amendoim, amendoins, nozes pecs, amndoas e abacates). No organismo, o cido oleico formado pelo estearato atravs da ao da enzima dessaturase. Os cidos graxos monoinsaturados podem desempenhar um papel no tratamento do diabetes. cidos Graxos Trans A maior parte dos cidos graxos monoinsaturados nos alimentos ocorre na forma cis, significando que os H esto do mesmo lado da dupla ligao. No processamento dos alimentos, os cidos graxos trans so formados quando se adiciona H2 a leos lquidos para torn-los semi-slidos e mais estveis. As fontes de cidos graxos trans na dieta so margarina dura, gordura, frituras, produtos de panificao ricos em gorduras e lanches salgados. Acidos Graxos Saturados
cidos graxos saturados Nmero de tomos de C 1 Toma parte no metabolismo de unidades C1 (formato). 2 Principal produto final da fermentao de carboidratos por organismos do 2 rmen . 3 Um produto final da fermentao de carboidratos por organismos do 2 rmen . 4 Em certas gorduras em pequenas quantidades (especialmente 5 manteiga). Um produto final da 6 fermentao de carboidratos por 2 organismos do rmen . 8 Em pequenas quantidades em muitas gorduras (incluindo manteiga), especialmente aquelas de origem 10 vegetal. 12 Espermacete, canela, cerne da palmeira, leos de coco, louco, manteiga. 14 Noz moscada, cerne da palmeira, leos de coco, mirta. 16 Comum em todas as gorduras animais e vegetais. 18 20 leo de amendoim (araquis). 22 Sementes. 24 Cerebrosdeos, leo de amendoim.

Nome comum Frmico Actico

1

Propinico

Butrico Valrico Caprico Caprlio (octanico) Cprico (Decanoico) Lurico

Mirpistuco Palmtico Esterico Araqudico Benico 2 Lignocrico

1 2

Rigorosamente, no um derivado alqulico.

Tambm formado no ccum de herbvoros e em menor quantidade no clon humano.

cidos Graxos Insaturados

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Podem ser: Monoinsaturados, Poliinsaturados, Eicosanides

cidos graxos insaturados de importncia fisiolgica e nutricional Nmero de tomos de Sries Nome Nome sistemtico Ocorrncia C e nmero e posio comum das duplas ligaes cidos monoenicos (uma dupla ligao) 16:1;9 7 Palmitolico Cis-9-Hexadecenico Em quase todas as gorduras. 18:1;9 9 Oleico Cis-9-Octadecenoico Principalmente o cido graxo mais comum nas gorduras naurais. 18:1;9 9 Eladico trans-9-Octadecenoico Gorduras hidrogenadas e de ruminantes. 22:1;13 9 Ercico Cis-13-Docosenoico leos de sementes de coiza e mostarda. 24:1;15 9 Nervnico Cis-15-Tetracosenoico Nos cerebrospideos. cidos dienoicos (2 duplas ligaes) 18:2;9,12 6 Linoleico Todo-cis-9, 12Milho, amendoim, E Octadecadienico algodo, soja, muitos leos de plantas. cidos trienicos (3 duplas ligaes) 18:3;6,9,12 6 y-Linolnico todo-cis-6,9,12Algumas plantas, p.ex., Octadecatrienoico leo de prmula da tarde; cidos graxos menores em animais. 18:3;9,12,15 3 -Linolnico todo-cis-9,12,15Frequentemente, Octadecatrienoico encontrado com o cido linoleico, porm particularmente no leo de linhaa. cidos tetraenicos (4 duplas ligaes) 20:4;5,8,11,14 6 Araquidnitodo-cis-5,8,11,14Encontrado em co Eicosatetraenoico gorduras animais e no leo de amedoim; importante componente de fosfolipdeos dos animais. cidos pentaenoicos (5 duplas ligaes) 20:5;5,8,11,14,17 3 Trimnodnitodo-cis-5,8,11,14,17 Importante componente co Eicosatetraenoico de leos de peixes, p.ex., leo de fgado de bacalhau, cavala, arenque e salmo. 22:5;7,10,13,16,19 3 Clupanodtodo-cis-7,10,13,16,19 leo de peixe, nico Docosapentaenoico fosfolipdeos do crebro. cidos hexaenoicos (6 duplas ligaes) 22:6;4,7,10,13,16,19 3 Cervnico todo-cis-5,8,11,14leos de peixe, Docosahexaenoico fosfolipdeos do crebro.

cidos Graxos Incomuns Os cidos graxos incomuns contm n. mpar de tomos de carbono. Ex.: cido margrico, cido malvlico. cidos Graxos Essenciais

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Os cidos graxos essenciais produzem efeitos especiais no organismo vivo. No podem ser produzidos pelo organismo humano. Devem ser administrados pelos alimentos. Exemplo: o cido linoleico transformado pelo organismo no cido araquidnico (4 vezes mais insaturado e com 20 carbonos). O cido araquidnico o cido graxo verdadeiramente essencial para o organismo humano. O cido Linoleico (6) e o cido Linolnico (3) so os dois cidos graxos essenciais na dieta porque previnem sintomas de deficincia e no podem ser sintetizados pelos seres humanos. Esses dois cidos Graxos so os compostos de origem para os outros cidos graxos biologicamente ativos. O cido Linoleico, atravs da ao das enzimas dessaturase, pode ser convertido em cido Linolnico e cido Araquidnico, e ambos podem desempenhar uma funo no incio do desenvolvimento cerebral. O cido Araquidnico pode prevenir a dermatite encontrada na deficincia de cido Graxo Essencial; portanto, tem atividade parcial de cido graxo essencial. Devido ao fato do cido Araquidnico ser sintetizado a partir do cido Linoleico, ele se torna essencial, se a dieta for deficiente em cido Linoleico. Na famlia do 3, o cido docosaexaenico (DHA, C22: 6 3), desempenha uma funo principal no funcionamento da retina e desenvolvimento cerebral, e acredita-se hoje que seja essencial para bebs. Essas famlias de cidos Graxos so tambm precursoras dos eicosanoides (prostaglandinas, tromboxanos e leucotrienos), compostos como hormnios, que ajudam no controle da presso sangunea, frequncia cardaca, dilatao vascular, coagulao sangunea, liplise e resposta imunolgica. Cada famlia d origem a uma srie diferente de eicosanoides. Ex.: cido Araquidnico (famlia 6) precursor de Prostaglandina, Tromboxano A2, que causa agregao plaquetria, formao de cogulo e vasoconstrio. Em contraste, os cidos Graxos 3 favorecem a produo de prostaciclinas (que tm efeitos opostos, isto , previnem a formao de cogulo e causam vasodilatao). Tambm inibem a enzima dessaturase, que diminui a produo de cido Araquidnico e, consequentemente, de tromboxano A 2. A ingesto na dieta dos cidos Graxos Essenciais est positivamente relacionada com suas concentraes nos steres de colesterol e fosfolipdeos no sangue, por isso, essas quantidades bioqumicas so usadas para confirmar a ingesto na dieta.

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Sintomas da deficincia de cido Linoleico 6 - Dermatite e desenvolvimento precrio em bebs alimentados com uma frmula sem gordura. - Os animais tambm tm insuficincia reprodutiva e fgado gorduroso. A deficincia de cidos Graxos Essenciais em crianas e adultos tem sido observada durante um longo perodo de nutrio parenteral total sem gordura. - Uma deficincia de cido Linolnico 3 produziu mudanas neurolgicas (entorpecimento, parestesia, fraqueza, incapacidade de andar, viso embaada) que foram revertidas quando o c. Linolnico foi fornecido. Outros sintomas da deficincia do 3 so: dificuldades de aprendizado, eletrorretinograma anormal e acuidade visual prejudicada. Acilgliceris So produtos da reao de esterificao de uma molcula de glicerol com at trs molculas de cidos graxos. Podem ser: Monoacilglicerol, Diacilglicerol e Triacilglicerol.

Triacilgliceris ou Triglicerdeos

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(TAG) Os triacilgliceris ou triglicerdeos so steres do lcool glicerol com cidos graxos. Contm uma molcula de Glicerol (um lcool tridrico) e um a trs cidos graxos na ligao do ster. So os leos de vegetais ou as gorduras de origem animal. Suas propriedades fsicas so determinadas pela proporo e estrutura qumica dos seus cidos graxos constituintes. Os triacilgliceris lquidos temperatura ambiente so chamados em geral, leos, e os que so slidos so chamados gorduras. Os cidos graxos menores e menos insaturados caracterizam as gorduras que so macias ou leos lquidos em T ambiente. As gorduras slidas (ex.: gordura da carne), contm grandes quantidades de cidos graxos de cadeia longa, isto , cidos palmtico (C16:0) esterico (C18:0). As propriedades dos glicerdeos tambm so influenciadas pelo n e pela posio dos c. graxos na molcula de glicerol. Nos alimentos, os lipdeos mais abundantes so os triacilgliceris. Os triacilgliceris so hidrolisados dando como resultado trs cidos graxos e o glicerol.

Funes ENERGIA: Devido a sua alta densidade energtica e baixa solubilidade, os Triacilgliceris (TAG) do tecido adiposo so a maior forma de armazenamento de energia no organismo. Os TAG so armazenados de forma mais eficiente que o GLICOGNIO, pois produzem 2 vezes o ATP depois da oxidao e so armazenados sem H2O. Geralmente, os seres humanos possuem algumas semanas de reservas adiposas, mas apenas o valor de cerca de um dia de glicognio. O tecido adiposo auxilia a manter rgos e nervos em posio e protege-os contra choques e leses traumticas. (Efeito Amortecedor). A camada subcutnea de gordura isola o organismo, preservando o calor do organismo e mantendo a temperatura do organismo (Efeito Isolamento Trmico). As gorduras lipossolveis. auxiliam no transporte e absoro de vitaminas

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Deprimem as secrees gstricas e tornam mais lento o esvaziamento gstrico. As gorduras adicionam o paladar da dieta e produzem uma sensao de saciedade aps a refeio. Hidrogenao dos Triacilgliceris (HIPERTEXTO) As gorduras comercializadas para alimentao so obtidas pela hidrogenao parcial de leos vegetais. O resultado so as gorduras parcialmente hidrogenadas presentes em muitos produtos alimentcios. A vantagem comercial da hidrogenao parcial a maior durao da vida til da gordura. H, porm, um problema com a hidrogenao parcial. O catalisador isomeriza parte das duplas ligaes no hidrogenadas e substitui o arranjo natural em cis por um arranjo artificial em trans; acumulam-se, porm, provas das gorduras em trans estarem associadas a riscos crescentes de molstias cardiovasculares. cidos Graxos Poliinsaturados Os cidos graxos poliinsaturados contm duas ou mais duplas ligaes. O cido graxo poliinsaturado predominante na dieta o cido Linoleico. Fontes de c. Linoleico so as sementes de vegetais e os leos que produzem. leos que no so provenientes de sementes como: leo de coco, leo de palmeira, manteiga de cacau so fontes pobres de cido linoleico. Existem duas principais famlias de c. Graxos Poliinsaturados: 3 e 6. Essas famlias no so conversveis, tendo funes bioqumicas muito diferentes. Os cidos graxos poliinsaturados esto relacionados com a resposta leso e inflamao. So classificados pelo nmero de suas ligaes duplas: linoleico (3), araquidnico (4) e eicosapentanico (5). Dependendo do tecido envolvido, os cidos graxos entram ou na cascata da prostaglandina ou na do leucotrieno, levando produo de hormnios eicosanoides. Esses hormnios podem alterar o tamanho e a permeabilidade dos vasos sanguneos, a atividade das plaquetas e contribuir para a coagulao do sangue, modificando os processos inflamatrios. Estudos mostram a eficcia dos cidos poliinssaturados na esclerose mltipla, nas doenas inflamatrias (artrite reumatoide e dermatite atpica) e na preveno da aterosclerose.

PERXIDOS

MEMBRANAS CELULARES

AGPI

PROSTAGLANDINAS

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BAINHA DE MIELINA VRUS

PAREDE DOS VASOS

SISTEMA IMUNOLGICO

SISTEMA IMUNOLGICO

MICROCIRCULAO

cidos Graxos

AGREGAO DE HEMCIAS

ADESIVIDADE PLAQUETRIA

PERMEABILIDADE DOS VASOS SANGUNEOS

mega 3

So de interesse nutricional o cido linolnico (C18:3) e seus derivados cidos Eicosapentanicos (C20:5) e o cido Docosahexanico (C22:6). Fontes de cido linolnico so os leos de salada, margarinas e gordura feita de leo de canola ou de soja. leos de peixes e mariscos so ricos em cidos Eicosapentanicos e Docosahexanico. Os cidos graxos 3 afetam o metabolismo lipoproteico. Os efeitos colaterais potenciais de altas doses de cidos graxos 3 incluem maior tempo de sangramento, infeces, diabetes, peroxidao lipdica. Lipdeos Compostos Fosfolipdeos: O 2 maior componente lipdico do organismo so os lipdeos em que um dos cidos graxos substitudo por uma substncia contendo fsforo, assim como o cido fosfrico. O O CH2 O C R1 O LECITINA

R2 C O CH

CH2 O P OCH2CH2N+(CH3)3 OLecitina: A lecitina (fosfatidilcolina) contm cido fosfrico e a base colina contm nitrognio. So encontradas grandes concentraes combinadas com protenas nas membranas celulares, onde facilitam a passagem de gorduras para dentro e para fora da clula, e no sangue, onde tambm agem no transporte de lipdios (como parte de lipoprotenas). Os cidos graxos contidos

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na alimentao iro influenciar os cidos graxos que aparecem nos fosfolipdios. 1- Atua no transporte e utilizao de cidos graxos e colesterol (em lipoprotenas) atravs da enzima Lecitina Colesterol Aciltransferase (LCAT). 2- A lecitina , entre os fosfolipdeos, o mais amplamente distribudo nos alimentos. Fgado, gema de ovo, feijo de soja, amendoim, espinafre e grmen de trigo so fontes ricas em lecitina. 3- A lecitina, porm, no um nutriente essencial, pois o organismo produz a quantidade que necessria. Alm disso, a lecitina da alimentao digerida antes de ser absorvida, portanto, os suplementos so de pequeno valor. 4- Devido s suas propriedades emulsificantes, a lecitina adicionada aos produtos alimentcios. Ex: margarina, bolachas e produtos de confeitaria. Outros Fosfolipdeos As cefalinas so semelhantes em estrutura s lecitinas. Os lipontis contm inositol, um composto com atividade semelhante s vitaminas. Os esfingolipideos contm um complexo aminolcool no lugar do glicerol. Todos eles so encontrados em altas concentraes no tecido nervoso. A esfingosina encontrada no crebro e outros tecidos nervosos como um componente da bainha de mielina. ESFINGOSINA: HO CH CH = CH (CH2)12 CH3 CH N H H CH2 O H GLICEROL: H2COH HCOH H2COH

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Glicolipdeos Incluem os cerebrosdeos e os gangliosdeos que contm a esfingosina e uma cadeia muito longa de cidos graxos (> 22C). O componente carboidrato dos cerebrosdeos a galactose. Os gangliosdeos tambm contm glicose e um composto complexo contendo um aminoacar. Estruturalmente, ambos os compostos so componentes do tecido nervoso e certas membranas celulares, onde desempenham uma funo no transporte de lipdeos. Esteroides e Esteris Os esteroides constituem um grande grupo de compostos cclicos que podem ser considerados derivados de um ncleo hidrocarbontico comum: o ncleo ciclopentanofenantreno. Os esteroides so, portanto, lipdeos de origem vegetal e animal, possuidores de um esqueleto de carbonos tetracclico caracterstico. So encontrados praticamente em todos os tecidos do organismo e causam uma grande variedade de efeitos fisiolgicos. Os esteroides esto estruturalmente relacionados aos terpenos e so biossintetizados a partir do precursor lanosterol (um triterpeno). O lanosterol, por sua vez, provm da ciclizao do esqualeno, um hidrocarboneto acclico. Os esteroides podem ser classificados como: Esteris; cidos Biliares; Hormnios Sexuais Masculinos; Hormnios Sexuais Femininos; Hormnios da Gravidez; Hormnios Adrenocorticais; Vitaminas D; Saponinas; Glicosdeos Cardacos. Esteris O mais conhecido o colesterol que est presente em todas as clulas animais e particularmente abundante em tecidos nervosos. No ncleo do colesterol h oito centros de assimetria e, teoricamente, algo como 256 ismeros so possveis. O colesterol o precursor dos cidos biliares, esteris fecais e hormnios esteroides. Colesterol Os esteris so caracterizados pela estrutura em anel, complexa com grupos laterais individuais. Alm do colesterol, que encontrado apenas em

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tecidos animais, os esteris comuns incluem o ergosterol, que ocorre em leveduras, e -sitosterol, que encontrado em alimentos vegetais. O colesterol um componente essencial das membranas estruturais de todas as clulas dos mamferos. o principal componente do crebro e das clulas nervosas. encontrado tambm em altas concentraes nas glndulas supra-renais, onde os hormnios adrenocorticais so sintetizados e, no fgado, onde sintetizado e estocado. O colesterol uma chave intermediria na biossntese de uma srie de esteroides importante como: cidos biliares, hormnios adrenocorticais (aldosterona) e hormnios sexuais (estrognios, testosterona e progesterona). Os lipdeos sanguneos (colesterol, triglicerdios e fosfolipdios) so transportados na corrente sangunea ligados s protenas. Estas partculas complexas, chamadas lipoprotenas variam em composio, tamanho e densidade. As cinco classes de lipoprotenas so: Quilomcrons; Lipoprotenas de Densidade muito Baixa (VLDL); Lipoprotenas de Densidade Intermediria (IDL), Lipoprotenas de Baixa Densidade (LDL) e Lipoprotenas de Alta Densidade (HDL). Elas possuem quantidades variveis de triglicerdeo, colesterol, fosfolipdeo e protena. A proporo de protena e gordura determina a densidade. As partculas com mais protenas so mais densas, portanto, HDL tem mais protenas do que LDL.

Colesterol Total o colesterol contido em todas as funes de lipoprotena. Cerca de 60 a 70% do total carreado com LDL, 20 a 30% do total carreado com HDL, 10 a 15% do total carreado com VLDL. Dentre as lipoprotenas ricas em triglicerdeos esto os Quilomcrons, VLDL e quaisquer produtos remanescentes ou intermedirios formados no catabolismo. Lipoprotenas e Metabolismo Qulomcrons: Maiores partculas. Transportam a gordura e o colesterol da alimentao, do intestino delgado para a periferia. Na corrente sangunea, os triglicerdeos nos quilomcrons so hidrolisados pela lipase lipoproteca. Lipoprotenas de Densidade Muito Baixa (VLDL): So sintetizadas no fgado para transportar triglicerdeos endgenos e colesterol. 60% desta partcula so triglicerdeos.

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Lipoprotenas de Densidade Intermediria (IDL): So formadas com o catabolismo do VLDL e so precursoras do LDL. Lipoprotenas de Baixa Densidade (LDL): So os transportadores primrios de colesterol no sangue. Consequentemente, o Colesterol Total e a LDL Colesterol esto altamente correlacionados. Lipoprotenas de Alta Densidade (HDL): Contm mais protenas do que qualquer outra lipoprotena. A teoria mais aceita para o efeito antiaterognico do HDL que ele est envolvido no transporte do colesterol em excesso das membranas para as lipoprotenas ricas em triglicerdeos, que so ento removidas por receptores no fgado. Este o processo de transporte de colesterol reverso, que ajuda o organismo a livrar-se do colesterol e previne o acmulo de lipdios na parede arterial. Nas anlises clnicas laboratoriais, normalmente usa-se a frmula: LDL C = (Colesterol Total) (HDL - C) (TG/5), pois algumas vezes no quantificado o LDL-C diretamente, principalmente quando TG < 400g/dl.

CONTEXTUALIZANDO Vitaminas Lipossolveis As vitaminas lipossolveis A, D, E, K ocorrem em alimentos de origem animal ou vegetal ricos em gorduras sendo absorvidas juntamente com os lipdios. Como os lipdios, elas so transportadas pelas protenas plasmticas. Esto envolvidas em diversos processos, inclusive atuando como coenzimas. A vitamina K, por exemplo, participa como cofator de reaes de carboxilao de resduos de glutamato de vrias protenas, entre as quais os fatores responsveis pela coagulao sangunea. A vitamina A obtida a partir de carotenoides vegetais e est envolvida nas reaes da viso e no crescimento e diferenciao de tecidos epiteliais. O colesterol e o ergosterol so precursores da Vitamina D (Calciferol). Essa vitamina conhecida como a vitamina da luz solar porque uma modesta exposio luz solar normalmente suficiente para a maioria das pessoas produzir vitamina D, utilizando a luz ultravioleta e o colesterol da pele. Dois esteris um dos lipdeos de animais (7 desidrocolesterol) e um dos vegetais (ergosterol) podem servir como precursores da vitamina D. A abertura do anel de 7 desidrocolesterol produz uma forma de provitamina de 7 desidrocolesterol que produz Colecalciferol (Vitamina D3). A abertura do anel de ergosterol produz ergocalciferol, ou vitamina D2. As vitaminas D2 e D3 necessitam de metabolismo posterior para produzir as formas metabolicamente ativas de 1,25-diidroxivitamina D2 e D3 (Calcitriol). Dessa forma, a vitamina D desempenha um papel importante, juntamente com o clcio e o fsforo, na sade dos ossos e dentes. A vitamina

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E, juntamente com as vitaminas A, C, e D, atuam como antioxidantes, bloqueando a ao lesiva dos radicais livres sobre as estruturas celulares.

ATIVIDADES DE AVALIAO 1. Caracterizar estruturalmente os cidos graxos mais comuns na natureza. 2. Definir triacilglicerol. Descrever as vantagens para os seres vivos do armazenamento de triacilgliceris. 3. Correlacionar a consistncia das gorduras animais e leos vegetais com a estrutura dos cidos graxos componentes destas substncias. 4. Definir Glicerofosfolipdio e Esfingolipdio. 5. Caraterizar as classes principais de lipoprotenas plasmticas, indicando a sua funo. 6. Definir lipdio anfiptico. 7. Desenhe a estrutura de um fosfoacilglicerol que contenha glicerol, cido oleico, cido esterico e colina. 8. Escreva a frmula estrutural de um triacilglicerol e o nome das partes que o compem. 9. Como as estruturas dos esteroides se diferem das de outros lipdeos? 10. Qual a semelhana estrutural entre a Vitamina D3 e o Colesterol? 11. As margarinas so feitas de leos vegetais normalmente lquidos. Por que elas so slidas? 12. Compare as estruturas e as propriedades fsicas dos TAG, dos esfingolipdeos e dos glicerofosfolipdeos. 13. Resuma as funes dos esteroides e eicosanoides. 14. Fale sobre a doena ADENOLEUCODISTROFIA (ALD). O que a ocasiona? Como composto o leo de Lorenzo, que usado como terapia na ALD? 15. Descreva a nomenclatura dos cidos graxos. 16. Sobre os Triacilgliceris, defina: a) Rancificao; b) Saponificao. 17. Esquematiza um fosfolipdeos, mostrando a ligao fosfodister. 18. Qual a importncia do colesterol? De que outros compostos ele a molcula inicial?

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19. Compare as vias de degradao e biossntese de cidos graxos. 20. Esboce o papel da carnitina no transporte de molculas de acil-CoA para mitocndria. 21. O principal composto de armazenamento de energia nos animais a gordura. Por que isso vantajoso? 22. Por que as plantas no usam gordura/leos como seus principais compostos de armazenamento de energia? 23. Por que o linoleato e o linolenato so considerados cidos graxos essenciais? 24. Discuta o papel das unidades isoprenoides na biossntese de colesterol. 25. Por que uma pessoa alcolatra pode ter um fgado gorduroso? 26. Qual o papel do citrato no transporte de grupos acetilas da mitocndria para citossol? 27. Que caracterstica todos os esteroides possuem? E quais implicaes biossintticas, essa caracterstica em comum atribui? 28. Por que o colesterol deve ser empacotado para transporte, em vez de correr livremente no sangue? 29. Faa a diferena entre o colesterol bom e o mau colesterol.

Bibliografia Comentada Campbell, M. K. Bioqumica. 3 ed. Porto Alegre: Artmed Editora, 2000. Lipdeos, a natureza qumica dos lipdeos as vitaminas lipossolveis e Prostaglandinas e Leucotrienos so apresentados e comentados de forma muito didtica no Captulo 6 desse livro. Mahan, K.; Escott-Stump. Alimentos, nutrio & dietoterapia. So Paulo: Roca, 2005. Os Lipdios foram comentados no Captulo 3, que trata dos macronutrientes carboidratos, protenas e lipdios. Marzzoco, A.; Torres, B. B. Bioqumica Bsica. 2 Ed. Rio de Janeiro: Ed. Guanabara Koogan S. A., 1999. Os autores apresentam lipdios na Parte 2 de

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seu livro no Captulo 6, que comenta sobre estruturas de carboidratos e lipdios.

LEITURAS, FILMES E SITES RECOMENDADOS: Filme: O leo de Lorenzo (1992) Filme: O Colesterol inimigo do Corao (Globo Vdeos) www.arquivosdeorl.org.br www.hepcentro.com.br/esteatose.htm

CAPTULO 4: AMINOCIDOS E PROTENAS

OBJETIVOS: Conhecer as macromolculas estruturais do nosso organismo, as protenas. Conhecer os tipos de molculas que compe as protenas, os aminocidos. Verificar os alimentos ricos em protenas. Estudar os tipos e funes de aminocidos, peptdeos e protenas. Reconhecer as estruturas dos diferentes aminocidos. O nome protena de origem grega e significa de 1 importncia. Em sua composio esto presentes C, H e O. As protenas tambm contm aproximadamente 16% de N, juntamente com S e, algumas vezes, outros elementos, tais como fsforo (P), ferro (Fe) e cobalto (Co). Os vegetais sintetizam a protena a partir do N, que obtm a partir de nitratos e amnia do solo e, nas circunstncias nicas das leguminosas, os nitratos se tornam disponveis simbioticamente a partir do N2 atmosfrico pelas bactrias nos ndulos das razes. J os animais obtm o N que necessitam de alimentos proteicos seja de origem vegetal ou animal. O metabolismo animal, a excreo e morte finalmente fazem retornar o N2 ao solo numa continuao do ciclo do nitrognio. Estrutura e Classificao

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A base da estrutura da protena so os aminocidos, dos quais 20 foram reconhecidos como constituintes da maioria das protenas. Eles so compostos que apresentam em sua molcula um grupo amino (-NH2) e um grupo carboxila (-COOH). Apenas a Prolina, possui um grupo imino (-NH-) em vez do grupo amino. Em pH fisiolgico, esses grupos esto na forma ionizada: -NH3+, -COOe NH2+ -. Os aminocidos tm uma frmula bsica comum, na qual os grupos amino e carboxila esto ligados ao carbono , ao qual tambm se liga um tomo de hidrognio e um grupo varivel chamado cadeia lateral ou grupo R. a estrutura da cadeia lateral R que diferencia os aminocidos entre si.

H R C H3 N+ COOH Estrutura bsica caracterstica de um aminocido

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Os aminocidos se combinam para formar protenas atravs de uma ligao chamada peptdica que une os carbonos carboxlicos de um aminocido ao N de outro. O composto resultante tem um grupo carboxila livre em uma das pontas e um grupo amino livre na outra, possibilitando a cadeia a continuar se ligando a outros aminocidos em qualquer das pontas. As protenas variam no tamanho, como, por exemplo, de polipeptdeos relativamente pequenos, como a Adrenocorticotropina (ACTH) com 23 unidades de aminocidos at molculas muito complexas com vrias centenas de milhares de unidades de aminocidos. Os polipeptdeos que constituem a Estrutura Primria das protenas podem conter de poucas at 300 unidades de aminocidos. Muitas cadeias de polipeptdeos podem ser ligadas entre si, normalmente atravs de ligaes S S da cistina, em uma forma helicoidal, pregueada ou espiral randmica

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chamada de Estrutura Secundria. As protenas mais complexas se caracterizam por uma Estrutura Terciria, na qual a cadeia polipeptdica est enrolada sobre si mesma em uma forma globular, com toda a estrutura sendo presa rigidamente por foras interatmicas, tais como ligaes de hidrognio. As extensas possibilidades de variao oferecidas por estas estruturas resultam em milhes de protenas diferentes com propriedades e funes biolgicas especficas. As protenas existem nas formas fibrosa e globulares. As Protenas Fibrosas caracterizam-se por vrias cadeias peptdicas helicoidais torcidas juntas para formar uma haste rija. So caracterizadas por baixa solubilidade e alta fora mecnica. Aparecem em elementos estruturais, tais como colgeno do tecido conjuntivo, queratina do cabelo e unhas e miosina do tecido muscular. As Protenas Globulares so encontradas em lquidos teciduais. So muito solveis e facilmente desnaturadas. As Protenas Globulares de interesse na nutrio so: a casena, presente no leite, a albumina presente no ovo, na carne etc. Protenas Simples so aquelas que produzem apenas aminocidos a partir da hidrlise. Incluem albuminas, globulinas, prolaminas entre outras. As protenas que so solveis em H2O, tais como as albuminas e globulinas, esto presentes nos lquidos animais, enquanto que as menos solveis, tais como a miosina e a protena muscular, esto presentes nos tecidos. Protenas Conjugadas so combinaes nas quais uma substncia no proteica est ligada a uma molcula de protena simples, como um grupo prosttico, assim facilitando as funes que nem os prprios constituintes poderiam provavelmente realizar. As protenas conjugadas incluem as Nucleoprotenas encontradas no cido Ribonucleico (RNA) e cido Desoxirribonucleico (DNA). As Mucoprotenas e as Glicoprotenas so aquelas que combinam protenas com quantidades variveis de Polissacardeos Complexos, tais como Mucina presente nas secrees gstricas, Lipoprotenas presentes no plasma sanguneo, Fosfoprotenas que contm H3PO4 ligado protena por ligaes ster, tal como na casena do leite; Metaloprotenas, tais como ferritina e a hemossiderina nas quais metais como Fe++, Cu++ e Zn++ esto ligados s protenas. Protenas Derivadas: Proteoses, Peptonas e Peptdeos formam-se nos vrios estgios do metabolismo proteico.

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GLOBULAR

FIBROSA

Leguminosas como Fontes de Protena (HIPERTEXTO) As leguminosas so nicas no reino vegetal por causa de suas sementes, ricas em protenas e pobres em amido, diferente das sementes de gros de cereais, que so pobres em protenas e ricas em amido. O seu contedo de Aminocidos Essenciais mais parecido com o das protenas animais. Suplementadas com uma pequena quantidade de metionina dos cereais ou fontes animais, o seu padro de aminocido adequado para suportar tanto a

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vida quanto o crescimento nos humanos. Os feijes de soja so nicos pelo fato de que um produto de seu processamento, a protena da soja isolada, a protena com um padro de aminocido capaz de suportar a vida e o crescimento. Esta caracterstica extraordinria talvez a consequncia casual de uma habilidade rara dos vegetais leguminosos de fixar o N gasoso do ar para o seu uso. Na realidade, o vegetal por si mesmo no tem esta capacidade e, como todos os outros vegetais, deve retirar o N atravs das razes ou na forma de nitrato de ons de amnio. Entretanto, localizadas nos ndulos das razes de leguminosas esto as bactrias Rhizobium, que fixam o N da atmosfera. Numa relao simbitica, as bactrias fornecem o N na forma de aminocido e amidas em troca da energia fornecida pelo vegetal atravs da fotossntese. Desnaturao de Protenas A estrutura tridimensional de uma protena significativa para a sua funo. As ligaes que mantm a forma tridimensional so relativamente fracas e facilmente rompidas por agitao mecnica, extremos de temperatura, acidez ou alcalinidade. Quando isso ocorre, a protena perde sua forma, caracterstica e no mais capaz de desempenhar sua funo neste papel particular. Este desemaranhamento irreversvel da molcula de protena, chamado desnaturao, um evento que normalmente prejudicial e algumas vezes desastroso para o organismo, dependendo de quantas molculas de protena so afetadas. Enquanto um ovo est fritando, a clara do ovo gradualmente engrossa e fica branca conforme a protena desnaturada pelo calor. Do mesmo modo, uma queimadura severa desnatura e, assim, destri a protena na pele e vasos sanguneos. Na realidade a suscetibilidade das protenas ao excesso no moderado de calor, frio, cido e lcalis que determina a limitao ambiental na qual os humanos podem sobreviver e funcionar.

Funes das Protenas As protenas da dieta esto envolvidas na sntese das protenas teciduais e outras funes metablicas especiais; nos processos anablicos, fornecendo os aminocidos necessrios para a construo e manuteno dos tecidos orgnicos; como uma fonte de energia, as protenas so equivalentes aos carboidratos no fornecimento de 4 Kcal/g. Entretanto, so consideravelmente

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mais caras, tanto em custo quanto na quantidade de energia necessria para o metabolismo. As protenas desempenham um papel estrutural no apenas em todos os tecidos do corpo, mas tambm na formao de enzimas, hormnios e de vrios lquidos e secrees corpreas. Como anticorpos, as protenas esto envolvidas na funo do sistema imunolgico. Na forma de lipoprotenas, as protenas participam do transporte de triglicerdeos, colesterol, fosfolipdeos e vitaminas lipossolveis. Muitas vitaminas e minerais so ligados a carreadores proteicos especficos para o transporte. A albumina transporta cidos graxos livres e bilirrubina, assim como muitas drogas. As protenas tambm contribuem para a homeostase atravs da manuteno de relaes osmticas normais entre os lquidos corpreos, como evidenciado pela formao de edema como uma consequncia de hipoproteinemia. A albumina particularmente importante para esta funo. Devido a sua estrutura nica, as protenas so capazes de se combinar ou com substncias cidas ou com substncias bsicas, mantendo assim o equilbrio cido-base do sangue e tecidos. Enzimas como Protenas O fato de todas as enzimas serem protenas e suscetveis desnaturao significante para as necessidades ambientais do organismo humano. As enzimas funcionam por se ligarem a molculas de formas e tamanhos caractersticos. Sendo assim a importncia da manuteno da forma original de uma enzima em particular imprescindvel. Como a desnaturao muda a forma das enzimas tornando-as no funcionais, a maioria dos organismos vivos no pode tolerar extremos de temperatura e pH. Algumas excees so formas diminutas de vegetais que sobrevivem a temperaturas prximas da fervura de veres quentes ou no ambiente frio de bancos de neve. Devido s exigncias rgidas da funo enzimtica de um pH timo, existe uma srie de mecanismos para eliminar o excesso de materiais cidos ou alcalinos do sangue. Exemplo fisiolgico da desnaturao de enzima o efeito do cido lctico que se acumula durante exerccios vigorosos, alcanando, eventualmente, um nvel suficiente para interferir com a ao enzimtica normal, contribuindo para a resultante fadiga. As enzimas em alimentos no cozidos so desnaturadas pelo cido clordrico (HCl) do estmago. A papana (enzima da papaia) rapidamente desnaturada conforme a temperatura da carne sobe durante o cozimento. Se no for destruda desta maneira, mais tarde desnaturada e parcialmente digerida quando atinge o estmago. O mesmo fato ocorre com enzimas que so tomadas oralmente como suplemento. Neste caso, entretanto, as enzimas so empacotadas em cpsulas que no dissolvem at que alcancem o intestino delgado.

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Aminocidos Essenciais (AAE) e No Essenciais Aminocidos Essenciais (AAE) so aqueles em que a sntese do organismo no suficiente para suprir as necessidades metablicas e, sendo assim, precisam ser fornecidos como uma parte da dieta. So eles: treonina, valina, triptofano, isoleucina, lisina, leucina, fenilalanina, metionina, histidina e arginina. A ausncia ou a ingesto inadequada de qualquer um desses aminocidos leva a um balano de N negativo, perda de peso, crescimento prejudicado em bebs e crianas e sintomas clnicos. Os aminocidos no essenciais remanescentes, como alanina, cido asprtico, asparagina, cidotglutmico, glutamina, glicina, prolina e serina so igualmente importantes para a estrutura da protena. Entretanto, se quantidades adequadas de certos aminocidos no essenciais no estiverem presentes na hora da sntese da protena, podem ser sintetizados a partir de AAE ou de precursores de C e N, apropriados prontamente sintetizados na clula. Os aminocidos condicionalmente essenciais so aqueles que se tornam essenciais sob certas circunstncias clnicas, como p. ex: taurina, cistena e, possivelmente, tIrosina so tidos como condicionalmente essenciais nos bebs prematuros. Pool Metablico de Aminocidos No h uma grande reserva de aminocidos livres no organismo, e qualquer quantidade acima da necessria para a sntese de protena tecidual e dos vrios compostos no proteicos que contm N metabolizada. Entretanto, nas prprias protenas celulares um pool metablico de AA existe num estado de equilbrio dinmico que pode ser requisitado a qualquer momento para suprir uma necessidade apropriada. A contnua dinmica da protena no adulto provavelmente necessria para a manuteno de um pool de AA e a capacidade de suprir a necessidade por aminocidos pelas vrias clulas e tecidos quando so estimulados a fazer as protenas necessrias. Os tecidos mais ativos para a dinmica de protena so as protenas do plasma, mucosa intestinal, pncreas, fgado e rins, enquanto os msculos, pele e crebro so muito menos ativos. Funes Especiais dos AA Quase todos os aminocidos tm certas funes nicas no organismo. O Triptofano, o aminocido mais complexo, um precursor da vitamina Niacina e do neurotransmissor Serotonina. A Metionina o principal doador de grupos metila para a sntese de compostos tais como Colina e Carnitina. Tambm um precursor da Cistina e de muitos outros compostos que contm enxofre. A Fenilalanina um precursor da Tirosina e juntas levam formao de Tiroxina e Epinefrina. A Tirosina o precursor do qual so feitos o pigmento da pele e do cabelo. A Arginina e a Citrulina esto envolvidas especificamente na sntese de Ureia no fgado. A Glicina, o mais simples e mais ubquo dos aminocidos,

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se combina com muitas substncias txicas, convertendo-a em formas incuas que so ento excretadas. Tambm usada na sntese do ncleo Porfirina da hemoglobina e um constituinte de um dos cidos da bile (cido glicoclico). A Histidina essencial para a sntese de Histamina, que causa vasodilatao no sistema circulatrio. A Creatinina, sintetizada a partir da Arginina, Glicina e Metionina, se combina com o fosfato para formar a fosfocreatinina, um importante reservatrio de fosfato de alta energia na clula. A Glutamina, formada pelo cido Glutmico, e a Asparagina, formada a partir do cido asprtico, tm importantes papis como reservatrios de grupos amino por todo o corpo. A Glutamina tem recebido ateno recentemente como uma fonte primria de combustvel para o trato intestinal, especialmente no controle da sntese de glicognio e degradao proteica, assim como para manter a integridade contra transformao bacteriana. o aminocido mais abundante no plasma e no msculo esqueltico. O cido Glutmico um precursor do neurotransmissor cido Gama-Amino-Butrico (GABA).

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Fontes Endgenas (~140g/dia)

Sntese de Protenas Teciduais, Enzimas, Protenas, Hormnios, etc. Fontes exgenas (~70g/dia) Protenas do alimento

Digesto e Absoro

1 SNTESE (AA no essenciais)

POOL DE AA
3

Sntese e Degradao

Excreo Renal
Excesso de AA (0,9 a 1,0g/dia)

2 4

Converso

TRANSAMINAO DESAMINAO

Constituintes teciduais nitrogenados no proteicos essenciais (Purinas, Pirimidinas, Colina, Creatinina, Niacina, Porfirina, Epinefrina, Tiroxina, c. Biliares, Melanina, Produtos de Desintoxicao, etc.)

Fgado

Amnia Ureia

cetocido Oxidao, etc.

Urina

Glicose, Corpos Cetnicos, etc. Acetil-CoA, ciclo do c.Ctrico CO2+H2O+ATP

Equao de Henderson Hasselbalch pH = pka + log [A] / [HA]

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Esta equao pode ser usada para calcular o pH de uma soluo contendo um cido fraco, aps a adio de um cido ou base fortes. Tambm pode ser usada para prever as formas inicas dos aminocidos. til para calcular como o pH de solues fisiolgicas (Ex.: sangue ou lquido intracelular) responde s alteraes na concentrao de cidos fracos e/ou sua forma salina correspondente. Por ex.: No sistema tampo do bicarbonato, a equao de Henderson Hasselbalch prev como as alteraes de concentrao influenciam o pH. Ela poder prever alteraes no pH medida que as concentraes de HCO-3 ou CO2 so alteradas ou as formas inicas das drogas. A equao tambm til para calcular a abundncia de formas inicas de drogas cidas e bsicas. Por ex.: a maioria das drogas so cidos fracos ou bases fracas. As drogas cidas (HA) liberam um prton (H+), levando formao de um nion carregado (A-). HA H+ + A-

As bases fracas (BH+) tambm podem liberar um H+; entretanto, a forma protonada das drogas bsicas usualmente carregada, e a perda de um prton produz a base sem carga (B). BH+ B + H+

Uma droga passa atravs das membranas mais facilmente se est sem carga. Assim, em um cido fraco, o HA sem carga pode permear-se atravs das membranas, e o A- no. Em uma base fraca, a forma sem carga, B, penetra atravs da membrana celular, e a BH+ no. Assim, a concentrao efetiva da forma permevel de cada droga em um stio de absoro determinada pela concentrao relativa das formas carregadas e descarregadas. A proporo entre as duas formas determinada pelo pH no stio de absoro e pela fora do cido ou base fracos, que representado pelo pka do grupo ionizvel. A equao de Henderson-Hasselbalch til para determinar qual a uantidade de droga encontrada em cada lado de uma membrana que separa dois compartimentos que diferem em pH, como, por exemplo, o estmago (pH 1,0 1,5) e o plasma sanguneo (pH 7,4). Propriedades cido-Bsicas dos Aminocidos e Protenas As protenas adquirem propriedades inicas em virtude das cadeias laterais dos aminocidos que as compem. Muitas dessas cadeias laterais podem ionizar-se e agir como cidos fracos. Dependendo do pK do grupo funcional da cadeia lateral, essa ionizao pode produzir uma carga positiva ou negativa. Formas Ionizadas dos Aminocidos

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Se um grupo funcional sofre dissociao ou protonado, depende do pH da soluo. A equao de Henderson-Hasselbalch descreve a quantidade de ionizao (proporo de dissociao para protonado) para cada grupo funcional individual, desde que cada um tenha seu valor de pKa e ionize-se independentemente dos outros.

A curva de titulao da alanina mostra a dissociao independente de seus dois grupos funcionais: o grupo -amino e o grupamento -carboxila. A curva de titulao da esquerda para a direita ilustra a mudana do estado de ionizao da alanina, assim como tambm descrito da direita para a esquerda na reao abaixo: H HOOC C NH3+ CH3 At pH 1,0 H+ H+
-

H OOC C NH3+ CH3 At pH 6,0

H+
-

H OOC C NH2 CH3 At pH 11,0

H+

Conforme os prtons vo sendo removidos da molcula, eles so primeiramente removidos do grupo carboxila, j que esse tem o menor pK (pKa = 2,3). Quando o pH aumenta em direo ao pK do grupamento amina (pKa = 9,9), esse ento perde seus prtons. Cada pKa representa o ponto mdio de

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dois equilbrios, ilustrando que os aminocidos (e protenas) tm capacidade de tamponamento. No pH 7,0, as cadeias laterais ionizveis de aminocidos em protenas apresentam cargas caractersticas: Carregadas positivamente: lisina, arginina. Carregadas negativamente: aspartato, glutamato. A histidina torna-se carregada positivamente se pH for inferior a 6,0. A cistena torna-se carregada negativamente se pH for maior que 8,0. pH Isoeltrico O total de cargas de um aminocido ou de uma protena equivale soma de todas as cargas das cadeias laterais de cada aminocido. O valor do pH que produz um total de carga igual a zero (neutra) na molcula denominado pH isoeltrico, ou pI. Se o pH > que pI, o total de cargas no aminocido (ou protena) ser negativo. Se o pH < que pI, o total de cargas no aminocido (ou protena) ser positivo. As protenas no se deslocam em um campo eltrico quando o pH do sistema tampo igual ao seu ponto isoeltrico, pois elas no possuem carga para serem atradas para o catodo ou para o anodo.

CONTEXTUALIZANDO Fenilcetonria e Erros Inatos do Metabolismo As mutaes que levam a deficincias em enzimas so normalmente referidas como erros inatos do metabolismo, uma vez que envolvem defeitos no DNA dos indivduos afetados. Os erros em enzimas que catalisam reaes de aminocidos tm frequentemente consequncias desastrosas, que levam a formas graves de retardo mental. A fenilcetonria um exemplo bem conhecido. A fenilalanina, o fenilpiruvato, o fenilactato e o fenilacetato acumulam-se no sangue e na urina. H evidncias disponveis que sugerem que o fenilpiruvato, que uma fenilcetona, causa retardo mental pela sua interferncia na converso do piruvato em acetil-CoA (um intermedirio importante em muitas reaes bioqumicas) no crebro. tambm provvel que o acmulo desses produtos nas clulas cerebrais resultem em um desequilbrio osmtico, fazendo com que a gua flua para dentro das clulas cerebrais. Elas ento aumentam de tamanho at comprimirem-se umas contra as outras no crebro em desenvolvimento. Nos dois casos, o crebro no est

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apto a desenvolver-se normalmente. O teste do pezinho como se pode fazer o diagnstico da doena. A partir da descoberta o aminocido fenilalanina deve ser limitado quantidade necessria para a sntese de protena. (Retirado de Campbell, M. K. Bioqumica, 3 ed. Artmed Editora LTDA, 2000.p. 113.)

ATIVIDADES DE AVALIAO 1. Escrever a frmula bsica caracterstica de um aminocido. Dar exemplos de: a. aminocido com um grupo amino e dois grupos carboxlicos. b. aminocido com um grupo carboxlico e dois grupos amino. 2. Definir Ponto Isoeltrico (pI) de um aminocido. 3. Analisando o grupo R, classificar os aminocidos em polares e apolares. Entre os polares, citar aqueles que, em pH 7, apresentam grupo com carga negativa (aminocidos cidos), carga positiva (aminocidos bsicos) e carga nula (polares sem carga). 4. Esquematizar a ligao peptdica. 5. Definir Protenas Globulares e Fibrosas. Citar exemplos. 6. Definir estrutura primria. 7. Descrever as estruturas regulares -hlice e folha pregueada que compem a estrutura secundria das protenas globulares. 8. Definir estrutura terciria de protenas globulares. Esquematizar os tipos de ligaes que a mantm, indicando os aminocidos que participam dessas ligaes. 9. Definir estrutura quaternria de protenas globulares. Citar exemplos de protenas com estrutura quaternria. 10. Verificar a posio dos radicais polares e apolares de uma protena em soluo aquosa. 11. Definir ponto isoeltrico de uma protena e indicar como pode ser determinado. 12. Definir desnaturao de uma protena e descrever a ao do pH extremo e temperatura sobre a estrutura das protenas.

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13. Citar 04 exemplos de protenas com funo no-enzimtica. 14. Em que diferem as pontes de hidrognio da estrutura secundria e terciria de protenas globulares? 15. Discutir a seguinte afirmao: a estrutura primria de uma protena determina a sua estrutura terciria. 16. Para o tripeptdeo: Ala Lys Ser: a. Classificar os aminocidos segundo o grupo R b. Esquematizar as ligaes que estes aminocidos poderiam formar na estrutura terciria de uma protena. 17. Defina protenas cidas e protenas bsicas. Fale sobre o pI de cada uma. 18. O que renaturao de protenas? 19. Fale sobre eletroforese. 20. Fale sobre o que ocasiona a doena conhecida como anemia falciforme. 21. Explique a origem do nome -aminocido. 22. Usando as seguintes formas para um -aminocido, relacione-as com os seus respectivos pHs. NH3+ H C COO-; R NH2 H C COO-; R pH 1; pH 7 e pH 11 23. Uma cadeia peptdica possui um sentido porque seus componentes tm extremidades diferentes, isto , os grupamentos -carboxila. Quem, por conveno, inicia a cadeia peptdica? 24. Que so grupos prostticos? E centros alostricos? 25. Escreva a frmula estrutural geral de um L-aminocido e de um Daminocido. 26. Qual o primeiro e o ltimo aminocido encontrado? 27. Cite a classificao dos aminocido quanto cadeia lateral. 28. Cite as principais propriedades fsicas e qumicas dos aminocidos que concordam com sua representao zwiterinica. NH3+ H C COOH R

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29. O cido Glutmico possui pK1 = 2,2; pK2 = 9,7 e pKr = 4,2: a) Represente as reaes de equilbrio entre as diversas formas do cido glutmico, nos pHs correspondentes aos pK1, pK2 e pKr. Determine a carga eltrica lquida para cada um desses pHs. b) Calcule o ponto isoeltrico do cido glutmico. c) Fazendo-se passar uma corrente eltrica numa soluo de cido glutmico em pH 1,0, para que polo devero migrar as formas inicas presentes em soluo? 30. Com relao titulao de 50 ml de uma soluo de glicina 0,2 N na forma totalmente protonada (H3NCH2COOH), pK1= 2,34 pK2 = 9,6 ) com NaOH 0,1N, responda: a) Que volume de NaOH necessrio para titular o grupo alfa-COOC da glicina ? b) Quanto de NaOH necessrio para titular o grupo alfa-NH3 da glicina? c) Que volume de NaOH necessrio para que a glicina fique com carga eltrica igual a zero ? Neste ponto qual o pH da soluo e qual a frmula inica da glicina? 31. Um peptdeo com 24 resduos de aminocidos est unido por quantas ligaes peptdicas? 32. Descreva a estrutura do aspartame. 33. Mostre como ocorre a ligao peprtdica. 34. Faa a estrutura de um tripeptdeo constitudo por uma alanina-histidinavalina. 35. Explique o processo de desnaturao das protenas. 36. Cite trs diferenas entre protenas fibrosas e globulares. 37. Que importantes diferenas existem entre as estruturas proteicas em alfahlice e beta- pregueada? 38. Comenta-se que a diferena entre a seda e a l a diferena entre suas estruturas helicoidais e da folha pregueada. Voc considera esse ponto de vista vlido? Justifique. 39. Cite duas semelhanas e diferenas entre a hemoglobina e mioglobina.

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Bibliografia Comentada Campbell, M. K. Bioqumica. 3 ed. Porto Alegre: Artmed Editora, 2000. Aminocidos e Peptdeos so apresentados e comentados de forma muito didtica no Captulo 3, da Parte 2, desse livro. Champe, P. C. Bioqumica Ilustrada. 4 Ed. Porto Alegre: Artmed, 2009. Na Unidade I do livro so apresentados os tpicos: Aminocidos (Captulo I), Estrutura das Protenas (Captulo II), Protenas Globulares (Captulo III) e Protenas Fibrosas (Captulo IV). O livro ricamente ilustrado tornando o assunto de fcil compreenso. Mahan, K.; Escott-Stump. Alimentos, nutrio & dietoterapia. So Paulo: Roca, 2005. Aminocidos e Protenas foram comentados na Parte I (Princpios Nutricionais) Captulo 3, que trata dos macronutrientes carboidratos, protenas e lipdios. Marzzoco, A.; Torres, B. B. Bioqumica Bsica. 2 Ed. Rio de Janeiro: Ed. Guanabara Koogan S. A., 1999. Os autores apresentam aminocidos e protenas na Parte 1 de seu livro no Captulo 2, comentando amplamente sobre o assunto. LEITURAS, FILMES E SITE RECOMENDADOS: o o o www.fotosearch.com.br/video-filme/protenas.html Filme: FOME (HUNGER) 2008 Filme: GARAPA (JOS PADILHA) - 2009

CAPTULO 5: ENZIMAS
OBJETIVOS: Estudar um tipo mais especfico de protenas, as enzimas, biocatalizadores naturais, produzidos por vrias glndulas do organismo animal e vegetal. Conhecer o mecanismo de uma reao enzimtica. Caracterizar os tipos de enzimas, seus mecanismos e aplicaes, de modo que o aluno saiba identificar uma enzima em um processo biolgico. Quase todas as enzimas conhecidas so PROTENAS, (com exceo de molculas de RNA que agem como enzimas, catalisando processos). A catlise

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a atividade mais importante das enzimas. Elas so catalisadores de sistemas biolgicos, dispositivos moleculares que determinam o perfil de transformaes qumicas e participam na transformao de diferentes formas de energia. Na ausncia de catlise, a maioria das reaes nos sistemas biolgicos ocorreria de forma extremamente lenta para fornecer produtos necessrios ao metabolismo de um organismo. Caractersticas mais Importantes 1. Poder cataltico As enzimas aceleram as reaes por fatores de 1.000.000 vezes, ou como catalisadores aumentam de vrias ordens de grandeza a velocidade das reaes que catalisam. 2. Especificidade Por serem altamente especficas, as enzimas selecionam, entre todas as reaes potencialmente possveis, aquelas que efetivamente iro ocorrer. A especificidade das enzimas chega ao ponto de distinguir estereoismeros de um determinado composto. Atuao das Enzimas na Cintica das Reaes As enzimas atuam na cintica das reaes acelerando a velocidade da reao por diminuir sua energia de ativao. A velocidade de uma reao proporcional concentrao de uma substncia. Ex.: Converso irreversvel de A em B: V = K [A] onde K = constante de velocidade da reao uma reao de 1 ordem, j que a velocidade depende da concentrao do reagente A com expoente 1. A maior parte das reaes qumicas nos organismos envolve no mnimo trs molculas diferentes e so geralmente reversveis. So de 2 ordem: 2A V = K [A]2 ou V = K [A] [B] Teoria das Colises A Teoria das Colises explica o fato acima. Para reagirem, as molculas presentes em uma soluo devem colidir com orientao apropriada e a coliso deve lev-las a adquirir certa quantidade de energia que lhes permita atingir o estado de transio. Para levar todas as molculas de um mol de uma substncia at o estado de transio, necessita-se de uma quantidade de energia chamada Energia de Ativao. Pode-se dizer que Energia de B + C ou A + B C+D

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Ativao a energia que separa os reagentes dos produtos. A velocidade de uma reao ser diretamente proporcional ao n de molculas com energia igual ou maior que a Energia do Estado de Transio. A velocidade das reaes pode ser aumentada: 1. Aumentando-se o n de molculas em soluo, ou seja, sua concentrao. 2. Aumentando-se a populao de molculas com energia necessria para reagir, o que pode ser obtido pela elevao de temperatura uma vez que um n maior de molculas atingir a energia de ativao e a velocidade aumentar. 3. Diminuindo a barreira da Energia de Ativao, pois com esta diminuio, mesmo mantida a temperatura inicial, um n maior de molculas estar em condies de reagir. Essa reduo obtida pela presena de catalisadores. Eles so substncias que aceleram a velocidade de uma reao, sem alterar a proporo entre reagentes e produtos encontrada no final da reao e sem serem efetivamente consumidos durante o processo. A Eficincia da Catlise Enzimtica As enzimas, como todos os catalisadores, aceleram reaes, mas no podem alterar a constante de equilbrio ou a variao de energia livre. A velocidade de uma reao depende da energia livre de ativao, ou energia de ativao (G), fornecimento da energia necessria para iniciar a reao. A energia de ativao para uma reao no catalisada maior do que a de uma reao catalisada. Em outras palavras, pode-se dizer que uma reao no catalisada necessita de mais energia para ser iniciada e, por este motivo, sua velocidade menor que a da reao catalisada. Dessa forma, pode-se dizer que os catalisadores criam um novo caminho para a reao, com um novo estado de Transio que requer uma Energia de Ativao menor. Em uma reao, no caso da catlise enzimtica, os reagentes so chamados substratos. As enzimas apresentam propriedades mais interessantes para as clulas que os catalisadores inorgnicos. Interao Enzima Substrato As enzimas so macromolculas proteicas. Embora o total da molcula enzimtica seja necessrio para o papel cataltico, a ligao com o substrato d-se apenas em uma regio pequena e bem definida da enzima. Esta regio chama-se Centro Ativo ou Stio Ativo da Enzima. O Centro Ativo formado por resduos de aminocidos, trazidos proximidade uns dos outros pelos dobramentos da cadeia polipeptdica que definem a estrutura terciria da protena. O centro ativo, assim organizado, constitui uma cavidade em forma definida que permite enzima reconhecer seu substrato. De fato, uma molcula, para ser aceita como substrato, deve ter a forma espacial adequada

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para alojar-se no centro ativo e grupos qumicos capazes de estabelecer ligaes precisas com os radicais do centro ativo.

Classificao das Enzimas e os Tipos de Reaes que Catalisam Classe

1.xido-Redutases xido-Reduo AH2 + B 2. Transferases AX+B 3. Hidrolases Hidrlise A B + H2O 4. Liases A H + B OH A + BH2 A+BX

Tipo de Reao

Transferncia de Grupos

Adio de grupos a duplas ou remoo de grupos deixando duplas. X Y A=B+XY

AB

5. Isomerases

Rearranjos Intramoleculares AB AB

Y X 6. Ligases

Condensao de duas molculas, associada hidrlise de uma ligao de alta energia (em geral, do ATP) A+B AB

Exemplos de Especifidade das Enzimas Enzimas Proteolticas so especficas para hidrlise de protenas. A pepsina uma enzima proteoltica que hidrolisa ligaes peptdicas dos quais participam grupos carboxlicos de aminocidos aromticos como Triptofano, Fenilalanina e Tirosina, enquanto a tripsina uma enzima proteoltica que reconhece apenas ligaes peptdicas formadas por arginina ou lisina. Graus extremos de especificidade so encontrados entre as enzimas L-aminoxidases, que so capazes de reconhecer ismeros na configurao L, sendo inativas para os aminocidos na forma D. pH e Temperatura Interferem na Atividade Enzimtica A maioria das enzimas apresenta um valor de pH para o qual a sua atividade mxima. A velocidade da reao diminui medida que o pH se afasta desse valor timo, que caracterstico para cada enzima. O pH timo depende do n e tipo de grupos ionizveis que a enzima apresenta, e da

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sequncia em que esto organizados, ou seja, depende da sua estrutura primria. A eficincia da catlise depende de encontrarem-se, enzima e substrato com conformao e carga adequadas para permitir a interao. Com relao Temperatura: A 0 C: a velocidade da reao enzimtica prxima de zero. Aumentando-se a temperatura, h aumento de velocidade, porm isto s ocorre enquanto a enzima conservar sua estrutura original. Acima de 50 - 55C: a maioria das protenas globulares (enzimas tambm) so desnaturadas, havendo alteraes nas molculas e havendo tambm perda do poder de catlise. Cintica Enzimtica em Termos Matemticos A velocidade de uma reao qumica normalmente expressa em termos de variao na concentrao de um reagente ou de um produto em um determinado intervalo de tempo. Em uma reao do tipo: A B V = K [A],

pode-se dizer que a reao catalisada ocorre em duas etapas: 1. A Enzima (E) liga-se reversivelmente ao Substrato (S), formando um complexo Enzima Substrato (ES). 2. O Produto (P) liberado e a enzima volta forma livre, podendo ligarse a outra molcula de substrato. Outro exemplo em uma reao: A + B C+D A e B devem ligar-se simultaneamente ao centro ativo, onde ocorre a reao, com liberao dos produtos C e D. Estudando a Cintica Enzimtica Partindo de uma reao S produto: P (onde h apenas um substrato e um

K1 E+S K2 ES K1 E+S K2 ES K3 E+P K3 E+P ES

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A formao do complexo ES ocorre numa velocidade maior que a sua decomposio e as equaes de velocidades correspondentes sero: V1= K1[E] [S] V3= K3[ES] Onde K1 > K2 > K3

Logo, a velocidade da reao global, ou seja, a velocidade da formao do produto igual a V3, j que esta a etapa mais lenta e limitante do processo. K1 E+S K2 ES Keq = __[ES]_____ = __K1____ [E] [S] K2

Quando o equilbrio da 1 etapa est estabelecido com 50% das enzimas sob a forma livre, haver 50% das enzimas na forma ES. Nestas condies a V ser V Mxima. Quando V=1/2 da V MX. 50% das enzimas est livre e 50% das enzimas na forma ES (o equilbrio da 1 etapa fica estabelecido) Nesta situao: [S] = KM (constante de MichaelisMenten)

KM indica a afinidade que uma enzima apresenta pelo seu substrato. Comparao de KM:

KM = [ S] indica que 50% dos stios ativos esto ocupados pelo substrato. Ex1: A enzima Lactato Desidrogenase (LDH) do msculo cardaco tem um KM elevado, logo tem baixa afinidade por Piruvato. EX2: A LDH do msculo esqueltico tem um KM baixo, logo tem alta afinidade por Piruvato. Isto significa que o Piruvato ser preferencialmente convertido a Lactato no msculo esqueltico, mas no cardaco ser preferencialmente usado no metabolismo aerbico, ao invs de ser convertido a Lactato. CONSIDERAES SOBRE A EQUAO DE MICHAELIS-MENTEN KM = [S]

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A constante de Michaelis-Menten numericamente igual [S] que determina a metade da VELOCIDADE MXIMA. O valor de KM pode identificar o grau de afinidade da ensina pelo substrato. Quando [S] muito inferior KM, ou seja KM + [S] praticamente igual KM, conclui-se que: Com [S] pequenas, a velocidade de reao diretamente proporcional [S]. Quando a [S] muito maior que KM, ento: KM + [S] = [S] Isto indica que quando [S] muito elevada, a velocidade da reao constante e mxima, independendo da [S]. Enzimas Alostricas ou Reguladoras As propriedades cinticas de muitas enzimas no podem ser explicadas pelo modelo de Michaelis-Menten. Um importante grupo constitudo das Enzimas Alostricas. Nas enzimas alostricas, a ligao do substrato a um centro ativo pode afetar as propriedades dos outros centros ativos, na mesma molcula de enzima. As enzimas alostricas so sempre oligomricas, com stios reguladores e catalticos topologicamente distintos. A caracterstica cintica das Enzimas Alostricas a relao atpica entre a atividade e a concentrao do substrato. At aqui foi estudado o caso de enzima em que a ligao de uma molcula de substrato no tem efeito nas constantes de dissociao intrnsecas dos stios vagos. Elas tm, neste caso, curvas de velocidade hiperblicas. Porm, se a ligao de uma molcula de substrato induz modificao estrutural ou eletrnica que resulta em afinidades alteradas dos stios vagos, a curva de velocidade no seguir mais a cintica de Michaelis-Menten e a enzima ser chamada alostrica. As enzimas alostricas normalmente apresentam uma curva de velocidade sigmoide. PERFEIO CATALTICA Algumas enzimas esto prximas da perfeio cataltica. Kcat = V MX [ETotal] Sendo: Kcat = A constante cataltica que mede para uma dada concentrao de enzima, a eficincia mxima obtida em condies de V mx, quando todas as enzimas esto complexadas com o substrato. Kcat tambm conhecida como n de renovao (turnover number) da enzima, porque equivale ao n mximo de molculas de substrato que um centro ativo converte em produto por segundo. Ela indica a rapidez com que

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uma enzima opera, quando todos os centros ativos esto ocupados. Em outras palavras pode-se dizer que Kcat evidencia com que eficincia o complexo enzima-substrato origina produto. Associando-se o valor de Kcat ao valor de KM, possvel definir-se uma nova constante Kcat/KM que pode relacionar a eficincia cataltica da enzima com a sua afinidade pelo substrato. Quando a relao Kcat/KM tiver um valor baixo significa que a enzima tem pouca afinidade pelo substrato (logo K M) ou baixa eficincia em gerar produto a partir do complexo ES, ou pelas duas razes. Quando Kcat/KM for um valor alto significa que a enzima tem alta eficincia em transformar ES em produto (logo K cat ) e portanto alta afinidade pelo substrato ( KM) So exemplos de enzimas com alta eficincia: Acetilcolinesterase (transmisso do impulso nervoso), Anidrose carbnica (remoo de CO 2 dos tecidos) Catalase e Superxido dismutase (remoo de radicais livres do oxignio). Um exemplo de enzima com pouca eficincia: Pepsina.

HIPERTEXTO Uma enzima particularmente til para exames a acetilcolinesterase (AChE), que importante no controle de certos impulsos nervosos. Muitos pesticidas interferem com essa enzima, portanto, agricultores deveriam ser frequentemente testados para se ter a certeza de que eles no estariam sendo inapropriadamente expostos a essas substncias txicas importantes para a agricultura. Na verdade, existem mais de 20 enzimas que so tipicamente usadas em laboratrios clnicos para o diagnstico de doenas. Existem marcadores altamente especficos para enzimas ativas no pncreas, nas hemcias, no fgado, no corao, no crebro, na prstata e em muitas glndulas endcrinas. Uma vez que essas enzimas so relativamente fceis de se medir, inclusive por meio da utilizao de tcnicas automatizadas, elas fazem parte dos exames de sangue de rotina que o mdico pode requisitar (Campbell & Farrel, 2011, p. 144). INIBIDORES ENZIMTICOS So responsveis pela diminuio da atividade enzimtica. Como a ao enzimtica controla o metabolismo, muitos medicamentos baseiam suas propriedades na inibio de certas enzimas, como, por exemplo, as Sulfonamidas, que combatem infeces bacterianas. O medicamento age inibindo uma enzima bacteriana que no existe no organismo do hospedeiro. As propriedades txicas de alguns inibidores so usadas no combate aos insetos. Os inibidores podem ser Irreversveis e Reversveis, segundo a estabilidade de sua ligao com a molcula de enzima.

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Inibidores Irreversveis Reagem quimicamente com as enzimas, levando a uma inativao definitiva. Um bom exemplo so os compostos organofosforados. Eles formam ligaes covalentes com o grupo OH de resduos do aminocido serina ou de iodoacetamida que reage com o grupo SH de resduos do aminocido cistena. O E CH2 SH + n Resduo de cistena ICH2 C NH2 Iodoacetamida O E -CH2 S CH2 C NH2 + HI

Outro exemplo de Inibidor Irreversvel a aspirina (cido AcetilSaliclico). Atua como antiinflamatrio, antipirtico e analgsico. Transfere irreversvelmente seu grupo acetil para o grupo OH de um resduo de serina da molcula da enzima Cicloxigenase, inativando-a. Esta enzima a responsvel pela catlise da 1 reao da via de sntese das prostaglandinas (substncias reguladoras de um conjunto de processos fisiolgicos). Sem a ao das prostaglandinas, processos como a reao inflamatria, ficam atenuados. Outro Inibidor irreversvel a penicilina. Ela se liga a enzimas da via de sntese da parede bacteriana, inibindo-as. Desprovidas de parede, as clulas ficam sujeitas lise. Inibidores Reversveis Podem ser: Competitivos e No-Competitivos. Os Inibidores competitivos competem com o substrato pelo centro ativo da enzima. Certas molculas porque apresentam configurao espacial semelhante do substrato, so capazes de ligarem-se ao centro ativo da enzima, produzindo um complexo enzima-inibidor semelhante ao complexo Enzima-Substrato. So os Inibidores Competitivos Ic. E + Ic EIc

O complexo EIc jamais gera produto, logo a atividade enzimtica decresce. Os inibidores competitivos so muito empregados por sua atividade teraputica, j que inibem reaes que ocorrem especficamente ou principalmente no organismo parasita, vrus ou bactria. Um exemplo importante o medicamento AZT, que o inibidor da DNA polimerase (transcriptase reversa), necessria para a replicao do vrus HIV, causador da AIDS. Outros exemplos de Inibidores competitivos so tambm usados na quimioterapia de tumores e de leucemias. Aqui, a clula tumoral comportase como o agressor do organismo e tem metabolismo diferente do da clula normal sob vrios aspectos, inclusive uma velocidade de multiplicao muito maior. As drogas que afetam reaes enzimticas normais e imprescindveis s clulas em geral agiro preferencialmente sobre as clulas tumorais; porm

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tambm atingiro alguns tecidos normais que se dividem rapidamente, como a medula ssea (que produz as clulas sanguneas), a mucosa intestinal e os folculos capilares. O alvo de escolha para ao dessas drogas a replicao do DNA, em suas vrias etapas. Inibidores no-Competitivos (INc) No tm semelhana estrutural com o substrato da reao que inibem e seu efeito deve-se ligao a radicais que no pertencem ao centro ativo; esta ligao altera a estrutura enzimtica inviabilizando a catlise. O ponto de ligao do inibidor no-competitivo (INC) a cadeia lateral de um aminocido, por exemplo: o grupo OH da serina ou o SH da cistena. Tm ao inespecfica, podendo atuar sobre grande nmero de enzimas (diferente do que ocorre com os Ic). E + INc

E - INc

Diferena entre INC e Irreversvel Nos inibidores irreversveis, uma molcula enzimtica ligada ao inibidor est definitivamente inativada. Nos inibidores reversveis no-competitivos, (INc) uma molcula de enzima, que, em um instante, est ligada ao inibidor (inativa), pode tornar-se ativa, ao ficar livre do inibidor, em um momento seguinte. Exemplos de INc so os metais pesados como Hg2+, Pb2+, Ag+ que reagem com os grupos SH das protenas. So altamente txicos. Antimetablitos ou Anlogos de Substratos Tm frmula estrutural semelhante aos substratos naturais e, ao contrrio dos inibidores competitivos, ligam-se ao centro ativo e geram produtos. No entanto, os produtos gerados por eles so diferentes do produto gerado pelo substrato e no prosseguem na sequncia metablica normal, por no serem aceitos como substrato pela enzima seguinte, por serem instveis ou por qualquer outro mecanismo. A via metablica sobre a qual interferem fica, portanto, interrompida. Muitos antimetablitos ocorrem naturalmente, sendo muitas vezes mecanismo de defesa de vegetais contra a ingesto de suas folhas e sementes por insetos, pssaros e mamferos. Um grande n de quimioterpicos constitudo por anlogos de substratos, particularmente utilizados no tratamento do cncer. Regulao da Atividade Enzimtica Ocorre basicamente por controle da disponibilidade de enzimas exercido sobre as velocidades de sntese e de degradao das enzimas, que determinam sua concentrao celular e por controle da atividade da enzima, efetuado por mudanas estruturais da molcula enzimtica e que redundam em alteraes da velocidade de catlise. Algumas enzimas tornam-se funcionais

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atravs de outros processos de ativao. Certas enzimas so sintetizadas na formas de precursores inativos, chamados zimognios. necessrio que haja hidrlise de certas ligaes peptdicas e remoo de um segmento da cadeia de aminocidos para que um zimognio adquira propriedades de enzima. Dessa forma a cadeia polipeptdica que resta assume uma nova estrutura espacial onde , ento, organizado um centro ativo funcional. Exemplos de enzimas sintetizadas como zimognios so a pepsina e a quimiotripsina. Cofatores So denominados Cofatores molculas ou ons que se associam a um grande nmero de enzimas para que elas possam exercer seu papel cataltico. Eles podem ser ons metlicos ou molculas orgnicas, no-proteicas, de complexidade variada, que recebem o nome de coenzimas. Os ons metlicos ligam-se aos radicais de aminocidos de cadeia proteica ou esto presentes em grupos prostticos. As enzimas atuam como aceptores de tomos ou grupos funcionais retirados do substrato em uma dada reao e como doadores destes mesmos grupos ao participarem de uma outra reao. Por isto diz-se que so transportadoras de determinados grupos. Durante a catlise, coenzima e substrato acham-se alojados no centro ativo da enzima, consistindo a reao na remoo de determinado grupo qumico do substrato e sua transferncia para a enzima, ou vice-versa. Em alguns casos, a coenzima encontra-se ligada covalentemente molcula enzimtica, constituindo, portanto, um grupo prosttico da protena; em outros casos, a coenzima uma molcula livre, reunindo-se enzima apenas no momento da catlise. A estrutura qumica de uma coenzima bastante varivel. Algumas como a Adenosina Trifosfato (ATP) e a Guanina Trifosfato (GTP) so completamente sintetizadas pelas clulas. Outras apresentam um componente orgnico que no pode ser sintetizado pelos animais superiores. Deve ser obtido atravs da dieta, constituindo uma vitamina. As vitaminas so necessrias na dieta em pequenas quantidades j que so precursores de coenzimas. As vitaminas so divididas em Hidrossolveis e Lipossolveis. As Hidrossolveis incluem as vitaminas do complexo B: tiamina (B1), riboflavina (B2), cido pantotnico (B3), nicotinamida (B5), piridoxina (B6); biotina (B7), cido flico (B9), cobalamina (B12) e o cido ascrbico (vitamina C). As vitaminas lipossolveis so: A, D, E, K. So as vitaminas hidrossolveis as que tm funo de coenzimas ou fazem parte de molculas de coenzimas.

CONTEXTUALIZANDO Algumas enzimas so encontradas somente em tecidos especficos ou em um nmero limitado de tecidos. A enzima lactato-desidrogenase (LDH)

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apresenta-se de duas formas diferentes, chamadas de isoenzimas, no corao e nos msculos. As duas formas diferenciam-se discretamente na composio de aminocidos e podem ser separadas com base nas cargas resultante dessa diferena. Uma vez que a LDH um tetrmero de quatro subunidades, ela tambm pode existir em cinco diferentes formas, dependendo da origem das subunidades. Um aumento de qualquer forma de LDH no sangue indica algum tipo de dano tecidual. Um ataque cardaco poder ser diagnosticado com certeza se houver um aumento da forma cardaca do LDH. De modo similar, existem diferentes formas da creatina-quinase (CK), uma enzima que se encontra no crebro, no corao e no msculo esqueltico. O aparecimento da forma cerebral pode indicar um acidente vascular cerebral ou um tumor no crebro, ao passo que o tipo cardaco indica o infarto. Depois de um ataque cardaco, a CK aparece no sangue mais rapidamente do que a LDH. A monitorao da presena de ambas as enzimas permite melhorar a possibilidade de diagnstico, o que muito til, uma vez que um ataque cardaco brando pode ser difcil de ser diagnosticado. Um nvel elevado da isoenzima cardaca no sangue uma indicao segura de dano no tecido cardaco (Campbell & Farrel, 2011, p. 144).

HIPERTEXTO A rubisco ou RuBisCO (ribulose-bisfosfato carboxilase oxigenase, a enzima mais abundante nas plantas e, por conseguinte, a protena mais abundante no planeta. Esta enzima capta o dixido de carbono procedente do ar e um acar existente na clula chamado RuDP (ribulose 1,5-difosfato ou RuBP - ribulose bis-fosfato). A reaco entre estes dois reagentes d origem a duas molculas do acar PGA (fosfoglicerato). A RuBisCO assim responsvel pelo importante primeiro passo do ciclo de Calvin e em concreto pela fixao do dixido de carbono na sua forma orgnica. importante dizer que a reao pode acontecer tanto com dixido de carbono quanto com oxignio molecular (O2). Quando o oxignio absorvido, o processo faz parte da respirao celular, sem absoro de carbono. Algumas plantas (por volta de 5% das plantas existentes na Terra) utilizam um processo intermdio e mais seletivo para absoro do dixido de carbono, evitando o contato direto com o oxignio do ar tpico do "processo rubisco" (s vezes chamado C3), com o processo chamado C4 ou o CAM ("Crassulacean acid metabolism"). O C4 usa estruturas dentro da clula e um sistema bioqumico de transporte que envolve molculas com quatro tomos de carbono (por isso C4). O CAM usado por plantas em ambientes muito ridos, em que os estmatos s abrem noite, a fim de economizar gua, que se perderia por evaporao, se estes ficassem abertos durante o dia. Assim, noite, absorvem o dixido de carbono em molculas de quatro carbonos que ficam armazenadas em vacolos para serem utilizadas durante o dia.

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Os processos C3, C4 e CAM tm vantagens e desvantagens. O C3 mais direto, gastando cerca de 18 ATPs para fixar cada molcula de dixido de carbono, mas requer concentraes mais altas de dixido de carbono e gua. O C4 requer mais estruturas e mais energia (30 ATPs), porm trabalha com concentraes de dixido de carbono mais baixas na atmosfera e mais apropriado para ambientes secos. O CAM usado em ambientes predominantemente ridos, mas fixa pouco dixido de carbono, levando a taxas de crescimento da planta baixas.

ATIVIDADES DE AVALIAO 1. Considerando a reao A B, no catalisada: a) Definir velocidade de reao. b) Escrever a equao de velocidade em funo da concentrao de A. 2. Definir enzima, substrato e stio ativo. 3. Escrever as reaes de formao do produto a partir de E e S. Escrever a equao de velocidade de formao de P.

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4. Fazer o grfico da velocidade da reao S P, catalizada enzimaticamente, em funo da concentrao de S. Descrever os procedimentos experimentais, que levariam obteno dos dados para a construo deste grfico. 5. Analisando o grfico do item 4, verificar, em cada trecho da curva, as concentraes de Enzima livre, substrato e complexo ES. 6. Definir constante de Michaelis-Menten (KM) e mostrar a relao entre seu valor e a afinidade da enzima pelo seu substrato. 7. Definir e dar exemplos de inibidor competitivo e no-competitivo. 8. Definir cofator. Dar exemplos de cofatores inorgnicos (ativadores metlicos) e orgnicos (coenzimas). 9. Definir vitaminas, relacionando sua funo com atividade enzimtica. 10. Caracterizar enzima alostrica. Definir centro alostrico. Qual a diferena entre a curva de velocidade de uma enzima comum e a de uma enzima alostrica? 11. Definir regulao enzimtica por modificao covalente. 12. Representar o grupo ativo de NAD+ e de FAD nas formas reduzida e oxidada. 13 Definir Zimognio. 14 Descreva as enzimas LDH, CK e AChE. Aps um ataque cardaco qual enzima cardaca aparece primeiro: a LDH ou a CK ?

Bibliografia Comentada Campbell, M. K.; Farrel, S. O. Bioqumica. Vol 1. So Paulo: Cengage Learning - 2011. O Comportamento das Protenas: Enzimas o ttulo do Captulo 6 do volume 1 desse livro. So apresentados os tpicos relativos ao assunto e todos comentados de forma muito didtica. Champe, P. C.; Harvey, R. A.; Ferrier, D. R. Bioqumica Ilustrada. 4 Ed. Porto Alegre: Artmed, 2009. Na Unidade I do livro, no Captulo 5, so apresentados os tpicos relativos s Enzimas. O livro ricamente ilustrado tornando o assunto de fcil compreenso. Cooper, Geoffrey M. (2000). "10.The Chloroplast Genome". The Cell: A Molecular Approach (2nd ed.). Washington, D.C: ASM Press.ISBN 0-87893106-6. Mahan, K.; Escott-Stump. Alimentos, nutrio & dietoterapia. So Paulo: Roca, 2005. Enzimas foram comentados no Captulo 1 (Digesto, Absoro, Transporte e Excreo de Nutrientes).

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Marzzoco, A.; Torres, B. B. Bioqumica Bsica. 2 Ed. Rio de Janeiro: Ed. Guanabara Koogan S. A., 1999. Os autores apresentam Enzimas na Parte 1 de seu livro no captulo 5, comentando amplamente sobre o assunto.

LEITURAS, VDEOS E SITE RECOMENDADOS veja.abril.com.br/.../enzima-pode-ser-novo-alvo-na-luta-contra parkinsom. www.not1.com o mal de

CAPTULO 6: CIDOS NUCLEICOS OBJETIVOS: Conhecer as estruturas formadoras do DNA e RNA. Aprender as funes de DNA e RNA. Fazer a diferena entre DNA e RNA. Saber o que o genoma humano. Conhecer a replicao do DNA. Perceber como se d o teste de DNA ou teste de reconhecimento de paternidade. Os cidos nucleicos tm sido objeto de investigao bioqumica desde que foram, pela primeira vez, isolados no ncleo da clula, h mais de 100 anos. Eles ocorrem em todas as clulas vivas, onde no s so responsveis pelo armazenamento e transmisso da informao gentica, mas tambm pela traduo dessa informao, expressa pela sntese precisa das protenas, caractersticas de cada clula. So biopolmeros de alto peso molecular como as protenas, s que, nos cidos Nucleicos, a unidade que se repete o mononucleotdeo. Um nucleotdeo consiste em uma base, uma ose e um ou mais grupamentos fosfato. Os nucleotdeos possuem uma variedade de papis no metabolismo celular. So moedas energticas nas transaes metablicas; os elos qumicos essenciais na resposta das clulas aos hormnios e outros estmulos extracelulares e os componentes estruturais de uma coleo de cofatores enzimticos e intermedirios metablicos, alm claro, de

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constiturem os cidos Nucleicos: cido Desoxirribonucleico (DNA) e cido Ribonucleico (RNA), que so as molculas repositrias da informao gentica. A ose em um desorribonucleotdeo a desoxirribose. O prefixo desoxi indica que nesta ose falta um tomo de oxignio que est presente na ribose, o composto original. A base nitrogenada um derivado de purina ou pirimidina. So as bases das molculas de DNA que levam a informao gentica enquanto seus grupamentos ose e fosfato tm um papel estrutural. Os nucleotdeos formam uma poro de coenzimas, tais como FAD, NAD , NADP+, Coenzima A e SAdenosil-Metionina. As estruturas bsicas do DNA e RNA consistem em cadeias nas quais cido Fosfrico e resduos de acar alternam-se. No RNA, o acar a D-ribofuranose. No DNA, o acar a 2-desoxi-D-ribofuranose. Ligada a todas as unidades de acar, h uma base nitrogenada que pode ser tanto um derivado purnico como pirimidnico. a sequncia de bases nas longas cadeias de acar-fosfato que determina as propriedades biolgicas da molcula.
+

Estrutura dos Nucleotdos Tanto o RNA como o DNA contm as duas purinas, Adenina e Guanina. Vrias bases menos comuns foram encontradas nos RNA de transferncia (RNA transportadores, tRNA). Entre elas, esto a hipoxantina, a 1-metilhipoxantina, 1-metilguanina, e treonilcarbamoiladenina. Tambm a pirimidina Citosina comum ao RNA e DNA, mas, os dois tipos de cidos nucleicos diferem na quarta base nitrogenada, o RNA contm Uracila enquanto o DNA contm Timina. Portanto todos os cidos nucleicos contm adenina, guanina e citosina. O DNA (mas no os RNAs), tambm contm Timina, enquanto os RNAs (mas no o DNA), tambm contm Uracila.

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A estrutura das bases que contm oxignio foi escrita na forma cetnica (ou lactmica). necessrio salientar que h um equilbrio entre as formas cetnicas e enlicas (ou lactmicas) o qual depende do pH do meio. a forma lactmica que predomina na pH fisiolgico. Outras pirimidinas tm sido detectadas em amostras purificadas de DNA; 5-metilcitosina ocorre em DNA isolado do germe do trigo e outras fontes vegetais. Tambm tm aparecido traos dessa base no DNA do timo e em outras fontes, nos mamferos. A citosina substituda pela 5-hidrometilcitosina no DNA de certos vrus bacterianos, principalmente os bacterifagos T que infectam E. coli. Em tRNA, foram encontrados os derivados de pirimidina diidrouracila, pseudouridina e 4-tiouracila. Nucleosdeos A molcula de nucleotdeo sem o grupo fosfato chamada de nucleosdeo. Os nucleotdeos so, portanto, steres de cido Fosfrico dos nucleosdeos. NOMES DOS NUCLEOSDEOS BASE ADENINA GUANINA URACILA CITOSINA TIMINA RIBONUCLEOSDEO ADENOSINA GUANOSINA URIDINA CITIDINA TIMINA RIBONUCLEOSDEO DESOXIRRIBOCUCLEOSDEO 2 DESOXIADENOSINA 2 DESOXIGUANOSINA 2 DESOXIURIDINA 2 DESOXICITTIDINA 2 DESOXITIMIDINA

O resduo de ribose de um ribonucleotdeo tem trs posies (as hidroxilas dos carbonos 2, 3 e 5), onde o fosfato pode ser esterificado, enquanto que o 2-desoxirribonucleosdeo tem somente as posies 3 e 5 disponveis. Todas essas possibilidades podem ser obtidas pela hidrlise parcial de c. Nucleicos por vrios mtodos. Alm disso, vrios componentes celulares so steres 5-fosfato. Um dos mais importantes nucleotdeos que ocorre naturalmente a Adenosina-5-Monofosfato (AMP). Esse composto em conjunto com dois de seus derivados, Adenosina-5-Difosfato (ADP) e Adenosina-5-Trifosfato (ATP) exerce um papel extremamente importante na conservao e utilizao da energia liberada durante o metabolismo celular. O significado fisiolgico desses componentes consiste na sua capacidade de doar e aceitar grupos fosfato em reaes bioqumicas.

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O impedimento estrico pela base heterocclica determina que uma vez formada, no existe liberdade de rotao em torno da ligao -N-glicosdica, que une os acares s purinas ou pirimidinas. Os nucleosdeos e os nucleotdeos, assim, existem como Confrmeros estveis, nointerconversveis, syn e anti, que s podem ser interconvertidas pela ruptura e reformao da ligao da ligao glicosdica. Embora ambos os confrmeros ocorram naturalmente, os confrmeros anti predominam e o confrmero anti de nucleotdeos que participa no pareamento normal das bases na DNA dupla fita. Principais Bases, Nucleosdeos e Nucleotdios
BASE X=H ADENINA A NUCLEOSDEO X=RIBOSE OU DESOXIRRIBOSE ADENOSINA A AMP GUANINA G GUANOSINA G GMP CITOSINA C CITIDINA C CMP URACILA U URIDINA U UMP TIMINA T TIMIDINA T TMP TIMIDINA MONOFOSFATO URIDINA MONOFOSFATO CITIDINA MONOFOSFATO GUANOSINA MONOFOSFATO NUCLEOTDEO XRibose fosfato

ADENOSINA MONOFOSFATO

As abreviaes A, G, C, T e U referem-se s bases adenina, guanina, citosina, timina e uracila, respectivamente, tanto no estado livre, como formando os nucleosdeos ou nucleotdeos. O prefixo d (deoxi) indica que o acar 2-dioxi-D-ribose, ex., dGTP. Os nucleosdeos fosforilados no carbono 3- ou no 5 da ribose so denominados nucleosdeo 3-monofosfato e nucleopdeo 5-monofosfato respectivamente. Ex.: adenosina 3-monofosfato ou

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3-AMP. Contudo, como o 5-hidroxil um produto esterificado dos mais comuns, 5- omitido quando se refere a 5-nucleotdeos. As abreviaes tais como UMP ou AMP, portanto, dizem respeito a nucleotdeos em que o fosfato liga-se, por um grupo ster, ao carbono 5 da pentose. Fosfatos adicionais, unidos por ligaes anidridos de cidos aos fosfatos j existentes em um mononucleotdio, formam nucleosdeos di - e trifosfatos, tais como ADP (adenosina difosfato) e ATP (adenosina trifosfato). OBS: Um nmero com apstrofo indica um tomo da ribose ou da desoxirribose, enquanto um nmero sem apstrofo indica um tomo de anel de purina ou pirimidina. Os mono, di e trifosfato de adenosina j foram descritos. Existem derivados correspondentes de guanosina, citidina e uridina, assim como de desoxiadenosina, desoxicitidina, e desoxitimidina que exercem funes importantes no metabolismo celular. Por exemplo, os nucleosdeos 5-trifosfato servem como precursores da sntese de RNA e DNA. Derivados de certos nucleosdeos 5-difosfato agem como coenzimas, fornecendo resduos de acares em certas reaes; outros derivados de adenosina 5-difosfato participam de reaes de xido-reduo. Assim, uridina 5-disfosfato, ligada glucose, serve como doador de glucose. Adenosina 5-disfosfato, ligada nicotinamida, forma uma coenzima de xido-reduo extremamente importante, a nicotinamida adenina dinucleotdeo, NAD+. DNA e RNA Em clulas procariticas, o DNA normalmente ocorre sob forma de um anel composto de uma fita dupla extremamente torcida, parcialmente associado com a poro interna da membrana plasmtica, mas livre de complexos proteicos. Ao contrrio, cerca de 98% do DNA total numa clula diferenciada tpica, eucaritica, encontrado no ncleo, como um polmero composto de uma fita dupla extremamente torcida, ligado a protenas bsicas chamadas Histonas; o complexo conhecido como Cromatina. Quantidades muito menores de DNA so sempre encontradas na matriz mitocondrial de clulas eucariticas e em cloroplastos, sob a forma de pequenos anis formados de fitas duplas, livres de complexos proteicos. O segundo cido nucleico componente da clula, o RNA, ocorre em mltiplas formas, todas elas servindo como elos informacionais extremamente importantes entre DNA, o veculo fundamental da informao, e as protenas. O menor desses polmeros chamado RNA transportador (tRNA). O tRNA corresponde a cerca de 60 diferentes espcies moleculares. Os tRNA exercem uma srie de funes sendo a mais importante delas agir como transportadores

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especficos de aminocidos ativados para locais determinados nos moldes sintetizadores de protenas. Os tRNA compreendem cerca de 10-15% do RNA total da clula. Um segundo grupo de RNA inclui os RNA ribossmicos (rRNA). Esses cidos nucleicos esto sempre associados com um grande nmero de protenas num complexo altamente ordenado chamado Ribossoma. Eles perfazem cerca de 75-80% do RNA total de clula. O terceiro grupo importante de RNA formado pelos RNA mensageiros (mRNA) que compreendem cerca de 5-10% do RNA total da clula. Em clulas bacterianas, os mRNA so extremamente instveis, no sentido de serem constantemente degradados e ressintetizados. Em clulas eucariticas, a velocidade de renovao muito menor. Esses cidos nucleicos, com uma composio bsica muito semelhante quela do DNA, esto intimamente envolvidos na transcrio e traduo da informao programada pelo DNA para a sntese das protenas. Determinao das Relaes Molares entre as Bases nos cidos Nucleicos As caractersticas fundamentais de um cido nucleico so a composio e a sequncia de bases purnicas e pirimidnicas. Dados de composio so usados para calcular a equivalncia entre A e U e entre C e G no RNA; e entre A e T e entre C e G no DNA. Estudos estruturais concluram que DNA de diferentes fontes tinham padres de difrao de RX semelhantes. Isso sugeriu um padro molecular uniforme para todas as molculas de DNA. Os dados tambm sugeriram que o DNA consistia de duas ou mais cadeias polinucleotdicas arranjadas numa estrutura helicoidal. Com evidncias baseadas no pareamento, na equivalncia e em dados de titulao que sugeriam que as longas cadeias de nucleotdeos so mantidas unidas por meio de pontes de hidrognio entre os resduos de bases, Watson e Crick construram seu modelo de DNA, em 1953. Nesse modelo, duas cadeias polinucleotdicas esto enroladas numa dupla hlice. As caractersticas importantes de seu modelo de DNA so: 1. Duas cadeias polinucleotdicas helicoidais esto enroladas em torno de um eixo comum. As cadeias correm em sentidos opostos. 2. As bases purnicas e pirimdicas esto do lado de dentro da hlice, enquanto as unidades fosfato e desoxirribose esto de fora. Os planos das bases so perpendiculares ao eixo da hlice. Os planos das oses so mais ou menos perpendiculares aos das bases. 3. O dimetro da hlice de 20 . Bases adjacentes so separadas por por 3,4 , ao longo do eixo da hlice, e com uma rotao de 36 graus. Assim a estrutura helicoidal se repete a cada 10 nucleotdeos em cada cadeia, isto , a intervalos de 34 .

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4. As duas cadeias so mantidas juntas por pontes de hidrognio entre os pares de bases. Aadenina est sempre pareada com a timina. A guanina est sempre pareada com a citosina. 5. A sequncia de bases ao longo de uma cadeia polinucleotdica no , de nenhum modo, restrita. A sequncia exata de bases leva a informao gentica. Assim, temos uma estrutura espacial formada de duas cadeias enroladas em torno de um eixo comum e mantidas unidas pelas ligaes especficas de adenina com timina e citosina com guanina. As cadeias no so idnticas, mas, por causa do pareamento de bases, uma exatamente o complemento da outra. O aspecto mais importante da dupla hlice de DNA a especificidade do pareamento das bases. Watson e Crick deduziram que a adenina deve se parear com a timina, e a guanina com a citosina, devido a fatores estricos e de pontes de hidrognio. A dupla hlice de DNA pode ser reversivelmente separada. Os dois filamentos da hlice de DNA so separados quando as pontes de hidrognio so rompidas entre suas bases pareadas. Replicao Semiconservativa do DNA O poder do DNA de formar uma hlice dupla de grande importncia quando se considera sua funo na clula. O DNA capaz de produzir cpias exatas de si mesmo. a Replicao. A molcula de DNA abre-se ao meio. As duas cadeias de polinucleotdeos se separam. So formadas novas cadeias complementares, ao longo de cada polinucleotdeo matriz. O processo de duplicao do DNA Semiconservativo, pois cada molcula recm-formada recebe uma cadeia de polinucleotdeo da original. Os fenmenos de replicao de DNA s ocorrem na presena da DNA-polimerase e a energia necessria para a replicao obtida a partir do ATP. Embora as informaes para a sntese das protenas encontrem-se no ncleo da clula, elas so produzidas predominantemente no citoplasma O RNA o mensageiro do DNA que comanda a sntese das protenas. A estrutura helicoidal dupla sugere um mecanismo para a replicao perfeita da informao gentica. Por causa da complementaridade da estrutura helicoidal, cada fita serve de molde para especificar a sequncia de bases na sntese de uma nova fita complementar. Em consequncia, na sntese de duas molculas-filhas de DNA, cada uma ser perfeitamente idntica do DNA-me. Esta distribuio de tomos parentais chamada de semiconservativa.

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Figura digitalizada a partir da pgina 39 do Livro "Color Atlas of Genetics"de Eberhard Passarge publicado pela Editora Thieme em 1995.

Representao da forquilha de replicao, onde esto mostradas as principais enzimas e cofatores que formam o complexo de replicao ( figura disponvel no site www.ncbi.nlm.nhi.gov livro The Cell: A molecular Approach, de J. Cooper, Sinauer Assoc. Co.).

RNA No RNA, a ribose substitui a Desoxirribose e a Uracila substitui a Timina (formando par com Adenina). Embora o DNA seja quase que exclusivamente nuclear (exceo: encontrado em cloroplastos e em mitocndrias), o RNA

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tanto nuclear como citoplasmtico. Denomina-se Transcrio ao processo mediante o qual a mensagem do DNA transportada para o RNA. O RNA transportador desempenha um papel-chave na sntese proteica. Cada molcula de tRNA transporta um aminocido para os ribossomos e decifra a informao contida no RNA mensageiro em termos de aminocidos (correspondentes ao cdigo), dispondo-os na sequncia correta. 60 70% da molcula dos tRNA apresenta uma estrutura helicoidal. Essa e outra evidncia indicam uma estrutura em folha de trevo para todos os tRNA, com o anticdon (isto , a trinca de nucleotdeos necessrios para o ajuste do tRNA especfico ao molde de mRNA, durante a sntese de protenas) localizado na ptala central do trevo. Outros pesquisadores sugeriram uma estrutura terciria para o tRNA, o que est mais prxima realidade. Vrias espcies de RNA ocorrem em ribossomos procariticos e eucariticos e designado RNA ribossmico. O RNA ribossmico (rRNA) tem uma estrutura helicoidal resultante do dobramento de uma polmero de fita simples sobre si mesmo, em reas onde so possveis ligaes por pontes de hidrognio. Porm, o rRNA no ocorre como um polmero de fita dupla. Alm do mais, uma vez que o rRNA no tem a estrutura helicoidal do DNA, estvel e extremamente rgida, ele pode existir em vrias conformaes. Assim, na ausncia de eletrlitos ou em altas temperaturas, pode ocorrer uma conformao de fita simples. Em foras inicas baixas, pode aparecer em basto compacto com regies helicoidais regularmente arranjadas e, em foras inicas altas, aparece uma espiral compacta. Principalmente a concentrao de Mg++ tem um papel importante nas estruturas macromoleculares do RNA, possivelmente porque o Mg++ forma ligaes de coordenao com os grupos fosfato do cido nucleico. Em baixas concentraes de Mg++, ocorre dissociao dos complexos de RNA, enquanto que em altas concentraes de Mg++ a associao dos complexos favorecida. Por causa da heterogeneidade e instabilidade metablica do RNA mensageiro, s recentemente foi possvel uma caracterizao cuidadosa. O RNA mensageiro parece ser principalmente de fita nica, e sua complementariedade em relao sequncia de bases do DNA foi demonstrada atravs da formao de molculas hbridas artificiais de DNARNA de fita dupla. Estruturas A estrutura da molcula de DNA corresponde a uma escada espiralada, onde os pares de bases nitrogenadas representam os degraus e a ligao fosfato-acar os corrimes. Pode ser representada assim:

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C T

A linha vertical refere-se ose, enquanto A, G, C e T representam as bases. No diagrama, P dentro da linha em diagonal indica uma ligao fosfodister. Esta linha diagonal une o meio de uma linha vertical com a ponta da outra. Estas funes referem-se respectivamente a 3-OH e a 5-OH.

C 3
P P

OH 5 Agora se for: A 3
P P P

G 3

OH 5

pApCpG ou pACG Isto mostra que uma cadeia de DNA tem polaridade, pois uma ponta de cadeia tem um grupamento 5-OH e a outra um 3-OH, nenhum deles ligado a outro nucleotdeo. Estrutura do RNA A molcula formada por 1 nica cadeia de polinucleotdeo, que se torna dupla ocasionalmente ao dobrar-se em torno de si mesma.

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Diferenas entre DNA e RNA DNA Principalmente no Ncleo Adenina Guanina Timina Citosina Desoxirribose cido Fosfrico Pentose Ligao entre Nucleotdeos Funo Bases Pirimdicas Localizao RNA Principalmente no Citoplasma

Bases Pricas

Adenina Guanina Uracila Citosina Ribose cido Fosfrico

Depsito de Informaes Genticas

Sntese de Protenas

Desnaturao do DNA As pontes de hidrognio entre os pares de base so importantes para manter a estrutura da dupla-hlice. Para romper as pontes de hidrognio e as interaes do empilhamento das bases na conformao nativa do DNA

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necessrio que seja cedida energia a uma amostra de DNA, como por aquecimento ao DNA em soluo, por exemplo. A desnaturao por calor tambm pode ser chamada fuso. Quando o DNA sofre aquecimento, as fitas se separam. A desnaturao por aquecimento uma maneira de obter um DNA de fita simples.

HIPERTEXTO Retrovrus (HIV): Recebe esse nome pelo fato de sua replicao ocorrer de trs para frente, se comparado ao dogma central da Biologia Molecular (cria DNA a partir do RNA, pois a sequncia de bases de RNA nesse caso quem direciona a sntese do DNA).

Fluxo de Informaes Genticas na Clula A sequncia de bases no DNA codifica a informao gentica. Uma etapa necessria sempre que uma clula se divide para produzir clulas filhas a duplicao do DNA, dando origem a uma nova molcula de DNA com a mesma sequncia de bases que a original. Esse processo, como j foi dito, chama-se replicao. O DNA no o molde direto para a sntese de protenas. Estes moldes so as molculas de RNA. A formao de produtos dos genes requer RNA; a produo de RNA em um molde de DNA chamada transcrio. A sequncia de bases do DNA reflete-se na sequncia de bases do RNA. Trs tipos de RNA esto envolvidos na biossntese de protenas; dos trs, o RNA mensageiro (mRNA) tem importncia especial. Uma sequncia de trs bases

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no mRNA especifica a identidade de um aminocido da forma direcionada pelo cdigo gentico. O processo pelo qual a sequncia de bases dirige a sequncia de aminocidos chamado traduo. Em quase todos os organismos, o fluxo de informaes genticas DNA RNA Protenas. As excees so os retrovrus, onde o RNA, e no o DNA, o material gentico. Os genes especificam os tipos de protenas que so feitos pelas clulas. Expressam-se fenotipicamente atravs das protenas que produzem. Ex.: olhos escuros: clulas da ris com genes para produo das protenas responsveis pelo pigmento escuro. Gene Protena Fentipo Diagnstico pelo DNA A gentica molecular uma ferramenta. o estudo da expresso e herana dos genes a nvel molecular. Na clnica bioqumica isso envolve o estudo das diferenas nas sequncias de pares de base no DNA. A anlise do DNA de um paciente e dos seus genes pode fornecer informao para o diagnstico. Mutaes em genes isolados podem causar doenas hereditrias como fibrose cstica, anemia falciforme, hipercolesterolemia familiar e distrofia muscular de Duchenne, enquanto que desordens em vrios genes so importantes nas doenas mais comuns tais como doena coronariana, diabetes mellitus e cncer. Duas protenas diferentes quanto aos efeitos biolgicos podem possuir os mesmos aminocidos. Como? As caractersticas especficas de cada protena dependem da sequncia dos aminocidos. Um bom exemplo a ser estudado a anemia falciforme. Esse problema ocorre devido mudana de um nico aminocido em uma molcula formada por 600 aminocidos. Hemoglobina normal: Val His Leu Thr Pro Glu Glu - etc. Hemoglobina Anormal: Val His Leu Thr Pro Val Glu - etc. Genoma Humano A maior parte do genoma humano no tem cdigo para protenas funcionais, pois elas so longas regies entre e dentro dos genes. O genoma no idntico entre uma pessoa e outra: uma mdia de 200 pares de bases sero diferentes. Quando uma mudana ocorre na regio de cdigo, poder levar sntese de uma protena alterada, defeituosa em sua funo. Mudanas na regio de no-cdigo so frequentemente neutras, mas podem ser teis para o geneticista molecular. Recentemente, mudanas no no-cdigo do DNA tm sido identificadas como causa de doenas como Sndrome X e distrofia miotnica. A Reao em Cadeia da Polimerase um mtodo usado para aumentar uma quantidade pequena de DNA com base na reao de enzimas isoladas.

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Endonucleases de Restrio O DNA pode ser fracionado em pequenos pedaos por enzimas chamadas Endonucleases de Restrio. Essas enzimas so restritas ao corte de DNA numa sequncia de pares de bases especficas. A presena de stios polimrficos, onde h diferenas na sequncia dos pares de bases do DNA pode criar ou abolir um lugar de corte para uma particular enzima endonuclease de restrio. Dessa forma, os polimorfismos levam produo de fragmentos de diferentes comprimentos depois da ao da enzima.

CONTEXTUALIZANDO Lpus uma doena autoimune envolvendo o processamento de RNA. Aparece no final da adolescncia ou incio da fase adulta com uma erupo cutnea na fronte e nas bochechas (semelhante s faces de um lobo, da o nome lpus). Podem ocorrer problemas renais, artrite, acmulo de lquido ao redor do corao e inflamao dos pulmes. 90% dos doentes so mulheres. Uma vez que o processamento do mRNA ocorre em todos os tecidos e rgos do corpo, essa doena afeta vrios sistemas e pode espalhar-se facilmente.

ATIVIDADES DE AVALIAO 1. Escreva a sequncia complementar (na notao padro 53) para: a) GATCAA; b) ACGCGT; c) TCGAAC; d) TACCAT 2. Uma amostra de DNA contendo 30% de adenina e 20% de guanina provavelmente conter ____% de Timina e _____% de citosina. 3. a) Compare e contraste RNA e DNA, relativamente a: 1. Composio qumica 2. Estrutura secundria

3. Localizao nas clulas vivas - 4. n dos diferentes tipos ou espcies 5. funes biolgicas b) Desenhe a frmula estrutural e d o nome de: 1. um ribosdeo de purina 2. um desoxirribosdeo 5 difosfato de purina 3. um ribosdeo 3, 5 difosfato de pirimidina 4. um ribosdeo 2, 3 difosfato de purina

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5. um desoxirribosdeo 3, 5 monofosfato cclico de purina. c) Desenhe a unidade repetitiva da molcula de DNA. Indique as posies de quebra que so: a) predominantemente nucleosdeo 3 fosfato; b) predominantemente nucleosdeo 5 fosfato 4. Descreva dois tipos bem diferentes de foras (ou ligaes) que esto envolvidas na estabilizao da estrutura de dupla hlice do DNA. 5. Descreva os tipos de RNA at agora conhecidos, explicando suas funes. 6. Defina os termos REPLICAO, TRANSCRIO E TRADUO 7. Por que se diz que a replicao do DNA um processo semiconservativo? 8. Descreva o complexo chamado CROMATINA. 9. Definir, em termos de DNA e sntese de protenas, o termo RETROVRUS. 10. Cite vrias (mais de 2) doenas autoimunes relacionadas com o RNA. 11. Qual o papel das enzimas denominadas Endonucleases de Restrio? 12. Pesquise e fale sobre a Reao em Cadeia da Polimerase tambm conhecida como PCR. 13. Pesquise e fale sobre Mtodos de Clonagem.

Bibliografia Comentada Campbell, M. K.; Farrel, S. O. Bioqumica. Vol 2. So Paulo: Thomson Learning - 2007. Nos captulos 9, 10, 11, 12, 13 e 14 do vol. 2 so apresentados tpicos relativos ao assunto e todos comentados de forma muito didtica. Champe, P. C.; Harvey, R. A.; Ferrier, D. R. Bioqumica Ilustrada. 4 Ed. Porto Alegre: Artmed, 2009. Na Unidade VI do livro, nos Captulos 29, 30, 31, 32 e 33 so apresentados os tpicos relativos aos cidos Nucleicos. O livro ricamente ilustrado tornando o assunto de fcil compreenso. Stryer, L. Bioqumica. 4 Ed. Rio de Janeiro: Editora Guanabara Koogan S. A.1996. Os captulos 4, 5 e 6 apresentam tpicos relativos aos cidos Nucleicos. Murray, R. K.; Granner, D. K.; Mayes, P. A.; Rodwell, V. W. Harper: Bioqumica. 8 ed. So Paulo: Atheneu, 1998. Os captulos 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41 e 42 da Seo IV, abordam tpicos detalhados sobre cidos Nucleicos.

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LEITURA, VDEOS E SITE RECOMENDADOS: Gattaca (Gattaca - Experincia Gentica) um filme de fico cientfica produzido nos Estados Unidos em 1997). A Experincia (Europa filmes, 2001). www.clonesfilmes.net O clone (Clone) - 1997 O outro eu/ eu e meu clone (the order me) - 2000

CAPTULO 7: BIOENERGTICA OBJETIVOS: Conhecer como os processos biolgicos ocorrem e de onde vem a energia necessria para esses processos. Relembrar o conceito de energia livre de Gibbs. Conceituar reaes de xido-reduo em um sistema biolgico. Verificar a participao de coenzimas nas reaes de respirao celular. Verificar a importncia do ciclo de Krebs para a obteno de intermedirios da via glicoltica. Molculas consumidas como nutrientes precisam ser decompostas para a obteno de energia a ser usada na criao de novas molculas. Esse processo ocorre em vrias etapas nas quais os doadores de eltrons transferem energia aos aceptores de eltrons. A bioenergtica , portanto o estudo da variao de energia que acompanha as reaes bioqumicas, ou seja, ela descreve a transferncia e utilizao da energia em sistemas biolgicos fazendo uso de algumas ideias bsicas da termodinmica, particularmente do conceito de energia livre. Alteraes na energia livre (G) fornecem uma medida da probabilidade energtica da ocorrncia de uma reao qumica, permitindo prever se uma reao ir ocorrer. O conceito de energia livre essencial para compreender a funo especial que a Adenosina Trifosfato (ATP) desempenha ao transferir energia de processos catablicos geradores de energia para reaes que requerem energia. Os sistemas biolgicos so essencialmente isotrmicos e utilizam a energia qumica para impulsionar os processos vitais. A bioenergtica interessa-se somente pelos

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estados de energia inicial e final dos componentes inicos, e no o mecanismo nem o tempo necessrio para que ocorra a alterao qumica, ou seja, o que ela prev a possibilidade de um processo ocorrer. O sentido e a extenso de uma reao qumica so determinados pelo grau em que dois fatores so alterados durante a reao. Esses fatores so a entalpia e a entropia. Entalpia (H) uma medida da mudana no contedo de calor dos reagentes e produtos. Entropia (S) uma medida da desorganizao dos reagentes e produtos. Nenhuma delas por si s suficiente para determinar se uma reao qumica poder ocorrer espontaneamente no sentido em que escrita. Porm, combinadas matematicamente a entalpia e a entropia podem ser usadas para definir a energia livre de Gibbs, que prediz o sentido em que a reao ocorrer espontaneamente. A energia livre de Gibbs, G, talvez a forma mais adequada de medir as variaes de energia nos sistemas vivos, pois mede a energia disponvel para realizar um trabalho a uma presso e temperatura constantes, o que descreve o estado vivo. G = H -TS (onde G a variao na energia livre; H corresponde variao na entalpia e S indica a variao na entropia. T a temperatura absoluta em graus Kelvin (K): K = C +273). Reaes Exergnicas e Endergnicas Ao se falar de reao espontnea significa dizer que ela ocorrer sem adio de energia e a variao da energia livre de Gibbs assume um valor negativo (- G). Isto , ela exergnica. No entanto quando o processo noespontneo, ou seja, precisa de adio de energia para que possa ocorrer, possui um valor positivo para a variao de energia livre (+G), isto , ela endergnica. Se a variao de energia livre tem apenas 1 kcal mol -1 em qualquer direo, ento a reao considerada reversvel. Adicionando reagentes ou removendo produtos, a reao muda para a direita; caso os reagentes sejam removidos ou se os produtos forem adicionados, a reao muda para a esquerda. Acoplamento dos Processos Endergnicos aos Processos Exergnicos Um mecanismo possvel de acoplamento pode ser imaginado quando um intermedirio obrigatrio comum (I) faz parte de ambas as reaes, isto : A+CIB+D As reaes de sntese, contrao muscular, conduo do impulso nervoso e transporte ativo os chamados processos vitais obtm energia por ligao qumica, ou acoplamento, s reaes oxidativas. A converso do metablito A

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ao metablito B ocorre com liberao de energia livre (reao exergnica), que aplicada a outra reao, na qual a energia livre necessria para converter o metablito C ao metablito D (reao endergnica). Como uma parte da energia liberada na reao de degradao transferida para a reao de sntese em uma forma diferente de calor, os termos exotrmico e endotrmico no podem ser aplicados a estas reaes. So usados os termos exergnico e endergnico para indicar que o processo acompanhado por perda ou ganho, respectivamente, de energia livre, sem considerar a forma da energia envolvida. Na prtica, um processo endergnico no existe separadamente. Ele deve ser um componente de um sistema acoplado: exergnico endergnico, onde a variao lquida global exergnica. Algumas reaes exergnicas e endergnicas dos sistemas biolgicos so acopladas assim. Deve-se levar em conta que este tipo de sistema tem um mecanismo interno para o controle biolgico da velocidade, no qual os processos oxidativos ocorrem desde que a existncia de um intermedirio obrigatrio comum permita que a velocidade de utilizao do produto da via de sntese (D) determine, pela lei da ao das massas, a velocidade na qual A oxidado. Na verdade, estas inter-relaes fornecem uma base para o conceito do Controle Respiratrio, o processo que previne que um organismo perca o controle. Uma extenso deste conceito de acoplamento proporcionado pelas reaes de desidrogenao, que so acopladas s hidrogenaes por um transportador intermedirio. Um mtodo alternativo de acoplamento entre um processo exergnico e outro endergnico a sntese de um composto de alta energia potencial na reao exergnica e incorporao deste novo composto na reao endergnica, assim efetuando uma transferncia de energia livre do percurso exergnico para o endergnico. Na clula viva, o principal intermedirio de alta energia ou composto transportador Adenosina Trifosfato ou Trifosfato de Adenosina (ATP). O ATP , portanto, formado por uma molcula de adenosina (adenina + ribose) qual esto ligados trs grupos fosfato. Com a remoo de um grupo fosfato, obtm-se ADP; se dois fosfatos forem removidos, o produto resultante o monofosfato de adenosina (AMP). Devido a um G grande e negativo, o ATP denominado um composto fosfatado de alta energia. Muitas reaes acopladas utilizam ATP para gerar um intermedirio comum. Essas reaes podem envolver a clivagem do ATP, ou seja, a transferncia de um grupo fosfato do ATP para outra molcula. Outras reaes levam sntese de ATP pela transferncia de fosfato de um intermedirio rico em energia para o difosfato de adenosina (ADP), formando ATP. Um exemplo de reaes acopladas o caso da fosforilao da glicose ao ser acoplada para a hidrlise de um grupo fosfato do ATP. A fosforilao da glicose e a hidrlise do ATP so duas partes da mesma reao. Somando-se as duas, pode-se

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determinar a variao de energia geral e garantir que no total ela seja exergnica. Metabolismo As reaes exergnicas so denominadas catabolismo (geralmente a quebra ou oxidao de molculas combustveis), enquanto as reaes de sntese, que constroem as substncias, so denominadas anabolismo. O conjunto de processos catablicos e anablicos constituem o metabolismo. O catabolismo e o anabolismo so vias separadas, e no simplesmente o oposto uma da outra. No catabolismo, um processo oxidativo, h liberao de energia enquanto no anabolismo, um processo redutivo, ocorre necessidade de energia. Reaes de xido-Redues Biolgicas Reaes de oxirreduo so aquelas em que os eltrons so transferidos de um doador a um aceptor. A oxidao a perda de eltrons e a reduo o ganho de eltrons. A substncia que perde eltrons, ou seja, a que oxidada, chamada de agente redutor. A substncia que ganha eltrons, ou seja, a que reduzida chamada agente oxidante. Tanto os agentes oxidantes como os redutores so necessrios para a transferncia de eltrons ocorrer. Os nutrientes, ao serem oxidados, perdem prtons e eltrons (H+ + e-) e tm seus tomos de carbono convertidos a CO2. Os prtons e eltrons so recebidos por coenzimas na forma oxidada, que passam assim forma reduzida. Vrias reaes de oxidao biolgicas so acompanhadas da transferncia de um prton (H+). A meia reao de oxidao escrita como uma reao reversvel porque a ocorrncia da oxidao ou da reduo depende dos outros reagentes presentes. Um exemplo de uma meia reao de oxidao a converso de NADH, a forma reduzida de Nicotinamida Adenina Dinucleotdeo, para a forma oxidada, NAD+. Essa coenzima importante em vrias reaes.

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Outro importante aceptor de eltrons o FAD (Flavina Adenina Dinucleotdeo), que a forma oxidada do FADH2.

Oxidao de Nutrientes e Produo de Energia A oxidao dos nutrientes para fornecer energia a um organismo no acontece sem a reduo de algum aceptor de eltrons. O principal aceptor de eltrons na oxidao aerbia o oxignio. A reduo de metablitos desempenha um importante papel nos processos anablicos dos organismos

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vivos. As biomolculas importantes so sintetizadas nos organismos por vrias reaes em que um metablito reduzido enquanto a forma reduzida de uma coenzima oxidada.

CARBOIDRATOS LIPDIOS PROTENAS

CO2

(H++ e-)

COENZIMAS (oxidadas) COENZIMAS (H++ e-) (reduzidas)

ATP+H20

O2 + ADP + Pi

A reoxidao das coenzimas obtida pela transferncia dos (H++ e-) para o oxignio molecular, que ento convertido H2O. A energia derivada desta oxidao utilizada para sintetizar um composto rico em energia, a adenosina trifosfato (ATP) a partir da adenosina difosfato (ADP) e fosfato inorgnico (HPO42- a pH 7,4 representado por Pi). a energia qumica do ATP que ser diretamente usada para promover os processos biolgicos que consomem energia. Portanto, para que a energia derivada da oxidao dos alimentos possa ser aproveitada pelas clulas, ela deve estar sob a forma de ATP. O aproveitamento da energia do ATP feito associando a retirada de seu grupo fosfato terminal aos processos que requerem energia. Desta forma, a energia qumica armazenada no ATP pode ser utilizada em processos qumicos (biossnteses), mecnicos (contrao muscular), eltricos (conduo de estmulo nervoso), osmticos (transporte ativo atraves de membranas) ou luminosos (bioluminescncia). A retirada do grupo fosfato terminal do ATP no constitui uma hidrlise simples. A reao de hidrlise tem um valor de G negativo, mostrando ser termodinamicamente vivel. ATP + H2O ADP + Pi + H+ G = -31KJ.mol-1

A velocidade desta reao convenientemente baixa. Se fosse diferente, a ao das enzimas que catalisam a hidrlise de ATP (sob controle celular) hidrolisaria todo o ATP formado, inviabilizando a vida celular. Alm disto, a energia liberada pela hidrlise seria dissipada na forma de calor, uma forma de energia que no pode ser aproveitada pelas clulas. Exemplos para entender a utilizao do ATP como doador de energia:

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Glicose + Pi

Glicose 6-Fosfato + H2O

G= + 12 KJ/mol

G > 0, logo a reao invivel. As clulas contornam isto, fazendo: Glicose + ATP Glicose 6-Fosfato + ADP G= - 17 KJ/mol G < 0, logo a reao vivel. Outro exemplo comum nas reaes metablicas so as snteses. Vamos supor que a reao de condensao de A e B tenha um G desfavorvel: A+BAB G > 0

Este problema pode ser contornado pela utilizao de ATP. Neste caso, um caminho possvel ser a transferncia do grupo fosfato terminal do ATP para o composto A, e a reao ser termodinamicamente vivel:

ADP + Pi

OXIDAO DE NUTRIENTE

PROCESSOS QUE REQUEREM ENERGIA

ATP A + ATP A FOSFATO + ADP G < 0

O composto A fosforilado pode reagir com B, em uma reao tambm termodinamicante vivel, liberando o grupo fosfato. A FOSFATO + B Da soma das duas reaes vem: A + B + ATP A B + ADP + FOSFATO G < 0 A B + FOSFATO G < 0

Fontes Principais de Fosfato Participantes da Conservao ou Captao de Energia 1. A primeira fonte a Fosforilao Oxidativa. a fonte de fosfato quantitativamente mais importante, dos organismos aerbicos. A energia livre, para manter este processo funcionando, provm da oxidao na cadeia respiratria utilizando O2 molecular dentro da mitocndria.

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2. Na Gliclise, a formao lquida de dois fosfatos de alta energia resulta da formao de lactato a partir de uma molcula de glicose, gerados em duas reaes catalisadas pela fosfoglicerato-quinase e piruvato-quinase, respectivamente. 3. No Ciclo do cido Ctrico, um fosfato de alta energia produzido, na passagem catalisada pela succinil-tioquinase. O ATP permite que o acoplamento de reaes termodinamicamente desfavorveis tornem-se favorveis. Um exemplo a fosforilao da glicose a glicose 6 fosfato, a primeira da via glicoltica, altamente endergnica e no poderia ocorrer isoladamente em condies fisiolgicas. (1) Glicose + Pi Glicose 6 fosfato + H2O (G = + 13,8 kj/mol) Para que essa reao acontea ela deve estar acoplada a uma outra que seja mais exergnica do que a fosforilao da glicose-endergnica. Tal reao a hidrlise do fosfato terminal do ATP. (2) ATP ADP + Pi (G = - 30,5 kj/mol)

Acoplando-se as reaes 1 e 2, tem-se uma reao global, catalisada pela hexoquinase, altamente exergnica, e em condies fisiolgicas longe do equilbrio, assim irreversvel. Glicose + ATP kj/mol).
HEXOQUINASE

Glicose 6 fosfato + ADP (G = - 16,7

Ciclo de Krebs No metabolismo aerbio, os nutrientes so oxidados a dixido de carbono e gua. Os organismos podem obter muito mais energia a partir dos nutrientes por meio da oxidao aerbia do que pela oxidao anaerbia. A gliclise produz apenas duas molculas de ATP para cada molcula de glicose metabolizada. Na oxidao aerbia completa de cada molcula de glicose at dixido de carbono e gua podem ser produzidas 30 a 32 molculas de ATP. Trs processos atuam no metabolismo aerbio: o ciclo do cido ctrico, aqui discutido, e o transporte de eltrons e a fosforilao oxidativa. O ciclo do cido ctrico anfiblico, pois atua tanto no catabolismo como no anabolismo. O ciclo do cido ctrico ocorre em local da clula diferente de onde a gliclise ocorre. Enquanto a gliclise ocorre no citosol, o ciclo do cido ctrico ocorre na mitocndria e a maioria das enzimas que dele participam est presente na matriz mitocondrial.

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camilalemos.com Portal do conhecimento relacionado sade. Em condies aerbias, a oxidao do piruvato produzido pela gliclise prossegue com a formao de dixido de carbono e gua como produtos finais. O piruvato proveniente da glicose oxidado a uma molcula de dixido de carbono e um grupo acetila que se liga a coenzima A. A acetil-CoA entra no ciclo do cido ctrico. Alm da glicose, vrios aminocidos produzem piruvato e, portanto, acetil-CoA, ao serem degradados. Outros aminocidos e os cidos graxos tambm produzem acetil-CoA sem a formao intermediria de piruvato. A acetil-CoA constitui, portanto, o ponto de convergncia do metabolismo degradativo de carboidratos, aminocidos e cidos graxos. Completando o catabolismo destes compostos, a acetil-CoA, qualquer que seja sua provenincia ser totalmente oxidada a CO2 pelo Ciclo de Krebs, com a produo de coenzimas reduzidas. Paralelamente a esta oxidao, o ciclo de Krebs produz um grande nmero de compostos utilizados como precursores para biossnteses.

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Funo Anablica do Ciclo de Krebs A reduo de coenzimas no a nica funo do ciclo de Krebs. Os compostos intermedirios do ciclo de Krebs podem ser utilizados como precursores em vias biossintticas. Oxaloacetato e -cetoglutarato formam aspartato e glutamato, respectivamente. Succinil-CoA precursora do grupo heme. A eventual retirada desses intermedirios pode ser compensada por reaes que permitem o seu nvel. Entre essas reaes, chamadas reaes anaplerticas (reaes de preenchimento), a mais importante a que leva formao de oxaloacetato a partir do piruvato, catalisada pela piruvato carboxilase: COOC=O CH3 + CO2 + H2O + ATP COOC=O CH2 COOPiruvato Oxaloacetato + ADP + Pi + 2H+

HIPERTEXTO No Ciclo de Krebs, o oxaloacetato tem um papel at certo ponto cataltico: como no efetivamente consumido pelas reaes do ciclo, j que reposto pela ltima reao, teoricamente com apenas uma molcula de oxaloacetato poder-se-ia oxidar uma quantidade qualquer de acetil-CoA. Entretanto, a velocidade com que esta oxidao ocorreria seria muito baixa, uma vez que, aps a condensao de acetil-CoA com oxaloacetato, iniciando o ciclo, novas molculas de acetil-CoA s poderiam ser oxidadas quando, ao final das reaes do ciclo, o oxaloacetato fosse regenerado. O ajuste da velocidade de consumo de acetil-CoA pelo Ciclo de Krebs sua prpria concentrao feito por interveno da reao catalisada pela piruvato carboxilase. Esta enzima fortemente ativada pela prpria acetil-CoA. Desta forma, quando, por exemplo, a gliclise intensa e grande quantidade de piruvato transformada em acetilCoA, o acmulo desta coenzima ativa a piruvato carboxilase e o piruvato passa a originar oxaloacetato. Com concentraes altas de oxaloacetato e acetil-CoA, a citrato sintase, que d incio ao ciclo, pode funcionar a velocidades altas.

CONTEXTUALIZANDO A energia livre de Gibbs, G, provavelmente a maneira mais conveniente para se medir as variaes de energia nos sistemas vivos, uma vez que mede

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a energia disponvel para realizar um trabalho temperatura e presso constantes, o que descreve o estado vivo. Mesmo os animais de sangue frio esto a uma temperatura e presso constantes em um dado tempo; quaisquer mudanas da temperatura e da presso so suficientemente lentas, de modo a no afetar as medidas de G. Espontaneidade e Reversibilidade: Espontaneidade significa que uma dada reao pode ocorrer sem adio de energia como, por exemplo, a gua de uma represa no topo de uma montanha, que possui energia potencial para descer mas que no o far a menos que se abra a barragem. Como a gua sempre corre montanha abaixo, essa a direo em que a variao de energia negativa (-G); no entanto bombear a gua montanha acima no um processo espontneo (requer energia), e tem um valor positivo para a variao de energia livre (+G). Se a variao de energia livre for apenas de 1kcal/mol ( 4Kj/mol) em ambas as direes, ento essa reao considerada reversvel, podendo ocorrer em ambas as direes. Adicionando-se reagentes ou retirando produtos, a reao ir para a direita; se forem retirados os reagentes ou adicionados produtos a reao se deslocar para a esquerda. Esse aspecto de muita importncia para grande nmero de vias metablicas; muitas reaes so completamente reversveis. Isso significa que as mesmas enzimas podem ser usadas tanto na via que leva quebra da substncia, como na via que forma a substncia (Campbell & Farrel, 2008).

ATIVIDADES DE AVALIAO 1. Definir Bioenergtica 2. Quem controla a velocidade de liberao de energia? 4. Como os processos vitais (reaes de sntese, contrao muscular, conduo do impulso nervoso, transporte ativo) obtm energia? 5. O que um processo endergnico? E um processo exergnico? 6. Definir catabolismo e anabolismo. 7. Definir metabolismo. 8. Indique um mtodo alternativo de acoplamento entre um processo exergnico e outro endergnico. 9. Quem o principal intermedirio de alta energia, ou melhor, o composto transportador, na clula viva? 10. Qual a funo do ATP no processo de fosforilao? 11. Como age um ciclo ATP/ADP?

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12. Quais so as trs fontes principais de fosfato de alta energia que participam da conservao ou captao de energia? 13. De onde provm a energia livre que mantm a fosforilao oxidativa funcionando? 14. Sendo a fosforilao da glicose a glicose 6-fosfato, altamente endergnica, como pode ocorrer na via glicoltica? Explique. 16. O que ocorre com os nutrientes ao serem oxidados? Explique todas as etapas at chegar ao ATP + H2O. 18. Como a energia derivada da oxidao dos alimentos pode ser aproveitada pelas clulas? 19. Desenhe o Ciclo de Krebs. 20. Fale sobre a funo anablica do Ciclo de Krebs.

Bibliografia Comentada Campbell, M. K.; Farrel, S. O. Bioqumica. Vol 3. So Paulo: Thomson Learning - 2008. Nos Captulos 15 e 16 do vol. 3 so apresentados tpicos relativos ao assunto e todos comentados de forma muito didtica. Champe, P. C.; Harvey, R. A.; Ferrier, D. R. Bioqumica Ilustrada. 4 Ed. Porto Alegre: Artmed, 2009. Na Unidade II do livro, nos Captulos 6 a 9 so apresentados os tpicos relativos ao assunto abordado. O livro ricamente ilustrado tornando o assunto de fcil compreenso. Murray, R. K.; Granner, D. K.; Mayes, P. A.; Rodwell, V. W. Harper: Bioqumica. 8 ed. So Paulo: Atheneu, 1998. Os Captulos 12 e 13 ,da Seo II, abordam tpicos detalhados sobreo assunto.

LEITURA, VDEOS E SITES RELACIONADOS: Sndrome de leigh anatapat-unicamp Adams RD, Victor M, Ropper AH. Principles of Neurology, 6th Ed. McGrawHill, New York, 1997. Carpenter S, Karpati G. Pathology of Skeletal Muscle. 2nd. Ed. Oxford University Press, 2001. Johns DR, Fadic RN. Genetic Mitochondrial Disorders. in Martin JB (ed) Molecular Neurology. Scientific American, New York, 1998.

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CAPTULO 8: CADEIA DE TRANSPORTE DE ELTRONS Oxidao de Coenzimas e Sntese de ATP OBJETIVOS: Compreender o metabolismo aerbico. Observar a sntese de ATP e a gerao de energia celular. Verificar a produo de gua no final da cadeia transportadora de eltrons. Localizar os intermedirios da cadeia transportadora de eltrons, na mitocndria e suas funes particulares. Compreender a funo das coenzimas do sistema mitocondrial. Atravs do metabolismo aerbio, um organismo pode extrair energia de modo eficiente a partir dos nutrientes. Molculas ricas em energia, como a glicose, so metabolizadas por uma srie de reaes de oxidao, levando por fim produo de CO2 e gua. Os processos de oxidao da glicose, de vrios aminocidos e de cidos graxos levam produo de Acetil-CoA, que, no ciclo de Krebs, totalmente oxidada a CO2. Os intermedirios metablicos dessas reaes cedem eltrons a coenzimas especficas NAD+ (Nicotinamida Adenina Dinucleotdeo) e FAD (Flavina Adenina Dinucleotdeo) formando as coenzimas reduzidas ricas em energia, NADH e FADH2. O ciclo de Krebs constitui o estgio final e mximo de oxidao dos tomos de carbono que compem carboidratos, protenas e lipdeos. A oxidao destes compostos acompanhada da reduo de grande quantidade das coenzimas NAD + e FAD. Observe o n de moles destas coenzimas reduzidas durante a oxidao de um mol de glicose.
Reao Gliclise Gliceraldedo 3-fosfato 3-Fosfoglicerato Piruvato Acetil-CoA Ciclo de Krebs Isocitrato -Cetoglutarato -Cetoglutarato Succinil- CoA Malato Oxaloacetato Succinato Fumarato Total 2 2 2 10 2 2 2 2 Moles de NADH Moles de FADH2 -

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Do ponto de vista energtico, verifica-se que da energia total disponvel inicialmente na molcula de glicose, uma frao muito pequena levou produo de ATP; a maior parte da energia inicial foi conservada nas coenzimas reduzidas. O mesmo ocorre na oxidao de aminocidos e lipdios. As coenzimas reduzidas devem ser reoxidadas por duas razes: 1. Para que voltando forma oxidada, possam participar outra vez das vias de degradao dos nutrientes. 2. Porque a partir da oxidao destas coenzimas que a energia nelas conservada e pode ser aproveitada pelas clulas, para sintetizar ATP. As coenzimas reduzidas podem doar, cada uma, um par de eltrons a um conjunto especializado de transportadores de eltrons chamados cadeia de transporte de eltrons. A energia liberada pela oxidao de nutrientes usada pelos organismos na forma de energia qumica do ATP. Enquanto os eltrons fluem atravs da cadeia transportadora de eltrons, eles perdem muito de sua energia livre. Parte dessa energia pode ser captada e armazenada para a produo de ATP a partir de ADP e fosfato inorgnico (Pi) e a esse processo d-se o nome de fosforilao oxidativa. O restante da energia livre que no captada para a sntese de ATP serve para impulsionar outras reaes. A produo de ATP por fosforilao oxidativa (processo endergnico) separada do transporte de eltrons para o oxignio (um processo exergnico), no entanto as da cadeia transportadora de eltrons esto ligadas entre si e associadas sntese de ATP pela fosforilao de ADP. A atividade da cadeia de transporte de eltrons leva ao bombeamento de prtons (H +) pela membrana mitocondrial interna, criando um gradiente de pH, tambm conhecido como gradiente de prtons. A soluo para as clulas aproveitarem energia para a sntese de ATP exatamente transformar a energia contida nas coenzimas reduzidas em um gradiente de prtons e utilizlo para promover a sntese de ATP. A produo do gradiente de prtons conseguida pela transferncia dos eltrons das coenzimas para o oxignio, atravs de passagens intermedirias por vrios compostos que constituem uma cadeia de transporte de eltrons. Nos organismos aerbios, a oxidao de coenzimas feita por transferncia de seus eltrons para o oxignio. Recebendo eltrons, o oxignio liga-se a prtons do meio formando gua. Este processo libera grande quantidade de energia, em virtude da diferena de potenciais de xido-reduo entre a coenzima e o oxignio. A energia liberada na oxidao de um mol de NADH permite a sntese de alguns moles de ATP. Se a transferncia de eltrons das coenzimas reduzidas fosse feita diretamente para o oxignio, toda a energia do processo seria liberada como calor, portanto, inutilizvel pelas clulas para promover os processos que requerem energia.

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Lembrete:

A NICA FORMA DE ENERGIA UTILIZVEL PELAS CLULAS EM TAIS PROCESSOS A ENERGIA QUMICA PRESENTE NO ATP.

A cadeia de transporte de eltrons est presente na membrana mitocondrial interna. Os compostos que compem a cadeia de transporte de eltrons so organizados de acordo com seus potenciais de xido-reduo. Assim, os eltrons partem da coenzima reduzida, que tem potencial de xidoreduo menor que os componentes da cadeia de transporte de eltrons, e percorrem uma sequncia de transportadores com potenciais de xido-reduo crescentes, at atingirem o oxignio, que tem o maior potencial de xidoreduo. As transferncias de eltrons entre estes compostos so sempre acompanhadas de queda de energia livre. O transporte de eltrons facilitado pelo fato de tais compostos estarem organizados em membranas, com posies definidas, de modo a situar cada componente exatamente entre aquele que lhe fornecer eltrons e aquele ao qual seus eltrons sero doados. Enquanto se processam as passagens de eltrons, forma-se um gradiente de prtons, j que se estabelece uma concentrao de prtons diferente de cada lado da membrana onde ocorre o transporte de eltrons. A sntese de ATP possvel porque aproveita a energia potencial contida no gradiente de prtons. Esta sntese consiste na fosforilao do ADP (ADP + Pi ATP) e, como utiliza energia derivada da oxidao das coenzimas, denominada fosforilao oxidativa. A oxidao das coenzimas reduzidas pela cadeia de transporte de eltrons processa-se na membrana interna da mitocndria, da qual fazem parte os componentes da cadeia. Estes componentes agrupam-se em quatro complexos: I, II, III e IV.

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UBIQUINONA

Composio dos complexos da cadeia de transporte de eltrons Componentes transportadores de eltrons Complexo I (NADH-CoQ redutase) Complexo II (Succinato-CoQ redutase) Complexo III (Coenzima Q citocromo c redutase) Complexo IV (Citocromo c oxidase) FMN Centros Fe-S FAD Centros Fe-S Citocromo b Citocromos b e c1 Centros Fe-S 10 5 Nmero aproximado de polipeptdios 26

Citocromos a e a3 ons de cobre

6-13

Embora no faa parte de Complexos dois constituintes da cadeia de transporte de eltrons tm papis muito importantes. A coenzima Q (CoQ) conecta os Complexos I e II ao Complexo III, e o citocromo c conecta o Complexo III ao Complexo IV. Os eltrons que se encontram presentes no NADH so transferidos desta coenzima para o Complexo I, do Complexo I para, a coenzima Q, depois para o Complexo III, citocromo c, Complexo IV e finalmente para o oxignio. Os eltrons presentes no succinato e em outros substratos tm uma entrada especial na cadeia de transporte de eltrons: so transferidos ao Complexo II e deste para a coenzima Q; ento seguem a rota comum: Complexo III, citocromo c, Complexo IV e oxignio. Estas transferncias so possveis porque todos os compostos presentes nos complexos, mais a coenzima Q e o citocromo c, podem apresentar-se nos estados reduzidos e oxidado: Ao receberem um eltron, reduzem-se; transferindo o eltron oxidam-se e podem receber eltrons novamente.

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Excetuando-se a coenzima Q, todos os componentes da cadeia de transporte de eltrons so protenas. A estas esto associados grupos prostticos, como FAD, FMN e centros Ferro-Enxofre (Fe-S). COMPLEXO I O Complexo I (NADH-CoQ redutase) oxida o NADH, transferindo seus eltrons para a coenzima Q. formado por 26 cadeias polipeptdicas. A estas cadeias esto associados: uma molcula de flavina mononucleotdio (FMN) e 6 ou 7 centros Fe-S. A FMN um derivado da riboflavina com estrutura semelhante do FAD e como este, capaz de receber 2 prtons e 2 eltrons passando forma reduzida FMNH2. O doador de eltrons para a reduo de FMN (1 transferncia de eltrons para a cadeia de transporte de eltrons) o NADH produzido pelo metabolismo. NADH + H+ + FMN (Complexo I) NAD+ + FMNH2 (Complexo I)

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O resultado a oxidao do NADH e a entrada dos eltrons na membrana interna da mitocndria, de onde s saem para serem doados ao oxignio, no final da cadeia. Os centros Fe-S no recebem prtons; so transportadores de eltrons: Fe3+ para Fe2+. Os eltrons do FMNH2 so transferidos para o primeiro centro Fe-S; depois, atravs de passagens por outros centros Fe-S, deixam o Complexo I, sendo entregues coenzima Q. Na transferncia de eltrons do FMNH2 para os centros Fe-S, os prtons so excludos, sendo transferidos da membrana interna da mitocndria para o espao intermembranas, sendo esta a primeira etapa da formao do gradiente de prtons (da matriz mitocondrial so retirados prtons que vem de NADH + H+; no espao intermembranas so introduzidos prtons) Ocorre ento uma

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diferena de concentrao de prtons aprecivel entre o interior e o exterior da mitocndria. HIPERTEXTO O FMN, como o FAD, sintetizado a partir da vitamina riboflavina. Ela contm a estrutura em anel flavina receptora de eltron, mas no a poro monofosfato de adenosina (AMP) do FAD. A deficincia grave de riboflavina diminui a habilidade da mitocndria de produzir ATP a partir da fosforilao oxidativa devido carncia de FMN nos carreadores de eltrons.

COMPLEXO II O Complexo II (Succinato-CoQ Redutase) oxida o succinato, transferindo seus eltrons tambm para a coenzima Q. Ele a segunda porta de entrada de eltrons na cadeia de transporte de eltrons, em direo ao oxignio. A enzima Succinato Desidrogenase tem FAD como grupo prosttico e catalisa a oxidao de succinato fumarato: os e- e os prtons do succinato so transferidos para o FAD, que se reduz a FADH2. Os prtons presentes no FADH2 so devolvidos matriz mitocondrial. O complexo II no contribui para a formao do gradiente de prtons. No complexo II, os eltrons provenientes do succinato so transferidos ao FAD, grupo prosttico da succinato desidrogenase; a seguir so captados por centros Fe-S e pelo citocromo b560, passando, ento para a coenzima Q. A coenzima Q o ponto de convergncia de eltrons provenientes de NADH (Complexo I), succinato (Complexo II), glicerol 3-fosfato e acil-CoA. Coenzima Q ou Ubiquinona (CoQ) uma quinona com uma longa cadeia lateral composta de unidades isoprnicas. A forma mais encontrada nos mamferos apresenta 10 unidades. As caractersticas hidrofbicas da CoQ permitem sua mobilidade na fase lipdica da membrana, ao contrrio dos outros

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componentes da cadeia de transporte de eltrons, que tm posies relativamente fixas na membrana mitocondrial, com exceo do citocromo c. Citocromos de vrios tipos participam da cadeia de transporte de eltrons. So protenas transportadoras de eltrons que contm heme como grupo prosttico. O on de ferro o responsvel pela capacidade de transferncia de eltrons desta protena: O on pode alterar entre Fe 2+ e Fe3+. Os citocromos so classificados em a, b e c, segundo o espectro de absoro que apresentam. Os trs tipos esto representados na cadeia de transporte de eltrons. Cada citocromo constitudo por uma cadeia polipeptdica com uma sequncia de aminocidos que lhe prpria. Nos citocromos dos tipos b e c, o grupo heme idntico ao da hemoglobina quanto aos radicais substituintes. No tipo a, aparece um grupo heme modificado, com um grupo isoprnico e um grupo formila em lugar de grupos vinila e metila, respectivamente. Os citocromos diferem tambm quanto forma com que o grupo heme est ligado cadeia proteica. Nos tipos a e b, a ligao protena no-covalente e, no tipo c, covalente (tioter), formada com resduos de cistena.

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COMPLEXO III O Complexo III transfere eltrons da coenzima Q para o citocromo c. O Complexo III (Coenzima Q citocromo c redutase) constitudo por 2 citocromos b (b562 e b566, os ndices indicam o pico mximo de absoro e caracteriza cada subtipo de citocromo), por um centro Fe-S e pelo citocromo c1. As transferncias de eltrons da coenzima Q para os componentes do complexo III, e deste para o citocromo c, so acompanhadas de movimento de prtons: os citocromos e o centro Fe-S recebem apenas eltrons, e os prtons da CoQ reduzida (CoQH2) so liberados no espao intermembranas. O

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Complexo III promove a oxidao da coenzima Q e a reduo do citocromo c, contribuindo para a criao do gradiente de prtons. O citocromo c uma protena pequena localizada na face externa da membrana interna da mitocndria. Seu tamanho e mobilidade fazem com que cumpra sua funo na cadeia de transporte de eltrons: conectar o Complexo III, do qual recebe eltrons, ao Complexo IV ao qual doa eltrons.

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COMPLEXO IV O Complexo IV (citocromo c oxidase) transfere eltrons para o oxignio. Ele contm 2 citocromos do tipo a (a e a3) e dois ons de cobre, cada qual associado a um dois citocromos. Os ons de cobre alternando entre Cu 2+ e Cu1+ fazem parte do transporte de eltrons. O Complexo IV responsvel pela doao de 4 eltrons para a molcula de O2 que, ligando-se a prtons do meio, converte-se em 2 molculas de H2O. A retirada de prtons da matriz mitocondrial contribui para o estabelecimento do gradiente de prtons. Alm disto, o Complexo IV contribui para a produo do gradiente lanando prtons da matriz para o espao intermembranas. A utilizao de O 2 pelo complexo IV de cerca de 95% do O2 consumido pelo homem; a produo de H2O neste processo chega a cerca de 300 ml dirios (gua metablica). Essa gua fundamental para a sobrevivncia do indivduo, como no caso dos animais que hibernam ou de camelos, que passam longos perodos sem ingerir gua. O caminho exato percorrido pelos eltrons no Complexo IV no ainda conhecido. Acredita-se que os eltrons do citocromo c so recebidos pelo complexo formado entre o citocromo a e um on de cobre (Cu A). Depois so transferidos para o citocromo a3 ligado ao outro on de cobre (CuB), e, finalmente, para o O2, que se combina com prtons da matriz, reduzindo-se a gua.

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CONTEXTUALIZANDO Esporte e Metabolismo Atletas treinados, especialmente os de elite, so mais conscientes do resultado do metabolismo aerbio e anaerbio do que as pessoas que no so atletas. As caractersticas genticas e o treinamento so importantes no sucesso do atleta, porm uma compreenso aguda da fisiologia e do metabolismo igualmente importante. Para planejar a nutrio adequada para o desempenho, um atleta srio deve compreender a natureza do metabolismo e como ele se relaciona ao esporte escolhido. A musculatura, ao trabalhar, tem quatro diferentes fontes de energia disponveis aps um perodo de repouso: 1. A creatina fosfato, que reage diretamente com o ADP na fosforilao em nvel de substrato para produzir ATP. 2. A glicose derivada dos depsitos musculares de glicognio, consumida inicialmente pelo metabolismo anaerbio. 3. A glicose do fgado, derivada tanto de depsitos de glicognio quanto da gliconeognese a partir do cido lctico produzido no msculo (ciclo de Cori), novamente consumida inicialmente pelo metabolismo anaerbio. 4. Metabolismo aerbio nas mitocndrias musculares. Inicialmente as quatro fontes de energia esto disponveis para o msculo. Quando a creatina fosfato esgota-se, restam as outras fontes. Quando o glicognio muscular termina, o estmulo anaerbio fornecido por ele diminui proporcionalmente, e, quando o glicognio heptico acaba, resta apenas o metabolismo aerbio a dixido de carbono e gua. Atletas bem condicionados e treinados apresentam um maior nmero de mitocndrias em suas clulas musculares. Um grande atleta americano, Greg LeMond, foi vtima

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de um tiro de chumbo grosso nas costas durante uma caada. Ele se recuperou, mas apesar de ganhar mais prmios em competies, nunca se sentiu realmente bem novamente. Comeou a ganhar peso e a no responder ao treinamento. Depois de alguns exames descobriu que tinha uma rara condio chamada miopatia mitocondrial. Quando ele treinava intensamente, suas mitocndrias comeavam a desaparecer. Ele era essencialmente um atleta aerbio sem a capacidade de processar combustvel aerobiamente. Da se pode avaliar a importncia da cadeia transportadora de eltrons e das mitocndrias para o atleta (Campbell & Farrel, 2008). ATIVIDADES DE AVALIAO 1. Citar os compostos que fazem parte da cadeia de transporte de eltrons e caracteriz-los quimicamente. 2. Esquematizar a sequncia dos compostos da cadeia de transporte de eltrons, indicando os transportadores de eltrons e os transportadores de prtons e eltrons. 3. Indicar a localizao celular da cadeia de transporte de eltrons. 4. Indicar o nmero de ATP sintetizados para cada NADH e FADH2 oxidados. 5. Citar exemplos de processos biolgicos que utilizam ATP.

Bibliografia Comentada Campbell, M. K.; Farrel, S. O. Bioqumica. Vol 3. So Paulo: Thomson Learning - 2008. No Captulo 20 do vol. 3, o assunto Cadeia de Transporte de Eltrons abordado de forma muito didtica. Champe, P. C.; Harvey, R. A.; Ferrier, D. R. Bioqumica Ilustrada. 4 Ed. Porto Alegre: Artmed, 2009. Na Unidade II do livro, no Captulo 6, so apresentados tpicos relativos ao assunto abordado. O livro ricamente ilustrado tornando o assunto de fcil compreenso. Marzzoco, A.; Torres, B. B. Bioqumica Bsica. 2 ed. 1999. Rio de Janeiro: Editora Guanabara Koogan S. A. O Captulo 11 da Parte 3 desse livro explana de forma bastante compreensiva o assunto Cadeia de Transporte de Eltrons. Smith, C.; Marks, A. D.; Lieberman, M. Bioqumica Mdica Bsica de Marks Uma abordagem clnica. 2 ed. Porto Alegre: Artmed, 2007. O Captulo 21 do livro aborda o assunto com muito detalhamento e de forma didtica. LEITURA, VDEOS E SITES RECOMENDADOS: www.biotopics.co.uk/a2/electrontransportchain.html vcell.ndsu.edu/animations/etc/movie.htm

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CAPTULO 9: FOSFORILAO OXIDATIVA E LANADEIRAS DE ELTRONS OBJETIVOS: Conhecer as lanadeiras de eltrons e o gradiente de protns gerados nesses processos. Diferenciar e definir desacopladores e inibidores da fosforilao oxidativa. Descrever a teoria de Mitchell, para o acoplamento de eltrons durante a fosforilao oxidativa. A transferncia de eltrons ao longo da cadeia de transporte de eltrons energeticamente favorecida, j que o NADH um forte doador de eltrons, e o oxignio molecular um grande aceptor de eltrons. O fluxo de eltrons do NADH para o oxignio, porm, no resulta diretamente na sntese de ATP. Os componentes da cadeia de transporte de eltrons apresentam-se organizados em ordem crescente de potenciais de xido-reduo, desde as coenzimas reduzidas at ao Oxignio. As transferncias de eltrons se processam com liberao de energia, aproveitada para sintetizar ATP. Uma parte da energia liberada pelas reaes de oxidao na cadeia transportadora de eltrons usada para acionar a fosforilao do ADP. As reaes de oxidao que liberam energia originam o bombeamento de prtons e, consequentemente, o gradiente de pH pela membrana mitocondrial interna. Alm do gradiente de pH, h uma diferena de voltagem pela membrana, gerada pelas diferenas de concentrao de ons nos lados interno e externo. A energia do potencial eletroqumico (queda de voltagem) pela membrana convertida em energia qumica armazenada pelo ATP pelo processo de acoplamento. Como ocorre a conexo entre o Transporte de Eltrons e a Fosforilao uma pergunta que exige resposta. necessrio um fator de acoplamento para ligar a oxidao e a fosforilao. Esse acoplamento explicado pela teoria quimiosmtica conhecida tambm como hiptese de Mitchell. O transporte de eltrons est acoplado fosforilao do ADP pelo bombeamento de prtons atravs da membrana mitocondrial interna. Esses prtons so bombeados da matriz para o espao intermembranas. Esse processo cria, atravs da membrana mitocondrial interna, um gradiente eltrico (com mais cargas positivas no lado externo da membrana do que no lado interno) e um gradiente de pH (o meio externo da membrana est em pH mais baixo do que o meio interno). A energia gerada por esse gradiente de prtons suficiente para impulsionar a sntese de ATP. Assim, o gradiente de prtons funciona como o intermedirio comum que acopla a oxidao fosforilao. Um complexo proteico oligomrico, conhecido como ATP sintase, separado dos complexos de transporte de eltrons, exerce a funo de

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sintetizar ATP. A ATP sintase compreende dois componentes, cada um, constitudo por vrias cadeias polipeptdicas. ATP Sintase Fica nas microesferas que esto na face interna da membrana interna da mitocndria. As microesferas so ligadas membrana por pequenas hastes. A ATP-Sintase compreende dois componentes: 1. Poro esfrica chamada: Fator de acoplamento 1 (F1) (corresponde s microesferas que contm os stios de sntese de ATP). 2. A poro 2 fica embebida na membrana interna constituindo um canal atravs do qual os prtons retornam matriz mitocondrial. chamada Fo porque contm o stio de ligao para oligomicina (um antibitico que inibe a sntese de ATP, pois se liga ao Fo da ATP sintase, que se torna impermevel protena). Em conformidade com o que prope a teoria quimiosmtica aps os prtons serem transferidos para o lado citoslico da membrana mitocondrial interna, eles retornam matriz mitocondrial. A membrana interna da mitocndria impermevel a prtons em toda a sua extenso exceto na ATP sintase. por esse canal que os prtons atravessam a membrana, de volta matriz mitocondrial. As velocidades do transporte de eltrons e da sntese de ATP so reguladas pela concentrao de ADP. Porm as necessidades celulares de ATP variam de acordo com o estado fisiolgico. Por exemplo: uma fibra muscular pode ter suas necessidades aumentadas de 100 vezes em segundos, quando passa do repouso para o exerccio intenso. Para promover o ajuste da produo de ATP ao seu gasto, o transporte de eltrons e a sntese de ATP so acoplados, em outras palavras, s h oxidao de coenzimas se houver sntese de ATP, e vice-versa. Essa regulao da velocidade de oxidao das coenzimas (equivalente velocidade de consumo de oxignio) exercida pela concentrao de ADP (tem concentrao limitante) chama-se controle respiratrio. O resultado do controle respiratrio um perfeito ajuste entre a velocidade de produo de coenzimas reduzidas e a velocidade de sua oxidao pela cadeia de transporte de eltrons, com produo de ATP. esse ajuste que vai regular a produo de energia pela clula. HIPERTEXTO O salicilato, quel um produto da degradao da aspirina nos humanos, solvel em lipdeos e tem um prton dissocivel. Em altas concentraes, como no envenenamento por salicilato, ele capaz de desacoplar parcialmente a mitocndria. O declnio da concentrao de ATP na clula e consequente aumento de AMP no citosol estimulam a gliclise. A superestimulao da rota

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glicoltica resulta em nveis aumentados de cido ltico no sangue e acidose metablica. Desacopladores Desacopladores so compostos que inibem a fosforilao do ADP sem afetar o transporte de eltrons. Um modo de ao razovel para os desacopladores pode ser proposto com base na existncia de um gradiente de prtons. Um exemplo de desacoplador o 2,4-dinitrofenol que um cido; sua base conjugada, o nion dinitrofenolato, o verdadeiro desacoplador, uma vez que pode reagir com prtons no espao intermembranas, reduzindo, dessa forma, a diferena na concentrao de prtons entre os dois lados da membrana mitocondrial interna. Antibiticos como valinomicina e gramicidina A so desacopladores. Eles so ionforos, e criam um canal pelo qual ons como H+, K+ e Na+ podem atravessar a membrana. O gradiente de prtons ento anulado, levando ao desacoplamento da oxidao e da fosforilao. Quando os processos de oxidao mitocondrial esto operando normalmente, o transporte de eltrons do NADH ou do FADH2 para o oxignio resulta na produo de ATP. Quando um desacoplador est presente, o oxignio ainda reduzido a H2O, porm no se produz ATP. Se o desacoplador for removido, a sntese de ATP ligada ao transporte de eltrons reiniciada. Portanto, desacopladores so substncias capazes de dissociar o transporte de eltrons da fosforilao oxidativa. Quando os dois processos so desacoplados, o transporte de eltrons pode prosseguir, porm a sntese de ATP para. A energia produzida pelo transporte de eltrons liberada em forma de calor, ao invs de sintetizar ATP. Um exemplo a aspirina e outros salicilatos que desacoplam a fosforilao oxidativa. Superdosagem dessas substncias do como resultado um aumento da temperatura corporal. Inibidores Existem drogas capazes de agir de modo especfico sobre cada um dos complexos da cadeia de transporte de eltrons, impedindo o prosseguimento da transferncia de eltrons. So os inibidores. O resultado disso a paralisao do transporte de eltrons e das vias metablicas que dependem da cadeia para a reoxidao de coenzimas. Assim, um transportador reduzido, incapaz de passar adiante seus eltrons, tambm incapaz de receber eltrons do transportador antecedente. Dessa forma os componentes da cadeia localizados antes do ponto de atuao da droga estaro reduzidos, e a cadeia torna-se inoperante. Sem o transporte de eltrons no se forma o gradiente de prtons e, consequentemente, no h sntese de ATP. Os inibidores so divididos em: 1. Inibidores caractersticos da cadeia respiratria. 2. Inibidores da fosforilao oxidativa.

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Inibidores que paralisam a respirao pelo bloqueio da cadeia respiratria atuam em trs locais: 1. Impedindo a oxidao de substratos que se comunicam diretamente com a cadeia respiratria, via uma desidrogenase dependente de NAD, por bloquear a transferncia de eltrons da Flavoprotena NADH redutase para a CoQ. Ex: Barbituratos, e Rotenona. 2. Inibindo a cadeia respiratria entre os citocromos b, CoQ e o citocromo c1. Ex.: Antimicina A (antibitico). 3. Inibindo a transferncia de eltrons do citocromo aa3 para o oxignio (podem paralisar totalmente a respirao). So inibidores muito potentes, como, por exemplo: Azida (N3-), Monxido de carbono (CO) e cianeto (CN-). Inibidores da Cadeia de Transporte de Eltrons e o complexo em que atuam Inibidores Barbituratos (hipnticos) Rotenona (inseticida) Malonato (anlogo do succinato, inibidor competitivo da succinato desidrogenase) Antimicina A Cianeto, monxido de carbono, cido sulfrico, azida sdica II Complexo I

III IV

Fosforilao no Nvel do Substrato a sntese de ATP obtida diretamente em reaes que fazem parte da gliclise e do ciclo de Krebs e que utilizam como substratos compostos ricos em energia: 1,3 Bisfosfoglicerato; Fosfoenolpiruvato; Succinil CoA. A fosforilao no nvel do substrato no afetada por desacopladores. A produo de ATP pela fosforilao no nvel do substrato responde por uma pequena frao do total produzido em condies aerbias e, por ser independente do transporte de eltrons, no afetada por desacoplado. Cadeias de Transporte de Eltrons Bacteriano Nas bactrias, encontram-se cadeias de transporte de eltrons bem mais diversificadas. Nelas, alm das coenzimas reduzidas, podem ser fornecedores de eltrons: NH4+, NO2-, H2S, H2, S e Fe. O aceptor final tambm pode variar, e

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alm do O2, podem ter esta funo: NO3-, NO2-, SO42-, CO32 e substncias orgnicas, como o fumarato. Quando o aceptor final diferente do O 2, a cadeia dita anaerbia e caracteriza a respirao anaerbia. Circuitos de Transporte ou Lanadeiras A membrana interna da mitocndria impermevel a NAD + e NADH e, portanto, a oxidao do NADH citoslico no pode ser feita diretamente pela cadeia de transporte de eltrons. Porm, as coenzimas reduzidas no citosol podem ser indiretamente oxidadas pela cadeia de transporte de eltrons; graas a sistemas designados circuitos ou lanadeiras. Nelas, os eltrons do NADH so transferidos para um composto citoslico, que, reduzido, pode atravessar a membrana interna da mitocndria. Alternativamente, os eltrons so transferidos para um composto que, pode transferir eltrons para um componente da membrana interna. Por qualquer dos dois processos, o composto que transporta os eltrons reoxidado; ao do-lo, retorna ao citossol e pode participar de um novo ciclo. H dois tipos de lanadeiras: Glicerol Fosfato e Malato Aspartato Lanadeira glicerol fosfato um sistema transportador que foi muito estudado no msculo do vo de insetos. Nesse mecanismo usada uma enzima dependente de FAD presente na face externa da membrana mitocondrial interna que oxida o glicerol fosfato. O glicerol fosfato produzido pela reduo de diidroxiacetona fosfato; no curso da reao o NADH oxidado a NAD+. Nessa reao, o agente oxidante (que tambm reduzido) o FAD, e o produto o FADH2, que passa ento os eltrons pela cadeia transportadora de eltrons, levando produo de 1,5 mol de ATP para cada mol de NADH citoslico. Esse mecanismo tambm foi observado no msculo e no crebro de mamferos. Lanadeira Malato-Aspartato Nas clulas hepticas, cardacas e renais de mamferos o NADH citosslico reduz oxaloacetato, em uma reao catalisada pela malato desidrogenase citosslica. O malato formado entra na mitocndria, onde oxidado pela malato desidrogenase mitocondrial, que tambm utiliza, NAD + como coenzima. Este processo produz NADH mitocondrial a partir de NADH citosslico, apesar da impermeabilidade da membrana interna da mitocndria ao NADH. O oxaloacetato formado na mitocndria no atravesssa a membrana interna, mas pode receber um grupo amino do glutamato formando aspartato, que sai da mitocndria e no citossol, refenera o oxaloacetato. A passagem de malato e aspartato atravs da membrana interna da mitocndria efetuada por protenas presentes nesta membrana. Resumindo pode-se dizer que esta lanadeira usada para transportar equivalentes redutores do NADH

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citosslico para a matriz mitocondrial no rim, fgado e corao dos mamferos. O malato pode transpor a membrana mitocondrial, mas o oxaloacetato no.

CONTEXTUALIZANDO Tecido Adiposo Marrom: Um caso de ineficincia til Quando o transporte de eltrons gera um gradiente de prtons, parte da energia produzida assume a forma de calor. H duas situaes nas quais a dissipao da energia como calor til para o organismo: a termognese sem tremores induzida pelo frio (produo de calor) e a termognese induzida pela dieta. A termognese sem tremores, induzida pelo frio, permite que os animais sobrevivam em baixas temperaturas aps terem se adaptado a essas condies, e a termognese induzida pela dieta evita o desenvolvimento da obesidade apesar da alimentao excessiva prolongada. (A energia dissipada como calor na medida em que as molculas de alimento so metabolizadas em vez de serem armazenadas como gordura.) Esses dois processos podem ser bioquimicamente iguais, ocorrendo, principalmente, se no exclusivamente, no tecido adiposo marrom (TAM), que rico em mitocndrias (O tecido adiposo marrom obtm sua cor por causa do grande nmero de mitocndrias presentes nele, em vez das gorduras brancas usuais.) A chave para esse uso ineficiente de energia no tecido adiposo marrom parece ser uma protena mitocondrial chamada termogenina, tambm conhecida como protena desacopladora. Quando tal protena ligada membrana ativada na termognese, ela funciona como um canal de prtons pela membrana mitocondrial interna. Como todos os outros desacopladores, ela abre um buraco na membrana mitocondrial e diminui o efeito do gradiente de prtons. Os prtons fluem de volta para a matriz por meio da termogenina, desviando-se do complexo ATP sintase. Poucas pesquisas sobre a bioqumica ou a fisiologia do tecido adiposo marrom foram realizadas em humanos. Recentemente os pesquisadores dedicaram grandes esforos para identificar o gene que codifica a protena desacopladora envolvida na obesidade. Alguns pesquisadores tambm propuseram uma ligao entre a sndrome de morte sbita do lactente e o metabolismo do tecido adiposo marrom. Acreditam que uma ausncia de TAM, ou mesmo uma mudana para tecido adiposo normal muito precocemente, poderia levar ao resfriamento da temperatura corporal de um modo capaz de afetar o sistema nervoso central.

ATIVIDADES DE AVALIAO 1. Citar trs inibidores da cadeia de transporte de eltrons, indicando os transportadores sobe os quais atuam.

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2. Verificar se possvel a oxidao de malato e de succinato em presena de rotenona. 3. Descrever a hiptese do acoplamento quimiosmtico para a fosforilao oxidativa. 4. Indicar o nmero de ATP sintetizados para cada NADH e FADH2 oxidados. 5. Definir desacoplador e citar um exemplo. 6. Definir inibidor de fosforilao oxidativa e citar um exemplo. 7. Definir controle respiratrio. 8. Definir fosforilao ao nvel do substrato e citar as reaes onde ocorre esta fosforilao. 9. A membrana interna da mitocndria impermevel a ATP e NADH. Mostrar como: a) O NADH produzido na via glicoltica pode ser oxidado na cadeia respiratria (lanadeiras do malato e do glicerol-fosfato). b) O ATP produzido na mitocndria pode ser utilizado no citosol. Bibliografia Comentada Campbell, M. K.; Farrel, S. O. Bioqumica. Vol 3. So Paulo: Thomson Learning - 2008. No Captulo 20, do vol. 3, o assunto Fosforilao Oxidativa e Inibidores e Desacopladores da Cadeia de Transporte de Eltrons so abordados de forma muito didtica. Champe, P. C.; Harvey, R. A.; Ferrier, D. R. Bioqumica Ilustrada. 4 Ed. Porto Alegre: Artmed, 2009. Na Unidade II do livro, no Captulo 6, so apresentados tpicos relativos ao assunto abordado. O livro ricamente ilustrado tornando o assunto de fcil compreenso. Marzzoco, A.; Torres, B. B. Bioqumica Bsica. 2 ed. 1999. Rio de Janeiro: Editora Guanabara Koogan S. A. O Captulo 11 da Parte 3 desse livro explana de forma bastante compreensiva o assunto Cadeia de Transporte de Eltrons e Fosforilao Oxidativa. Smith, C.; Marks, A. D.; Lieberman, M. Bioqumica Mdica Bsica de Marks Uma abordagem clnica. 2 ed. Porto Alegre: Artmed, 2007. O Captulo 21 do livro aborda o assunto com muito detalhamento.

CAPTULO 10: METABOLISMO DE CARBOIDRATOS GLICLISE E FORMAO DE ACETIL-CoA OBJETIVOS: Entender o metabolismo. Da Glicose Piruvato (Falta o verbo no objetivo)

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Oxidao do Piruvato: do Piruvato Acetil-CoA (Falta o verbo no objetivo) Produo de Energia (Falta o verbo no objetivo) Gliclise Anaerbica (Falta o verbo no objetivo) O uso da glicose como fonte energtica pode ser considerada universal, pois dos microorganismos ao homem quase todas as clulas so potencialmente capazes de atender suas demandas energticas apenas a partir deste acar. A glicose o principal acar da dieta e o carboidrato que circula no sangue para garantir que todas as clulas tenham um fornecimento de substrato energtico contnuo. A glicose armazenada nas clulas como glicognio, o qual pode fornecer uma fonte interna de substrato energtico para a gliclise em situaes de emergncia. Assim sendo pode-se dizer que a glicose prontamente disponvel a partir da dieta, de reservas internas de glicognio e do sangue. Ela imprescindvel para algumas clulas e tecidos, como hemcias e tecido nervoso, por constituir o nico substrato que estes tecidos so capazes de oxidar para obter energia. O crebro utiliza glicose quase exclusivamente como um substrato energtico. O primeiro estgio do metabolismo da glicose chamado gliclise. A gliclise um processo anaerbio que, sozinho, produz apenas duas molculas de ATP. A oxidao aerbia completa da glicose em dixido de carbono e gua (envolvendo a gliclise, o ciclo do cido ctrico e a fosforilao oxidativa) produz energia equivalente a 32 molculas de ATP. Durante atividades fsicas vigorosas, o corpo metaboliza aerobiamente os carboidratos, as gorduras e as protenas para gerar combustvel; entretanto, mais carboidratos so utilizados conforme a intensidade da atividade fsica aumenta. Alm de servir como uma fonte anaerbica e aerbica de ATP, a gliclise uma rota anablica que fornece precursores para a biossntese. Por exemplo, no fgado e no tecido adiposo, essa rota produz piruvato como um precursor para a biossntese de cidos graxos. A gliclise tambm fornece precursores para a sntese de compostos, como aminocidos e ribose-5-fosfato, o precursor de nucleotdeos. Em corridas de 400 metros, em que ocorrem exploses repentinas de gasto de energia, o corpo utiliza os carboidratos mais rapidamente do que pode process-los de modo aerbio. A glicose ser metabolizada por meio da gliclise, com o piruvato sendo o produto final. O piruvato ser convertido em cido lctico, que, consequentemente, ser exportado dos msculos para o fgado. Assim, os dois ATP da gliclise anaerbia sero uma fonte de energia adicional nessas condies. Sob condies aerbias, o principal objetivo da gliclise alimentar o piruvato no ciclo do cido ctrico, em que as etapas metablicas posteriores geraro um aumento considervel na sntese de ATP. Portanto, todas as clulas oxidam glicose a piruvato para obter ATP; o piruvato pode ser oxidado a CO2, aumentando muito a produo de ATP. Nas clulas anaerbias, a degradao da glicose para no piruvato.

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Oxidao parcial da glicose

Glicose

Piruvato

Permite aproveitar menos de 10% da energia total da glicose (A maior parte fica conservada como piruvato).

libera ~200kj.mol

-1

Oxidao completa da glicose

Glicose

CO2
libera 2870kj.mol
-1

Nas clulas aerbias, o piruvato subsequentemente oxidado, com grande ganho de ATP. Esquema da oxidao completa da glicose Na gliclise, no citosol, a glicose convertida em frutose-1,6-bisfosfato, que gera duas molculas de piruvato. Quando o piruvato formado, ele pode ter vrios destinos. No metabolismo aerbio, o piruvato perde dixido de carbono, e os dois tomos de carbono restantes ficam ligados coenzima A como um grupo acetila para formar a acetil-CoA, que, ento, entra no ciclo do cido ctrico. No metabolismo anaerbio existem dois destinos para o piruvato. Em organismos capazes de fermentao alcolica, o piruvato perde dixido de carbono, dessa vez produzindo acetaldedo, que ser ento reduzido a etanol. O destino mais comum para o piruvato no metabolismo anaerbio a sua reduo a lactato, chamada gliclise anaerbia para distinguir da converso de glicose a piruvato que conhecida simplesmente como gliclise. O metabolismo anaerbio a nica fonte de energia nas hemcias dos mamferos, assim como em diversas espcies de bactrias, como o Lactobacillus no soro do leite e o Clostridium botulinum em alimentos enlatados estragados. Em todas essas reaes a converso de glicose ao produto uma reao de oxidao, exigindo reaes de reduo em que NAD + convertido em NADH. Gliclise: Oxidao de Glicose a Piruvato Na gliclise ocorre, portanto, duas fosforilaes por ATP e duas fosforilaes por fosfato inorgnico. Os quatro grupos fosfato so transferidos para ADP, formando quatro ATP.

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A gliclise pode ser dividida em quatro etapas. Estas quatro etapas so compostas por dez reaes sequenciais que compem a gliclise. Etapa I: Ocorre uma dupla fosforilao da hexose, custa de 2 ATP, originando uma hexose com 2 grupos fosfato. Na primeira reao da gliclise, os organismos efetuam a fosforilao da glicose atravs de uma reao que utiliza ATP como doador de grupo fosfato. A reao essencialmente irreversvel e catalisada por quinases. Quinases so enzimas que transferem um grupo fosfato de um composto de alta energia (em geral ATP) para um composto aceptor. Na maioria dos organismos e tecidos, a enzima hexoquinase quem atua catalisando a fosforilao da glicose. No fgado, quem atua a glicoquinase. Em seguida, ocorre a isomerizao da glicose 6fosfato a frutose 6-fosfato, por ao da isomerase, a fosfoglicoisomerase, e nova fosforilao, utilizando ATP catalisada pela fosfofrutoquinase. Forma-se ento uma hexose com 2 grupos fosfato: a 1,6-bisfosfato. Etapa II: Ocorre a clivagem da frutose 1,6 bisfosfato, produzindo duas trioses fosforiladas: diidroxiacetona fosfato e gliceraldedo 3-fosfato. Essa reao catalisada por aldolase. As duas trioses fosforiladas so ismeras e devem ser interconvertidas por ao de uma isomerase especfica a triose fosfato isomerase. A converso de diidroxiacetona fosfato em gliceraldedo 3fosfato possibilita que todos os carbonos da glicose sejam oxidados a piruvato, apesar de apenas o gliceraldedo 3-fosfato ser substrato da prxima enzima e poder, portanto, prosseguir pela via glicoltica. Etapa III: Nesta etapa ocorre oxidao e nova fosforilao, desta vez por fosfato inorgnico (Pi), das trioses fosfato, formando duas molculas de um intermedirio com 2 grupos fosfato. As duas molculas de gliceraldedo 3fosfato obtidas por fosforilao custa de 2 ATP so novamente fosforiladas, agora por fosfato inorgnico, formando duas molculas de 1,3-bisfosfoglicerato; assim, o substrato, um aldedo, oxidado a um cido. Esta etapa cumprida por uma reao de xido-reduo complexa, catalisada pela gliceraldedo 3fosfato desidrogenase. Etapa IV: Compreende dois eventos de formao de ATP. Ocorre transferncia dos grupos fosfato deste intermedirio para ADP, formando 4 ATP e 2 molculas de piruvato. A gliclise tem, portanto, um rendimento de 2 ATP: para cada molcula de glicose so produzidos 4 ATP (2 por triose), dos quais devem ser descontados os 2 ATP consumidos na Etapa I.

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http://www.fortunecity.com

Gliclise Anaerbia: Fermentaes O NADH produzido na gliclise pode ser oxidado anaerobiamente: o piruvato convertido a lactado ou etanol Equao geral da gliclise (eq. 1) :
O C6H12O6 + 2ADP + 2Pi + 2NAD+ 2H3C C COO- + 2ATP + 2H2O + 2NADH + 2H+ Glicose Piruvato

A reduo de NAD+ est associada oxidao da glicose e produo de ATP. Como o NAD+ existe nas clulas em concentraes limitantes, muito inferiores s dos substratos, a manuteno do funcionamento da gliclise depende da reoxidao do NADH. Os organismos regeneram o NAD + atravs de dois processos diferentes, segundo a disponibilidade de oxignio. Quando

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em situao de aerobiose, utilizam o oxignio para oxidar o NADH enquanto no caso de haver anaerobiose, o prprio piruvato produzido pela gliclise serve como aceptor dos eltrons do NADH, sendo reduzido a lactato (equao 2):
O
lactato

OH 2H3C C COO- + 2 NAD+

desidrogenase

2H3C C COO- + 2 NADH + 2 H+

H Lactato

Piruvato

HIPERTEXTO Acidose Ltica A deficincia da enzima piruvato desidrogenase evita a oxidao do piruvato, levando a seu acmulo no citoplasma. Isto aumenta a converso de piruvato em lactato e produz um aumento do lactato e piruvato sanguneos. Os prtons que acompanham esses nions so neutralizados pelo bicarbonato srico, criando uma acidose metablica com uma elevada diferena de nions. A acidose ltica uma das vrias acidoses metablicas causadas pelo acmulo de cidos orgnicos no sangue. Algumas espcies de bactrias, as hemcias, fibras musculares de contrao rpida (fibras brancas) e fibras musculares em geral, quando submetidas a esforo intenso, utilizam esse processo. Nestas condies, o oxignio trazido pela circulao torna-se insuficiente para promover a oxidao da grande quantidade de NADH resultante do trabalho muscular e a fibra muscular fica submetida a uma anaerobiose relativa. A oxidao do NADH pelo piruvato gera, ento, o lactato caracteristicamente produzido por msculos em anaerobiose, permitindo que, pela regenerao do NAD+, a gliclise possa prosseguir, formando ATP.
OH C6H12O6 + 2ADP + 2Pi 2H3C C COO- + 2 ATP + 2H2O H Glicose Lactato

A equao acima a soma da equao de converso de glicose a piruvato (equao 1) com a de converso de piruvato a lactato (equao 2) e chama-se equao geral da converso de glicose a lactato.

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Em leveduras e algumas bactrias, a regenerao do NAD+ feita por outro processo: o piruvato descarboxilado, originando acetaldedo, que, servindo como aceptor de eltrons do NADH, reduz-se a etanol: O
H3C C COO- + H+ Piruvato O
lcool

O
Piruvato descarboxilase

H3C C H + CO2 Acetaldedo OH H3C C H + NAD+ DEGRADAO ANAERBICA DA GLICOSE = FERMENTAO

H3C C H + NADH + H+
desidrogenase

H
Etanol

As fermentaes diferem nas reaes que regeneram o NAD +, dependendo das enzimas utilizadas no processo e no produto final da reao ou seja, o piruvato pode ser convertido a lactato, etanol, butirato, propionato, etc. Ento, pode-se afirmar que existe fermentao ltica, fermentao alcolica, fermentao propinica etc. Converso de Piruvato a Acetil-CoA Em aerobiose, a converso do piruvato em acetil-CoA o primeiro passo para sua oxidao total. Nas clulas eucariticas, o piruvato do citosol entra na mitocndria, atravs de uma translocase especfica, e transformado em acetil-CoA, conectando, portanto, a gliclise e o Ciclo de Krebs. Assim sendo, o piruvato deixa de ser o aceptor dos eltrons do NADH produzido pela gliclise e esta coenzima no ser regenerada no citosol; ser oxidada pelo oxignio, aceptor final de eltrons no metabolismo aerbio. O piruvato convertido a acetil-CoA, atravs de uma descarboxilao oxidativa, de acordo com a equao: O
H3C C COO- + HS CoA + NAD+ Piruvato Coenzima A

O
H3C C SCoA + NADH + CO2 Acetil-CoA

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CICLO DE KREBS

http://www.tudomaisumpouco.com/aula6respirao Via das pentoses fosfato (ou rota da hexose monofosfato) A rota da hexose monofosfato consiste em duas reaes oxidativas irreversveis, seguidas de uma srie de converses reversveis acar-fosfato. Nenhum ATP consumido ou produzido diretamente no ciclo o carbono 1 da glicose 6-fosfato liberado como CO2, e dois NADH so produzidos para cada glicose 6-fosfato, que entra na parte oxidativa da rota. Esta via ocorre no citosol da clula, e fornece uma importante poro do NADH da clula, que funciona como um redutor bioqumico. particularmente importante no fgado e glndulas mamrias, que so ativos na biossntese de cidos graxos, e no crtex adrenal, o qual ativo na sntese de esteroides dependente de NADH. Esta via tambm produz ribose-fosfato, necessria para a biossntese de nucleotdeos e d condies para o uso de acares de cinco carbonos.

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VIA DAS PENTOSES FOSFATO

http://www.bioq.unb.br/htm/textos_explic/via_pentoses.htm

Metabolismo de carboidratos Monossacardeos Os carboidratos so entregues s clulas principalmente na forma de glicose, juntamente com quantidades menores de outros monossacardeos. A frutose e a galactose so convertidas em glicose no fgado. A maior parte da glicose oxidada pelo ciclo do cido ctrico para atingir as necessidades de energia imediatas de todos os tecidos. Um pouco de glicose convertida em: ribose, frutose (para espermatozoides), desoxirribose, glicosamina e galactosamina, e esqueletos de carbono para a produo de aminocidos no essenciais. Carboidrato em excesso convertido em glicognio ou cidos graxos, que so depois armazenados como triglicerdeos no tecido adiposo. Galactose: convertida no fgado em UDFG (uridina difosfato glicose) que pode ser incorporada no glicognio ou convertida em glicose-1-PO4 e metabolizada pelas vias da glicose. Frutose: Sua entrada na clula no insulino-dependente. Pode ser convertida em glicose; aumenta a glicose ou triglicerdeos no sangue em indivduos suscetveis com diabetes no insulino-dependentes.

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GALACTOSE

GALACTOSE-1-PO4

GLICOSE

GLICOSE-1-PO4
UTP UPP G

GLICOSE-6-PO4

MSCULO

FRUTOSE
FGADO

GLICOGNIO

FRUTOSE-1,6-DIPO4

DIIDROXIACETONA FOSFATO

GLICOSE

GLICERALDEDO3-PO4

CIDO PIRVICO

A frutose e a galactose no so dependentes da insulina para entrar na clula. Glicognio, Amido, Sacarose e Lactose Glicognio: sintetizado principalmente pelo fgado e msculos quando a oferta de glicose supera as necessidades energticas imediatas destes rgos. Glicognio Heptico: Produz glicose (por degradao), que exportada para manter a glicemia (concentrao de glicose sangunea) nos perodos entre as refeies e no jejum noturno. Glicognio Muscular: Prov energia apenas para a fibra muscular em contrao intensa, quando a demanda energtica ultrapassa o aporte de O 2. A degradao do glicognio produz 1-fosfato. A glicose 1-fosfato convertida pela fosfoglixomutase. A glicose 6-fosfato que pode ser degradada pela gliclise, formando lactato, no msculo. No fgado, a glicose 6-fosfato preferencialmente hidrolisada por ao da glicose6-fosfatase, produzindo glicose, que liberada na circulao. A sntese de glicognio utiliza como precursor uma forma ativada de glicose e gasta 2 ATP por glicose incorporada.

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Doenas hereditrias do metabolismo do glicognio Tipo I von Gierke Enzima deficiente Glicose 6-fosfatase Consequncias Acmulo de glicognio heptico e aumento do fgado; inabilidade de corrigir a glicemia no jejum. Acmulo generalizado de glicognio, insuficincia cardiorrespiratria e morte precoce. Glicognio com ramificaes curtas, resultantes da ao do glicognio fosforilase. Glicognio com cadeias muito longas no ramificadas; morte precoce. Incapacidade de realizar exerccios intensos. Semelhantes s do tipo I, mas menos intensas. Semelhantes do tipo V. Semelhantes s do tipo I, mas menos intensas. Diminuio do glicognio heptico.

II

Pompe

-1,4 Glicosidase1

III

Cori

Enzima desramificadora

IV

Andersen

Enzima ramificadora

McArdle

Glicognio fosforilase muscular

VI

Hers

Glicognio fosforilase heptica

VII VIII

Tarui

Fosfofrutoquinase muscular Fosforilase quinase heptica

IX
1

Glicognio sintase heptica

Enzima lisossmicas que hidrolisa os segmentos lineares do glicognio; em indivduos normais, constitui uma via secundria do metabolismo do glicognio.

CONTEXTUALIZANDO As cries dentrias esto entre as doenas mais frequentes nos Estados Unidos e, possivelmente, no mundo, embora tratamentos modernos, como aplicaes de flor e uso do fio dental, tenham reduzido a sua incidncia entre os jovens. Os fatores que contribuem para a crie dentria so uma combinao de uma dieta com alto teor de acar refinado, o desenvolvimento da placa dentria e o metabolismo anaerbico. A dieta com alto teor de acar permite o pronto crescimento de bactrias na boca, e a sacarose talvez seja o acar mais facilmente usado por elas. Por outro lado, as bactrias podem fazer a sua cola de polissacardeos a partir desse acar no-redutor. As bactrias desenvolvem-se ampliando suas colnias pegajosas, formando placas na superfcie dos dentes. As bactrias que crescem debaixo da superfcie da placa fazem metabolismo anaerbico, j que o oxignio no se difunde pela superfcie encerada da placa dental. Os dois produtos predominantes, o lactato e o piruvato, so cidos orgnicos relativamente

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fortes, e so esses produtos cidos que, de fato, causam a destruio da superfcie esmaltada. As bactrias, claro, crescem melhor nos buracos das cries, e, se o esmalte for inteiramente degradado, as bactrias crescero ainda mais rapidamente na camada macia da dentina, embaixo do esmalte. A adio de flor gua resulta em uma superfcie de esmalte muito mais dura, e o fluoreto pode inibir o metabolismo das bactrias. O uso do fio dental diariamente rompe a placa e evita o estabelecimento de condies anaerbicas (Campbell, 2000).

ATIVIDADES DE AVALIAO 1. Quantas molculas de piruvato se formam a partir de uma molcula de glicose? 2. Que hexose d origem a trioses? 3. Indicar as reaes de xido-reduo. 4. Indicar os compostos ricos em energia. 5. Identificar as reaes catalisadas pelos seguintes tipos de enzimas: a) b) c) d) Quinase. Isomerase. Aldolase. Desidrogenase.

6. Considerando o n de molculas de ATP consumidas e formadas, estabelecer o saldo final de ATP na degradao de uma molcula de glicose pela via glicoltica. 7. Citar os compostos que devem ser fornecidos via glicoltica para: a) b) inici-la (haver formao de lactato). mant-la em funcionamento.

8. Indicar a funo da via glicoltica. 9. Esquematizar as reaes de fermentao alcolica que possibilitam a obteno de NAD+ na forma oxidada. 10. Citar as vitaminas necessrias para as seguintes converses: a) Glicose Lactato b) Lactato Glicose

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11. Escrever a reao de formao de acetil-CoA a partir de piruvato e indicar: a) As 5 coenzimas necessrias; b) As vitaminas envolvidas; c) A localizao celular.

Bibliografia Comentada Campbell, M. K.; Farrel, S. O. Bioqumica. Vol 3. So Paulo: Thomson Learning - 2008. No Captulo 17, do vol. 3, o assunto Gliclise abordado de forma muito didtica. Campbell, M. K. Bioqumica. 3 Ed. Porto Alegre: Artmed Editora, 2000. A contextualizao sobre cries, explica de modo didtico sua produo por anaerobiose. Champe, P. C.; Harvey, R. A.; Ferrier, D. R. Bioqumica Ilustrada. 4 Ed. Porto Alegre: Artmed, 2009. Na Unidade II do livro, no Captulo 8, so apresentados tpicos relativos ao assunto abordado. O livro ricamente ilustrado tornando o assunto de fcil compreenso. Marzzoco, A.; Torres, B. B. Bioqumica Bsica. 2 ed. 1999. Rio de Janeiro: Editora Guanabara Koogan S. A. Os Captulos 9, 12, 13 da Parte 3 desse livro explanam de forma bastante compreensiva os tpicos explorados nesse captulo. Smith, C.; Marks, A. D.; Lieberman, M. Bioqumica Mdica Bsica de Marks Uma abordagem clnica. 2 ed. Porto Alegre: Artmed, 2007. O Captulo 22 do livro aborda o assunto com muito detalhamento e de forma didtica.

LEITURA, VDEO E SITES RECOMENDADOS www.ebah.com.br/content/AFAAAAAkUAD/glicolise pathmicro.med.sc.edu/portuguese/chapter_3_bp.htm gratisvideoaulas.blogspot.com/.../biologia-glicolise-respirac

CAPTULO 11: GLICONEOGNESE OBJETIVOS: Verificar o catabolismo de glicose. Diferenciar a quebra e sntese de glicose no organismo.

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Compreender o papel da glicose no fgado, como reserva de energia. Relacionar glicose com doenas como, diabetes e glaucoma. Conceituar o consumo de glicose de forma anaerbica. A glicose ocupa um papel central no metabolismo, tanto como combustvel quanto como um precursor de carboidratos estruturais essenciais e de outras biomolculas. O crebro (consome 120 g de glicose por dia) e as clulas vermelhas do sangue (consomem 30 g de glicose, diariamente) so quase completamente dependentes da glicose como fonte de energia. preciso que o suprimento de glicose seja ininterrupto, por isso o organismo dispe de mecanismos destinados a manter a oferta de glicose circulante, possibilitando a captao contnua mesmo muito depois das refeies. proporo que diminui a glicose circulante, derivada da ingesto de alimentos, a degradao do glicognio heptico incumbe-se da manuteno da concentrao adequada de glicose sangunea. O nvel de glicose no sangue mantido nos limites normais pela liberao de glicose a partir do glicognio do fgado (glicogenlise), por exemplo, durante o sono, ou jejum prolongado. Porm, a capacidade de armazenamento de glicognio no fgado suficiente para suprir o crebro com glicose por apenas aproximadamente dez a dezoito horas na ausncia de ingesto de carboidratos, aps o que outra via metablica de produo de glicose, a gliconeognese, acionada. Essa via requer tanto enzimas mitocondriais como citoslicas. Durante o jejum de uma noite, cerca de 90% da gliconeognese ocorre no fgado com os rins fornecendo 10% das molculas de glicose recm-sintetizadas. No entanto, em um jejum prolongado, os rins tornam-se importantes produtores de glicose, cerca de 40%, da produo total.

HIPERTEXTO O principal fator envolvido na regulao dos nveis de glicose sangunea a prpria concentrao de glicose sangunea e de hormnios, particularmente insulina e glucagon. medida que os nveis de glicose sangunea se elevam aps uma refeio, a concentrao aumentada de glicose estimula as clulas do pncreas para estimular insulina. Certos aminocidos, particularmente arginina e leucina, tambm estimulam a liberao de insulina pelo pncreas. Os nveis sanguneos de glucagon, que secretado pelas clulas do pncreas, podem aumentar ou diminuir, dependendo do contedo da refeio. Os nveis de glucagon diminuem em resposta a uma refeio rica em carboidratos, mas podem aumentar em resposta a uma refeio rica em protenas. Aps uma refeio tpica mista contendo carboidrato, protena e gordura, os nveis de glucagon permanecem relativamente constantes enquanto os nveis de insulina aumentam (Smith, Allan & Lieberman, 2007).

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Fonte de energia para diferentes tecidos Composto Tecido Crebro Hemcias e leuccitos Medula renal Retina Mucosa intestinal Fgado Adiposo Msculos esquelticos e cardaco Crtex renal Fonte: Marzzoco & Torres, 1999. A energia livre da glicose sequestrada na forma de ATP por meio da gliclise, do ciclo do cido ctrico e da fosforilao oxidativa. A gliconeognese uma rota importante do metabolismo dos carboidratos e se processa no fgado e, minoritariamente, nos rins. Ela a rota metablica que atravs de precursores que no so carboidratos, tais como lactato, piruvato, glicerol e aminocidos, converte-os a glicose. Glicognio Glicose + + + + + + + + + + + + cidos graxos Corpos cetnicos

Glicose 1-PO4

Glicose 6-PO4

Frutose 6-PO4

Frutose -1,6 Difosfato

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Gliceraldedo -3-Fosfato + Diidroxiacetonafosfato

2 molculas de Piruvato

Via Aerbia (Ciclo de Krebs)

Via Anaerbia (2 de cido Lctico)

Figura: Resumo simplificado das reaes da gliclise e da gliconeognese Quando em jejum, a maior parte da glicose do organismo deve ser suprida por meio da gliconeognese (significa sntese de glicose nova), que a biossntese da glicose a partir de precursores que no so carboidratos. A gliconeognese ocorre no fgado e, em menor extenso, nos rins como j foi dito. Os precursores no-carboidratos que podem ser convertidos glicose incluem os produtos da gliclise, lactato e piruvato, intermedirios do ciclo do cido ctrico e os esqueletos de carbono da maioria dos aminocidos. A degradao de protenas um processo normal. A utilizao de aminocidos para a gliconeognese uma via metablica habitual cotidiana, contribuindo para a manuteno da glicemia durante o jejum noturno. Antes de tudo, porm, todas essas substncias devem ser convertidas a oxalacetato, o material de partida para a gliconeognese. O oxalacetato um intermedirio na produo de fosfoenol piruvato na gliconeogse como ser visto mais adiante. Os nicos aminocidos que no podem ser convertidos a oxalacetato em animais so leucina e lisina, pois sua hidrlise gera apenas acetil-CoA. Da mesma forma, cidos graxos no podem servir como precursores de glicose em animais porque a maioria dos cidos graxos degradada completamente a acetil-CoA. No entanto, ao contrrio dos animais, as plantas possuem uma rota para a converso de acetil-CoA a oxalacetato que o ciclo do glioxalato, de modo que os cidos graxos podem ser a nica fonte de carbono das clulas vegetais. O glicerol, um produto da hidrlise de triacilgliceris, convertido glicose por meio da sntese do intermedirio glicoltico diidroxiacetona fosfato.

HIPERTEXTO Hipoglicemia Neonatal Idioptica

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Recm-nascidos tm uma necessidade crtica da gliconeognese. O suprimento de glicose pela placenta interrompido e no h glicose imediatamente disponvel na dieta. Uma vez que o crebro precisa ter uma fonte prolongada de glicose proveniente do sangue, os genes para as enzimas gliconeognicas so ativados simultaneamente ao nascimento. Ocasionalmente, esta ativao no ocorre e o recm-nascido deve ser alimentado com uma soluo de glicose ou ter hipoglicemia (Fonte: Pelley, 2007). Relao entre diferentes rgos na gliconeognese A produo de glicose ocorre a partir de substratos produzidos pelo msculo como lactato no esforo intenso e alanina no jejum. O lactato originase dos msculos submetidos contrao intensa e de outras clulas que degradam glicose anaerobiamente medula adrenal, e, principalmente, hemcias. A maior parte da glicose sintetizada destina-se ao crebro. Os aminocidos so provenientes de degradao de protenas endgenas, principalmente as musculares, durante o jejum. Ainda no msculo, os aminocidos so convertidos alanina, a forma de transporte do aminocido ao fgado. O glicerol derivado da hidrlise de triacilgliceris (TAG) do tecido adiposo, durante o jejum. O fgado o principal rgo responsvel pela gliconeognese e, apenas em casos de jejum muito prolongado, o crtex renal chega a dar contribuio importante. Reaes da Gliconeognese De onze reaes necessrias para converter piruvato em glicose livre, sete so reversveis, catalisadas por enzimas glicolticas. A gliconeognese utiliza as reaes reversveis da gliclise e substitui por outras as reaes irreversveis. Contudo, trs das enzimas glicolticas, glicoquinase, fosfofrutoquinase (PFK) e piruvato-quinase, catalisam reaes com grandes variaes de energia livre negativa na direo da gliclise. Essas reaes devem ser substitudas na gliconeognese por reaes que tornem a sntese de glicose termodinamicamente favorvel. Assim, essas reaes so contornadas pela ao das enzimas glicose-6-fosfatase, frutose-1,6bisfosfatase e piruvato-carboxilase/PEP-carboxiquinase.

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Alanina Cistena Glicina Serina Treonina Triptofano Lactato

Piruvato

Aspartato Asparagina Malato Citrato Fumarato Fenilalanina Tirosina Succinato -cetoglutarato Succinil-CoA Arginina Isoleucina Metionina Valina Glutamato Glutamina Histidina Prolina Ciclo de Krebs Isocitrato Oxalacetato

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educadorfisico.esp.br

Figura: Rotas que convertem lactato, piruvato e intermedirios do ciclo do cido ctrico a oxalacetato. Os esqueletos de carbono de todos os aminocidos, exceto leucina e lisina, podem ser em parte convertidos a oxalacetato e, ento, glicose atravs das reaes da figura acima. 1. O O
Piruvato-carboxilase
-

CH3 C C OPiruvato HCO-3 + ATP

O - C CH2 C C OOxalacetato

ADP +Pi

2. O
-

Fosfoenolpiruvato carboxicinase

O O H2C - C C -O- PO32-

O - C CH2 C C OOxalacetato GTP GDP + CO2

Fosfoenolpiruvato

Figura: Converso de piruvato a oxalacetato e, ento, a fosfoenolpiruvato A transformao da alanina e do lactato, em glicose, se inicia por sua converso ao piruvato. A alanina origina piruvato por ao da alanina aminotransferase; o lactato convertido a piruvato por ao da lactato desidrogenase. A transformao do piruvato em glicose pela gliconeognese processa-se no sentido oposto ao da gliclise, utilizando quase todas as suas enzimas, com exceo daquelas que catalisam reaes irreversveis. Essas

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reaes so contornadas atravs de outras reaes, catalisadas naturalmente, por outras enzimas. As trs etapas em que a gliconeognese difere da gliclise so: 1. Converso de piruvato a fosfoenolpiruvato. O piruvato convertido a oxalacetato antes da converso a fosfoenolpiruvato. A converso de piruvato a fosfoenolpiruvato compreende o transporte de piruvato para a mitocndria, sua carboxilao a oxaloacetato, o transporte de oxaloacetato para o citossol e a transformao deste composto em fosfoenolpiruvato. As enzimas envolvidas so (1) a piruvato-carboxilase e (2) a fosfoenolpiruvato-carboxiquinase. Para ser utilizado como substrato da piruvato carboxilase, uma enzima mitocondrial, o piruvato produzido no citosol entra na mitocndria por ao da piruvato translocase. Essa enzima contm biotina (vitamina B7), como grupo prosttico. Para promover a carboxilao do piruvato e produzir oxalacetato, a biotina combina-se com CO2 custa de ATP. O oxalacetato passa para o citossol atravs da lanadeira do malato-aspartato e, por ao da fosfoenolpiruvato carboxiquinase, convertido a fosfoenolpiruvato, atravs de descarboxilao e fosforilao custa de GTP. O fosfoenolpiruvato ento transformado em frutose 1,6-bisfosfato pelas enzimas que tambm compem a gliclise, que como catalisam reaes reversveis, podem operar a via no sentido inverso. Piruvato + CO2 + H2O + ATP Oxalacetato + GTP 2. Oxalacetato + ADP + Pi + 2 H+

Fosfoenolpiruvato + CO2 + GDP

Converso de frutose 1,6-bisfosfato a frutose 6-fosfato.

Essa reao substitui a reao irreversvel catalisada pela enzima fosfofrutoquinase. uma reao de hidrlise do grupo fosfato do carbono 1, catalisada pela frutose 1,6-bisfosfatase. Frutose 1,6-bisfosfato + H2O Frutose 6-fosfato + Pi

A fosfoglicoisomerase pode levar isomerizao da frutose 6-fosfato a glicose 6-fosfato. 3. Converso de glicose 6-fosfato glicose. A irreversibilidade da reao catalisada pela glicoquinase, pode ser contornada substituindo-se esta reao por uma reao de hidrlise do grupo fosfato ligado ao carbono 6, catalisada pela glicose 6-fosfatase. , portanto, uma reao semelhante anterior. Glicose 6-fosfato + H2O Glicose + Pi

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O produto da reao, a glicose, ao contrrio da glicose fosforilada, pode atravessar livremente a membrana plasmtica. A glicose 6-fosfatase ocorre exclusivamente no fgado e rins, e graas a ela, que estes rgos, especialmente o fgado, podem exportar glicose para corrigir a glicemia. O glicerol para ser usado como composto gliconeognico fosforilado a glicerol 3-fosfato, que oxidado a diidroxiacetona fosfato. Esse um composto da via glicoltica e pode, portanto prosseguir em direo glicose pelas reaes da gliclise e as substitutivas (frutose 1,6-bisfosfatase e glicose 6-fosfatase). Ao final do processo, pode-se afirmar que para cada molcula de glicose formada a partir de duas molculas de piruvato so necessrios 6 ATP, utilizados nas reaes catalisadas por piruvato carboxilase, fosfenolpiruvato carboxiquinase e fosfoglicerato quinase. Partindo do piruvato, a equao geral da gliconeognese : 2 Piruvato + 6ATP + 6H2O + 2NADH Glicose + 6ADP + 6Pi +2NAD+ +2H+

Caso o composto inicial seja o lactato, a equao ser: 2 Lactato + 6ATP +6H2O Glicose + 6ADP +6Pi + 4H+

Partindo do glicerol, a sntese de uma molcula de glicose consome somente 2 ATP na reao catalisada pela glicerol quinase.

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CONTEXTUALIZANDO Alteraes nos Nveis de Glicose Sangunea aps uma Refeio Aps uma refeio rica em carboidratos, a glicose sangunea se eleva de um nvel de jejum de aproximadamente 80 a 100 mg/dL para um nvel de cerca de 120 a 140 mg/dL dentro de um perodo de 30 minutos a 1 hora. A concentrao de glicose no sangue, ento comea a diminuir, retornando faixa do jejum aproximadamente duas horas aps a refeio. Os nveis de glicose sangunea aumentam quando a glicose da dieta digerida e absorvida. Os valores no sobem mais do que aproximadamente 140 mg/dL em uma pessoa saudvel normal, pois os tecidos captam a glicose do sangue, armazenando-a para uso subsequente e oxidando-a para produzir energia. Aps a refeio ser digerida e absorvida, os nveis de glicose sangunea declinam, pois as clulas continuam a metabolizar a glicose. Se os nveis de glicose sangunea continuam a subir aps uma refeio, a alta concentrao de

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glicose causar a liberao de gua dos tecidos como resultado do efeito osmtico da glicose. Os tecidos iro se tornar desidratados, e sua funo ser afetada. Um coma hiperosmolar pode ocorrer por desidratao do crebro. Inversamente, se os nveis de glicose sangunea continuam a diminuir aps uma refeio, os tecidos que dependem de glicose sofrem de uma perda de energia. Se os nveis de glicose sangunea diminuem abruptamente, o crebro no ser capaz de produzir uma quantidade adequada de ATP. Isso resultar em tontura, seguida de sonolncia e, finalmente, coma. As clulas sanguneas vermelhas no sero capazes de produzir ATP o suficiente para manter a integridade de suas membranas. A hemlise dessas clulas diminuir o transporte de oxignio para os tecidos do corpo. Eventualmente, todos esses tecidos que dependem de oxignio para a produo de energia falharo em realizar suas funes normais. Se o problema for grave o suficiente, poder ocorrer a morte. Consequncias devastadoras de excesso ou insuficincia de glicose normalmente so evitadas, pois o corpo capaz de regular seus nveis de glicose sangunea. medida que a concentrao de glicose sangunea se aproxima da faixa normal de 80 a 100 mg/dL aproximadamente duas horas aps uma refeio, o processo de glicogenlise ativado no fgado. O glicognio heptico a fonte primria de glicose sangunea durante as primeiras horas de jejum. Subsequentemente, a gliconeognese comea a ter um papel como fonte adicional de glicose sangunea. O carbono para a gliconeognese, um processo que ocorre no fgado, fornecido por outros tecidos. O msculo em exerccio e as clulas sanguneas vermelhas fornecem lactato por meio da gliclise; o msculo tambm fornece aminocidos pela degradao de protenas, e o glicerol liberado do tecido adiposo medida que as reservas de triacilgliceris so mobilizadas. Mesmo durante um jejum prolongado, os nveis de glicose sangunea no diminuem muito. Aps 5 a 6 semanas de jejum, os nveis de glicose sangunea diminuem para apenas 65 mg/dL (Smith, Marks & Lieberman, 2007).

ATIVIDADES DE AVALIAO 1. Defina Gliconeognese, indicando quando ocorre e qual o seu balano energtico. 2. Quais so as trs etapas que diferenciam a gliconeognese da gliclise? D as reaes que ocorrem. 3. Quais as enzimas usadas em cada etapa que diferencia a gliconeognese da gliclise?

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Bibliografia Comentada Campbell, M. K.; Farrel, S. O. Bioqumica. Vol 3. So Paulo: Thomson Learning - 2008. No Captulo 18, do vol. 3, o assunto Gliconeognese amplamente discutido. Champe, P. C.; Harvey, R. A.; Ferrier, D. R. Bioqumica Ilustrada. 4 Ed. Porto Alegre: Artmed, 2009. Na Unidade II, do livro no Captulo 10, so apresentados os tpicos relacionados Gliconeognese com muitas ilustraes, tornando o assunto de fcil compreenso. Marzzoco, A.; Torres, B. B. Bioqumica Bsica. 2 ed. 1999. Rio de Janeiro: Editora Guanabara Koogan S. A. O Captulo 14 da Parte 3 desse livro explana de forma bastante compreensiva o assunto Gliconeognese. Pelley, J. W. Bioqumica. Rio de Janeiro: Elsevier, 2007. Smith, C.; Marks, A. D.; Lieberman, M. Bioqumica Mdica Bsica de Marks Uma abordagem clnica. 2 ed. Porto Alegre: Artmed, 2007. O Captulo 31 do livro aborda o assunto detalhadamente e de forma didtica.

LEITURA, VDEOS E SITE RECOMENDADOS http://www.ufpe.br/dbioq/portalbq04/metabolismo_de_carboidros.htm www.ebah.com.br/content/ABAAAApsYAF/bioquimica

CAPTULO 12: METABOLISMO DE LIPDIOS OBJETIVOS: Compreender o metabolismo de lipdios em nosso organismo. Verificar onde e como as gorduras ficam acumuladas em nosso corpo. Aprender o custo energtico da queima de gorduras no corpo humano. Observar os destinos de metablitos secundrios aos lipdios principais e seu destino dentro do metabolismo. Avaliar o quanto o acmulo de gorduras em nosso corpo prejudicial sade.

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Conhecer como gorduras so fabricadas em nosso organismo e fazer a relao gasto x consumo das mesmas.

A maioria dos lipdeos encontrados no corpo insere-se nas categorias de cidos graxos e triacilgliceris; glicerofosfolipdeos e esfingolipdeos; eicosanides; colesterol, sais biliares, e hormnios esteroides, e vitaminas lipossolveis. Esses lipdeos tm diferentes estruturas qumicas e funes, entretanto apresentam uma propriedade comum: sua relativa insolubilidade em gua. Os lipdeos da dieta, absorvidos no intestino, e os que so sintetizados endogenamente so distribudos nos tecidos pelas lipoprotenas plasmticas, para utilizao ou armazenamento. Os triacilgliceris (tambm chamados gorduras ou triglicerdeos) so os lipdios mais abundantes da dieta (cerca de 90%). Eles constituem a principal forma de armazenamento de energia metablica nos seres humanos. Representam a maior reserva energtica do organismo, em mdia, 20% do peso corpreo, o que equivale a uma massa 100 vezes maior do que a do glicognio heptico. Os triacilgliceris so armazenados nas clulas adiposas, sob forma anidra. Os cidos graxos, armazenados como triacilgliceris servem como sua principal fonte de energia. Os glicerofosfolipdeos e os esfingolipdeos, os quais contm cidos graxos esterificados, so encontrados nas membranas e nas lipoprotenas plasmticas na interface entre os componentes lipdicos dessas estruturas e a gua circundante. Os cidos graxos poliinsaturados que contm 20 carbonos formam os eicosanoides, que regulam muitos processos celulares. O colesterol, alm de proporcionar estabilidade bicamada de fosfolipdeos das membranas, age como precursor dos sais biliares, compostos semelhantes aos detergentes que agem no processo de digesto e absoro de lipdeos, e dos hormnios esteroides, que, entre outras aes, regulam o metabolismo, o crescimento e a reproduo. As vitaminas lipossolveis so lipdeos que esto envolvidos em uma variedade de funes, como viso, crescimento e diferenciao (vitamina A), coagulao sangunea (vitamina K), preveno do dano oxidativo celular (vitamina E) e metabolismo do clcio (vitamina D).

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Degradao de Triacilgliceris: (do depsito) O H2C O C R O HC O - C - R O H2C O - C R Triacilgliceris (TAG) Glicerol cidos Graxos + 3H2O adipcitos lipase dos H2C OH O

H C OH + 3R C O- +3H+ H2C - OH

Os TAG da dieta so transportados pelos quilomcrons (Figura 1), hidrolisados pela lipase lipoproteica e do como produtos finais da hidrlise glicerol e cidos graxos. O glicerol no pode ser reaproveitado pelos adipcitos, que no tm glicerol quinase e so liberados na circulao. No fgado e outros tecidos, por ao da glicerol quinase, convertido a 1,6 Glicerol 3-Fosfato e transformado em diidroxiacetona fosfato, um intermedirio da gliclise ou da gliconeognese.

H2C OH ATP H C OH H2C OH Glicerol

ADP + H+ H2C OH H C OH

NAD+

NADH +H H2COH C O

glicerol quinase

H2 C O P Glicerol 3-fosfato

Glicerol 3-fosfato Desidrogenase

H2C-O- P
Diidroxiacetona fosfato

Figura 1 Quilomcrons Fonte: http://bioquimicadocolesterol.blogspot.com

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Os cidos graxos so degradados atravs de uma via que se processa no interior das mitocndrias. Os cidos graxos liberados dos adipcitos so transportados pelo sangue ligados albumina e utilizados pelos tecidos, incluindo fgado e msculos, como fonte de energia; o tecido nervoso e as hemcias so excees, porque obtm energia exclusivamente a partir da oxidao da glicose. Degradao de cidos Graxos Para sua oxidao, os cidos graxos so ativados e transportados para a matriz mitocondrial. Para serem oxidados, os cidos graxos so convertidos uma forma ativada: Acil-CoA. Esta etapa catalisada por acil-CoA sintetases, associadas membrana externa da mitocndria: O RCH2CH2COO- + ATP + HSCoA c. Graxo RCH2CH2CSCoA + AMP + PPi Acil CoA

A membrana interna da mitocndria impermevel a acetil-CoA, e somente os radicais acila so introduzidos na mitocndria, ligados Carnitina. Ela sintetizada a partir de aminocidos e amplamente distribuda nos tecidos animais e vegetais, sendo muito abundante nos msculos. Sistema Utilizado para Transporte de Radicais Acila O sistema usado para transportar os radicais acila consta das etapas 1 a 4. 1) Na face externa da membrana interna, a carnitina-acil transferase I transfere o radical acila da coenzima A para a carnitina. 2) A acil-carnitina resultante transportada atravs da membrana interna por uma translocase especfica. 3) Na face interna, a carnitina-acil transferase II doa o grupo acila da acilcarnitina para uma coenzima A da matriz mitocondrial, liberando a carnitina. 4) A carnitina retorna ao citossol pela mesma translocase. desta forma, portanto, que o radical acila dos cidos graxos atinge o interior da mitocndria, onde ocorre a sua oxidao. -Oxidao ou Ciclo de Lynen No processo conhecido como -oxidao ou Ciclo de Lynen, a acil-CoA presente na matriz mitocondrial oxidada a acetil-CoA, produzindo NADH e FADH2. Esta via metablica composta de uma srie cclica de quatro

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reaes, ao final das quais a acil-CoA encurtada de dois carbonos, que so liberados sob a forma de acetil-CoA. So as seguintes as reaes: 1. Oxidao da acil-CoA a uma enoil-CoA (acil-CoA -insaturada) de configurao trans, custa da converso de FAD a FADH2 (nica reao irreversvel da via); 2. Hidratao da dupla ligao, formando uma 3-hidroxiacil-CoA (ismero L); 3. Oxidao do grupo hidroxila a carbonila, resultando uma -cetoacilCoA e NADH; 4. Ciso da -cetoacil-CoA por reao com uma molcula de CoA, com formao de acetil-CoA e uma acil-CoA com dois carbonos a menos; esta acilCoA refaz o ciclo vrias vezes, at ser totalmente convertida a acetil-CoA. A oxidao completa de um cido graxo necessita no apenas do Ciclo de Lynen, mas tambm do Ciclo de Krebs. No Ciclo de Lynen, ocorre a converso do cido graxo a acetil-CoA, e, no Ciclo de Krebs, ocorre a oxidao do radical acetil a CO2. Em cada volta do Ciclo de Lynen, sero produzidos 1 FADH2, 1 NADH, 1 acetil-CoA e 1 acil-CoA com 2 tomos de carbono a menos que o cido graxo original. Sempre que o nmero de tomos de carbono do cido graxo for par, a ltima volta do ciclo de oxidao inicia-se com uma acilCoA de 4 carbonos, a butiril-CoA, e, nesse caso, so produzidas 2 acetil-CoA (alm de FADH2 e NADH). Para a oxidao completa de uma molcula de cido palmtico, que tem 16 tomos de carbono, so necessrias 7 voltas no ciclo (j que na ltima volta so produzidas 2 molculas de acetil-CoA), com a produo de 8 acetil-CoA.

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H3C-C-SCoA Acetil-CoA R-C-SCoA Acil-CoA

(com n-2 carbonos) HS-CoA

R-CH2-CH2C-SCoA Acil-CoA
(com n carbonos)

H O O O

R-C - C- C SCoA
H Trans- -enoil-CoA H2O OH O
2

R-C-CH2-C-SCoA
-Cetoacil-CoA

NADH + H

R-C-CH2-C-SCoA H L-Hidroxil-CoA NAD

+

Figura - No Ciclo de Lynen, a acil-CoA formada no final de cada volta tem dois carbonos a menos e reinicia o ciclo.

A oxidao de cidos graxos no restrita mitocndria. A degradao de cidos graxos ocorre em outras organelas citoplasmticas: glioxissomos e peroxissomos. Nos vegetais, a -oxidao feita apenas nos glioxissomos. A acetil-CoA produzida pode ser convertida em glicose, graas presena, nestas organelas, das enzimas do ciclo do glioxilato. Estas enzimas so ausentes de clulas animais, que, por isto, so incapazes de utilizar acetil-CoA como um composto gliconeognico. Nos animais, a via de oxidao peroxissmica promove o encurtamento de cidos graxos muito longos (com mais de 20 carbonos). Os cidos graxos de cadeia longa penetram nos peroxissomos sem auxlio da carnitina e so convertidos nas respectivas acilCoA. A oxidao das acil-CoA longas catalisada por uma acil-CoA oxidase, que reduz oxignio gua oxigenada, que ento decomposta em H2O e O2 por ao da catalase.

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Oxidao de cidos graxos com n mpar de carbonos cidos graxos com o nmero mpar de tomos de carbonos constituem uma pequena frao dos cidos graxos da dieta e so tambm oxidados pela -oxidao. Neste caso, a ltima volta do ciclo de Lynen inicia-se com uma acilCoA de cinco carbonos e produz uma molcula de acetil-CoA e uma propionilCoA, em vez de duas de acetil-CoA. A propionil-CoA convertida a succinilCoA, um intermedirio do ciclo de Krebs, para sua oxidao.

HIPERTEXTO Deficincia de Vitamina B12 A existncia da vitamina B12 foi descoberta em 1926, quando, Geoge Minot e William Murphy descobriram que a anemia perniciosa, uma doena frequentemente fatal nos idosos, caracterizada pela reduo do nmero dos glbulos vermelhos, por baixos nveis de hemoglobina e pela deteriorao neurolgica progressiva, podia ser tratada por meio do consumo dirio de grandes quantidades de fgado cru. Entretanto, o fator anti-anemia perniciosa a vitamina B12 no foi isolado at 1948. A vitamina B 12 no sintetizada por plantas nem por animais, somente por algumas espcies de bactrias. Os herbvoros obtm vitamina B12 das bactrias que habitam o trato digestivo (na verdade, alguns animais, como o coelho, devem periodicamente comer um pouco de suas fezes para obterem quantidades suficientes dessa substncia essencial). Os seres humanos, no entanto, obtm quase toda vitamina B 12 diretamente da dieta, em especial da carne. No intestino, a glicoprotena fator intrnseco, secretada pelo estmago, se liga especificamente vitamina B12, e o complexo protena-vitamina absorvido via um receptor na mucosa intestinal. O complexo dissocia-se, e a vitamina B12 liberada transportada corrente sangunea. Pelo menos trs protenas plasmticas diferentes, as transcobalaminas, ligam-se vitamina e facilitam sua captao pelos tecidos. A anemia perniciosa em geral no uma doena de deficincia da dieta, mas normalmente resulta de uma secreo insuficiente do fator intrnseco. A necessidade humana normal de cobalamina muito pequena, ~ 3g ao dia, e o fgado armazena um suprimento dessa vitamina suficiente para 3 a 5 anos. Isso justifica o incio tardio da anemia perniciosa e o fato da deficincia diettica de vitamina B12, mesmo entre vegetarianos estritos, ser extremamente rara (Voet, Voet & Pratt, 2000). Oxidao de cidos graxos insaturados Os cidos graxos insaturados so muito comuns em tecidos animais e vegetais, apresentando suas duplas ligaes quase sempre a configurao cis. Depois de remover algumas unidades de dois carbonos (Acetil-CoA) pelo ciclo

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de Lynen, o cido graxo insaturado pode dar origem a dois tipos de enoil-CoA, conforme a posio original da dupla ligao em sua molcula: se a dupla ligao for de n mpar (ex.: 9 do cido olico), forma-se uma cis-3-enoilCoA; se for de n par (como a 12 do cido linoleico), ser formada uma cis-4enoil-CoA. Para a oxidao dessas acil-CoA insaturadas, so necessrias, alm de enzimas da -oxidao, outras enzimas que as convertam em trans2-enoil-CoA. O intermedirio insaturado da -oxidao. cidos graxos ramificados ou hidroxilados cidos graxos que possuem ramificaes ou hidroxilaes so comuns em lipdeos das bactrias, porm pouco frequentes em animais superiores. Nos animais superiores, os cidos graxos ramificados ocorrem apenas como componentes da cera produzida pelas glndulas sebceas, e os hidroxilados (com uma OH no carbono ), como componentes de esfingolipdeos do tecido nervoso. Os cidos graxos ramificados so importantes constituintes da alimentao (gramneas) de animais ruminantes e, em consequncia, aparecem em componentes da dieta dos seres humanos atravs das gorduras de origem animal, do leite e de seus derivados, como, por exemplo, o cido ftnico. Esses cidos possuem um grupo metil no carbono , no reconhecido pela acil-CoA desidrogenase, que catalisa a primeira reao da -oxidao. Essa situao contornada pela -oxidao que ocorre nos peroxissomos, iniciando-se com a hidroxilao de carbono . Segue-se uma oxidao e uma descarboxilao, resultando em um composto que tem o radical metil agora no carbono e apresenta o carbono no substitudo, podendo ser ativado e oxidado pelo ciclo de Lynen. Corpos cetnicos Acetona, Acetoacetato, -Hidroxibutirato Na ausncia de carboidrato suficiente, quantidades maiores de gordura so usadas para produzir energia, sendo maiores do que o organismo pode processar e restando numa oxidao incompleta, pois os mamferos no dispem de via capaz de transformar cidos graxos, principalmente os da reserva lipdica, em glicose. O acmulo de intermedirios acdicos leva acidose, ao desequilbrio sdico e desidratao. Por um processo conhecido como cetognese, que ocorre principalmente nas mitocndrias do fgado, a acetil-CoA convertida em acetoacetato ou em -hidroxibutirato. O acetoacetato sofre descarboxilao espontnea, originando acetona. Esses compostos so referidos como corpos cetnicos, e sua sntese chamada cetognese. Os corpos cetnicos so combustveis metablicos importantes para vrios tecidos perifricos, em particular para o corao e para o msculo esqueltico.

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H3C C CH2 C OAcetacetato

H3C C CH3

Acetona

OH

H3C C CH2 C H O-

- Hidroxibutirato

O crebro, em circunstncias normais, utiliza apenas a glicose como fonte de energia (cidos graxos so incapazes de cruzar a barreira hematoenceflica), mas, durante um jejum prolongado, os corpos cetnicos tornam-se a principal fonte de combustvel metablico do crebro. Corpos cetnicos so equivalentes hidrossolveis dos cidos graxos. Os corpos cetnicos so liberados na corrente sangunea, e o acetoacetato e o -hidroxibutirato so aproveitados como fonte de energia pelos tecidos extra-hepticos, principalmente corao e msculos esquelticos. A acetona, por sua vez, volatilizada pelos pulmes. Os corpos cetnicos so veculos para a transferncia de carbonos oxidveis (originados da Acetil-CoA) do fgado para outros rgos. Quando no h oferta de glicose, o organismo lana mo da gliconeognese que consome oxaloacetato obtido de aminocidos, principalmente. A oxidao da acetil-CoA pelo ciclo de Krebs fica, ento, impedida: a acetil-CoA acumulada condensa-se, formando os corpos cetnicos. o que ocorre quando h reduo drstica da ingesto de carboidratos (jejum ou dieta) ou distrbios de seu metabolismo (diabetes). Quando a produo ultrapassa o aproveitamento pelos tecidos extra-hepticos, estabelece-se uma condio denominada Cetose, caracterizada por uma concentrao elevada de corpos cetnicos no plasma (cetonemia) e na urina (cetonria). Um sintoma, caracterstico de indivduos com Cetose o odor de acetona de seu hlito. Como os outros dois corpos cetnicos so cidos, a cetonemia resulta em

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acidose, isto , uma diminuio do pH sanguneo. Em casos de Cetose acentuada, o crebro obtm uma boa parte de energia de que necessita por oxidao dos corpos cetnicos. Metabolismo do Etanol Os seres humanos ao ingerirem etanol apresentam absoro rpida. Ocorre a oxidao do etanol a acetaldedo no fgado, por uma lcool desidrogenase citosslica, em uma reao idntica ltima etapa da fermentao alcolica por leveduras, neste caso em sentido diverso. H CH3-C-OH + NAD+ H
Etanol Acetaldedo

O CH3- C -H + NADH + H+

O equilbrio dessa reao vai favorecer a formao de etanol, porm sua oxidao vai prosseguir por causa da converso de acetaldedo em acetato, catalisada pela acetaldedo desidrogenase mitocondrial. O CH3 - C - H + H2O + NAD+ Acetaldedo O CH3 C O- + NADH + 2H+ Acetato

O acetato (como os cidos graxos) origina acetil-CoA por ao de uma acil-CoA sintetase. Neste ponto, o metabolismo do etanol confunde-se com o metabolismo de carboidratos, lipdios e protenas, que tambm originam acetilCoA. Quando ocorre um consumo de quantidades discretas de etanol, significa que haver um consumo adicional de calorias, que devem ser somadas quelas derivadas da ingesto de nutrientes no cmputo das calorias totais da dieta. Porm, quando h ingesto constante de etanol, nem sequer o seu contedo calrico aproveitado pelo organismo. Uma via minoritria, catalisada por um sistema enzimtico localizado na membrana do retculo endoplasmtico, oxida etanol, utilizando O2, mas sem o concurso da cadeia de transporte de eltrons e, portanto, sem a produo de ATP. No alcoolismo crnico, em que h ingesto de grandes quantidades de etanol, ocorrem inmeras consequncias danosas para o organismo. A oxidao do etanol nas clulas hepticas produz altos nveis de NADH no citossol, onde normalmente a concentrao NAD+ muito maior do que a de NADH. A alta concentrao de NADH vai deslocar a reao catalisada pela lactato desidrogenase no sentido da formao de lactato, cuja concentrao poder aumentar em at 5 vezes, levando portanto a uma acidose. A constante converso da piruvato a lactato impossibilita a gliconeognese, j que todos os amonocidos glicognicos devem ser primeiramente convertidos a piruvato; ou seja, em vez de originarem

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glicose, so transformados em lactato. Muitas vezes, a ingesto de lcool no acompanhada da ingesto de nutrientes, ento, diminuda a reserva de glicognio, pode ocorrer hipoglicemia e, finalmente, o coma. Uma produo alta acetil-CoA, associada baixa disponibilidade de glicose, vai ocasionar Cetose. importante lembrar que concentraes altas de acetaldedo so txicas, j que se trata de uma substncia extremamente reativa e que se liga covalentemente a protenas, modificando a sua estrutura e sendo responsvel pela ressaca. Sntese de cidos Graxos Grande parte dos cidos graxos usada pelo organismo suprida pela dieta. Carboidratos, protenas e outras molculas obtidas da dieta em excesso, podem ser convertidas em cidos graxos, que so armazenados como triacilgliceris. Em humanos adultos, a sntese de cidos graxos ocorre principalmente no fgado e nas glndulas mamria sem lactao e, em menor extenso, no tecido adiposo. O processo incorpora carbonos da acetil-CoA na cadeia de cido graxo em crescimento, usando adenosina trifosfato (ATP) e Nicotinamida Adenina Dinucleotdeo fosfato reduzido (NADPH). Na via que leva produo de cidos graxos, o substrato imediato a acetil-CoA e o produto final o cido palmtico. A sntese ocorre no citossol, para onde deve ser transportada a acetil-CoA formada na mitocndria, a partir de piruvato. Como a membrana interna da mitocndria impermevel a acetil-CoA, os seus carbonos so transportados sob a forma de citrato. Os carboidratos e protenas (precursores dos cidos graxos) so degradados a acetil-CoA e oxaloacetato, que sofrem condensao, formando citrato, por ao da primeira enzima do ciclo de Krebs, a citrato sintase. Nas condies consideradas, o citrato no pode ser oxidado pelo ciclo de Krebs em virtude da inibio da isocitrato desidrogenase e transportado para o citossol pela tricarboxilato translocase, onde desmembrado em oxaloacetato e acetil-CoA, custa de ATP, numa reao catalisada pelo citrato liase.

COO CH2 HO-C-COO- + ATP 4 + HS-CoA CH2 COO

Citrato

COO C=O O

CH2 + H2O C ScoA + ADP + P1 COO

Oxaloacetato

Acetil-CoA

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O oxaloacetato reduzido a malato pela malato desidrogenase do citossol. O malato substrato da enzima mlica. Nesta reao, so produzidos piruvato, que retorna mitocndria, e NADPH. COOHO C H CH2 COOMalato Piruvato

COO+ NADP+ O=C CH3 + CO2 + NADPH

O resultado final destas reaes o transporte dos carbonos da acetilCoA (sob a forma de citrato), com gasto de ATP, da mitocndria para o citossol, e, ainda, a produo de NADPH. Acetil-CoA e NADPH, ambos no citossol, podem, ento, ser utilizados para formar cidos graxos. A sntese de cidos graxos consiste na unio sequencial de unidades de dois carbonos: a primeira unidade proveniente de acetil-CoA, e as outras, de malonil-CoA, formada por carboxilao de acetil-CoA. A enzima acetil-CoA carboxilase que catalisa essa reao tem como grupo prosttico a biotina. O
acetil-CoA

O + ATP + HCO3Carboxilase
-

O C CH2 C + ADP + Pi + H+ SCoA

Malonil-CoA

H3C C

SCoA
Acetil-CoA

A sntese de cidos graxos catalisada por um sistema enzimtico denominado sintase de cidos graxos. Tambm faz parte destas sintases uma pequena protena no-enzimtica, designada protena carregadora de acila, ou ACP, qual est sempre ligada a cadeia do cido graxo em crescimento. O ACP tem como grupo prosttico um derivado do cido pantotnico, a fosfopantetena, tambm componente da coenzima A. A sequncia das reaes de sntese (condensao, reduo, desidratao e reduo) inversa sequncia das reaes de um cido graxo pelo ciclo de Lynen (oxidao, hidratao, oxidao, quebra da cadeia carbnica). Os processos diferem quanto s enzimas e coenzimas utilizadas, o compartimento celular onde se processam e o suporte da cadeia carbnica (CoA ou ACP). As enzimas constituintes da sintase so: acetil-CoA-ACP-transacilase (1), malonil-CoA-ACP-transacilase (2), -cetoacil-ACP sintase (3), cetoacil-ACP redutase (4), -hidroxiacil-ACP desidratase (5) e enoil-ACP redutase (6). A sintase de cidos graxos pode ser representada por uma

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esfera, na qual se destacam o ACP, com sua sulfidrila terminal, e a -cetoacilACP sintase (enzima 3), com o grupo SH de um de seus resduos de cistena. Tambm aparece o primeiro ciclo de sntese, que leva formao de butirilACP. Para que haja o alongamento da cadeia carbnica, o butiril-ACP sintetizado no final da primeira volta sofre a mesma sequncia de reaes (enzimas 2 a 6), que o acetil-ACP; o radical butiril, transferido para o grupo SH da enzima 3, como ocorreu com o radical acetil no incio da primeira volta, prosseguindo as reaes como no primeiro ciclo de sntese. Nos seres humanos, a maioria dos cidos graxos produzida pelo fgado a partir de carboidratos da dieta e exportados para os outros tecidos atravs das lipoprotenas plasmticas.

CONTEXTUALIZANDO Corpos Cetnicos como Combustveis: A Dieta Atkins A mais conhecida das dietas pobres em carboidratos a Dieta Atkins. Essa dieta rica em gordura e protena e muito pobre em carboidratos (menos do que 20g /dia durante a fase inicial), sendo motivo de controvrsias entre nutricionistas e mdicos, devido a seu alto teor de gordura. O interessante que indivduos que fazem essa dieta perdem uma quantidade considervel de peso. Estudos clnicos demonstraram que indivduos obesos perdem mais peso em uma dieta rica em gordura e pobre em carboidratos do que em uma dieta isocalrica com nveis mais altos de carboidratos. surpreendente tambm que ocorra uma notvel queda nos nveis de triacilgliceris no sangue desses indivduos. At agora, no existem estudos de longo prazo do efeito do perfil lipdico ou da sade geral dessas pessoas obesas que permanecem nessa dieta. Entretanto, provvel que a dieta Atkins resulte em dramtica perda de peso, devido saciedade causada pelo alto contedo de gordura e protena da dieta, resultando em uma reduo de ingesta alimentar. O centro da dieta Atkins a mobilizao de cidos graxos do tecido adiposo e sua converso pelo fgado em corpos cetnicos (-hidroxibutirato, acetoacetato e acetona). A presena de corpos cetnicos na urina o mtodo prescrito para determinar o estado metablico durante a dieta, uma vez que mesmo quantidades pequenas de carboidratos na dieta reprimem a sntese de corpos cetnicos, principalmente por inibirem liplise no tecido adiposo. medida que a concentrao de corpos cetnicos sobe no sangue, uma frao excretada na urina e uma parte pela respirao. Seria isso responsvel pela maior perda de peso observada em indivduos na dieta Atkins? Para comparao, aps 7 dias de jejum, a taxa de excreo urinria diria de acetoacetato e -hidroxibutirato no homem de aproximadamente 110 mmol/dia; a taxa de excreo ainda menor no incio do jejum (60 mmol/dia aps dois dias de jejum). Esta excreo poderia contribuir para o balano calrico negativo e perda de peso

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caractersticos da dieta de Atkins, embora a perda de energia no exceda 100 kcal/dia. Em geral, a Cetose ocorre quando a oxidao de glicose suprimida e o catabolismo de gordura acelerado. Existem dois tipos de Cetose: a Cetose normal do jejum e a hipercetonemia patolgica da cetoacidose diabtica. Nenhum outro combustvel do sangue humano pode mudar to drasticamente como os corpos cetnicos, e ainda ser compatvel com a vida. Aps jejum de uma noite, a concentrao de corpos cetnicos aproximadamente 0,05 mM, mas esta concentrao pode subir para 2 mM aps 2 dias de jejum e para 7 mM aps 40 dias, uma mudana de 140 vezes na concentrao. Resultados de pesquisas tm demonstrado que durante um jejum prolongado acetoacetato e -hidroxibutirato substituem a glicose como o combustvel predominante para o crebro. Isso reduz a necessidade de sntese de glicose a partir de aminocidos derivados de protena muscular e do fgado. O tecido muscular consome avidamente corpos cetnicos logo no incio do jejum, mas muda para oxidao de cidos graxos medida que o jejum progride, economizando assim corpos cetnicos para o metabolismo do crebro. Portanto, corpos cetnicos so o combustvel normal para uma variedade de tecidos e parte de um padro complexo de metabolismo de combustveis que ocorre durante o jejum no homem (Devlin, 2007).

ATIVIDADES DE AVALIAO 1. Esquematizar: a) a reao catalisada pela lipase do tecido adiposo; b) as reaes de converso de glicerol a compostos intermedirios da via glicoltica; c) o primeiro passo necessrio para a degradao de um cido graxo (ativao). 2. Citar a localizao celular da oxidao dos cidos graxos e mostrar o papel da carnitina. 3. Citar os compostos formados no fim de cada volta do ciclo de Lynen. 4. Indicar o n de molculas de ATP necessrias para degradar uma molcula de cido graxo. 5. Listar as vitaminas que participam do Ciclo de Lynen. 6. Descrever a regulao do Ciclo de Lynen. 7. Indicar os tecidos que no oxidam cidos graxos.

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8. Fale sobre o metabolismo do etanol indicando os principais passos. 9. Por que a ingesto de etanol em grandes quantidades resulta em problemas? 10. Fale sobre o metabolismo da sntese de cidos graxos. 11. Que so corpos cetnicos? D suas estruturas. 12. Como se formam os corpos cetnicos e em quais tecidos do organismo? 13. Defina: cetonria; cetonemia; acidose; cetose, indicando quando e por que ocorre cada um desses processos. 14. Indique como se processa a sntese de cidos graxos.

Bibliografia Comentada Campbell, M. K.; Farrel, S. O. Bioqumica. Vol 3. So Paulo: Thomson Learning - 2008. No Captulo 21, do vol. 3, o assunto Metabolismo dos Lipdeos amplamente discutido. Champe, P. C.; Harvey, R. A.; Ferrier, D. R. Bioqumica Ilustrada. 4 Ed. Porto Alegre: Artmed, 2009. Na Unidade III do livro, nos Captulos 15, 16, 17 e 18 so apresentados tpicos relacionados ao Metabolismo dos Lipdeos com muitas ilustraes, tornando o assunto de fcil compreenso. Devlin, T. M. Manual de Bioqumica com Correlaes Clnicas. So Paulo: Editora Blucher, 2007. Os Captulos 17 e 18 da Parte IV desse livro abordam tpicos relacionados ao Metabolismo dos Lipdeos. Marzzoco, A.; Torres, B. B. Bioqumica Bsica. 2 ed. 1999. Rio de Janeiro: Editora Guanabara Koogan S. A. O Captulo 16 da Parte 3 desse livro explana de forma bastante compreensiva o assunto Metabolismo dos Lipdeos. Pelley, J. W. Bioqumica. Nos Captulos 10 e 11 so estudados tpicos relativos ao Metabolismo dos Lipdeos de uma forma sucinta e objetiva. Rio de Janeiro: Elsevier, 2007. Smith, C.; Marks, A. D.; Lieberman, M. Bioqumica Mdica Bsica de Marks Uma abordagem clnica. 2 ed. Porto Alegre: Artmed, 2007. Os Captulos 32, 33, 34, 35 e 36 abordam tpicos relacionados ao Metabolismo dos Lipdeos de modo detalhado e didtico. Voet, D.; Voet, J. G.; Pratt, C. W. Fundamentos de Bioqumica. Porto Alegre: Artmed, 2000. O Captulo 19 da Parte IV traz uma discusso bastante abrangente sobre o Metabolismo dos Lipdeos.

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LEITURA, VDEOS E SITES RECOMENDADOS: underpop.free.fr/b/biologia/metabolismo-de-lipIdios.doc colesterolgorduraomega.blogspot.com

CAPTULO 13: METABOLISMO DE AMINOCIDOS OBJETIVOS: Compreender o papel dos aminocidos em nosso corpo e como eles so importantes para a manuteno do nosso organismo. Verificar o papel do nitrognio proveniente das protenas. Entender melhor o ciclo da ureia e associ-la com a excreo do nitrognio no absorvido pelo nosso organismo. Conhecer as doenas decorrentes da deficincia do metabolismo dos aminocidos. Um adulto saudvel ingerindo uma dieta variada est, geralmente, em balano de nitrognio, ou seja, em um estado em que a quantidade de nitrognio ingerida a cada dia equilibrada pela quantidade excretada, resultando em alterao lquida nula no nitrognio total do corpo. Na condio de um organismo bem alimentado, o nitrognio excretado vem principalmente do excesso de protenas ingerido ou da reciclagem (turnover) normal. O turnover de protenas definido como a substituio de protena do corpo por sntese e degradao. Em certas condies, o corpo est em balano negativo ou positivo de nitrognio. No balano negativo de nitrognio, mais nitrognio excretado do que ingerido. Isso ocorre no jejum e em certas doenas. Em um ser humano com idade adulta e dieta adequada, h uma renovao de aproximadamente 400g de protena por dia.

RENOVAO

TURNOVER

Uma consequncia importante do turnover proteico restar sempre certa quantidade de aminocidos no utilizados porque o conjunto de aminocidos originado das protenas que esto sendo degradadas nunca igual ao conjunto de aminocidos necessrios para compor as protenas que esto sendo sintetizadas. Tendo em vista que no h meios de armazenar os aminocidos excedentes, eles so oxidados e seu nitrognio, excretado. Um adulto saudvel, com dieta adequada, elimina uma quantidade de nitrognio

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correspondente a 100g de protena aproximadamente. Como 400g de protenas devem ser renovados neste perodo, faltam os 100g eliminados, que devem ser repostos pela alimentao. Os aminocidos presentes nas clulas animais originam-se, ento, das protenas da dieta (exgenas) e das protenas endgenas e constituem um pool: derivado das protenas da dieta e das protenas endgenas. O pool de aminocidos usado para sntese de protenas endgenas e de outras molculas que contenham nitrognio. Os aminocidos so precursores de todos os compostos nitrogenados noproteicos, que incluem as bases nitrogenadas constituintes dos nucleotdios (dos cidos nucleicos, coenzimas) e as aminas e seus derivados, como adrenalina, histamina etc. Aminocidos Essenciais A biossntese de protenas exige a presena de todos os aminocidos constituintes. Se um dos vinte aminocidos estiver ausente ou em pequena quantidade, a biossntese proteica inibida. Alguns organismos, como a Escherichia coli, podem sintetizar todos os aminocidos de que precisam. Outras espcies, incluindo os seres humanos, devem obter alguns aminocidos dos alimentos. So os chamados aminocidos essenciais para a nutrio humana (ver Tabela 1). O organismo pode sintetizar alguns desses aminocidos, mas no em quantidades suficientes para suas necessidades, especialmente no caso de crianas em fase de crescimento. As crianas tm necessidade principalmente de arginina e histidina. Como os aminocidos no so armazenados (exceto nas protenas), as fontes alimentares de aminocidos essenciais so necessrias em intervalos regulares. A falta de protenas, especialmente uma deficincia prolongada de fontes que contenham aminocidos essenciais, leva doena kwashiorkor. O problema dessa doena, muito grave em crianas em fase de crescimento, no simplesmente a desnutrio, mas a degradao das protenas do prprio organismo. Como j foi dito, os seres vivos no so capazes de armazenar aminocidos nem protenas e, consequentemente, satisfeitas as necessidades de sntese, os aminocidos excedentes so degradados. Em um adulto saudvel, com dieta adequada, a oxidao de aminocidos responde por 10 15% de suas necessidades energticas. Como a estrutura dos aminocidos revela, eles so simplesmente carboidratos ligados a um nitrognio. Logo, os aminocidos excedentes so degradados, restando as respectivas cadeias carbnicas e o grupo amino, que convertido em ureia.

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Tabela 1 - Necessidades de aminocidos no ser humano Essenciais Arginina Histidina Isoleucina Leucina Lisina Metionina Fenilalanina Treonina Triptofano Valina Fonte: Campbell & Farrel, 2008 Degradao de Aminocidos Quando os aminocidos no so necessrios sntese de outras molculas contendo nitrognio, eles so convertidos a carboidratos. A degradao dos aminocidos, portanto, compreende a remoo e a excreo do grupo amino e a oxidao da cadeia carbnica remanescente (-cetocido). Quando o nitrognio removido do aminocido, o carboidrato residual convertido em piruvato ou em um intermedirio do ciclo do cido ctrico para a produo de energia ou gliconeognese. Como a amnia txica, uma via designada para converter o nitrognio do aminocido em um composto no txico neutro, a ureia, que eliminada na urina. Em resumo, pode-se dizer ento que os aminocidos, ao se degradarem, tm o grupo amino convertido em uria, e as vinte cadeias carbnicas resultantes so convertidas em compostos comuns ao metabolismo de carboidratos e lipdios, ou seja, piruvato, acetil-CoA e intermedirios do ciclo de Krebs. Como Removido o Grupo Amino dos Aminocidos O nitrognio dos aminocidos se transfere para o ciclo da ureia em trs etapas: transaminao, formao da amnia e formao da ureia. O grupo amino da maioria dos aminocidos coletado inicialmente como glutamato. O grupo amino de: alanina, arginina, aspartato, asparagina, cistena, fenilalanina, glutamina, isoleucina, leucina, tirosina, triptofano e valina retirado por um processo comum, que consiste na transferncia deste grupo para o cetoglutarato, formando glutamato; a cadeia carbnica do aminocido No-Essenciais Alanina Asparagina Aspartato Cistena Glutamato Glutamina Glicina Prolina Serina Tirosina

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convertida ao -cetocido correspondente. importante lembrar que o glutamato o principal doador de grupos amino nas reaes enquanto o cetoglutarato o principal aceptor. Aminocido + -Cetoglutarato -Cetocido + Glutamato

Estas reaes so catalisadas pelas aminotransferases, tambm chamadas transaminases (presentes no citossol e na mitocondria e que tm como coenzima piridoxal-fosfato) e transferem o grupo -amino do aminocido para o -cetoglutarato produzindo glutamato. Existem doze tipos de transaminases que catalisam a eliminao do nitrognio atravs da formao do glutamato. Duas transaminases clinicamente importantes servem como marcadoras de leso heptica quando aparecem em altas concentraes no sangue: a aspartato aminotransferase (AST) que catalisa a transaminao reversvel do nitrognio entre aspartato e glutamato; a alanina aminotransferase (ALT), que catalisa a transaminao reversvel do nitrognio entre alanina e piruvato. O piridoxal-fosfato, a forma ativa da vitamina B6, (piridoxina), torna-se necessria como coenzima das aminotransferases. Na reao geral de transaminao, inicialmente, o grupo amino de um aminocido transferido ao piridoxal fosfato, que convertido piridoxamina fosfato; a seguir doado ao -cetoglutarato, produzindo glutamato. O glutamato um produto comum s reaes de transaminao, constituindo um reservatrio temporrio de grupos amino, provenientes de diferentes aminocidos. O aumento da produo de glutamato, (precursor do GABA, um neurotransmissor), gerando um excesso, provoca destruio de neurnios. c. Glutmico COOH CH2 CH2 CHNH2 COOH c. -Cetoglutrico COOH CH2 CH2 C=O COOH

CH3 C=O COOH c. Pirvico Figura - Esquema da Reao de Transaminao

CH3 CHNH2 COOH Alanina

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O cido pirvico pode ser aminado para formar alanina que transportada para o fgado onde desaminada e o esqueleto carbnico reconvertido glicose. O ciclo da alanina move N do msculo para o fgado sem produzir NH3. Em uma segunda etapa, os grupos amino originam aspartato e/ou amnia. O glutamato formado consumido em duas reaes importantes, uma nova transaminao e uma desaminao. Na remoo do grupo amino do prprio glutamato por transaminao pela ao da aspartato aminotransferase, o grupo amino do glutamato transferido para o oxaloacetato, formando aspartato. COOH3N+ C H CH2 CH2 COOGlutamato Oxaloacetato Aspartato

COO+ C =O CH2 COO-

AST

COOH3N+ C H CH2 COO+

COOC =O CH2 CH2 COO-Cetoglutarato

A desaminao oxidativa do glutamato em -cetoglutarato na matriz mitocondrial produz amnia livre. Em outras palavras, o grupo amino do glutamato pode ser liberado como amnia (on NH4+, em pH fisiolgico); A reao catalisada pela glutamato desidrogenase (GDH), encontrada principalmente no fgado, e produzindo NADH ou NADPH. NH3 R CH COOH NH2 -aminocido
Enzima

R C COOH NH -iminocido H2O

R C COOH O -cetocido

Figura - Desaminao Oxidativa A reao reversvel sendo, portanto possvel incorporar amnia livre em -cetoglutarato para formar glutamato quando necessrio. Os esqueletos de carbono so convertidos em alguns dos mesmos intermedirios formados durante o catabolismo da glicose e cidos graxos. Podem ser levados para os tecidos perifricos, onde entram no ciclo do cido ctrico para produzir adenosina trifosfato (ATP). Estes fragmentos tambm podem ser usados nos processos de sntese para fabricar glicose ou gorduras. Aproximadamente 58% da protena consumida podem ser convertidos em glicose desta maneira. A maioria dos aminocidos, particularmente a alanina, potencialmente glicognica. O piruvato a partir da oxidao da glicose no msculo aminado

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para formar a alanina que, por sua vez, transportada para o fgado onde desaminada e o esqueleto de C reconvertido glicose. O ciclo da alanina uma importante fonte de glicose durante perodos de baixo suprimento exgeno. tambm um mtodo de mover N do msculo para o fgado sem a formao de amnia. O grupo amino liberado na desaminao principalmente como amnia, a qual usada em processos sintticos ou carregada para o fgado para converso em ureia, a forma na qual a maioria dela excretada. Como a amnia altamente txica, transportada em combinao com o cido glutmico como glutamina. A amnia liberada da matriz mitocondrial e serve como um precursor do ciclo da ureia. A ao combinada das aminotransferases e da glutamato desidrogenase resulta na convergncia do grupo amino da maioria dos aminocidos para dois compostos nicos: NH4+ e aspartato. O aspartato o segundo depositrio do grupo amino dos amincidos. COOH3N+ CH CH2 CH2 COOGlutamato

COO+ NAD(P)+ + H2O C = O + NAD(P)H + H+ + NH4+ CH2 CH2 COO-cetoglutarato

Reao catalisada pela glutamato desidrogenase. glutamato desidrogenase especfica para glutamato. Reaes Especiais para Desaminao de alguns Aminocidos

Glicina, Histidina, Lisina, Metionina, Prolina, Serina e Treonina, no participam de reaes de transaminao. Os grupos amino desses aminocidos so removidos por reaes particulares a cada um deles. Um aspecto comum e importante do metabolismo destes aminocidos a forma de remoo do grupo amino que ou liberado como NH4+ por reaes de desaminao, ou forma glutamato atravs de transaminao de um intermedirio aminado com -cetoglutarato. Desta forma, os tomos de N destes aminocidos convergem para os mesmos produtos originados pelo grupo amino dos outros aminocidos: NH4+ e glutamato, que pode originar aspartato. Pode-se concluir, portanto que durante a degradao dos 20 aminocidos, o grupo amino convertido finalmente em NH4+ e aspartato, os precursores da ureia. A ureia sintetizada a partir de NH4+, aspartato e HCO3-.

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Os dois tomos de N presentes na ureia so provenientes de NH 4+ e aspartato, e o tomo de carbono, do bicarbonato. A sntese da ureia feita no fgado, atravs do ciclo da ureia. Ciclo da Ureia A sntese da ureia ocorre atravs do Ciclo da Ornitina. O CO2 e NH3 (com energia da ATP) se combinam com a ornitina atravs de uma srie de passos para formar a arginina que ento hidrolisada para produzir ureia e ornitina. Sendo assim, uma molcula de ornitina usada repetidamente na formao da arginina e ureia. CICLO DA ORNITINA O NH4+ + HCO3ATP

H2NC OPO3
CARBAMOILFOSFATO

O C NH CH2 CH2 CH2 NH2

CH2NH3+ CH2 CH2 CHNH3+ COOOrnitina NH2-C-NH2 O Ureia Arginina

CHNH3+ COOCitrulina

O glutamato formado vai dar origem a aspartato e/ou amnia. COONOVA TRANSAMINAO

COO+ C =O CH2 COO-

AAT

COOH3N+ C H CH2 COO+

COOC =O CH2 CH2 COO-

H3N+ C H CH2 CH2 COOGlutamato

Oxaloacetato

Aspartato

-Cetoglutarato

AAT= Aspartato Amino Transferase

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O ciclo da ureia inicia-se na matriz mitocondrial terminando com a formao da ureia no citoplasma. No incio da sntese, na matriz mitocondrial, ocorre a formao de carbamoil-fosfato a partir de ons bicarbonato e amnio, com gasto de duas molculas de ATP. Os ons amnia se ligam com o dixido de carbono e ATP para produzir carbamoil-fosfato, numa reao catalisada pela carbamoil-fosfato-sintetase. Em seguida, o carbamoil-fosfato condensa-se com ornitina, numa reao catalisada pela ornitina transcarbamoilase, formando citrulina. Tanto a ornitina como a citrulina tm carreadores especficos de membrana na mitocndria. No citoplasma, a citrulina e o cido asprtico se condensam para formar argininossuccinato numa reao catalisada pela argininosuccinatosintetase. O composto argininossuccinato clivado em reao catalisada pela argininossuccinase e se decompe em arginina e fumarato. A arginina hidrolisada, em reao catalisada pela arginase regenerando ornitina e produzindo ureia, que transportada para o rim e eliminada pela urina. A ureia o principal produto de excreo do metabolismo nitrogenado de vertebrados terrestres; aves e reptis excretam cido rico, e, peixes, amnia. A quantidade de ureia excretada por um ser humano adulto cerca de 30g por dia, mas este valor varia proporcionalmente quantidade de protena ingerida. A ureia representa 90% dos compostos nitrogenados excretados; o restante aparece sob a forma de NH4+, creatinina e cido rico. Apesar de NH4+ constituir um pequeno percentual do N urinrio, sua excreo possibilita a eliminao de H +, contribuindo para a manuteno do equilbrio cido-base: o contedo de NH4+ da urina aumenta na acidose e diminui na alcalose. Por desaminao ocorre: COOH3N+ CH CH2 CH2 COOGlutamato + NAD(P)+ + H2O
desidrogenase Glutamato

COOC = O + NAD(P)H + H+ + NH4+ CH2 CH2 COO-Cetoglutarato

A ao combinada das aminotransferases + glutamato desidrogenase originam: +NH4 + aspartato, ou seja:

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AMINOCIDO T -CETOCIDO

-CETOGLUTARATO T GLUTAMATO GD NAD+(P)+H2O NAD(P)H+H+

OXALOACETATO

ASPARTATO

-CETOGLUTARATO

NH4+

Compostos nitrogenados excretados pelo homem Composto Quantidade excretada (g/dia) 30 0,7 1,4 0,8

Ureia NH4+ Creatinina cido rico

A amnia txica para os tecidos animais, especialmente para o crebro. A converso da maior parte do NH4+ em ureia fundamental para manter baixas as concentraes deste on nos tecidos. Quando h uma restrio na formao de ureia por disfuno heptica grave hepatite ou cirrose, por exemplo a concentrao de NH4+ se eleva, afetando principalmente o crebro e podendo ocasionar o coma. Como a amnia txica e a sua converso em ureia ocorre no fgado, o produzido nos outros tecidos, para ser transportado ao fgado, incorporado em compostos no-txicos e que atravessam membranas com facilidade: glutamina, na maioria dos tecidos extra-hepticos, e alanina, no msculo. A glutamina e a alanina so, portanto, os transportadores de amnia para o fgado. NH4+

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Degradao do Esqueleto Carbnico dos Aminocidos Quando removido o grupo amino do aminocido, resta sua cadeia carbnica, na forma de -cetocido. Estes esqueletos de carbono entram no metabolismo intermedirio em vrias etapas, dependendo se sero convertidos em piruvato, acetil-CoA, acetoacetil-CoA ou em intermedirios do ciclo do cido ctrico. Eles iro fornecer substratos para gliconeognese ou para a produo de corpos cetnicos. Os aminocidos cetognicos so convertidos em acetil-CoA ou acetoacetil-CoA, enquanto os aminocidos glicognicos sero convertidos em piruvato ou em intermedirios do ciclo do cido ctrico. Portanto conclui-se que as vinte cadeias carbnicas diferentes no possuem uma via comum de degradao. Seu metabolismo difere, neste aspecto, do metabolismo dos cidos graxos, todos degradados pelo ciclo de Lynen e dos acares, metabolizados pela gliclise. Embora existam vias prprias para a oxidao da cadeia carbnica de cada aminocido, estas diferentes vias de degradao convergem para a produo de apenas alguns compostos: piruvato, acetil-CoA, ou intermedirios do ciclo Krebs (oxaloacetato, -cetoglutarato, succinil-CoA e fumarato). A partir deste ponto, o metabolismo da cadeia carbnica dos aminocidos confunde-se com o das cadeias carbnicas de carboidratos ou de cidos graxos. O destino final dos -cetocidos depender do tecido e do estado fisiolgico considerados, podendo ser: oxidao pelo ciclo de Krebs, fornecendo energia; utilizao pela gliconeognese, para a produo de glicose; e converso a triacilgliceris e armazenamento. A maioria dos aminocidos produz piruvato ou intermedirios do ciclo de Krebs, precursores da gliconeognese e so por isso chamados glicognicos. A leucina origina corpos cetnicos, sendo o nico aminocido exclusivamente cetognico. Alguns outros aminocidos como Isoleucina, Fenilalanina, Tirosina, Treonina e Triptofano, so tanto glicognicos quanto cetognicos, isto , so glicocetognicos. Os destinos das cadeias carbnicas dos aminocidos de acordo com o composto formado so: 1. Aminocidos convertidos a piruvato: Ala,Cys,Gly,Ser,Thr,Trp. 2. Aminocidos convertidos a oxaloacetato: Asn, Asp. 3. Aminocidos convertidos a fumarato: Asp, Phe, Tyr. 4. Aminocidos convertidos a succinil-CoA: Ile,Val, Met e Thr. 5. Aminocidos convertidos a -cetoglutarato: Glu, Gln, Pro, Arg, His.

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6. Aminocidos convertidos a acetil-CoA: Phe,Tyr,Trp,Lys,Ile,Thr,Leu.

HIPERTEXTO Doenas Hereditrias do Metabolismo de Aminocidos Na fenilcetonria, a fenilalanina no pode ser convertida em tirosina e origina fenilpiruvato. H ausncia de fenilalanina hidroxilase. A converso de tirosina a 3,4-diidroxifenilalanina (DOPA) catalisada por tirosinase, uma oxigenase que contm cobre. As reaes que levam sntese de melanina a partir de DOPA so pouco conhecidas. A tirosina hidroxilase a enzima ausente no tipo clssico de albinismo. O albinismo est relacionado incapacidade de sintetizar melanina.

Tabela - Aminocidos Glicognicos e Cetognicos Glicognico Aspartato Asparagina Alanina Glicina Serina Treonina Cistena Glutamato Glutamina Arginina Prolina Histidina Valina Metionina Fonte: Campbell & Farrel, 2008 Cetognico Leucina Lisina Glicognico e Cetognico Isoleucina Fenilalanina Triptofano Tirosina

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1. Converso de Ala,Cys,Gly,Ser,Thr,Trp em piruvato A alanina convertida diretamente em piruvato atravs da transaminao, enquanto cistena e serina necessitam que suas cadeias laterais sejam inicialmente removidas. A glicina interconvertida em serina, fornecendo uma rota degradativa a piruvato. A treonina inicialmente convertida em aminoacetona e, depois desaminada em piruvato. 2. Converso de Asn, Asp em oxaloacetato A asparaginase remove o nitrognio amdico da cadeia lateral da asparagina para produzir aspartato, que convertido em oxalacetato atravs da transaminao pela AST. 3. Converso de Asp, Phe, Tyr em fumarato Aspartato um dos substratos do ciclo da ureia, em que convertido a fumarato. A fenilalanina convertida a tirosina por uma oxidao irreversvel, catalisada por fenilalanina hidroxilase. Dos nove carbonos da tirosina, quatro so convertidos a fumarato, quatro a acetoacetato e um a CO2. 4. Converso de Ile, Val, Met e Thr a succinil-CoA So inicialmente convertidos a propionil-CoA, que tambm produzida na oxidao de cidos graxos com nmero mpar de carbonos. As acil-CoA derivadas da isoleucina e valina so oxidadas por reaes semelhantes s da -oxidao, que convertem valina a propionil-CoA e isoleucina a propionil-CoA e acetil-CoA. A metionina forma -cetobutirato, que oxidado a propionil-CoA. A treonina por desaminao catalisada pela treonina desidratase, produz tambm -cetobutirato como a metionina. 5. Converso de Glu, Gln, Pro, Arg, His em -cetoglutarato O glutamato converte-se em -cetoglutarato por transaminao ou por desaminao oxidativa catalisada pela glutamato desidrogenase. A glutamina tem seu grupo amino liberado por ao da glutaminase formando glutamato. A prolina tem todos os seus tomos de carbono aparecendo como glutamato. A arginina ao ser hidrolisada pela arginase (ciclo da ureia, um de seus carbonos aparece na ureia e os outros passam a constituir ornitina, que origina glutamato. Cinco carbonos da histidina produzem glutamato e um carbono transferido ao tetraidrofolato. 6. Converso de Phe, Tyr, Trp, Lys, Ile, Thr, Leu em acetil-CoA A formao de acetil-CoA pode ser direta ou indireta (atravs de acetoacetato ou acetoacetil-CoA). A fenilalanina, tirosina, triptofano, isoleucina e treonina produzem tambm compostos precursores de glicose: os aminocidos glicocetognicos. Assim, quatro dos carbonos de fenilalanina e

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tirosina so convertidos a fumarato, trs do triptofano alanina e trs da isoleucina a propionil-CoA; a treonina, por uma via alternativa, converte-se a succinil-CoA. A via de degradao da leucina tem passos iniciais comuns dos outros aminocidos ramificados, valina e isoleucina, mas os produtos finais so exclusivamente acetoacetato e acetil-CoA. A lisina forma acetoacetil-CoA como o triptofano. O triptofano produz acetoacetil-CoA por uma via que inclui trs reaes com oxignio. Um dos intermedirios da via de degradao do triptofano precursor de cido nicotnico.

CONTEXTUALIZANDO Kwashiorkor e Marasmo Nos pases desenvolvidos, a desnutrio calrico-proteica observada mais frequentemente em pacientes hospitalizados com doenas crnicas, ou em indivduos que sofrem grandes traumas, infeces graves ou grandes cirurgias. Nos pases em desenvolvimento, so observados casos onde ocorre ingesto inadequada de protenas e/ou de energia. Os indivduos afetados mostram uma variedade de sintomas, incluindo sistema imunitrio deprimido, com reduo na capacidade de resistir a infeces. Duas formas extremas de desnutrio so o kwashiorkor e o marasmo. Enquanto o marasmo ocorre quando a privao de calorias relativamente maior do que a reduo em protenas, no kwashiorkor observa-se que a privao de protena relativamente maior do que a reduo em calorias totais. Ao contrrio do marasmo, a grande privao de protenas est associada grave perda de protena visceral. Crianas com kwashiorkor sofrem de perda muscular e diminuio da concentrao de protenas plasmticas, particularmente albumina. O resultado um aumento no fluido intersticial, provocando distenso abdominal e edema, o que faz com que a criana parea gordinha. A perda muscular causada pela falta de aminocidos essenciais na dieta; as protenas existentes devem ser degradadas para produzir tais aminocidos para a sntese de novas protenas. A esses problemas pode ser acrescida uma menor habilidade para produzir enzimas digestivas e clulas novas do epitlio intestinal devido a um decrscimo na disponibilidade de aminocidos para a sntese de novas protenas. As vtimas do marasmo no apresentam o edema ou as mudanas nas protenas plasmticas observadas no kwashiorkor (Champe, Harvey e Ferrier, 2009; Smith, Marks e Lieberman, 2007).

ATIVIDADES DE AVALIAO 1. Em relao aos aminocidos presentes nas clulas dos mamferos, indicar: a) suas procedncias;

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b) seus destinos metablicos; c) se existe uma reserva de aminocidos ou protenas. 2. Esquematizar as reaes catalisadas pelas seguintes enzimas: - Aspartato Aminotransferase; - Alanina Transferase 3. Esquematizar a reao catalisada pela glutamato desidrogenase. 4. Citar o principal produto de excreo de nitrognio no homem. 5. Esquematizar a reao de formao de carbamoil-fosfato catalisada por carbamoil-fosfato sintetase. 6. No ciclo da ureia: a) Indicar a procedncia dos tomos de nitrognio da molcula de ureia. b) Calcular o balano de ATP. c) Citar o aminocido proteico sintetizado. 7. Citar o rgo responsvel pela produo de ureia. 8. A amnia txica para os animais. Mostrar como a amnia produzida nos tecidos extra-hepticos transportada para o fgado. 9. Verificar o destino dos esqueletos de carbono dos aminocidos, seu catabolismo e indicar aqueles que podem originar glicose. 10. Citar as doenas genticas provenientes de alteraes do metabolismo da tirosina e da fenilalanina. 11. Definir aminocidos essencias e cit-los. 12. Qual o primeiro depositrio de grupos amino no metabolismo dos aminocidos? E o segundo?

Bibliografia Comentada Campbell, M. K.; Farrel, S. O. Bioqumica. Vol 3. So Paulo: Thomson Learning - 2008. No Captulo 23 do vol. 3, o assunto Metabolismo do Nitrognio discutido em todos os aspectos de importncia prprios do assunto. Champe, P. C.; Harvey, R. A.; Ferrier, D. R. Bioqumica Ilustrada. 4 Ed. Porto Alegre: Artmed, 2009. Na Unidade IV do livro nos Captulos 19, 20 e 21 so apresentados tpicos relacionados ao Metabolismo do Nitrognio com muitas ilustraes tornando o assunto de fcil compreenso. Devlin, T. M. Manual de Bioqumica com Correlaes Clnicas. So Paulo: Editora Blucher, 2007. O Captulo 19 da Parte IV desse livro aborda tpicos relacionados ao Metabolismo de Aminocidos. Marzzoco, A.; Torres, B. B. Bioqumica Bsica. 2 ed. 1999. Rio de Janeiro: Editora Guanabara Koogan S. A. O Captulo 17 da Parte 3 desse livro explana de forma bastante compreensiva o assunto Metabolismo de Aminocidos. Pelley, J. W. Bioqumica. No Captulo 12, so estudados tpicos relativos ao Metabolismo de Aminocido e Heme de uma forma sucinta e objetiva. Rio de Janeiro: Elsevier, 2007.

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Smith, C.; Marks, A. D.; Lieberman, M. Bioqumica Mdica Bsica de Marks Uma abordagem clnica. 2 ed. Porto Alegre: Artmed, 2007. Os Captulos 37, 38 e 39 abordam tpicos relacionados ao Metabolismo do Nitrognio de modo detalhado e didtico. Voet, D.; Voet, J. G.; Pratt, C. W. Fundamentos de Bioqumica. Porto Alegre: Artmed, 2000. O Captulo 20 da Parte IV traz uma discusso bastante abrangente sobre o Metabolismo dos Aminocidos.