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Mdulo: I Turno:
Sumrio
1. Qumica Instrumental: introduo e conceitos 2. A metodologia. 3. Reviso de eletroqumica 4. Condutometria 5. Titulao Condutomtrica 6. Polarometria 7. Potenciometria 8. Titulao Potenciomtrica 9. Cromatografia 10. Cromatografia Gasosa Acoplada a Espectrometria de Massas 11. Cromatografia Lquida Acoplada a Espectrometria de Massas 12. Colorimetria 13. Fotometria de chama 14. Espectrometria de Absoro Atmica 15. Espectrometria de Emisso Atmica 16. Espectrometria de Absoro Molecular no UV-Visvel 17. Anlise por injeo em fluxo 18. Amperometria 19. Turbidimetria 20. Referncias consultadas 4 5 6 8 10 11 13 25 28 38 40 44 48 53 56 60 64 66 68 69
1. Qumica Instrumental
O estudo dos contedos apresentados neste mdulo visa oferecer o conhecimento adequado sobre as principais tcnicas de anlise instrumental. Algumas tcnicas abaixo apresentadas esto organizadas por ordem de importncia, ou seja, por prioridade com relao s necessidades imediatas, alm de abranger uma gama maior de possveis meios de soluo de problemas. Cromatografia gasosa (CG) - Tcnica simples e bastante usada para separao e possvel identificao de substncias. Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (HPLC) - Tcnica mais precisa que a Cromatografia Gasosa, sendo bastante requisitada com a vantagem de evitar a decomposio das amostras. Espectroscopia de Massa (MS) - Tcnica bastante precisa e muito utilizada para quantificao de amostra. Espectroscopia de Absoro Atmica (AAS) - Tcnica muito usada para quantificao de amostra. Potenciometria - Tcnica importante e muito usada para controle de sistemas (Ex: medida de pH). Espectroscopia de Infravermelho - Tcnica muito usada para identificao de compostos alm de controle de sistemas. Muitos processos industriais proporcionam poluentes, que podem constituir problema sanitrio e/ou ambiental. A anlise quantitativa do ar, da gua e, em alguns casos, de amostras do solo devem ser efetivadas, a fim de determinar o nvel de poluio e tambm estabelecerem os limites seguros de contaminantes/poluentes.
Qumica Analtica
Envolve mtodos voltados para a determinao da composio da matria. Os mtodos qualitativos geram informaes sobre a identidade das espcies atmicas ou moleculares ou mesmo grupos funcionais na amostra. J os mtodos quantitativos proporcionam resultados numricos relacionados quantidade dos componentes na amostra. Os mtodos analticos podem ser classificados em: Clssicos ou Instrumentais.
Mtodos Clssicos
No incio do desenvolvimento da Qumica, a maioria das anlises empregava a separao dos componentes de interesse (os analitos) por tcnicas como precipitao, extrao ou destilao. Para anlises qualitativas, os componentes separados eram ento tratados com reagentes, que em contato com o analito produziam compostos identificados pela sua cor, solubilidade, pontos de fuso e ebulio etc. Assim as espcies qumicas eram identificadas. A quantificao dos analitos pode ser feita atravs de tcnicas simples, mas muito precisas e que esto em pleno uso como a volumetria (titulaes) e a gravimetria (medidas de massa). Esses mtodos clssicos de separao e determinao de analitos ainda so muito utilizados, devido relativa simplicidade de equipamentos necessrios e confiabilidade de resultados obtidos.
Mtodos Instrumentais
No incio do sculo 20, os qumicos passaram a explorar outros fenmenos distintos daqueles observados nos mtodos clssicos para resolver problemas analticos. Com isso, medidas de propriedades fsicas dos analitos tais como a condutividade eltrica, absoro e/ou emisso de luz, entre outras, passaram a ser utilizadas na anlise quantitativa de uma grande variedade de analitos inorgnicos, orgnicos e biolgicos. Com isso, novas tcnicas, a exemplo da cromatografia lquida de alta eficincia, espectroscopia e tcnicas eletroanalticas, passaram a ser utilizadas para a realizao de anlises cada vez mais sofisticadas. 5
Esses novos mtodos de separao e determinao de espcies qumicas passaram a ser conhecidos como mtodos instrumentais de anlise. Seu crescimento foi favorecido pelo avano tecnolgico dos dispositivos eletrnicos e dos computadores. A maioria dos equipamentos analticos modernos possui ou esto conectados a um ou mais dispositivos eletrnicos sofisticados capazes de detectar e registrar dados relativos aos analitos. Esses dispositivos podem ser amplificadores, circuitos integrados, microprocessadores ou mesmo computadores. De fato existem mquinas que apresentam uma imensa complexidade, enquanto outras so mais simples. O cientista deve definir o problema e ento decidir o mtodo mais apropriado para solucion-lo de acordo com suas condies. A Qumica Analtica Instrumental, devido ao nvel de desenvolvimento alcanado conseqente complexidade adquirida, divide-se de acordo com os mtodos de anlise utilizados na identificao e quantificao do analito. Os mtodos Espectromtricos, por exemplo, utilizam conhecimentos relacionados com a interao entre a luz e a matria. Entre eles destacam-se a Espectrometria de Absoro Atmica, Espectrometria de Absoro Molecular, Espectrometria de Emisso Atmica, entre outras tcnicas. Diversas outras caractersticas especficas das espcies qumicas so exploradas na Qumica Analtica. Os mtodos eletroanalticos so capazes de determinar analitos a partir de seus potenciais padro de reduo. Esses mtodos envolvem tcnicas como a Potenciometria, Coulometria e os diversos tipos de Voltametria.
2.
A metodologia
Amostragem (coleta e preservao de amostras); Pr-tratamento; Escolha da tcnica; Anlise dos dados. Na realizao de uma anlise, vrias decises devem ser tomadas. Definio do problema este o primeiro estgio numa anlise. Que informaes analticas so requeridas? Escolha do mtodo - como ser possvel obter essas informaes de forma segura e confivel. Amostragem processo de separao e remoo de uma pequena parte representativa de material da qual ser efetuada a anlise. Alm disso, deve preservar a amostra at a sua chegada ao laboratrio. Preparao da amostra de laboratrio amostras slidas so pulverizadas para assegurar a homogeneidade. Definir amostras replicatas a maioria das anlises so feitas em amostras replicatas, principalmente, em caso de pesquisa. A anlise em replicatas assegura a qualidade dos resultados. Preparao da amostra os mtodos analticos, em geral, so aplicados com o analito em soluo. Eliminao de interferentes as espcies, que podem alterar a medida final do analito, so chamadas de interferentes. Calibrao e medida Clculo dos resultados
Mtodos de referncia
So necessrios para validar os resultados analticos no meio cientfico, por exemplo, os parmetros de qualidade de guas naturais, de abastecimento e residurias so monitorados pelas anlises de: pH, condutividade, turbidez, alcalinidade, slidos, DQO, DBO, Nitrognio, Fsforo, Metais pesados, leos e Graxas e outros.
Os mtodos analticos podem ser classificados de acordo com a natureza da medida. Mtodos gravimtricos a massa do analito determinada a partir de uma pesagem numa balana analtica. Mtodos volumtricos o volume de uma soluo contendo uma espcie qumica, que reagir completamente com o analito. Diante desse consumo da soluo se encontra estequiometricamente a massa ou concentrao do analito. Mtodos eletroanalticos envolvem a medida de propriedades eltricas como potencial, corrente, resistncia e quantidade de eletricidade. Mtodos espectroscpicos so baseados na interao entre a radiao eletromagntica e tomos ou molculas do analito, ou ento, a emisso de tais radiaes pelo analito.
3. Reviso Eletroqumica
Pilhas voltaicas (galvnicas) e eletrolticas: Uma pilha consiste em dois eletrodos e uma ou mais solues no recipiente adequado. Se uma pilha pode fornecer energia para um sistema externo chamado de pilha voltaica. A energia qumica convertida mais ou menos completamente em energia eltrica, mas parte daquela energia pode ser dissipada em forma de calor. Se a energia for suprida da parte externa da pilha para a qual ela flui, a pilha chamada de pilha eletroltica e as leis de Faraday permitem o clculo da transformao de matria que ocorre nos eletrodos. Durante uma operao eletrogravimtrica, constri-se uma pilha galvnica na medida em que os produtos se formam nos eletrodos. Se a corrente for interrompida, os produtores tendero a produzir uma corrente na direo oposta direo em que passou a corrente de eletrlise. TIPOS DE CLULA Em qualquer dos casos: Os eletrodos onde ocorra oxidao sero sempre chamados nodos. Os eletrodos onde ocorra reduo sero sempre chamados ctodos.
Clula eletroltica - a energia eltrica produzida usada para forar uma reao qumica no espontnea.
Que representa a transferncia de um eltron do tomo de ferro para o tomo de crio em uma clula eletroltica: ou seja, a reao: Fe+2 Fe+3 + elogo seguida por Ce+4 + e- Ce+3 Clula galvnica (voltaica) - a reao qumica ocorre espontaneamente para produzir energia eltrica
Equao de Nernst
Considerando a semi-reao genrica Mn+ + ne- M O potencial do eletrodo dado pela equao E = Eo+ RT ln aMn+ nF onde: R = constante dos gases = 8,3144 J abs./Kmol T = temperatura absoluta (25oC) em graus kelvin = 298,16 K n = nmero de eltrons envolvidos F= constante de Faraday = 96.485,3 J abs./V abs.eq-g ln= 2,303 log (logaritmo neperiano transformado para log da base 10) Substituindo os valores das constantes e temperatura na de E E= Eo+ 8,3144 x 298,16 x 2,303 log aMn+ n x 96.485,3 E= Eo+ 0,0592 x log aMn+ n Equao de Nernst
Potencial de Eletrodo (Eo) - tendncia dos ons de doar ou receber eltrons Um voltmetro pode ser colocado entre dois eletrodos para medir a diferena de potencial A alta diferena de potencial mostra a grande tendncia do Fe (II) e do Ce (IV) de transferir eltrons Meia reao (reduo) Ce4+ + e- Ce3+ E1o = +1,44 Fe3+ + e- Fe2+ E2o= +0,77 O potencial depende da concentrao e o potencial padro de referncia foi calculado levando em considerao que a atividade para todas as espcies igual unidade. Quanto mais positivo o Eo, maior a tendncia da forma oxidada ser reduzida (forte agente oxidante). Quanto mais negativo o Eo, maior a tendncia da forma reduzida ser oxidada (forte agente redutor).
A calibrao das clulas condutomtricas feita, comumente, com solues de cloreto de potssio com concentraes conhecidas, cujas condutncias especficas foram determinadas em clulas com geometria perfeitamente definida. Existem valores das condutncias especficas de solues de cloreto de potssio para diferentes temperaturas.
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As lminas metlicas so dispostas em posio vertical para evitar a deposio sobre elas de precipitados que, eventualmente, se formem durante a titulao. Na titulao condutomtrica, a soluo padro adicionada de uma microbureta em sucessivos incrementos. Aps a adio de cada incremento, medida a condutncia da soluo. A adio da soluo padro ocasiona um certo aumento de volume e, portanto, um certo efeito de diluio que afeta a medida da condutncia. O efeito de diluio pode ser grandemente diminudo com o uso de uma soluo padro 10 a 20 vezes, pelo menos, mais concentrada do que a soluo em estudo com respeito a espcie interessada. Nas titulaes condutomtricas, so obtidos resultados satisfatrios sem colocar a clula em um banho termosttico desde que no se verifiquem variaes apreciveis de temperatura. Nos trabalhos mais acurados, pode-se fazer uso de um termostato para maior segurana. 11
Os dados de condutncia obtidos em uma titulao so representados graficamente em funo do volume da soluo padro para efeito de localizao do ponto final. A curva de titulao resultante consiste de dois ramos distintos: o primeiro, ramo de reao, d a variao da condutncia at o ponto de equivalncia; e o segundo, ramo do reagente, d a variao da condutncia aps o ponto de equivalncia. A interseo dos dois ramos localiza o ponto final. A localizao grfica do ponto final requer um nmero de medidas suficiente para definir a curva de titulao. Quando a reao envolve eletrlitos fortes, os ramos de reao e do reagente so duas linhas retas. Ento, basta achar trs ou quatro pontos antes e depois do ponto de equivalncia. Quando a reao envolve eletrlitos fracos, o ramo de reao curvilneo e, ento, torna-se necessrio um nmero maior de medidas para defini-lo. As principais aplicaes da titulao condutomtrica se referem s reaes de neutralizao, de precipitao e de formao de complexos.
Na clula polarogrfica acima referida, o eltrodo auxiliar tem a forma de um depsito de mercrio com uma grande superfcie; como a corrente que flui atravs da clula muito fraca, pode considerar-se como no ocorrendo sobre o eltrodo auxiliar nenhuma polarizao. Por conseguinte, o potencial do eltrodo auxiliar permanece constante, independentemente da f.e.m. aplicada clula. Por sua vez, o eltrodo gotejante de mercrio, devido s suas pequenas dimenses, um microeltrodo com condies favorveis para uma polarizao extrema. Portanto, o eltrodo gotejante de mercrio funciona como eltrodo indicador da corrente. O eltrodo gotejante de mercrio permite obter, sob condies apropriadas, curvas de corrente-voltagem perfeitamente reprodutveis. As referidas curvas so denominadas polarogramas. A Fig. abaixo representa os polarogramas de uma soluo IO-3 M em Cd2+ e 1 M em KCI (curva I) e de uma soluo 1 M cm KCI, ambas previamente livradas do oxignio dissolvido; o oxignio, por ser facilmente redutvel no eltrodo gotejante de mercrio, deve ser removido para no interferir na curva de corrente-voltagem. O desenvolvimento da curva I mostra que apenas uma corrente muito fraca, chamada corrente residual, passa atravs da clula antes de ser atingido o potencial de decomposio da soluo. Uma vez sobrepassado o potencial de decomposio, a f.e.m. aplicada provoca a eletrlise contnua da soluo, com a descarga de on zinco no eltrodo gotejante de mercrio (ctodo) e formao de amlgama de zinco extremamente diludo: Cd2+ + 2e- + Hg --> Cd (Hg) Simultaneamente, ocorre a oxidao de mercrio com formao de cloreto de mercrio I no eletrodo estacionrio (nodo):
Fig- Polarograma de uma soluo 1O-3 M em Cd2+ e 1 M em KCI (curva I) e de uma soluo 1 M em KCI(curva II)
Um grande nmero de substncias capaz de sofrer reduo ou oxidao no eltrodo gotejante de mercrio formando ondas polarogrficas bem definidas. Conforme o caso, as ondas so catdicas ou andicas.
Eletrodo Indicador
Eletrodo sensvel espcie a ser determinada, isto , o seu potencial ser funo da concentrao dessa espcie. Para que um eletrodo seja empregado como eletrodo indicador deve apresentar as seguintes caractersticas: Grande sensibilidade espcie a ser determinada; Alto grau de reprodutibilidade; Resposta rpida variao de concentrao da espcie em determinao.
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Eletrodo de Referncia
Eletrodo com potencial constante, isto , o seu potencial funo de uma espcie cuja concentrao permanece inalterada durante toda a determinao. Para que um eletrodo seja empregado como eletrodo de referncia deve apresentar as seguintes caractersticas: Invariabilidade do potencial durante o processo; Deve ser de fcil preparao; Rpido ajustamento a um determinado e exato potencial; Interesse trmico desprezvel, isto , o potencial do eletrodo deve responder prontamente a uma variao de temperatura, mas assim que a temperatura inicial restabelecida, o seu potencial deve voltar ao valor inicial; Baixa polarizabilidade, isto , mesmo havendo passagem de pequenas correntes pelo eletrodo, no deve haver mudana considervel no seu potencial. A necessidade de contar com o eletrodo de referncia, alm do eletrodo indicador, deve-se impossibilidade de medir diretamente o potencial do eletrodo indicador. O eletrodo indicador, imerso na soluo em estudo, associado, atravs de uma ponte salina, ao eletrodo de referncia, para que ento, se tenha condies de medir a fora eletromotriz (f.e.m.) da clula. A f.e.m. da clula a diferena algbrica dos potenciais dos dois eletrodos, o de referncia e o indicador, tomada em qualquer direo e dada em valor absoluto. Ecel = Eref - Eind ou Ecel = Eind - Eref 15
A rigor, preciso incluir ainda, na f.e.m. da clula, o potencial de juno lquida. Ecel = Eref - Eind + Ej ou Ecel = Eind - Eref + Ej O potencial de juno se manifesta entre a soluo do sistema do eletrodo de referncia e a soluo em estudo. Comumente, o potencial de juno minimizado mediante o uso de uma ponte salina. Para que possam ser obtidos resultados interpretveis, essencial, em muitos casos, que Eref e Ej sejam conhecidos ou permaneam constantes durante as medidas. Nestas condies, Eref e Ej podem ser incorporados em uma nica constante. Ecel = constante - Eind Ecel = Eind - constante O potencial Eind uma funo da atividade do on ativo, isto , do on para o qual o eletrodo indicador sensvel. Conhecida esta funo, a medida da f.e.m. da clula, Ecel, permite achar a concentrao da espcie em estudo. O Eletrodo de referncia em medidas potenciomtricas sempre tratado como um nodo. O Eletrodo de Referncia Ideal apresenta reao reversvel, obedece a equao de Nernst, tem potencial constante com o tempo, exibe pouca histerese variao de temperatura e retorna o potencial aps ser sujeito a pequenos valores de corrente. O eletrodo indicador de uma clula aquele que depende da atividade (e, portanto, da concentrao) de uma dada espcie inica cuja concentrao bem determinada. Na potenciometria direta ou na titulao potenciomtrica de um on metlico, um eletrodo indicador simples consiste usualmente num fio ou basto de um metal apropriado, cuidadosamente limpo; de importncia vital que a superfcie do metal esteja imersa numa soluo livre de pelculas de xido ou de quaisquer produtos da corroso. Em alguns casos, pode-se obter um eletrodo mais satisfatrio usando um fio de platina recoberto por uma pelcula fina do metal apropriado, por deposio eletroltica. Quando os ons hidrognio so envolvidos, pode-se, obviamente, utilizar como eletrodo indicador um eletrodo de hidrognio, mas a sua funo pode igualmente ser desempenhada por outros eletrodos, o melhor dos quais o eletrodo de vidro. Este um exemplo de um eletrodo de membrana no qual o potencial desenvolvido entre a superfcie de uma membrana de vidro e uma soluo uma funo linear do pH da soluo, de modo que pode ser utilizado para a medida da concentrao de on hidrognio da soluo. Como a membrana de vidro contm ons de metais alcalinos, tambm possvel desenvolverem-se eletrodos de vidro que podem ser utilizados para a determinao da concentrao destes ons na soluo, e, deste desenvolvimento (que baseado num mecanismo de troca inica), apareceu uma srie de eletrodos de membranas baseados em materiais de troca inica tanto de estado slido como de membrana lquida; estes eletrodos constituem a srie importante de eletrodos on seletivos, que, presentemente, se conhecem para diversos ons. O eletrodo indicador empregado numa titulao potenciomtrica depende, claro, do tipo de reao que est sendo investigada. Assim, numa titulao cido-base, o eletrodo indicador poder ser um eletrodo de hidrognio ou algum outro on que responda a ons hidrognio; para uma titulao de precipitao (haleto com nitrato de prata, ou prata com cloreto) usar-se- um eletrodo de prata, e para uma titulao redox um simples fio de platina como eletrodo redox. O eletrodo de hidrognio. Adicionalmente sua funo como um eletrodo padro, o eletrodo de hidrognio pode ser utilizado para a medida da concentrao de on hidrognio ou de pH de solues e igualmente em titulaes potenciomtricas cido-base. Deve ser notado que o eletrodo de hidrognio no pde ser usado em solues que contenham agentes oxidantes, e.g., ons permanganato, nitrato, crio (IV) e ferro (III), ou outras substncias capazes de reduo, como compostos orgnicos no-saturados, bem como na presena de sulfetos, compostos de arsnio etc. (venenos catalticos) que destroem a propriedade cataltica do negro-de-platina. Tambm no satisfatrio na presena de sais de metais nobres, como o cobre, a prata e o ouro, bem como em solues que contenham sais de chumbo, cdmio e tlio. Existem muitos outros eletrodos que so mais convenientes para o uso no intervalo em que so aplicveis. 16
O eletrodo de antimnio. O chamado eletrodo de antimnio na realidade, um eletrodo de antimnio-trixido de antimnio. O eletrodo de antimnio no pode ser utilizado: (a) na presena de agentes oxidantes fortes ou de reagentes complexantes (como tartaratos e cidos hidroxlicos orgnicos); (b) em solues de pH inferior a 3, nas quais o xido se torna demasiadamente solvel; (c) na presena de metais mais nobres do que o antimnio. O eletrodo no facilmente envenenado, de uso simples (nenhum reagente , usualmente, requerido), e forte; tem sido, ento, aplicado para o registro continuo e controle de pH nas condies em que utilizvel. O eletrodo de vidro. O eletrodo de vidro o mais amplamente utilizado dos eletrodos que respondem ao on hidrognio; o seu uso o depende da seguinte condio: quando uma membrana de vidro imersa numa soluo desenvolve-se um potencial que uma funo linear da concentrao de hidrognio da soluo. A natureza do vidro usado para a construo do eletrodo de vidro muito importante. Vidros duros do tipo Pyrex no so adequados, e durante muitos anos foi universalmente usado para a manufatura dos eletrodos de vidro um vidro de cal sodada. Estes eletrodos so muito satisfatrios num intervalo de pH de 1-9, mas em solues de alcalinidade mais elevada esto sujeito ao chamado erro alcalino" e tendem a dar valores mais baixos do que os reais de pH. O de vidro pode ser utilizado na presena de oxidantes e redutores fortes, em meios viscosos e na presena de protenas e substncias similares, que interferem fortemente com outros eletrodos. Tambm pode ser adaptado para medidas com pequenos volumes de solues. Pode dar resultados errneos quando usado com solues mal tamponadas que estejam quase neutras. O eletrodo de vidro deve ser muito bem lavado com gua destilada aps cada medida e, antes de se fazer uma outra medida, lavado com varias pores da prxima soluo a ser analisada. No se deve deixar o eletrodo de vidro ficar seco, exceto durante longos perodos de armazenagem ele retornara a sua condio de responder atividade inica quando for imerso, novamente, em gua destilada durante pelo menos 12 horas, antes da utilizao.
So utilizados dois tipos de eletrodos: (A) aqueles nos quais o trocador lquido contm o on ao qual o eletrodo responde, e (B) aqueles em que o trocador liquido eletricamente neutro e no contm quaisquer ons. Eletrodos de membrana lquida, a soluo do material que faz a troca inica colocada num tubo fechado por um diafragma poroso na extremidade inferior, e o eletrodo interno de prata-cloreto de prata numa soluo o de cloreto de potssio (ou sdio) instalado num tubo estreito que fica montado dentro do outro mais largo. A diferena de potencial de uma membrana on-sensvel : E = K + (2.303RT/nF)log (a) K uma constante que responde a outros potenciais R a constante geral dos gases T temperatura n a carga do on (incluindo o sinal) F a constante de Faraday a a atividade do on analito. Um grfico da medida do potencial contra o log da atividade (a) dar uma linha direta. ISEs so suscetveis a vrias interferncias. Amostras e padres so diludos (1:1) com um ajustador de fora inico e tampo (TISAB). O TISAB consiste numa soluo de NaCl 1M para ajustar a fora inica, um tampo cido actico/acetato para controlar o pH, e um agente complexante do metal.
Instrumentao
Os ISEs consistem de uma membrana on-seletivo, um eletrodo de referncia interno, um eletrodo de referncia externo, e um voltmetro. Um potencimetro tpico mostrado na figura abaixo.
Desenho esquemtico de um medidor de ISE ISEs comerciais combinam freqentemente os dois eletrodos em uma unidade que anexada ento a um pHmetro.
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Embora o eletrodo de hidrognio seja o eletrodo de referncia primrio, na prtica so preferidos, para a maioria das finalidades, eletrodos de referncia subsidirios que podem ficar montados permanentemente, ficando, assim, disponveis para o uso imediato; estes evitam, desta forma, cuidados na montagem (incluindo a purificao do gs) que requerida para se estabelecer um eletrodo de hidrognio satisfatrio. Quando usado como eletrodo padro o eletrodo de hidrognio opera numa soluo que contm ons hidrognio numa atividade constante (unitria) baseada, usualmente, no cido clordrico, e o gs deve estar a uma atmosfera de presso. Este no prtico em trabalhos de rotina, pois requer uma corrente de hidrognio puro a uma presso determinada e, torna-se inativo por efeito de envenenamento da camada cataltica com traos de certas substncias. Alm disso, o eletrodo no pode ser usado na presena de agentes oxidantes ou redutores.
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Nos eletrodos de vidro sensveis H+, a estabilidade qumica e a resistncia eltrica esto sempre ligadas. A resistncia eltrica dos eletrodos de pH, em funo da composio da membrana, tamanho e forma, pode variar entre 5 e 500 MW. Assim, os eletrodos com boa estabilidade qumica em elevadas temperaturas, possuem uma resistncia eltrica excessiva para baixas temperaturas. Contrariamente, eletrodos com boa resposta a baixas temperaturas degeneram rapidamente a altas temperaturas. Devido a esta contraposio, os eletrodos so desenhados de forma especfica para certos tipos de temperatura e pH.
Eletrodo de Vidro
Sem duvida o mais importante eletrodo sensvel ao pH o eletrodo de vidro. Esse dispositivo se baseia no fato de membranas delgadas de certas variedades de vidro serem suscetveis aos ons-hidrognio. Se duas solues estiverem separadas por essa membrana, aparecer uma diferena de potencial entre suas duas superfcies, que , no caso, proporcional ao logaritmo da razo das atividades do on-hidrognio das duas solues: Eg = ln = (0,0591) (pH2 pH1) (a 25C) 21
Uma forma tpica de eletrodo de vidro a forma de um tubo de ensaio terminando em bulbo de vidro de paredes delgadas sensvel ao pH. Internamente contem uma soluo tampo de cloreto de um eletrodo de referncia, geralmente prata-cloreto de prata ou calomelano. O tubo est permanentemente fechado no alto. No uso, mergulha-se esse conjunto de eletrodos na soluo da amostra junto com a ponte salina do eletrodo de calomelano ou de outro eletrodo de referencia. O eletrodo de vidro em relao a qualquer eletrodo de referncia conveniente fornece um potencial que relaciona ao pH por uma expresso do tipo pH = (Ecela EG) / 0,0591 (a 25C) O termo Eg inclui o potencial dos eletrodos de referencia, interno e externo e, em adio, pequenos potenciais espuricos chamados potenciais de assimetria, provavelmente resultantes de diferenas de tenso do vidro. Eg um constante para uma determinada associao de eletrodos, mas no podem ser calculados teoricamente. Por essa razo, habito padronizar a associao de eletrodos medindo-se o potencial produzido quando se mergulham os eletrodos em um tampo-padro. Considerando agora a situao que se origina quando um eletrodo de vidro, com um ECS interno em ma soluo de pH 7 junto com um ECS externo. Resulta um sistema essencialmente simtrico:
Dessa simetria evidente que teoricamente no se origina voltagem sob essas condies. Segue ento da equao anterior Eg = Ecela 0,0591 pH que Eg = 0 (0,0591) (7) = -0,4137 e o pH da soluo-teste dado por
pH = = +7 pode-se repetir esse tratamento para um eletrodo de vidro com qualquer valor de pH interno, digamos 5, caso em que a expresso resultante ser pH = +5
Assim, qualquer combinao de eletrodos de vidros e de eletrodos de referncia se caracteriza p um pH de potencial zero definido. Deve-se notar que um coeficiente de temperatura de um par de eletrodos de vidro referencia inclui no apenas o coeficiente Nernst, mas tambm a variao da solubilidade com a temperatura dos sais pouco solveis envolvidos. O coeficiente total seguira a inclinao de Nernst apenas se os eletrodos de referncia, interno e externo, forem idnticos. Isto , ambos ECS ou ambos os eletrodos de prata-cloreto de prata saturados com KCl. O eletrodo de vidro tornou-se extremamente importante na moderna prtica analtica e industrial e por isso substitui praticamente outros sistemas sensveis ao pH. Todavia apresenta limitaes definidas. Pode dar leituras que so altas demais por uma unidade de pH, quando a soluo apresentar pH 10 ou maior na presena de altas concentraes de ons-sdio. So disponveis eletrodos especiais que apresentam baixos erros em sdio. A superfcie do vidro pode absorver seletivamente alguns ons especficos, o que pode causar erros de medida. Geralmente, uma cuidadosa lavagem evita dificuldades. O eletrodo de vidro apresenta srios erros em solues de fluoreto mais acidas que pH 6. Vrios fabricantes fornecem combinaes de eletrodos de vidro e eletrodos de referencia. Em vrios projetos, o eletrodo de referencia mantm contato com a soluo da ponte salina (KCl ou outra) que esta em um recipiente anelar ao redor do eletrodo de vidro. 22
A soluo salina age como uma blindagem eletrosttica para o eletrodo de vidro de alta resistncia. O eletrodo combinado tornou-se muito comum devido sua grande convenincia. O custo menor que o eletrodo de vidro e referncia separados, mas maior que o de um eletrodo de vidro sozinho.
Dissolues Tampo
As dissolues tampo so dissolues aquosas de misturas de cidos fortes e bases fracas ou de bases fortes com cidos fracos, dando valores fixos de pH. As dissolues tampo podem ser utilizadas quando o pH est entre 1 e 12. pH a 25 C 4,00 7,00 9,00 10,00 10,00 Composio para volume final de 100 mL 50 mL KH Ftalato (0,1 M) + 0,1 mL HCl (0,1 M) 50 mL KH2PO4 (0,1 M) + 29,1 mL NaOH (0,1 M) 50 mL Brax (0,025 M) + 4,6 mL HCl (0,1 M) 50 mL Brax (0,025 M) + 18,3 mL NaOH (0,1 M) 50 mL NaHCO3 (0,05 M) + 10,7 mL NaOH (0,1 M)
Calibrao
Antes de realizar medies, se utilizam padres amortizadores, tampes, para validar a escala pH do instrumento: Ajustar o potencial de assimetria, colocando o eletrodo em tampo pH = 7. Coloca-se o eletrodo em um tampo diferente de pH 7, segundo a regio onde se fazem as medies de pH. Nos pH-metros controlados por microprocessador no interessa a ordem em que se introduzem os tampes. Nos pH-metros, com comandos de ajuste, sim. Para medidas precisas de pH, a temperatura da amostra ser a temperatura na qual estaro tambm os dois tampes de calibrao. Se a amostra est a diferente temperatura que os tampes ou h mudanas importantes de temperatura entre as amostras, devemos considerar e para isso resulta muito prtico utilizar uma sonda Pt100 de compensao automtica de temperatura. Nos novos pH-metros podemos calibrar os dois tampes na mesma temperatura, e as amostras a outra distinta, j que diferencia a temperatura de calibrao e a temperatura de medida. possvel ainda que no se disponha da sonda de temperatura Pt100.
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Limpeza do Diafragma Contaminantes Orgnicos: Coloca-se o eletrodo em mistura crmica a 80C durante 5 minutos e depois se lava com gua destilada. Depois de feitas medies em dissolues que contm enxofre, o diafragma costuma ter uma cor preta, devida ao precipitado de Ag2S. Para limp-lo, colocamos o eletrodo durante vrias horas em uma dissoluo ligeiramente cida de 7% de tiourea, e lava-se muito com gua. Depois de feitas medies em dissolues com baixa concentrao de Cl-, o diafragma costuma ter uma cor marrom devido ao AgCl precipitado. Para limp-lo, introduzimos o eletrodo por cima do diafragma em NH3 concentrado e o deixamos toda uma noite; ao dia seguinte enxgua-se bem com gua destilada, renova-se o eletrlito de referncia e recoloca-se durante uma hora no tampo de pH = 4. Se com as recomendaes anteriores, no ficar limpo o diafragma, pode-se retirar a capa externa do diafragma com uma lixa muito delgada, com muito cuidado para no desgrudar o diafragma do corpo do eletrodo. Cuidado da Membrana de Vidro Depois de medies em dissolues no aquosas, colocar o eletrodo em gua destilada entre medidas. Depois de medies em meios que contm protenas, colocar o eletrodo vrias horas em uma dissoluo de pepsina (5% de pepsina em HCl 0,1 M) e lavar com H2O. Regenerao da Membrana de Vidro Colocar a membrana de vidro durante um minuto em uma dissoluo de NH4HF2 a 10% ou alguns segundos em HF a 40%. Depois enxaguar durante 10 segundos em uma dissoluo de HCl: H2O (1:1). Lavar com gua destilada e manter o eletrodo durante 24 horas em KCl 3 M. Eletrodos Redox O potencial redox uma medida da fora de oxidao ou reduo de um sistema redox, (e no uma medida da atividade dos ons), sendo um fator importante para estimar o sentido do equilbrio redox no transcurso de uma reao. O potencial redox medido geralmente com condutores eletrnicos, em forma de metais nobres (Pt, Au), ou eletrodos de carvo. Estes eletrodos no so totalmente independentes das influncias de outros ons, portanto o eletrodo de Au d uma resposta frente aos ciano e cloro, complexos formados com o Au +. A equao de Peters relaciona o potencial no eletrodo redox EWE e as atividades inicas aox e ared. EWE = E + (RT / nF). ln (aox / ared ) Se no equilbrio redox tambm tomam parte os prtons H+ : Ox + n e Podemos expressar a equao de Peters como: EWE = E + (RT / nF). ln (aox . H m / ared) EWE = E + ( 0,1984/n) . (273,16 + T) . (log aox _ log ared _ m pH) Assim para o sistema: Cr2 O7 2- + 6e- + 14 H+ < - - - - - - -> 2Cr+3 + 7H2 O EWE = E + (0,1984575 / 6). T. (log Cr2 O7 2- _ 2. log Cr+3 _ 14 pH). O potencial redox deste sistema est fortemente influenciado pelo valor de pH. Inclusive para sistemas redoxes nos que no aparecem de forma direta a influncia dos prtons H+, o potencial redox tambm pode variar em funo do pH por mudanas de espcie, formao de hidrxidos, ao de complexantes ou precipitantes. 24 + mH+ + Red
b. - Com uma dissoluo de quinidrona (QH) em um meio tamponado cido ou neutro (no alcalino), a qual tem um potencial redox bem definido.
T (C) 5 10 15 20 25 30
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Os potenciais do par de eletrodos (eletrodo metal precioso / eletrodo de referncia) so a 20 C: pH E = E WE _ E ER ESCE (20C) 3,99 7,02 223,1 47,3 E Ag /AgCl (20C) 259,3 83,5 pH 3,99 7,02 EWE (mV) 20 C + 470,8 + 295,0
Os valores medidos podem variar s vezes em uns poucos milivolts devido a mudanas no potencial de difuso do eletrodo de referncia e quantidade de quinidrona utilizada.
8. Titulaes Potenciomtricas
Na titulao potenciomtrica, tambm chamada de potenciometria relativa, mede-se a f.e.m. da clula no curso da titulao. As titulaes, como sabemos, so acompanhadas de variaes bruscas de concentrao nas imediaes do ponto de equivalncia, o que provoca uma variao brusca no potencial do eletrodo indicador e, portanto, tambm na f.e.m. da clula. A titulao potenciomtrica uma tcnica de localizao do ponto final na anlise volumtrica, aplicvel sempre que se dispuser de um eletrodo indicador para a espcie desejada. So feitas sucessivas medies da f.e.m. da clula, sendo cada uma delas aps a adio de um certo volume de soluo titulante adequada. A seguir relacionam-se esses potenciais com o volume de soluo titulante consumida. 26
As medies feitas no decorrer da titulao potenciomtrica so relativas e informaram sobre as variaes ocorridas no potencial da clula. Atravs delas, pode-se estabelecer com preciso o ponto de equivalncia que determinar a concentrao da espcie sob anlise. A titulao potenciomtrica mais trabalhosa do que a tcnica volumtrica com indicadores visuais e requer equipamento especial, mas ela apresenta uma srie de vantagens sobre a tcnica convencional: Maior sensibilidade e pode ser aplicada a solues bem diludas; Pode ser empregada para solues coloridas ou turvas, pois dispensa o uso de indicadores visuais; Pode ser aplicada para certas reaes que no disponham de indicadores visuais adequados; Pode-se determinar sucessivamente vrios componentes; Pode ser aplicada em meio no aquoso; Pode ser adaptada a instrumentos automticos.
Em 1955, surgiram as primeiras buretas de pisto motorizadas, permitindo a automatizao das titulaes, acima de tudo com maior preciso na dosagem. As titulaes potenciomtricas, hoje em dia, podem ser executadas manual ou automaticamente, com ou sem registro da curva. Titulao potenciomtrica diferencial. medida que o ponto final de uma titulao aproximado a f.e.m. do sistema, muda mais rapidamente. possvel medir-se diretamente processo este que chamado de titulao potenciomtrica diferencial. O resultado desejado conseguido colocando-se dois eletrodos indicadores idnticos (e.g., fios de platina) na soluo a ser titulada, mas um destes (o eletrodo isolado) est numa pequena poro do liquido que esta separada do corpo principal da soluo, portanto, isolado da reao imediata com o titulante. A principal vantagem do mtodo diferencial que no requer um eletrodo de referncia; e mais lento e menos pratico do que a tcnica da titulao at o potencial do ponto de equivalncia. Os mtodos diferenciais no so adequados para titulaes em que os eletrodos atingem o equilbrio muito rapidamente na soluo. Na titulao manual, trabalha-se com um pH-metro e um grupo de titulao, que compreende uma bureta de pisto, montada junto com um agitador sobre uma base compacta. Esse tipo de titulao potenciomtrica requer o controle constante das diversas etapas, anotando o volume de reagente dosado e o respectivo potencial, dados que posteriormente so utilizados para construir a curva de titulao, de onde calculado o volume de reagente gasto at o ponto de equivalncia e a concentrao da espcie analisada. Titulaes automticas dispensam todas as operaes manuais e representam um grande avano sobre as automatizadas, que dependem de operaes manuais e so comumente encontradas nos laboratrios de controle de qualidade de matrias-primas ou de produtos finais, enquanto que as titulaes automticas so empregadas na rea industrial. Ligando-se um registrador a um potencimetro operado na rede, possvel produzir-se diretamente uma curva de titulao relacionada com uma titulao potenciomtrica que esteja em curso. Se a liberao do titulante da bureta for ligada ao movimento do papel do registrador, o processo se tornara automtico. Muitas firmas colocaram no mercado, unidades de titulao que realizam esta funo. Um exemplo tpico o "Potencigrafo" inclui a unidade de controle rolo de papel de registro ligado a um pisto de bureta movido a motor, e ao conjunto de eletrodos do vaso de titulao; a alimentao do papel do registrador e emparelhada com a transmisso do motor do pisto da bureta e a pena do registrador acompanha a mudana na f.e.m. do conjunto de eletrodos. A automao tambm tem sido estendida interrupo do titulante quando o potencial do eletrodo indicador atinge o valor correspondente ao ponto de equivalncia da titulao que se esta considerando; esta particularidade e nitidamente de grande valor quando se trata de fazer um certo nmero de titulaes repetitivas. E necessrio fazer um experimento preliminar para se determinar o potencial do ponto de equivalncia do eletrodo indicador (ou, mais precisa-mente, a f.e.m. do) ponto de equivalncia para a combinao de eletrodo indicador-eletrodo de equivalncia que esta em uso e prevenir que se ultrapasse o ponto final provendo condies para reduzir a velocidade de adio do titulante medida que se aproxima o ponto final. 27
Tipos de titulao
Dentro do mtodo de indicao potenciomtrica, podemos executar normalmente as titulaes que envolvem as reaes de neutralizao, de precipitao (ou complexao) e de xido-reduo.
Aparelhos Potenciomtricos
736 GP Titrino Metrohm Possui carto de memria e uma memria interna grande para mtodos bem organizados e dados de amostras. Futura-tecnologia de prova em um espao mnimo. Transferncia de mtodo rpido e sem defeito de um instrumento at outros, atravs de bordas e continentes.
Mediante esta tcnica se mede o potencial desenvolvido entre um eletrodo e a dissoluo de medio ou amostra, dependendo do potencial da concentrao de um on em particular. Esta tcnica se utiliza principalmente para as anlises de nions, tais como: F-, Cl-, Br-, CN-, NO3- , etc PHmetros (Medidores de bolso, portteis e de laboratrios) A forma rpida e precisa para medio de pH. Faixa de leitura 0,00 a 14,00pH com a resoluo de 0,001pH
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9. Cromatografia
A Cromatografia Gasosa (CG) uma tcnica para separao e anlise de misturas de substncias volteis. A amostra vaporizada e introduzida em um fluxo de um gs adequado denominado de fase mvel ( FM) ou gs de arraste. M. TSWEET (1903): Separao de misturas de pigmentos vegetais em colunas recheadas com adsorventes slidos e solventes variados. ter de petrleo Mistura de pigmentos
CaCO3
pigmentos separados
Cromatografia = kroma [cor] + graph [escrever](grego) Princpio Bsico: Separao de misturas por interao diferencial dos seus componentes entre uma FASE ESTACIONRIA (lquido ou slido) e uma FASE MVEL (lquido ou gs).
Modalidades e Classificao
Fase Mvel = Gs Cromatografia Gasosa (CG) Cromatografia Lquida (CL)
uma tcnica para separao e anlise de misturas de substncias volteis. A amostra vaporizada e introduzida em um fluxo de um gs adequado denominado de fase mvel (FM) ou gs de arraste. Slida Em CG a Fase Estacionria pode ser: Lquida Cromatografia Gs-Lquido (CGL) 29 Cromatografia Gs-Slido (CGS)
Aplicabilidade
Quais misturas podem ser separadas por CG ? Para uma substncia qualquer poder ser arrastada por um fluxo de um gs ela deve ser dissolver - pelo menos parcialmente nesse gs. Misturas cujos constituintes sejam VOLTEIS (=evaporveis)
De Forma Geral
CG aplicvel para separao e anlise de misturas cujos constituintes tenham PONTOS DE EBULIO de at 300oC e que termicamente estveis.
O Cromatgrafo a Gs 2
1 - Reservatrio de Gs e Controles de Vazo / Presso. 2 - Injetor (Vaporizador) de Amostra. 3 - Coluna Cromatogrfica e Forno da Coluna. 4 - Detector. 5 - Eletrnica de Tratamento (Amplificao) de Sinal. 6 - Registro de Sinal (Registrador ou Computador). Observao: 2, 3 e 4 com temperatura controlada
5 3
Este fluxo de gs com a amostra vaporizada passa por um tubo contendo a fase estacionria FE (coluna cromatogrfica), onde ocorre a separao da mistura. A FE pode ser um slido adsorvente (Cromatografia Gs-Slido) ou, mais comumente, um filme de um lquido pouco voltil, suportado sobre um slido inerte (Cromatografia Gs-Lquido com Coluna Empacotada ou Recheada) ou sobre a prpria parede do tubo (Cromatografia Gasosa de Alta Resoluo). Na cromatografia gs-lquido (CGL), os dois fatores que governam a separao dos constituintes de uma amostra so: - a solubilidade na FE: quanto maior a solubilidade de um constituinte na FE, mais lentamente ele caminha pela coluna. - a volatilidade: quanto mais voltil a substncia (ou, em outros termos, quanto maior a presso de vapor), maior a sua tendncia de permanecer vaporizada e mais rapidamente caminha pelo sistema. As substncias separadas saem da coluna dissolvidas no gs de arraste e passam por um detector; dispositivo que gera um sinal eltrico proporcional quantidade de material eluido. 30
O registro deste sinal em funo do tempo o cromatograma, sendo que as substncias aparecem nele como picos com rea proporcional sua massa, o que possibilita a anlise quantitativa.
Instrumentao Bsica
Os constituintes bsicos de um sistema cromatogrfico so: 1- Reservatrio de Gs de Arraste. O gs de arraste fica contido em cilindros sob presso. Assim, a escolha do gs de arraste independe da amostra a ser separada. O parmetro mais importante a sua compatibilidade com o detector (alguns detectores trabalham melhor quando se usam determinados gases). Os gases mais empregados so H2, He e N2 e a vazo do gs de arraste, que deve ser controlada, constante durante a anlise. Fase Mvel em CG: NO interage com a amostra, apenas a carrega atravs da coluna. Assim usualmente referida como GS DE ARRASTE
Requisitos do gs de arraste
- INERTE No deve reagir com a amostra, fase estacionria ou superfcies do instrumento. - PURO Deve ser isento de impurezas que possam degradar a fase estacionria. - CUSTO Gases de altssima pureza podem ser muito caros. - COMPATVEL COM DETECTOR Cada detector demanda um gs de arraste especfico para melhor funcionamento. (Seleo de Gases de Arraste em Funo do Detector). Alimentao de Gs de Arraste controladores de vazo / presso de gs. dispositivos para purificao de gs (traps) c d
b a
e a - Cilindro de Gs b - Regulador de Presso Primrio c - Traps para eliminar impurezas do gs d - Regulador de Presso Secundrio e - Regulador de Vazo (Controlador Diferencial de Fluxo) f - Medidor de Vazo (Rotmetro) 2 - Sistema de Introduo de Amostra. Na CG, a seo do cromatgrafo gasoso onde feita a introduo da amostra o injetor (ou vaporizador). Na verso mais simples, trata-se de um bloco de metal conectado coluna cromatogrfica e alimentao de gs de arraste. 31
Este bloco contm um orifcio com um septo, geralmente de borracha de silicone, pelo qual amostras lquidas ou gasosas podem ser injetadas com microseringas hipodrmicas. Amostras slidas podem ser dissolvidas em um solvente adequado. O injetor deve estar aquecido a uma temperatura acima do ponto de ebulio dos componentes da amostra, para que a amostra se volatilize completa e instantaneamente e seja carregada para a coluna. Se a temperatura for excessivamente alta, pode ocorrer decomposio da amostra. A amostra deve entrar na coluna na forma de um segmento estreito, para evitar alargamento dos picos. A quantidade de amostra injetada depende da coluna e do detector empregado. Para colunas empacotadas, volumes de 0,1 l a 3,0 l de amostra lquida so tpicos. Volumes altos prejudicam a qualidade de injeo (alargamento dos picos) ou saturam a coluna cromatogrfica. Para a cromatografia gasosa de alta resoluo (CGAR), os volumes de injeo deveriam ser da ordem de nanolitros. Entretanto, no existe meio simples de se medir um volume to pequeno com a preciso necessria. Assim, os injetores para CGAR so dotados de "diviso de amostra", de modo que apenas uma frao do volume injetado (tipicamente entre 1/10 e 1/300) chega coluna, sendo o restante descartado. Os dispositivos para injeo (INJETORES ou VAPORIZADORES) devem prover meios de introduo INSTANTNEA da amostra na coluna cromatogrfica.
Parmetros de Injeo
-TEMPERATURA DO INJETOR Deve ser suficientemente elevada para que a amostra vaporize-se imediatamente, mas sem decomposio Regra Geral: Tinj = 50oC acima da temperatura de ebulio do componente menos voltil -VOLUME INJETADO Depende do tipo de coluna e do estado fsico da amostra COLUNA Amostras Lquidas Amostras Gasosas
0,2 L ... 20
0,1 ml ... 50
L
capilar = 0,25 mm 0,01 L ... 3
mL
0,001 ml ... 0,1
L
1
mL
3 4
1 - Septo (silicone) 2 - Alimentao de gs de arraste) 3 - Bloco metlico aquecido 4 - Ponta da coluna cromatogrfica
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Corpo (pirex)
1 - Ponta da agulha da microseringa introduzida no incio da coluna. 2 - Amostra injetada e vaporizada instantneamente no incio da coluna. 3 - Plug de vapor de amostra forado pelo gs de arraste a fluir pela coluna.
3- Coluna Cromatogrfica e Controle de Temperatura da Coluna. Aps injetada e vaporizada, a amostra introduzida na coluna cromatogrfica, onde efetuada a separao. Na CG a "afinidade" de um soluto pela FM determinada pela volatilidade do soluto, sua presso de vapor, que funo da estrutura do composto e da temperatura. Alterando-se a temperatura, altera-se tambm a presso de vapor e, por conseguinte, a "afinidade" de uma substncia pela FM. Se a temperatura da coluna for excessivamente baixa, todos os constituintes da amostra tero presses de vapor muito baixas e ficaro quase que todo o tempo dissolvidos na FE, fazendo com que a sua migrao pela coluna ser muito lenta. O resultado pode ser um tempo excessivo de anlise e picos muito largos e baixos (quanto mais tempo a substncia passa na coluna, mais ela se espalha). Eventualmente, o composto pode nem sair da coluna. Por outro lado, uma temperatura muito alta implica presses de vapor tambm muito grandes e os compostos quase no passam tempo nenhum dissolvido na FE, saindo muito rapidamente da coluna sem serem separados. Assim, a temperatura da coluna uma condio que deve ser ajustada para se obter uma determinada separao. Alm de consideraes sobre a separao, a temperatura empregada deve ser compatvel com a FE empregada, pois as FE lquidas se volatilizam ou se degradam com temperaturas excessivas. A temperatura da coluna deve ser rigorosamente controlada, para assegurar a reprodutibilidade das anlises. No caso de amostras contendo constituintes com presses de vapor muito diferentes, se a temperatura for ajustada para separao adequada dos compostos menos volteis (temperaturas altas), os volteis sero muito pouco retidos e no sero separados. 33
Por outro lado, se o acerto for feito para separar os volteis (temperaturas baixas), os constituintes pesados se apresentaro sob a forma de picos excessivamente largos e baixos ou ficaro retidos na coluna. Este problema pode ser contornado usando a programao linear de temperatura (PLT), atravs da qual a temperatura da coluna vai sendo aumentada gradualmente durante a anlise. A PLT permite separaes de amostras muito complexas (petrleo, leos essenciais, etc.), no analisveis com temperatura de coluna constante (CG Isotrmica).
Forno da Coluna
EMPACOTADA = 3 a 6 mm L = 0,5 m a 5 m Recheada com slido pulverizado (FE slida ou FE lquida depositada sobre as partculas do recheio) CAPILAR = 0,1 a 0,5 mm L = 5 m a 100 m Paredes internas recobertas com um filme fino (frao de m) de FE lquida ou slida
Nas colunas tubulares abertas (genericamente denominadas de "colunas capilares"), a FE depositada na forma de um filme sobre a superfcie interna de um tubo fino. A sua grande vantagem sobre as colunas empacotadas que, pelo fato de serem tubos abertos, podem ser feitas colunas capilares de grandes comprimentos. Como, quanto maior o comprimento, mais pratos tericos contm a coluna (e maior a sua eficincia), colunas capilares so muito mais eficientes que as empacotadas. Normalmente, encontram-se colunas de 5 m at 100 m, embora j tenha sido fabricada uma coluna com 2175 m. Podem-se empregar tubos metlicos, de vidro ou de slica fundida, sendo os ltimos atualmente os preferidos pela sua flexibilidade e inrcia qumica. Nas colunas empacotadas, o desempenho afetado pelo dimetro e uniformidade das partculas do recheio e pela carga de FE. Nas colunas capilares, so importantes o dimetro interno da coluna e a espessura do filme de FE. Quanto mais fina for a coluna, mais eficiente ela ser. Entretanto, colunas muito estreitas suportam pouca FE, o que diminui a sua seletividade. Tipicamente, usam-se colunas com dimetros internos entre 0,1 mm e 0,5 mm. A espessura do filme de FE equivale percentagem de FE das colunas empacotadas, de modo que quanto mais espesso for o filme, maior a reteno e a seletividade. 34
Filmes excessivamente espessos causam alargamento dos picos e grandes tempos de anlise. Normalmente, empregam-se filmes de 0,1 m a 3,0 m. As FE so as mesmas usadas para colunas empacotadas. Muitas vezes, para minimizar as perdas de fase por volatilizao durante o uso, a FE fixada s paredes do tubo por algum meio. Pode-se polimerizar parcialmente a fase aps a deposio (fases imobilizadas) ou ento lig-la quimicamente s paredes (fase ligada). A capacidade de processamento de amostra das colunas capilares menor que aquela das empacotadas. Dependendo da coluna, ela pode ser saturada com quantidades to pequenas quanto 0,001 l de amostra. Como a injeo direta de volumes de amostra desta ordem de grandeza invivel, deve-se recorrer ao artifcio da diviso de amostra na injeo. Porm, o uso de diviso de amostra apresenta alguns inconvenientes. difcil ajustar reprodutivelmente a razo de diviso (frao da amostra injetada que entra na coluna), o que pode acarretar erros na anlise quantitativa. Alm disso, amostras contendo constituintes com volatilidades muito diferentes podem ser alteradas pela diviso: a frao da amostra que realmente vai para a coluna fica enriquecida com os componentes menos volteis. Dada a grande eficincia das colunas capilares, podem ser realizadas separaes de misturas extremamente complexas: fraes de petrleo, essncias, amostras biolgicas, etc. No caso especfico de anlises de interesse ambiental (poluentes em guas e ar, por exemplo), quase que obrigatrio o seu uso. A tendncia atual que a maioria das anlises seja feita com o uso de colunas capilares. Isto no significa que as colunas empacotadas esto sendo abandonadas, porm o seu uso deve ficar restrito aplicaes especficas. 4. Detector. O ltimo bloco de um CG o detector. O detector um dispositivo que indica e quantifica os componentes separados pela coluna, geram um sinal eltrico proporcional quantidade eluida de um analito. Grfico Sinal x Tempo = CROMATOGRAMA. Idealmente: cada substncia separada aparece como um PICO no cromatograma. Um grande nmero de detectores tem sido descritos e usados em CG. Existem, entretanto, algumas caractersticas bsicas comuns para descrever seu desempenho: - Seletividade. Alguns detectores apresentam resposta para qualquer substncia diferente do gs de arraste que passe por ele. Estes so os chamados detectores universais. Por outro lado, existem detectores que respondem somente a compostos que contenham um determinado elemento qumico em sua estrutura, que so os detectores especficos. Entre estes dois extremos, alguns detectores respondem a certas classes de compostos (detectores seletivos). - Rudo. So os desvios e oscilaes na linha de base (sinal do detector quando s passa o gs de arraste). Pode ser causado por problemas eletrnicos, impurezas e sujeiras nos gases e no detector, etc. Por melhor que seja o funcionamento do sistema, sempre existe rudo. - Tipo de Resposta. Alguns detectores apresentam um sinal que proporcional concentrao do soluto no gs de arraste; em outros, o sinal proporcional taxa de entrada de massa do soluto no detector. Isto depende do mecanismo de funcionamento de cada detector. - Quantidade Mnima Detectvel (QMD). a quantidade de amostra mnima para gerar um sinal duas vezes mais intenso que o rudo. uma caracterstica intrnseca do detector. Quanto menor a QMD, mais sensvel o detector. QMD a Massa de um analito que gera um pico com altura igual a trs vezes o nvel de rudo.; S =3 S I N A L (S) N
RUDO (N)
RUDO: Qualquer componente do sinal gerado pelo detector que no se origina da amostra 35
- Faixa Linear Dinmica. a razo entre a menor e a maior massa entre as quais o fator de resposta de um detector para um soluto constante, isto , onde a curva de calibrao linear. Os dois detectores mais significativos em CG so o Detector por Condutividade Trmica (DCT) e o Detector por Ionizao em Chama (DIC).
MASSA
- Limite de Deteo: Quantidade de analito que gera um pico com S/N = 3 e wb = 1 unidade de tempo. Mesmo detector, nvel de rudo e massa de analito MAS diferentes larguras de base:
wb
R E A
MASSA
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Enquanto passar gs de arraste puro pela cela, a taxa de perda de calor do filamento para o bloco constante e a temperatura do filamento no varia. Quando um componente eluido da coluna, ele sai misturado com o gs de arraste e passa pelo detector. Se a condutividade desta mistura for diferente daquela do gs de arraste puro, o filamento passa a perder calor para o bloco numa taxa diferente daquela do equilbrio. Por exemplo, se a taxa de perda de calor diminuir, o filamento se aquece quando a amostra eluida. O aquecimento do filamento causa uma variao na sua resistncia eltrica e a resistividade de um metal aumenta com a temperatura. O filamento montado em um circuito de ponte de Wheatstone, que converte a variao na resistncia eltrica do filamento numa variao de voltagem, que coletada em um registrador gerando o cromatograma. O DCT um detector universal, sensvel concentrao do soluto no gs de arraste. Geralmente, quando se usa DCT, o gs de arraste He ou H2. Pelo fato destes gases terem condutividades trmicas altssimas, as misturas gs de arraste mais o soluto sempre tero condutividades trmicas menores que a do gs de arraste puro, o que impede sinais negativos, alm de se obter maiores fatores de resposta. Entretanto, ele considerado um detector pouco sensvel. A QMD de um modelo moderno, para propano, de 400 pg/ml de gs de arraste, com faixa linear de 106. Apesar disso, o fato de ser universal, barato e de operao simples, o faz extremamente til para anlises que no necessitem de alta sensibilidade.
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Como a chama de H2 forma poucos ons, ela um mau condutor eltrico e quase nenhuma corrente passa entre os eletrodos. Ao eluir um composto orgnico, ele queimado e so formados ons na chama, que passa a conduzir corrente eltrica. A corrente eltrica resultante, da ordem de pA, amplificada e constitui o sinal cromatogrfico. Quase todos compostos orgnicos podem ser detectados pelo DIC. Apenas substncias no inflamveis (CCl4, H2O) ou algumas poucas que no formam ons na chama (HCOOH) no do sinal. Assim, ele um detector praticamente universal. De um modo geral, quanto ligaes C-H tiver o composto, maior a sua resposta (maior sensibilidade). Ele muito mais sensvel que o DCT, pois dependendo do composto, podem ser detectados entre 10 pg e 400 pg, com faixa linear dinmica de 107. Provavelmente o detector mais usado em CG.
As FE mais populares so os silicones. Silicones so polmeros extremamente estveis e inertes, o que os torna especialmente adequados CG. Nesta classe, as polidimetilsiloxanas so os menos polares. A substituio dos grupos metila na cadeia por outros grupos (fenil, ciano, trifluoropropil, etc.) fornece FE com polaridades crescentes. Deste modo, eles podem ser empregados na separao de misturas das mais diversas polaridades. Comercialmente, so disponveis sob diversas denominaes, muitas delas praticamente equivalentes. SE-30, OV-1 e DC-200 so nomes comerciais para polidimetilsiloxano de fabricantes diferentes. Outra classe de FE importante a dos poliglicis. So polmeros de etilenoglicol e epxido, preparados com diferentes tamanhos de cadeia polimrica. So FE moderadamente polares, adequadas para separao de lcoois, aldedos, teres, etc. A denominao comercial "Carbowax" designa a srie de poliglicis mais conhecida (p.ex., Carbowax 20M polietilenoglicol com massa molar mdia de 20.000.000 g/mol). Um terceiro grupo importante de FE o dos polisteres. So obtidos por condensao de dicidos com glicis. So fases altamente polares. As fases mais comuns desta categoria so o succinato de dietilenoglicol (DEGS) e o adipato de dietilenoglicol (DEGA).
Componentes Bsicos
Os espectrmetros de massa, embora relativamente simples o princpio em que se baseiam, so instrumentos complexos e dispendiosos. Existem vrios tipos, mas a todos so comuns alguns componentes bsicos, a saber: 1) dispositivo para a introduo da amostra; 2) cmara de ionizao e sistema de acelerao; 3) separador de ons; 4) coletor de ons e sistema de amplificao e registro da corrente inica.
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A amostra e volatilizada e introduzida lentamente na cmara de ionizao, mantida a uma prego de cerca de KT* mm de mercrio. As molculas da amostra so bombardeadas por um feixe de eltrons que fluem do filamento aquecido em direo a um nodo. Em conseqncia do impacto, formam-se tanto ons positivos como ons negativos: porem, predominam os ons positivos cm que se baseiam as aplicaes analticas. Os ons positivos so separados dos ons negativos mediante um pequeno potencial negativo na fenda A: depois, eles so acelerados no campo eltrico entre A e B (potencial de centenas a milhares de volts). Os ons que passam pela lenda B atravessam o separador de ons C que um tubo mantido a uma presso mm de mercrio submetido a um intenso campo magntico.
Coluna Capilar
As colunas capilares so tubos capilares de Slica Fundida revestidos externamente com um polmero (geralmente poliestireno) e internamente pela fase estacionria, que geralmente um poli-siloxano lquido, muito viscoso e de ponto de ebulio bastante alto, na maioria das vezes acima de 350C. Dados mais comuns: > > > > Comprimento: 5 a 60m; Temperatura mxima. 200 a 360C; Dimetro Externo: 0,22 a 0,53mm; Espessura do Filme: 0,10 a 2,0um. t.
Seleo de Colunas
As colunas mais adequadas para o trabalho com GC/MS so as pouco polares Metil-Silicone (HP-1, RTX-1, DB-1, etc.) ou 5% Fenil-Metil-Silicone (HP-5, DB-5, RTX-5, etc.). Elas tm temperaturas mximas que variam de 300 a 360C e baixa "sangria" (perda de fase estacionria, que suja o Detetor). Isto garante tambm menor rudo de fundo. Existe a opo de se usar colunas com fase estacionria melhorada do tipo "Crosslinked", que tm um polmero mais estvel temperatura e menor sangria em consequncia. Estes dois tipos de colunas tm separao muito semelhante. A coluna 5% Fenil-Metil-Silicone, sendo um pouco mais polar consegue separar alguns compostos que a Metil-Silicone no separa, como m- e p- Xilenos. Por outro lado a 5% Fenil-Metil-Silicone no separa Benzeno de Ciclohexano, que so separados pela Coluna de Metil-Silicone. As colunas mais polares como a Carbowax e os Glicis geralmente tm temperaturas mximas de menos de 250C e a "sangria" (perda de fase estacionria para o Detetor) tende a sujar o Espectrmetro muito rapidamente, alm de gerar um sinal de fundo muito alto. Em poucas aplicaes elas so indispensveis (exemplos: anlises de Metanol, Formol, etc.). Comprimento: as colunas de 0,22mm e 0,32mm mostram uma separao boa com um comprimento entre 20 e 60m. Um comprimento de 30m, em nossa opinio garante uma separao satisfatria e anlises feitas em um menor tempo. Colunas muito compridas geram anlises mais demoradas. Dimetro: Se o objetivo anlise de traos, no recomendamos as colunas de 0,22mm, que saturam-se facilmente e podem exigir maiores vazes de Split. As colunas de 0,32mm apresentam um desempenho timo de separao e suportam um bom volume de amostra, por isto as consideramos as melhores. 40
As colunas de 0,53mm (Megabore) suportam um bom volume de amostra, garantindo bons limites de deteco, mas em compensao, geralmente tm uma separao (resoluo) no muito boa. Espessura de filme: Se o objetivo analisar compostos volteis (Solventes, Benzeno, Tolueno, Xilenos, etc.) um filme espesso deve garantir uma separao melhor. Para uma coluna de 0,32mm geralmente um filme em torno de 1,0um deve garantir uma boa separao. Se o objetivo analisar compostos Semi-Volteis (Pesticidas, Ftalatos, compostos com PE acima de 20OC, etc.) para uma coluna de 0,32mm um filme em torno de 0,25um deve permitir que estes compostos eluam em uma temperatura mais baixa da coluna, o que evita degradao trmica, alargamento de picos, etc.
Transfer Line
apenas um tubo aquecido externamente a temperatura constante por onde a coluna capilar segue para o Espectrmetro de Massas
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completamente desenvolvidos como os equipamentos para GC/MS. No entanto, essa situao deve mudar nos prximos anos.
Espectrometros de Massa
So aparelhos de alta resoluo, bem mais caros, no tratados neste trabalho, tm capacidade de resolver nmeros fracionrios de massas o que permite, por exemplo, com base na % de Istopos definir a idade de objetos. Os tipos mais comuns encontrados no mercado atualmente so: a) Quadrupolo; b) Qudruplo lon-Trap; c) Alta Resoluo (HRMS). Conectado ao Espectrmetro de massas geralmente h um reservatrio para o Gs de Calibrao (um composto lquido, cujos vapores podem ser inseridos na cmara de Vcuo do Espectrmetro sob controle de uma vlvula) e um reservatrio para o Gs de Ionizao Qumica (este pode ser um gs, como o Metano, ou um lquido, como a Acetonitrila). Ambos os reservatrios so isolados do sistema por vlvulas que so abertas somente no momento do uso destes compostos.
Computador e Software
Todo o trabalho do Cromatgrafo e do Espectrmetro so comandados por um computador comum com um software adequado instalado. Os principais recursos disponibilizados so: > > > > > > Preparo de listas de amostras a injetar e injeo automatizada; Aquisio dos dados (sinal total e Espectros) e arquivamento; Comparao de espectros automtica (Biblioteca de Espectros); Mostra cromatogramas de Total de ons ou para ions especificados; Quantificao (preparo de curvas de calibraco com espectros dos padres, etc.); Relatrios de resultados
Com esta pequena vazo, diz-se que a cmara est "pressurizada", embora a presso seja ainda muito baixa. O fato de se ter um sistema sob alto vcuo traz o problema dos riscos de vazamentos. Entradas de ar (acompanhadas de umidade) se ocorrem desestabilizam por completo o detetor. Uma forma de procurar pequenos vazamentos lanar jatos de Argnio nos locais suspeitos e acompanhar o sinal de ions gerados, procurando pela massa do Argnio.
Aplicaes Qualitativas
O espectro de massa de um composto puro pode fornecer informaes valiosas para fins de identificao. A identificao facilitada quando, alm do espectro de massa, se dispe de outros dados espectrais (infravermelho, ressonncia magntica nuclear) e constantes fsicas (pontos de fuso e ebulio). A espectrometria de masSa tambm usada na identificao de componentes de misturas simples, particularmente gasosas. A mais importante informao isolada para identificar um composto o conhecimento de seu peso molecular, que a espectrometria de massa d muito exatamente. O trabalho requer a identificao do pico do on molecular. Na faixa dos potenciais de 9 a 14 V, pode-se admitir que no haja formao de ons mais pesados do que o on molecular; ento, a massa do on mais pesado, salvo as contribuies dos istopos mais pesados, d o peso molecular nominal (nmero inteiro). Ocasionalmente, o pico do on molecular pode estar ausente ou ser to pequeno a ponto de ser confundido com o pico de alguma impureza. Outra possibilidade as colises originarem um pico M + 1 mais pronunciado do que o on molecular. No caso molecular um composto puro, em geral, no difcil determinar o peso molecular nominal mediante identificao do pico do on molecular. Com um instrumento de alta resoluo, consegue-se determinar o peso molecular com considervel exatido. Muitas vezes, a massa exata do on molecular permite derivar a frmula molecular de um composto. Esta aplicao requer um instrumento capaz de detectar diferenas de massa de alguns milsimos de unidade de massa. Seja, por exemplo, um composto desconhecido para o qual se achou o peso molecular 150,0681; existem centenas de molculas com valor nominal igual a 150, mas o valor acima somente corresponde frmula C,H10O2. As tabelas elaboradas por Beynon oferecem extensas listas de combinao de C, H, N e O por peso molecular, at a terceira decimal. Uma aproximao frmula molecular de um composto pode ser obtida com base nas abundncias relativas dos istopos naturais. As molculas que contm istopos pesados devem exibir picos para valores de m/e uma ou mais unidades acima do normal, isto , pequenos picos para M + l ou M + 2. Posto que os istopos pesados ocorrem em propores definidas, possvel calcular a probabilidade de se encontrar um ou mais deles em uma certa molcula; assim sendo, pode-se prever a altura, por exemplo, do pico M + l em relao do pico do on molecular. Seja o caso de um composto desconhecido, cuja frmula pode ser C5H14N2O2 (M = I34)ou CIOH14(M = 134). Calculem-se, pois,as alturas relativas dos picos M + l para aquelas duas espcies moleculares. Como a molcula C5H14N2O2 possui cinco tomos de carbono, segue-se que deve haver 5 x 1,08 = 5,40 molculas do composto possuindo um tomo de I3C para cada 100 molculas sem nenhum tomo do istopo pesado. Portanto, considerando apenas este efeito isotpico, a altura do pico M + l em relao do pico M deve ser 5,40%. Ora, os istopos pesados dos demais elementos tambm entram com suas contribuies.
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Tcnica Quantitativa
Como em qualquer anlise cromatogrfica o software permite fazer curvas de calibrao para cada composto que identificado no s pelo tempo de reteno, como tambm pelo seu espectro, que capturado da mistura de calibrao. Os principais dados a serem definidos para cada composto so: Tempo de reteno; ons a utilizar na quantificao (quando h coeluentes pode-se definir ons diferentes para cada um, permitindo a quantificao individual, desde que no tenham os mesmos ons principais como os ismeros por exemplo); "Semelhana" aceita entre o espectro do pico na amostra e o espectro do pico no padro (geralmente "purity" que varia de O a 1000); Concentraes de cada nvel; Tanto a calibrao como a quantificao so feitas automaticamente e o usurio pode rever e modificar os dados quando aplicvel; Cada composto tem a sua curva de calibrao individual.
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O comprimento de onda i a distncia entre dois mximos de onda sucessivas e tem unidades mais usadas so a angstrm (=108 cm), nanmetro (nm=10 = 10-7 cm ) e o micrmetro (m=104 = 10-4 cm). A freqncia (nmeros de ciclos) tem unidade em ciclos por segundo (s-1) ou hertz (Hz).
Fig 01. Onda eletromagntica Espectro eletromagntico. Quando um feixe de radiao eletromagntica envolve um nico comprimento de onda, diz-se que a radiao monocromtica; quando ele comporta toda uma variedade de comprimentos de onda, a radiao chamada policromtica ou heterocromtica. O espectro eletromagntico total abrange uma imensa faixa de comprimento de onda ou freqncias. A fig. 02 uma representao diagramtica do espectro eletromagntico em escala logartmica. O espectro eletromagntico se estende desde os raios gama, altamente energticos, at as ondas de rdio, fracamente energticas. A regio visvel do espectro apenas uma pequena faixa de comprimentos de onda dos quais o olho humano sensvel, que vai aproximadamente de 380 a 780 nm. Abaixo e acima da regio visvel do espectro, na escala dos comprimentos de onda, tm-se o ultravioleta e o infravermelho. O ultravioleta prximo estende-se at 185 nm; as radiaes de comprimentos de onda imediatamente menores formam o ultravioleta remoto. A radiao complexa que compreende os diferentes comprimentos de onda, dentro da regio visvel do espectro eletromagntico, conhecida como luz branca. A Tab. 01. d as faixas dos comprimentos de onda correspondentes s diferentes cores. A percepo da cor resulta da absoro seletiva de certos comprimentos de onda da luz incidente plos objetos materiais. Os demais comprimentos de onda so transmitidos ou refletidos e percebidos como cor do objeto. Quando a luz branca atravessa um meio, por exemplo, um vidro, transparente a certos comprimentos de onda, mas capaz de absorver outros comprimentos, o meio aparece corado ao observador. Chama-se cor complementar a cor que seria percebida se os comprimentos de onda absorvidos pudessem ser observados; a complementaridade significa que a luz transmitida e a luz absorvida seriam capazes de recompor a luz branca. Semelhantemente, um objeto opaco corado absorve certos comprimentos de onda e reflete outros quando iluminados com luz branca. Finalmente, quando um objeto aparece como branco, porque ele reflete todos os comprimentos de onda; o objeto preto quando absorve todos os comprimentos de onda.
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Fig 02. Espectro eletromagntico Tabela 01. FAIXAS DOS COMPRIMENTOS DE ONDA DAS DIFERENTES CORES
Mtodo da escala de padres. A soluo problema (concentrao desconhecida), depois de convenientemente tratada para o desenvolvimento do sistema corado, comparada com uma escala de solues padres obtidas semelhantemente. A soluo problema e as solues da escala de padres, so levadas ao mesmo volume em tubos especiais com forma apropriada para a comparao colorimtrica. A comparao colorimtrica segundo o mtodo da escala de padres feita com o auxlio dos chamados tubos de Nessler. So tubos de vidro claro, de fundo chato, uniformemente calibrados. Eles so construdos em formas alta e baixa, com capacidades de 50 e 100 mL e, eventualmente, com tampa esmerilhada. Os tubos so dispostos em uma estante de madeira, que se acha munida na base com uma placa de vidro branco opalino em ngulo de 90, para refletir a luz natural de baixo para cima atravs dos tubos (Fig. 3). As solues padres so colocadas em ordem crescente de concentrao da substncia a determinar. A escala preparada de modo que a soluo problema possa ficar situada entre as solues padres dos dois tubos extremos. A comparao colorimtrica feita por observao vertical das camadas lquidas. A concentrao da soluo problema ser igual da soluo da escala com igual intensidade de colorao. Na prtica, a soluo problema fica situada quase sempre entre dois tubos adjacentes da escala. Quando a diferena de concentrao de um para outro dos tubos adjacentes suficientemente pequena, ento atribuise soluo problema uma concentrao intermediria. No sendo assim, pode-se preparar uma segunda escala de padres, com solues extremas contendo concentraes iguais s dos dois tubos adjacentes da primeira escala entre as quais ficou situada a soluo problema.
Fig. 03. Tubos de Nessler. Na prtica, a diferena de concentrao das solues padres adjacentes da escala no levada alm de certo limite, que depende da capacidade do olho humano em distinguir intensidades de colorao. Em regra, no h razo para que as concentraes das solues vizinhas de uma escala difiram em menos de 10 a 15%; quase sempre perfeitamente satisfatria uma diferena de 20%. Neste ltimo caso, o observador pode ainda alcanar uma exatido ao nvel de 5%. Suponhamos, por exemplo, que a soluo problema contenha 9,2 g do constituinte e que as solues da escala, entre as quais se situa aquela, 8 e 10 g, respectivamente. quase certo que o observador ter dificuldade em decidir se a soluo problema est mais prxima de uma ou de outra das solues padres; aceitando o valor intermedirio, 9 g, o erro ser menor do que 5%. Se a quantidade do constituinte for 9,6 g, o observador provavelmente identificar a soluo problema com a da escala contendo 10g e o erro ser mais uma vez menor do que 5%. O equipamento requerido para a prtica do mtodo da escala de padres muito simples. O sistema corado envolvido no precisa obedecer a lei de Beer (vista posteriormente), pois qualquer desvio compensado com a tcnica de comparao. Os tubos de Nessler trabalham com espessuras relativamente grandes e, assim, se prestam para a comparao de coloraes, como o amarelo, para as quais o olho tem fraca sensibilidade. Mtodo da variao de espessura: Consiste em comparar a soluo problema com uma nica soluo padro variando a relao das espessuras das duas camadas lquidas sob a observao at que seja alcanado o estado da equicolorao. Supondo que duas solues de mesmo sistema corado, contenha a substncia em diferentes concentraes C1 e C2, sejam colocadas em tubos atravs das quais se faz passar luz de igual intensidade. As espessuras das duas solues (b1 e b2) podem ser de tal modo ajustadas que as intensidades da luz por ambas transmitidas se tornem iguais., ou seja b1C1=b2C2. 48
A concentrao de uma das amostras pode ser achada desde que se conhea a concentrao da segunda e se determinem as espessuras das solues para a condio de equicolorao. Fig. 04. Colormetro Dubosq. A comparao colorimtrica segundo o mtodo da variao da espessura feita, comumente, com auxlio do colormetro de Dubosq. A Fig. 04 representa o diagrama ptico de um colormetro de Dubosq com iluminao natural. As clulas A e, A' possuem iguais dimenses e servem para receber as solues problema e padro. So construdas em duas peas soldadas entre si: os discos do fundo, planos e transparentes, e os cilindros enegrecidos para evitar a interferncia de luz estranha. As clulas so colocadas sobre suportes, que podem ser movimentados verticalmente por meio de um mecanismo de cremalheira. Os prismas de vidro B e B' possuem extremidades planas e se acham fixados estrutura do instrumento em posies correspondentes aos eixos que passam plos centros das respectivas clulas. Para variar as espessuras das camadas lquidas sob comparao, as clulas so movimentadas verticalmente para baixo ou para cima. Cada clula possui uma escala e um vernier, que permitem medir a distncia entre o fundo da clula e a face inferior do prisma com uma aproximao de 0,1 mm. A luz refletida por um espelho C, atravessando as solues contidas nas clulas,- parcialmente absorvida; a absoro em cada clula depende da concentrao da soluo e da altura da camada lquida respectivas. Os feixes de luz transmitidos pelas duas solues atravessam os respectivos prismas fixos e, por meio de um sistema de prismas de reflexo total. D c D', e da lente F, so conduzidos para a ocular G. O campo da ocular dividido ao meio, sendo um dos semicrculos iluminado pelo feixe transmitido pela soluo problema e outro, pelo feixe transmitido pela soluo padro. A comparao colorimtrica consiste em ajustar as espessuras das duas camadas lquidas de modo que os dois semicrculos se tornem igualmente corados. Para assegurar uma mais perfeita iluminao, os colormetros de Dubosq trabalham com luz artificial obtida com uma lmpada de bulbo opalino em combinao com uma lmina de vidro fosco. As clulas possuem capacidades de 5 a 25 mL. Tambm so variveis as alturas das clulas; clulas de maior altura prestam para a comparao de solues fracamente coradas. Quando se tem de usar um colormetro, preciso ajustar convenientemente a iluminao.
A espectroscopia de chama uma tcnica de emisso em que a amostra introduzida na chama como aerossol. As funes exercidas pela chama so: a) converso dos constituintes da amostra em estado de vapor; b) decomposio dos constituintes em tomos ou molculas simples; c) excitao eletrnica de uma frao dos tomos ou molculas resultantes. A chama deve alcanar uma temperatura suficiente para cumprir as funes enumeradas e, por outro lado, seu prprio espectro de emisso no deve interferir comprometedoramente com a observao da radiao interessada. Uma chama ordinria de ar-gs obtida com um combustor de Bunsen, por sua temperatura relativamente baixa (1 700C), excita apenas cerca de uma dzia de elementos, principalmente os alcalinos e alcalino-terrosos. 49
Porm, as chamas base de hidrognio ou acetileno so muito mais quentes e tm capacidade de excitao muito maior. A chama uma fonte de excitao mais fraca do que o arco ou a centelha. Os espectros produzidos so muito simples; as chamas excitam umas poucas raias de cada elemento. Por outro lado, em contraste com os espectros de arco ou centelha essencialmente formados de raias, os de chama freqentemente acusam bandas originadas por xidos e hidrxidos de metais. A espectroscopia de chama utiliza, principalmente, espectros de raias, mas, s vezes, tambm espectros de bandas. A maior simplicidade dos espectros de chama facilita a construo dos instrumentos para a espectroscopia de chama. tambm mais fcil fixar condies reprodutveis na excitao com a chama do que com s outras fontes energticas mencionadas. De qualquer maneira, o aspecto crtico da espectroscopia de chama o controle da fonte energtica.
Instrumental
Os instrumentos para a espectroscopia de chama isolam as raias ou bandas de emisso com filtros pticos ou monocromadores. Conforme o caso, so chamados fotmetros ou espectrofotmetros de chama.
Componentes Bsicos
Os instrumentos para a espectroscopia de chama consistem nas seguintes partes essenciais: 1) reguladores de presso e fluxmetros para os gases de alimentao da chama; 2) nebulizador (ou atomizador) para introduzir a amostra na chama em forma de aerossol; 3) combustor para produzir a chama; 4) sistema ptico base de filtro ou monocromador para isolar a radiao desejada; 5) detector associado a algum tipo de medidor ou amplificador eletrnico. A Fig. abaixo mostra, esquematicamente, os componentes bsicos de um espectrofotmetro de chama.
Fig-Diagrama esquemtico de um espectrofotmetro de chama. Reguladores de presso e fluxmetros. Para assegurar uma emisso^ constante, a chama deve ser estvel. A chama alimentada com ar (ou oxignio) e combustvel a presses constantes. A regulao da corrente do gs usado para a aspirao da soluo particularmente importante, pois uma variao da presso afeta tanto a prpria chama como a velocidade com que a soluo nebulizada. Os gases combustveis e oxidantes, para a produo de chamas, so supridos em cilindros de ao com o gs sob presso; quando o oxidante o ar, este pode ser suprido por um compressor atravs de um reservatrio mantido a uma certa presso. Manmetros apropriados indicam a presso durante a operao e permitem os ajustamentos necessrios, quando o instrumento usado. Reguladores automticos de presso, de um ou dois estgios, so usados para reduzir a presso a um valor seguro. Um regulador de um estgio acusa uma leve queda na presso de controle medida que a presso cai no cilindro. Um regulador de dois estgios mantm constante a presso de controle, a despeito de alguma queda na presso do cilindro. Os reguladores de dois estgios so mais recomendados e devem ser seguidos de algum controle adicional de fluxo, por exemplo, uma vlvula de agulha. 50
Embora as presses dos gases possam ser ajustadas mesma leitura do manmetro, cada vez que o instrumento vai ser usado, til inserir um fluxmetro na linha do cilindro ao nebulizador. O conhecimento das razes de fluxo do combustvel e do oxignio permite escolher melhor as propores dos dois componentes. Nebulizadores e combustores. O nebulizador deve introduzir a soluo da amostra na chama a uma razo uniforme e reprodutvel. Alm disso, deve ser resistente a solues corrosivas, forte e fcil de limpar. H duas categorias de nebulizadores: 1) os que introduzem o lquido pulverizado em uma cmara de condensao para reter as gotculas maiores; 2) e os que introduzem o lquido pulverizado diretamente na chama. Neste ltimo tipo, o nebulizador e o combustor formam, freqentemente, uma unidade. Quanto aos combustores, o principal requisito que produzam uma chama uniforme quando alimentados com os gases combustvel e oxidante a presses constantes. Sistema ptico. Sua funo recolher a luz emitida pela chama, isolar a parte interessada e focar esta ltima sobre o detector. Um espelho cncavo colocado atrs do combustor, com seu centro de curvatura na chama, ,, freqentemente, usado para aumentar a intensidade da luz que penetra no instrumento. Os filtros pticos no se prestam para lidar com sistemas espectrais complexos. Os instrumentos com filtros se restringem, geralmente, determinao de ltio, sdio, potssio e clcio. Um melhor desempenho conseguido com os instrumentos que incorporam um monocromador base de prisma ou rede de difrao. A combinao de uma fenda ajustvel um apropriado controle de ganho do amplificador do circuito de deteco e um seletor de comprimentos de onda permitem escolher a relao mais favorvel entre a radiao de fundo e a radiao analtica, e isolar mais eficientemente a radiao do elemento interessado. Detectores fotossensveis.. Devem responder satisfatoriamente na parte do espectro interessada e possuir sensibilidade consentnea com o nvel de iluminao prprio do instrumento. As clulas fotovoltaicas, cuja resposta de difcil amplificao, tm seu uso restrito aos sistemas capazes de emitir uma grande quantidade de energia radiante e aos instrumentos com sistema ptico que faz chegar ao detector uma faixa de energia radiante relativamente larga. Um galvanmetro com sensibilidade de microampermetro completa o circuito de medida. Os espectrofotmetros de chama, na mesma medida em que restringem a largura da faixa espectral que alcana o detector, so obrigados a empregar fototubos e unidades de amplificao do sinal. A corrente de um fototubo pode ser suficiente para permitir o emprego de um galvanmetro de alta sensibilidade como dispositivo de medida, mas comumente a corrente amplificada.
Tipos de Instrumentos
Os instrumentos so fotmetros ou espectrofotmetros de chama, conforme o uso de filtros pticos ou monocromadores para isolar a energia espectral. Os fotmetros de chama, consentaneamente com as limitaes dos filtros pticos na anlise de espectros complexos, usam chama de baixa temperatura como fonte de excitao. Os fotmetros de chama so instrumentos relativamente simples, construdos para a determinao de sdio e potssio e, s vezes, ainda clcio e magnsio. Nos fotmetros de feixe simples, a corrente gerada na clula fotovoltaica lida diretamente em um galvanmetro. possvel incorporar um circuito supressor de zero para compensar a radiao de fundo da chama. Os fotmetros de feixe duplo permitem aplicar o mtodo do padro interno. A energia radiante emitida pela chama dividida em dois feixes: um passa atravs de um filtro que transmite a radiao do elemento interessado; o outro passa por um segundo filtro que transmite a radiao do padro interno. Cada um dos feixes focado sobre uma clula fotovoltaica. As fotocorrentes produzidas so, ento, comparadas em um circuito de ponte. Os espectrofotmetros operam com chama de alta temperatura. A disperso e a resoluo dos instrumentos base de monocromadores, associadas ao uso de uma fonte mais intensa, estendem a espectroscopia de chama determinao de cerca de sessenta elementos. O baixo nvel de iluminao com que operam os espectrofotmetros de chama torna necessrio o emprego de tubos fotomultiplicadores associados a um amplificador. Os espectrofotmetros so de feixe simples ou duplo.
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possvel construir instrumentos com canais mltiplos, que possuem, no plano focal do monocromador, uma srie de fendas para dar passagem a vrias raias espectrais ao mesmo tempo, uma de cada elemento a determinar; as diversas raias so conduzidas a circuitos de medida individuais para leituras simultneas. Em geral, um canal reservado ao padro interno.
Interferncias
As dificuldades que podem afetar a emisso na espectroscopia de chama incluem interferncias espectroscpicas e outras relacionadas com variaes das propriedades fsicas da soluo em estudo.
Interferncias Espectroscpicas
Abrangem a interferncia espectral direta, a emisso de fundo da chama, a auto-absoro, a ionizao e a influncia de nions.
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Mtodos de Avaliao
Os mtodos de avaliao usam solues padres preparadas a partir de sais espectroscopicamente puros. Geralmente, prepara 1000 g mL-1. Com esta so obtidas, mediante diluio, as solues padres com as concentraes desejadas. recomendvel conservar as solues em frascos de polietileno ou vidro quimicamente resistente. Vrios so os mtodos de avaliao usados. Intensidade da emisso versus concentrao. Na ausncia de interferncias, a construo da curva de calibrao simples. Inicialmente, preparada uma srie de padres com diferentes concentraes do elemento interessado. Ento, com o instrumento munido do filtro apropriado ou fixado no comprimento de onda indicado, introduz-se gua deionizada no nebulizador e l-se a emisso de fundo da chama; ou, se o instrumento permitir, ajustam-se os controles de supresso de zero. Em seguimento, introduz-se o padro mais concentrado e ajusta-se a sensibilidade do instrumento para alcanar a leitura mxima da escala ou, ento, uma leitura qualquer prefixada. As operaes so repetidas at obter-se uma duplicao das leituras com a aproximao de uma sobre 100 divises da escala. Finalmente, so introduzidos os vrios padres com concentraes mar baixas e anotadas as leituras correspondentes. A curva de calibrao traada com as leituras do instrumento lanadas sobre a ordenada e as concentraes sobre a abscissa. As leituras dos padres devem ser conferidas antes e depois de cada srie de anlises. As curvas de calibrao so lineares, dentro de regies limitadas. Quando no essencialmente linear, a curva de calibrao tem de ser preparada com um nmero maior de padres. Se necessrio, so preparados padres adicionais que enquadrem estreitamente a amostra. Mtodo da adio. Comea-se preparando uma curva de calibrao. O mtodo da adio envolve leituras de emisso obtidas com duas solues: uma soluo A contendo uma alquota da soluo desconhecida, e uma soluo B contendo a mesma quantidade da soluo desconhecida acrescida de uma quantidade medida de uma soluo padro do elemento interessado. As quantidades do elemento interessado contidas nas duas solues so, ento, determinadas atravs de medidas das intensidades de emisso, com auxlio da curva de calibrao. A curva de calibrao dever ser essencialmente linear. Subtraindo-se a quantidade do elemento achada para a soluo A daquela achada para a soluo B, deve-se obter uma quantidade do elemento igual quela adicionada, sempre que no ocorram depresso ou exaltao. Entretanto, quando ocorre um desses efeitos, a quantidade do elemento achada por subtrao ser maior ou menor do que a quantidade adicionada. Ento, o verdadeiro teor do elemento na soluo A achado multiplicando-se o teor observado por um fator que corrija a interferncia. Este fator de correo obtido dividindo-se a quantidade do elemento adicionada soluo B pela quantidade do elemento achada subtraindo-se o teor do elemento observado na soluo B do teor observado na soluo A. A modalidade do mtodo da adio baseado em uma srie de padres d resultados ainda melhores. A iguais volumes da soluo-problema so adicionadas solues contendo diferentes quantidades conhecidas do elemento interessado; as solues so diludas ao mesmo volume final. As imensidades de emisso (corrigidas com respeito emisso de fundo) so, ento, representadas contra a concentrao dos incrementos das solues padres adicionados soluo desconhecida. A linha extrapolada leitura de emisso zero d a quantidade do elemento na amostra original pela interseo sobre o eixo da concentrao.
Mtodo do padro interno. O padro interno um elemento adicionado amostra em concentrao conhecida. A relao das intensidades de uma raia do elemento interessado e de uma raia do padro interno serve como ndice da concentrao do primeiro. A relao das intensidades para uma srie de padres lanada contra a concentrao do elemento interessado d a curva de calibrao. A intensidade de cada raia corrigida com respeito radiao de fundo no ponto em que a raia se situa. Na espectroscopia de chama, usa-se freqentemente, ltio como padro interno. O ltio apresenta caractersticas fsicas e qumicas bastante assemelhadas s de sdio e potssio; por outro lado, as energias de excitao das raias de ressonncia de sdio, potssio e ltio so tambm semelhantes. Entretanto, o ltio um padro pouco satisfatrio para metais alcalino-terrosos, pois as respectivas caractersticas fsicas e qumicas so muito dessemelhantes.
O processo de absoro apenas indiretamente influenciado pelas flutuaes de temperatura; a principal razo que o nmero total de tomos produzidos na chama a partir da amostra ordinariamente aumenta com a temperatura. De qualquer maneira, o efeito indireto torna necessrio um controle razovel da temperatura nas medidas de absoro atmica.
Fig. Componentes fundamentais de um espectrofotmetro de absoro atmica Fontes de radiao. As fontes usadas na espectrofotometria de absoro atmica so as lmpadas de descarga e as lmpadas de ctodo oco. Ordinariamente, cada elemento a determinar requer uma lmpada prpria. As lmpadas de descarga produzem um espectro de raias por meio da passagem de uma corrente eltrica atravs de vapor do metal. As fontes deste tipo so particularmente teis na espectrofotometria de absoro atmica para produzir espectros dos metais alcalinos e do mercrio. As lmpadas de ctodo oco so o tipo de fonte de uso mais amplo. A lmpada de ctodo oco consiste de um tubo de vidro com grossas paredes, contendo nenio ou argnio a baixa presso (1 a 2 mm), provido de um ctodo feito do elemento interessado, comumente fechado em uma das extremidades (10 a 20 mm de dimetro), e um nodo em forma de um fio de tungstnio.
Fig. Lmpada de alta intensidade Nebulizadores-combustores. Um componente importante na construo de um espectrofotmetro de absoro atmica o dispositivo que serve para dispersar a amostra em forma de partculas atmicas neutras no caminho ptico do instrumento. Vrios tipos de sistemas tm sido investigados para este fim: a) fornos, em que a amostra levada rapidamente a uma alta temperatura; b) arcos ou centelhas; c) dispositivos de projeo, em que a .amostra, colocada sobre um ctodo, bombardeada por ons positivos de um gs; d) nebulizadores--combustores, em que a amostra introduzida como um aerossol em uma chama produzida pela queima de um gs combustvel. At o presente, o sistema do nebulizador-combustor o que se mostrou mais eficiente e o nico empregado nos instrumentos comerciais. 55
A introduo da amostra a uma velocidade constante na chama crtica. A amostra introduzida em forma de soluo com o auxlio de um nebulizador, da mesma forma que na espectroscopia de chama. Monocromadores. Os espectrofotmetros de absoro atmica so construdos com monocromadores capazes de isolar a raia analtica e de bloquear as raias ou bandas vizinhas, bem como a radiao de fundo da chama tanto quanto possvel. Em geral, requerida uma fenda ajustvel para dar passagem a uma faixa espectral com uma amplitude de 0,5 . No que se refere preciso e exatido fotomtricas, o dispositivo monocromador deve deixar passar a maior quantidade de luz possvel; em outras palavras, a abertura da fenda deve ser to larga quanto for tolervel. H elementos, como ferro, nquel e cobalto, cujas raias de ressonncia se acham muito estreitamente rodeadas por outras; ento, preciso que o monocromador seja capaz de isolar faixas com amplitudes de aproximadamente 2 . Para a maioria dos elementos, entretanto, opera-se com faixas de 7 a 20 . Por outro lado, o monocromador deve cobrir a faixa de comprimentos de onda de 1 950 a 8 500 . Os espectrofotmetros de absoro atmica so ordinariamente construdos com redes de difrao. Detectores e indicadores. Os componentes do sistema detector-indicador de um espectrofotmetro de absoro atmica so, no essencial, idnticos aos de um espectrofotmetro tpico para operar com solues nas regies ultravioleta e visvel. Em geral, os instrumentos empregam tubos fotomultiplicadores para converter a energia radiante em sinal eltrico. O sistema eletrnico do detector-indicador deve ser capaz de responder a um sinal modulado da fonte sem interferncia da chama na qual introduzida a amostra. A modulao do sinal da fonte necessria para eliminar esta interferncia. A chama emite um espectro contnuo resultante da excitao das molculas do combustvel; alm disso, a chama emite um espectro de raias oriundas da excitao dos tomos dos metais presentes na amostra. s temperaturas das chamas, a f rao dos tomos que sofre excitao trmica pequena; de qualquer maneira, os poucos tomos do elemento interessado que chegam a ser excitados emitem radiao correspondente raia de absoro escolhida para a anlise e, portanto, constituem uma sria fonte de erro. A maior parte da radiao da fonte removida mediante colocao do monocromador entre a chama e o detector; entretanto, o monocromador transmite a raia de emisso correspondente ao comprimento de onda do pico de absoro. Ento, a potncia radiante observada P no ser P = P0 P0 em que Pa a potncia da radiao absorvida; de fato, ser P = P0 Pa + Pe, em que Pe a potncia da raia emitida pela chama mais a potncia da correspondente radiao de fundo.
Tipos de instrumentos
Os espectrofotmetros de absoro atmica podem ser de feixe simples ou de feixe duplo. A Fig. abaixo representa um sistema de feixe simples, em que a radiao da fonte modulada com um interruptor rotatrio. O sistema de feixe simples est sujeito aos efeitos da variabilidade na emisso da fonte e na sensibilidade do detector.
Fig. Diagrama de um espectrofotmetro de absoro atmica com feixe simples No sistema de feixe duplo representado na Fig. abaixo, o feixe de radiao provindo da fonte dividido em duas partes por meio de um espelho rotatrio com setores refletores e transmissores alternados separados por pores opacas. Um dos feixes resultantes (feixe da amostra) atravessa a chama, ao passo que o outro (feixe de referncia) a contorna. Os dois feixes, aps recombinao por meio de um espelho semitransparente, passam por um monocromador reticular e alcanam o detector. O sinal do circuito eletrnico aparece como a relao dos feixes da amostra e de referncia. Assim, os efeitos das variaes da fonte e da sensibilidade do detector so eliminados. 56
Em segundo lugar, a fonte deve suprir energia suficiente para promover a excitao eletrnica das espcies atmicas ou inicas. As fontes energticas mais usadas na espectroscopia de emisso so a chama, o arco e a centelha. Existem trs distintos tipos de espectros de emisso, que podem ser classificados segundo sua origem e forma: o espectro contnuo, o espectro de raias e o espectro de bandas. O espectro contnuo produzido plos sistemas condensados. Quando a energia radiante emitida por um slido incandescente dispersa com o auxlio de um monocromador, resulta um espectro formado de radiaes com todos comprimentos de onda dentro de uma ampla faixa espectral. A distribuio dos comprimentos de onda depende da temperatura e assemelha-se do corpo negro. Em contrapartida, os espectros produzidos por gases incandescentes so descontnuos, isto , compostos de radiaes com comprimentos de onda discretos. Todavia, preciso distinguir, entre os espectros descontnuos, os espectros de raias formados por tomos ou ons monoatmicos isolados e os espectros de bandas produzidos por molculas isoladas. Somente os tomos ou os ons monoatmicos emitem, quando convenientemente excitados, radiaes com comprimentos de onda definidos, que so caractersticos da espcie emissora. As espcies atmicas ou inicas so excitadas a nveis energticos mais altos, atravs de transies eletrnicas quantizadas. Quando as espcies excitadas retornam ao estado fundamental ou a nveis energticos mais baixos, h emisso de radiaes caractersticas. O conjunto das radiaes emitidas por uma espcie atmica neutra formam o espectro atmico ou normal do elemento; o espectro emitido por uma espcie inica chamado espectro inico. Quando uma espcie molecular levada a uma fonte energtica suficientemente forte para decompor as molculas em seus tomos componentes, o espectro emitido um espectro de raias. Entretanto, existem espcies moleculares, incluindo espcies transitrias como os radicais CN e OH, que se mantm ntegras e produzem espectros moleculares. Os espectros moleculares consistem de um nmero extraordiariamente elevado de raias muito prximas, que formam agrupamentos chamados bandas. Os espectros de banda so tambm o resultado de transies entre estados energticos. Apenas os nveis energticos das molculas so muito mais numerosos e prximos do que os das espcies atmicas neutras ou ionizadas, comportando trs fatores que so as energias eletrnica, vibracional e rotacional, todas quantizadas. A complexidade do espectro molecular devido sobreposio de variaes vibracionais e rotacionais s transies eletrnicas. A espectroscopia de emisso faz uso dos espectros de raias, atmicos ou tnicos. A distribuio dos comprimentos de onda nos espectros de raias caracterstica do elemento emissor. Porm, tambm importante considerar a natureza da fonte, pois o tipo de espectro emitido atmico ou inico depende da energia da fonte de excitao. 5 interessante lembrar ainda que a energia radiante emitida por um arco ou centelha revela a presena dos trs tipos de espectros sobrepostos. H uma radiao de fundo contnua emitida plos eltrodos aquecidos, mais ou menos fracos. O uso de eltrodos de carvo em presena de ar atmosfrico produz bandas de cianognio devidas presena de radicais CN, tambm mais ou menos fracas. Sobre os espectros de fundo e de bandas ressalta, entretanto, o espectro de raias emitido pelas espcies atmicas componentes da amostra. Origem dos espectros de raias. Ainda nos primrdios da espectroscopia de emisso foi observado que os espectros de muitos elementos comportavam o agrupamento das raias espectrais em um certo nmero de sries. Assim, para os metais alcalinos foram indicadas quatro sries, que receberam em ingls as designaes "principal", "sharp", "diffuse" e "fundamental", como uma tentativa para descrever a aparncia fsica das raias. A nomenclatura da moderna espectroscopia de emisso conserva o uso das letras S, P, D e F para caracterizar as diferentes espcies de nveis energticos dos tomos. O modelo atmico de Bohr-Sommerfeld d uma descrio satisfatria dos espectros de emisso atmicos e inicos. Cada rbita pode ser considerada como correspondendo a um nvel energtico. Quando um tomo se encontra em condies normais, cada eltron ocupa uma rbita correspondente ao seu mais baixo nvel energtico; ento, o tomo se encontra no estado fundamental. Se o tomo sofrer uma violenta coliso com uma partcula (tomo, on, eltron ou molcula) dotada de grande velocidade, os seus eltrons externos ou de valncia, mais frouxamente ligados ao sistema, se transferem para nveis energticos mais altos (rbitas mais afastadas no ncleo). A espcie excitada resultante sempre instvel e quando no se desativa por coliso, retorna ao estado fundamental perdendo a energia da excitao na forma de radiao eletromagntica. 58
Um eltron excitado pode retornar rbita original atravs de uma transio direta ou, eventualmente, atravs de uma srie de transies passando por nveis energticos intermedirios.
Espectrgrafos
A anlise dos espectros de emisso requer um arranjo ptico capaz de separar convenientemente as diferentes freqncias. No sentido mais amplo, chama-se espectroscpio qualquer instrumento usado para produzir e observar os espectros de emisso; em sentido restrito, o termo empregado para designar os instrumentos com observao visual. O espectrgrafo um espectroscpio munido de uma cmara fotogrfica para registrar o espectro; o registro fotogrfico do espectro denominado espectrograma. Por extenso, o termo espectrgrafo tambm serve para designar os instrumentos com deteco fotoeltrica.
Fig. Diagrama de um espectroscpio prismtico simples. O sistema ptico de um espectroscpio , essencialmente, um monocromador com um prisma ou uma rede de difrao como elemento de disperso. A Fig. acima mostra o diagrama de um espectroscpio simples e serve para ilustrar a funo de cada componente fundamental do sistema. A lente L1 recolhe a radiao heterognea provinda da fonte focando-a sobre a fenda, que tem a forma de um estreito retngulo. Os raios que penetram no monocromador atravs da fenda so tornados paralelos pela lente colimadora L2 antes de alcanar o elemento de disperso. O prima separa, ento, as diferentes freqncias que compem a radiao heterognea. Finalmente, a lente L3 foca a luz dispersa sobre o dispositivo de deteco, por exemplo, uma pelcula fotogrfica estendida ao longo da curva focal do instrumento. Aps a exposio e a revelao da emulso, as vrias freqncias presentes aparecem registradas como raias pretas, cada uma das quais uma imagem aproximadamente monocromtica da fenda de entrada, A posio da raia determinada pela freqncia da radiao; por sua vez, o grau de enegrecimento da raia funo da intensidade da radiao. A utilidade e a eficincia de um espectroscpio dependem das caractersticas de construo do instrumento no que concerne faixa de operao, a extenso da disperso, o tipo de disperso e o poder de resoluo. A faixa de comprimentos de onda, ao longo na qual o instrumento capaz de operar, depende, de uma parte, dos limites de transparncia do material usado na construo dos componentes do sistema ptico. A transparncia do vidro se estende de 3 500 a 30 000 e a do quartzo, de 1 800 a 35 000 . A faixa operacional depende, de outra parte, do tipo de detector usado. O registro fotogrfico, por exemplo, estendese, de um lado, at o ultravioleta remoto (abaixo de 2000 ) e, do outro, at o infravermelho prximo (12000 ). Ora, a regio espectral de maior importncia na espectroscopia de emisso se situa entre 2 500 e 4 000 A. Isso significa que os componentes pticos atravs dos quais a radiao transmitida devem ser de quartzo ou slica fundida e que o detector deve ser sensvel no ultravioleta. Para operar abaixo de 2 000 , a espectroscopia requeriria um instrumento evacuado em virtude da absoro das radiaes pelo ar.
A identificao de uma nica raia com grande exatido ou de trs ou mais raias com exatido aproximada suficiente para configurar a presena de um elemento. Ainda importante que um operador experimentado, avaliando subjetivamente o grau de enegreeimento de uma raia, pode fazer rapidamente uma estimativa da concentrao do elemento na amostra com a aproximao de uma ordem de grandeza. A tcnica da anlise espectrogrfica qualitativa consiste em excitar a amostra, registrar o espectrograma e identificar as raias. Em geral, faz-se uso de um arco de corrente direta. Uma amostra de 2 a 50 mg do material em estudo acondicionada na cavidade de um eltrodo de grafita; ou, ento, a soluo evaporada sobre a cavidade. Um segundo eltrodo, tambm de grafita, completa o arco. A corrente e o tempo de exposio so ajustados para garantir a completa volatilizao da amostra; so usuais correntes de 5 a 30 A para 20 a 100 segundos. O eltrodo contendo a amostra geralmente tomado como ctodo por ser sua temperatura mais alta. A sensibilidade da anlise espectrogrfica qualitativa depende do elemento, da natureza e da quantidade da amostra, do tipo de excitao e do instrumento usado. A identificao dos elementos feita base da localizao das raias mais persistentes ou raias ltimas, que so as raias mais sensveis dos elementos, isto , as ltimas a desaparecer com a .gradual diminuio da concentrao do elemento respectivo. A maior parte das raias ltimas se encontra no ultravioleta. Em geral, elas resultam de transies s-p. Ordinariamente, as raias so identificadas mediante comparao direta com espectrogramas de materiais de referncia. O espectro da amostra e o espectro de referncia so registrados um abaixo do outro sobre a mesma chapa ou pelcula, a fim de facilitar a comparao. Por ocasio do registro contguo dos espectros, preciso evitar deslocamentos laterais da chapa ou pelcula fotogrfica. No caso dos espectrgrafos livres de astigmatismo, usa-se o diafragma de Hartmann, que uma lmina de ao com vrias aberturas retangulares, cada uma das quais podendo ser justaposta fenda mediante deslocamento horizontal do diafragma. O dispositivo permite registrar sucessivamente vrios espectros ao longo do eixo vertical da chapa ou pelcula sem necessidade de mover a mesma.
A espectrografia convencional, depois de convenientemente preparados os padres e a curva de calibrao, permite determinar freqentemente 5 ou mais elementos, sem maiores tratamentos da amostra, em cerca de 30 minutos. Os espectrgrafos de leitura direta chegam a determinar uma dezena de elementos ou mesmo mais em 1 a 2 minutos. A preciso na anlise espectrogrfica depende do equipamento e dos mtodos utilizados. Na espectrografia com deteco fotogrfica base do mtodo do padro interno, os erros relativos podem ser reduzidos a 2 a 5%. Ora, na anlise de traos este nvel de preciso quase sempre tolervel e no significativamente menos favorvel do que o de outros mtodos. Em relao determinao dos constituintes maiores, a preciso da espectrografia convencional evidentemente deixa a desejar.
A Eq. acima uma das formulaes matemticas da lei de Beer. V-se que a absorbncia (isto , o logaritmo da .transmitncia tomado com sinal negativo) o produto da absortividade, do comprimento do percurso ptico e da concentrao da espcie absorvente. A absorbncia de uma soluo diretamente proporcional concentrao da espcie absorvente quando se fixa o comprimento do percurso; e diretamente proporcional ao comprimento do percurso quando se fixa a concentrao. A transmitncia e a absorbncia so duas quantidades importantes na absorciometria.
Fig. Fotmetro de feixe simples A corrente gerada medida pela deflexo da agulha do microampermetro sobre uma escala de O a 100. Inicialmente, com a clula fotovoltaica escurecida, o indicador ajustado mecanicamente para transmitncia zero (A oo). Em seguida, o instrumento deve ser ajustado para 100% T com relao ao solvente; coloca-se o solvente na clula de absoro e regula-se a abertura varivel de modo que a quantidade de energia radiante incidindo sobre a clula fotovoltaica cause uma deflexo de 100 unidades da agulha sobre a escala do indicador. Finalmente, substitui-se a clula contendo o solvente por outra contendo a soluo em estudo e l-se a transmitncia (ou absorbncia) na escala do indicador. Geralmente, a escala de O a 100% T do indicador acompanhada de uma escala logartmica que permite ler diretamente a absorbncia.
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O fotmetro de feixe simples um instrumento de leitura direta, que requer iluminao estvel durante as medidas; a corrente que alimenta a fonte estabilizada com um transformador de voltagem constante. Em condies timas, pode ser alcanada uma preciso de 2% na medida da transmitncia.
Fig. Fotmetro de duplo feixe. Nos fotmetros de feixe duplo, o feixe incidente dividido em duas partes: uma parte atravessa a clula de absoro contendo o solvente ou a soluo em estudo e chega at uma clula fotossensvel, a clula indicadora ou de trabalho; a outra parte desviada em direo a uma segunda clula fotossensvel, a clula de referncia. A corrente da clula indicadora , ento, comparada com a da clula de referncia com auxlio de um circuito adequado. O sistema de duplo feixe serve para atenuar os efeitos da instabilidade da fonte e da no-linearidade da resposta da clula fotossensvel; ambos os feixes so igualmente afetados e os efeitos se compensam. Os fotmetros de duplo feixe permitem alcanar uma preciso de 0.5% na medida da transmitncia. A Fig. 28.27 o diagrama de um fotmetro de .duplo feixe. O feixe incidente dividido em duas partes com o auxlio de um espelho, que desvia uma das partes em direo clula de referncia. As correntes das duas clulas fotovoltaicas passam atravs de resistores variveis, um dos quais calibrado em unidades lineares de O a 100 formando a escala de % T. Um galvanmetro sensvel, ligado entre os dois resistores, serve de indicador de zero. Espectrofotmetros tpicos. Os espectrofotmetros podem ser construdos em arranjos de feixe simples ou de feixe duplo. A construo de instrumentos de feixe simples requer componentes estveis de alta qualidade no tocante fonte, o detector e o amplificador para que possam ser feitas medidas com boa preciso. Os espectrofotmetros de leitura direta operam com preciso moderada, em torno de 1% em transmitncia; so instrumentos relativamente baratos, de operao simples e rpida e de fcil manuteno. Os espectrofotmetros de feixe simples para poderem operar com maior preciso precisam incorporar um circuito de zero para a medida da transmitncia. O circuito de zero simplesmente um potencimetro ou um circuito de ponte, em que o sinal eltrico do amplificador equilibrado com um sinal eltrico conhecido. Os instrumentos com circuito de zero podem alcanar uma preciso de 0,2% na medida da transmitncia, mas so muito mais caros, de operao mais demorada e maior custo de manuteno.
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A Fig. acima representa o diagrama de um espectrofotmetro de feixe simples e leitura direta (Speetronic 20, Bausch & Lomb), que concilia uma preciso moderada com simplicidade de operao. A faixa de trabalho vai de 350 a 650 nm, mas pode ser estendida at 900 nm mediante uso de um fototubo sensvel ao vermelho e um filtro suplementar para reduzir a radiao estranha. A radiao de uma lmpada de tungstnio dispersa por uma rede de difrao; o monocromador isola uma faixa com largura constante de 20 nm ao longo de toda a regio espectral. A desejada faixa de radiao selecionada girando convenientemente a rede. A corrente do fototubo, depois de amplificada, aciona o ponteiro de um medidor calibrado em transmitncia e absorbncia. Inicialmente, ajusta-se o boto de controle do amplificador para 0% T na ausncia de radiao incidente sobre o fototubo (compensao da corrente escura); depois, ajusta-se o controle de luz para 100% T com o solvente na clula; finalmente, l-se diretamente a transmitncia da soluo em estudo. Um instrumento de feixe simples com circuito de zero, tpico, o espectro-fotmetro Beckman DU-2. O elemento de disperso um prisma (de quartzo) de Littrow. O instrumento opera na regio de 200 a l 000 nm, dispondo para isso de uma lmpada de hidrognio para a regio ultravioleta e de uma lmpada de tungstnio para a regio visvel e superior. Um tubo foto-multiplicador opera abaixo de 600 nm e um fototubo, acima de 600 nm. As fendas so ajustveis e permitem isolar faixas com larguras de 0,5 nm a 700 nm e 0,01 nm a 200 nm. A Fig. Abaixo representa o diagrama ptico do espectrofotmetro Beckman DU-2. A energia radiante da fonte A, por meio do espelho cncavo B e do espelho plano C, refletida atravs da fenda de entrada D para dentro do compartimento do monocromador. O feixe refletido pelo espelho colimador E disperso pelo prisma de quartzo F. A radiao sofre uma primeira disperso ao penetrar no prisma, refletida pela face metalizada e retorna sofrendo nova disperso; mediante ajustamento da posio do prisma, a radiao de comprimento de onda desejado focada na fenda de sada. O arranjo ptico tal que as fendas de entrada e de sada se acham dispostas uma sobre a outra no mesmo eixo vertical. O feixe de sada passa acima do espelho C e entra no compartimento da clula G. Aps atravessar a clula contendo o solvente ou a soluo em estudo, a radiao penetra no compartimento do fototubo H. A corrente do fototubo medida como queda de potencial atravs de um resisto^ fixo com um circuito potenciomtrico; a corrente muito fraca e, por isso, preciso amplificar o estado de desequilbrio no circuito potenciomtrico. O potencimetro calibrado em transmitncia e absorbncia. Controles especiais permitem ajustar a corrente escura em zero e a transmitncia em 100%.
Fig. Espectrofotmetro Beckman DU-2. Os espectrofotmetros de feixe duplo partem a radiao original no espao (por meio de um espelho) ou no tempo (por meio de um espelho setorial rotatrio). Um dos feixes atravessa a clula contendo o solvente e o outro, a clula contendo a soluo em estudo. Os dois feixes so, ento, convenientemente comparados. 64
Instrumentao
A Figura abaixo mostra um diagrama de um dos mais simples sistemas de injeo em fluxo. Uma bomba peristtica faz com que um reagente colorimtrico para ons cloreto mova-se diretamente a uma vlvula que permite a injeo de amostras no fluxo. A amostra e o reagente passam ento atravs de um reator helicoidal de 50 cm, no qual o reagente se difunde na amostra e produz um produto colorido pela seqncia de reaes Hg(SCN)2(aq) + 2 Cl- HgCl2(aq) + 2SCN - Fe3++SCN- F(SCN)2+ vermelho Do reator helicoidal, a soluo passa por um fotmetro equipado com um filtro de interferncia a 480 nm. O registro da sada desse sistema para uma srie de padres contendo de 5 a 75 ppm de cloreto est mostrado no lado esquerdo da Figura abaixo. Observe que foram feitas quatro injees de cada padro para demonstrar reprodutibilidade do sistema. As duas curvas direita na figura so varreduras feitas em alta velocidade de uma das amostras contendo 30 (R30) e outra contendo 75 (R75) ppm de cloreto. Essas curvas mostram que a contaminao mnima em uma corrente no-segmentada. Ento, menos de 1% do primeiro analito est presente na clula de fluxo aps 28 s, o tempo para a prxima injeo (S2). Esse sistema tem sido usado com sucesso para a determinao de rotina de ons cloretp em guas salobras e em guas efluentes, bem como em amostras de soro sanguneo.
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Fig. Determinao de cloreto por injeo em fluxo: (a) diagrama de fluxo, (b) registro de sada para injees quadruplicadas s contendo de 5 at 75 ppm de on cloreto
Para que uma anlise seja bem-sucedida vital que a soluo de amostra seja injetada rapidamente como um pulso ou um volume discreto de lquido; alm disso, as injees no devem perturbar o fluxo de corrente transportadora. Com a vlvula de amostragem colocada na posio indicada, o fluxo de reagentes continua atravs da passagem secundria (bypass, em ingls) enquanto a amostra flui atravs da vlvula. Posicionando a vlvula a 90 graus, a amostra entra no fluxo como uma zona nica e bem-definida. Para finalidades prticas, o fluxo atravs da passagem secundria cessa com a vlvula nesta posio porque o dimetro da ala da amostra (sample loop, em ingls) significativamente maior que o da tubulao da passagem secundria. Embora a injeo com seringa seja usada algumas vezes, a maneira mais satisfatria para a introduo de amostras est baseada em alas de amostragem similares s encontradas em cromatografia. A deteco em procedimentos de injeo em fluxo tm sido efetuada por absoro e emisso atmica, fluormetros, sistemas eletroqumicos, refratmetros, espectrofotmetros e fotmetros. A ltima forma talvez seja a mais comum.
Separaes por F I A
Separaes por dilise, por extrao lquido/lquido e por difuso gasosa so facilmente realizadas automaticamente com sistemas de injeo em fluxo. Dilise e Difuso Gasosa. A dilise usada, normalmente, em mtodos de fluxo contnuo para separar ons inorgnicos como cloreto ou sdio, ou pequenas molculas orgnicas, como glicose, de espcies de alto peso molecular, como protenas. Pequenos ons e molculas se difundem com relativa rapidez atravs de membranas hidroflicas finas de nitrato ou acetato de celulose, ao passo que molculas grandes no o fazem. A dilise usualmente precede a determinao de ons e pequenas molculas no sangue ou no soro sanguneo. Extrao. Outra tcnica comum de separao facilmente adaptada aos mtodos de fluxo contnuo a extrao.
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Na clula polarogrfica, em virtude das reas superficiais relativas dos dois eletrodos, a densidade de corrente pequena no eletrodo auxiliar, ou contra-eletrodo, por ser grande a rea do eletrodo: no eletrodo de trabalho, muito menor, a densidade de corrente pode ser elevada. Por isso, o contra-eletrodo no facilmente polarizado; quando uma pequena corrente eltrica flui atravs da clula, a concentrao dos ons na camada superficial do eletrodo (isto , na camada da soluo imediatamente vizinha ao eletrodo) permanece praticamente igual concentrao dos ons no seio da soluo, e o potencial do eletrodo se mantm num valor constante. Em contraste com isso, no eletrodo gotejante, a camada superficial do eletrodo tende a ficar com poucos ons da espcie que se descarrega no eletrodo; se a soluo no for agitada, o fator importante que determina a grandeza da corrente que passa pelo eletrodo a difuso dos ons atravs do gradiente de concentrao que se estabelece. A corrente total que passa pelo eletrodo igual corrente provocada pelos ons que sofrem a migrao eletroltica normal mais a corrente devida difuso dos ons: onde I a corrente total, Id a corrente de difuso e Im a corrente de migrao. H, contudo, um efeito complicador: numa soluo diluda, o esvaziamento da camada superficial do eletrodo provoca um aumento da resistncia eltrica da soluo e uma variao na queda de potencial da lei de ohm (IxR) na clula; por isso, o potencial exato vigente no eletrodo fica sujeito a dvidas. Para superar esta dificuldade usual adicionar ao sistema um excesso de eletrlito indiferente (p. ex., KC1 0,1 M); nestas condies, a resistncia eltrica da soluo mantm-se num valor baixo e constante, e a corrente de migrao da espcie inica investigada praticamente desaparece, ou seja, I= Id.
I= Id + Im
Titulao Amperomtrica
A titulao amperomtrica com um microeltrodo polarizado baseia-se na aplicao da tcnica da polarografia, em que a corrente controlada pela difuso, localizao do ponto final de titulaes que envolvam a participao de espcies eletroativas. A titulao amperomtrica (com um eltrodo polarizado) foi introduzida por Heyrovsky e Berezicky. Na titulao amperomtrica, a corrente medida aps sucessivas adies do reagente titulante, com o microeltrodo mantido a um potencial fixo durante toda a titulao. O microeltrodo mais comumente usado o eltrodo gotejante de mercrio; a introduo do microeltrodo rotatrio de platina permitiu estender a titulao amperomtrica a reaes com participantes eletroativos no lado dos potenciais positivos at 1,1 vs. E.C.S. O potencial aplicado fixado sobre o plat da corrente limite em que a corrente proporcional concentrao. Os valores da corrente observados no curso da titulao so representados graficamente em funo do volume da soluo titulante. Os dados de cada lado do ponto de equivalncia formam duas linhas retas com diferentes inclinaes e o ponto final assinalado pela interseo das duas retas extrapoladas. A titulao amperomtrica apresenta algumas vantagens sobre a anlise polarogrfica. A substncia a determinar no precisa ela prpria ser eletroativa; igualmente satisfatrio que o seja o reagente titulante. A titulao amperomtrica praticada com aparelhagem muito simples. O mtodo menos dependente das caractersticas do capilar e do eletrlito suporte. Ele no requer um controle muito rigoroso da temperatura, bastando que esta no varie apreciavelmente durante uma titulao. As medidas da corrente so feitas em pontos da titulao afastados, antes e depois, do ponto de equivalncia, de sorte que, tal como na titulao condutomtrica, possvel empregar reaes relativamente incompletas. A titulao amperomtrica inerentemente mais exata do que a anlise polarogrfica, pois cada ramo da curva de titulao baseia-se na determinao de uma srie de pontos. A forma das curvas de corrente-volume encontradas nas titulaes amperomtricas varia conforme a substncia a titular e/ou o reagente titulante sejam espcies capazes de originar correntes de difuso, catdicas ou andicas, para o potencial fixo aplicado ao microeletrodo durante a titulao. O mtodo amperomtrico tem um campo de aplicao bastante amplo. Ele aplicvel determinao de substncias capazes de produzir correntes de difuso, mas tambm de substncias que, embora no sendo eletroativas, podem ser tituladas com reagentes capazes de produzir correntes de difuso. 68
A maior parte das aplicaes da titulao amperomtrica se referem a reaes com formao de precipitados muito pouco solveis. Alguns mtodos se baseiam no emprego de reagentes orgnicos redutveis no eltrodo gotejante de mercrio. A titulao amperomtrica encontra algumas aplicaes no campo das reaes de oxidao-reduo; so exemplos as titulaes que envolvem o uso de iodo ou bromo (na forma de bromato).
=s-1
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Referncias Consultadas
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